全 文 ：园 艺 学 报 2004，31(4)：533～536
Acta Horticulturae Sinica
现代月季(Rosa hybrida)叶片植株再生体系的建立
任桂芳 王建红 冯 慧 李 毅 李 燕 施雪波
( 北京市园林科学研究所，北京 100102； 北京大学生命科学学院，北京 100871)
摘 要：本试验对冰山、金秀娃、火球等24个现代月季 (Rosa hybrida)品种再生体系进行了研究，
结果表明：部分品种可从叶柄砧处直接再生出小苗；基因型、植物生长调节剂组合、暗培养时间及叶片的
幼嫩程度对现代月季叶片的再生影响很大，暗培养和幼叶均有利于再生。24个现代月季品种中 l2个品种
再生出了不定芽；现代月季品种冰山幼叶暗培养30 d后的再生率可从无暗培养的15．6％提高到45．6％；冰
山顶生3片叶、中部叶片及基部叶片的再生率分别为46．5％、12．9％和0。适宜现代月季叶片不定芽再生
的培养基为 Ms+6一BA 6．0 mg·L +ZT 6．0 mg·L +IBA 0．4 mg·L～；芽伸长培养基为 MS+6一BA 2．0
mg·L +IBA 0．1 mg·L～；生根培养基为 l／2 MS+NAA 0．2 mg·L +0．1％活性炭。
关键词：现代月季；叶片；不定芽；植株再生
中图分类号：S 685．12 文献标识码：A 文章编号：0513-353X (2004)04-0533434
Establishment of Plant Regeneration from Leaves Explants of Rosa hybrida
Ren Guifang ，Wang Jianhong ，Feng Hui ，Li Yi ，Li Yan ，and Shi Xuebo
( Beijing Institute 0厂Landscape and Gardening，Beijing 100102，China； College 0厂Life Science，Peking University，Beifng
100871，China)
Abstract：The regeneration system of 24 rose cultivars(Rosa hybrida)was researched．The research
results indicted that genotypes．hormone varieties and its concentrations．cultural time in the dark and ages of
the explants have great effect on the regeneration of rose leaf explants、Culturing in dark and using tender ex—
plants can improve the shoot regeneration of leaf explants．Only l 2 varieties can forlTl adventitious buds from
24 varieties of roses researched． After 30 days of dark culturing，the regeneration rate of Iceberg improved
from 15．6％ to 45．6％ ．In vitro the regeneration rate of Iceberg，if leaves from upside of rose。iS 46．5％ ：
from medium is 12．9％ ：from downside is 0、The appropriate media for regeneration from leaf explants of rose
is MS+6．BA 6、0 mg·L一 +ZT 6．0 mg·L一 +IBA 0．4 mg·L一 ．The medium for shoot buds elongation iS
MS+6一BA 2．0 mg·L一 +IBA 0．1 mg·L一 ．The medium for regenerating adventitious roots iS 1／2 MS+
NAA 0．2 mg·L +0．1％ activate carbon．
Key words：Rose；Leaf explants；Adventitious buds；P1ant regeneration
1 目的、材料与方法
现代月季 (Rosa hybrida)在我国俗称为月季 ¨，其再生较困难。国外有多篇关于现代月季叶片
植株再生体系的研究报道，但再生过程较复杂，需先将叶片接种于愈伤诱导培养基中，待长出愈伤组
织后再转接到分化培养基中分化 ，且再生率普遍较低 ，只有少数试验得到较高的再生
率 ’ 。许多研究 ’Ⅲ 表明外植体的基因型是决定现代月季器官发生的重要因素。本试验用北京
市城市绿化应用较多的一些现代月季品种进行叶片再生研究，为叶盘法基因转化打下了基础。
试验材料为，丰花月季品种：冰山、欢笑、仙境、蔓海姆宫殿、金玛丽、本研究所自育品种一号、
花房子；藤本月季品种：金秀娃、至高无上、多特蒙德、光谱、瓦尔特大叔；杂种茶香月季品种：火
收稿日期：2004—01—15；修回日期：2004—05—21
基金项目：北京市科委资助项目 (95330)
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球、蒙特利尔、艾里克红、粉和平、上海、红魔王、红茶、布来恩、摩尼卡、樱桃绒、为何不、白牌c
现代月季无菌苗：剪取地栽现代月季带腋芽的枝条，剪去叶片，清洗干净后用0．1％ HgCIz进行
表面灭菌8 min，用无菌水冲洗4～5次后，接种于快繁培养基上培养。培养基为Ms+6-BA 1．5 mg‘
L +IBA 0．1 mg·L +蔗糖30 g·L +琼脂 4．5 g·L (pH 5．8)。培养室温度为 (24-4-2) ，
光强约36 Ixmol·ITI～·s～，每天光照 14 h。30 d继代 1次。
不定芽的诱导和分化：剪取无菌苗叶片，每叶留约 1 mm长的叶柄 (下称叶柄砧)，接种于分化
培养基上，基本培养基为Ms+蔗糖30 g·L +琼脂4．5 g·L (pH 5．8)，每瓶接种9～1 1个叶片，
每个品种接种12瓶。暗培养分别为0、10、20、30和40 d。培养条件同上。50 d后统计再生情况。
不定芽的伸长：将长约2 cm的不定芽接种到伸长培养基上继代培养。培养基为MS+6-BA 2．0 mg·
L +IBA 0．1 mg·L +蔗糖30 g·L +琼脂4．5 g·L (pH 5．8)。培养条件同上，30 d继代 1次。
生根及移栽成苗：将长约2 cm的不定芽接种到生根培养基 (1／2MS+蔗糖30 g·L +琼脂4．5
g·L +0．1％活性碳+NAA 0．2 mg·L )上，培养条件同上。生根苗炼苗后移植到过渡基质上。
2 结果与分析
2．1 不定芽的诱导和分化
2．1．1 植物生长调节剂及其配比的影响 金秀娃、冰山和火球3个现代月季品种无菌苗的顶生3片
叶分别接种于1～19号分化培养基上 (附加激素分别为6．BA 0～10．0 mg·L～、KT 0～4．0 mg·L～、
ZT 0～6．0 mg·L～、IBA 0．2～0．4 mg·L )。50 d后在 12、16、17、18和 19号培养基上3个供试
品种都有不定芽分化 (表 1)，以17号的分化率最高，其它编号培养基上未见不定芽的分化。
表 1 不同植物生长调节剂及其配比对现代月季不定芽分化的影响
Table1 Efect of combinations ofPGR (plant growth regula~r)on diferentiation of尼 hybr／da CVSGoldshower。Icebergand Fireball
2．1．2 基因型的影响 取24个现代月季品种无菌苗的顶生 3片叶接种于 17号培养基 (表 1)上，
15 d时部分品种叶片叶柄砧处开始不规则膨大，20 d时可见绿色芽点 (图版，1)，40 d后形成不定
芽 (图版 ，2、3)，50 d时 12个品种可见不定芽的分化，且不同品种 问的分化率差异很大 ，为
10．9％ ～46．5％ (表2)，其余 12个品种未见不定芽分化。冰山品种的再生频率最高，为46．5％。
表2 基因型对现代月季叶片不定芽分化的影响
Table 2 Efect of genotypes of R．hybr~a on diferentation of adventitious buds
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4期 仃桂芳等：现代月季 (Rosa brida)叶片植株再生体系的建 535
2．1．3 暗培养的影响 分别取金秀娃、冰山和火球无菌苗的顶生3片叶分别接种于 I7号培养基 (表
1)上进行暗培养试验。结果表明暗培养30 d对月季叶片的分化最为有利，冰Ilj暗培养30 d后分化
率比无暗培养提高了30．9％ (表3)。
表3 暗培养对现代月季不定芽分化的影响
Table 3 Efect of culturing in the dark on diferentiation of R．hybr／da
2．1．4 叶片幼嫩程度的影响 金秀娃 、冰山和火球 3个月季品种无菌苗的不同部位叶片 (顶生 3片
叶、中部叶片和基部叶片)接种于l7号培养基 (表 1)上。结果表明顶部叶片的分化率最高，中部
叶片次之，下部老叶片未见分化 (表4)。
表4 外殖体幼嫩程度对月季不定芽分化的影响
Table 4 Efect ofleaf age on diferentiation ofR．hybrida
2．2 生根及移栽成苗
金秀娃、冰山和火球3个月季品种的伸长不定芽 (图版，4)接种于生根培养基 一 t-，40 d后可形
成较完整的根系 (图版，5)，移植到过渡基质上，30 d后小苗成活 (图版，6)。
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