全 文 ：园 艺 学 报 2003，30(2)i 236～238
Acta Hortieulturae Sireca
悬铃木叶片植株再生系统的建立
范国强 蒋建平 贺窑青 李 锋
(河南农业大学泡桐研究所，郑州 450002)
摘 要：以悬铃木实生苗叶片及其诱导的愈伤组织为材料建立植株再生系统。结果表明，WPM可作为悬铃
木叶片体外再生系统的基本培养基。从基部向上数第 5、6、7片叶诱导芽最适培养基为 WPM+IBA 0．1(单位 mg
- L一1
， 下同)+BA 3．0～2．0；对第5片叶在WPM+IBA0．6+BA 8．0上诱导出的愈伤组织，再进行芽诱导的最适
培养基为WPM+IBA 0．1+BA 4．8；幼苗根诱导的最适培养基为1／2 Ms+IBA 0．1～0．5。
关键词：悬铃木 ；叶片；植株 ；再生
中图分类号 ：S 68 文献标识码：A 文章编号 ：0513—353X (2003)02-0236-03
1 目的、材料与方法
悬铃木 (P／atanus orientalis L．)为世界著名的行道树之一【l吲 。作者探索了悬铃木的高效体外器
官再生系统，为开展其基因工程研究和在较短时间内大量繁殖奠定基础。
将生长于郑州地区的成熟但未脱落的悬铃木球果用 自来水浸泡 2 d后 (每 10 h换水 1次)，去掉
种 (果)毛，将种子放人腐熟、湿度适宜的木屑中在室外发芽。待子叶完全展开后用 0．1％的氯化汞
溶液消毒5 rain，无菌重蒸馏水清洗3次，用吸水纸吸干表面水，接种于不加植物激素的MS基本培养
基中培养成无菌苗。当无菌苗第 7片真叶完全展开时，取不同位次 (从苗基部往上数)的叶片
(O．5 cm×0．3 cm)和第 5片叶在 WPM+IBA 0．6(单位 哗 ·L～，下同) +BA 8．0培养基上诱导的愈
伤组织，在不同的培养基上进行培养。光照强度 130 tanol·m ·s～，光照时间16 h·d。。，温度 (25-I
2)℃。培养基分别为 WPM、MS并附加 IBA 0．1～0．6、BA 0．5～10、ZT 0．5、蔗糖 25 g·L～、琼脂
4 g·L～。50 d时观察叶片和愈伤组织诱导芽的情况。当诱导出的芽长到约 2 cm时，从其茎的基部剪
断并转移到 1／2 MS附加 IBA 0～2．0、蔗糖 20 g·L 和琼脂 4 g·L 生根培养基上 (培养条件同上)进
行根的诱导。第 3O天时观察生根情况。
2 结果与分析
2．1 悬铃木叶片和愈伤组织芽的诱导
2．1．1 叶片在不同培养基上芽诱导的情况 悬铃木幼苗第 5片叶在 MS培养基上只有附加 IBA 0．1、
zIO．5、BA 2．0～3．0时，才可以诱导出芽，但诱导出芽数和诱导率较低；而在其它激素组合中都不
能诱导出幼芽。在WPM基本培养基上诱导出芽数和诱导率较高 (表 1)。在WPM基本培养基中只附
加 IBA和BA两种激素，当IBA浓度为0．1，BA浓度从 1．0上升到3．0时，叶片芽的诱导数达到234～
925个，诱导率66％～100％。当IBA浓度为0．2，BA浓度逐渐上升时，叶片芽的诱导数和诱导率则
有下降的趋势。加入 zI0．5的情况下均达不到上述效果。叶片诱导芽的情况如图版 1～4所示 (见插
页 3)。
在叶片没有诱导出芽的不同激素组合的WPM培养上，都有一定量的愈伤组织形成，并且愈伤组
织的质地和结构也有一定的差异。在 Ms培养基上，所有附加一定种类激素浓度的组合中，叶片都可
收稿 日期：2oo2—04—30；修回日期：2oo2—08—06
基金项 目：河南省杰出人才创新基金资助项 目 (2(103017)
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2期 范国强等：悬铃木叶片植株再生系统的建立 237
形成大量红色或米黄色的愈伤组织。
2．1．2 实生苗叶位对芽诱导的影响 不同部位叶片在附加不同种类激素及其组合的 WPM培养基上
芽诱导数和诱导率也存在一定的差异，第 1片叶在 IBA为 0．1、BA为 4．0时达最高，其分别为 29和
10％；第 2片叶在 IBA为 0．2、BA为2．5时最高，分别为 28和 12％；第 3片叶当 IBA为 0．2、BA为
裹 1 叶片在 删 培养基芽诱导的情况
Table1 B●ld 由Kb呲 h咖 leaves onW 聊旺 media
4．0时最高，分别为76和38％；第 4、6、7片叶
以 IBA为 0．1、BA为4．0、3．0、2．0诱导出芽数
最多 (分别为 317、860和 792个)，芽诱导率最
高 (分别为 70％、100％和 100％)。当 IBA浓度
为0．2，BA浓度为0．5～4．0时，第 1片叶和第4
片叶的芽诱导率皆为0。
裹2 愈伤组织在 wPM 培养基上芽的诱导
Table2 & iladuetloa 0fthe leaf鞠m 蚰 WnIl media
注：接种愈伤组织块数均为 100。
Note-Number ofthe calus．mcl】 Ilgis100le哪 veb
2．1．3 愈伤组织在 WPM培养基上芽的诱导 将悬铃木幼苗第5片叶在WPM+IBA 0．6+BA 8．0培养
基上诱导出的米黄色愈伤组织转移到新的培养基上 (表 2)培养 50 d后发现，当 IBA浓度为 0
． 1时，
随着BA浓度的增加，愈伤组织诱导出芽数增多，在 BA浓度为4．8时，芽的数量和诱导率最高。当
IBA浓度分别为0．2和0．3时，随着BA浓度的增加，虽然从愈伤组织上诱导芽的数量和诱导率处于
增加趋势，但是总体上均增加较小。此外，在诱导出芽的培养基上，当 BA浓度一定时
， 随着 IBA浓
度的增高，愈伤组织芽诱导率则逐渐下降。
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238 园 艺 学 报 3O卷
此外，我们还发现，将愈伤组织在低温 (4～7℃)下处理 3～4 d，可以提高愈伤组织芽的诱导数
量和诱导率，特别是在 WPM+IBA 0．1+BA 4．8培养基上，愈伤组织芽诱导率提高更多。愈伤组织诱
导芽的情况如图版 5，6所示 (见插页 3)。
2．2 悬铃木幼苗根的诱导
悬铃木幼苗在 IBA 0～2．0的 1／2 MS培养基上都可 100％诱导出不定根，其中 IBA 0．1和 IBA 0．5
时诱导出的根系比较完整 (见插页 3图版 7，8)。因此 ，可选择附加 IBA浓度为0．1～0．5的 1／2 Ms
培养基为悬铃木幼苗诱导根的最适培养基。
参考文献：
l 章利民．悬铃木修剪控果技术 ．江苏林业科技，2000，27(3)：37
2 宋 珍 ，张 剑，李艳慧 ，等．越冬埋藏对提高悬铃木硬枝扦插成活率的影响．河南林果研究 ，1998，13(3)：207～215
3 周业恒，江守和，鲁润龙，等．悬铃木无球果育种的研究．园艺学报，1993，20：295～298
In Vitro Efi cient Plant Regeneration th Platanus orientalis L． Leaves as
Explants
Fan Guoqiang，Jiang Jianping，He Yaoqing，and Li Feng
(1nstiaae ofPaulownia，Henan Agricultural University， 嘞 Ⅱ4501302，Ch／na)
Abstract： s paper dealt with in vitro eficient o~ant regeneration on WPM media with 0．6(嘴 ’L一，the
below)IBA and 8．0 BA，using P／atanus or／enta／s L．1eav~and their cali as explanm．1he results indi—
eated that删 might be the basic medium for the plant regeneration，and that bud inductionⅡ ia of the 5th，
6th，7th leav~ (from the bases of seedlings) +0．1 IBA+3．0—2．0 BA，and the 5th leaf cam induced on
+0．6Ⅲ A+8．0 BA medium was +0．1 IBA+4．8 BA．Root induction medium was 1／2 MS+0．1—
0．5ⅢA．These results might provide reference to cel and gene engineering manipulations and quick propagations
of Phuanus orienitalis．
Key words： P／atan~ or／enta／／s L．；IJeaf；Plant；Regeneration
、
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购书者请汇款至北京中关村南大街 l2号中国农科院蔬菜花卉所 《园艺学报>编辑部。邮编
l0懈 1。
更 正
《园艺学报》2003年第 1期彩色插页 3倒数第 3～1行中的 “不定芽”、 “不定根”、 “Shoot”和
“Root”应为 “不定胚芽”、“不定胚根”、“Adventitious shoot”和 “Adventitious root”，特此更正。
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