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Ｒｅｐｅａｔ（ＩＳＳＲ）ｖａｒｉａｔｉｏｎｓｉｎｔｈｅｇｅｎｕｓ犆犻犮犲狉［Ｊ］．Ｅｕｐｈｙｔｉｃａ，
２００４，１３５（２）：２２９２３８
［３］　ＴａｌｅｂｉＲ，ＦａｙａｚＦ，ＭａｒｄｉＭ，犲狋犪犾．Ｇｅｎｅｔｉｃｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓａｍｏｎｇ
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Ｂｉｏｌｏｇｙ，２００８，１０（３）：３０１３０５
［４］　ＷｅｉｓｉｎｇＫ，ＫａｅｍｍｅｒＤ，ＷｅｉｇａｎｄＦ，犲狋犪犾．Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｆｉｎ
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（３）：４３６４４２
［５］　ＳｈａｒｍａＰＣ，ＷｉｎｔｅｒＰ，ＢüｎｇｅｒＴ，犲狋犪犾．Ａｂｕｎｄａｎｃｅａｎｄｐｏｌｙ
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Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，１９９５，９０（１）：９０９６
［６］　ＳｅｒｒｅｔＭＤ，ＵｄｕｐａＳＭ，ＷｅｉｇａｎｄＦ．Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔｏｆｇｅｎｅｔｉｃｄｉ
ｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆｃｕｌｔｉｖａｔｅｄ ｃｈｉｃｋｐｅａ ｕｓｉｎｇ ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｉｔｅｄｅｒｉｖｅｄ
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１９９７，１１６（６）：５７３５７８
［７］　ＳａｎｔＶＪ，ＰａｔａｎｋａｒＡＧ，ＳａｒｏｄｅＮＤ，犲狋犪犾．ＰｏｔｅｎｔｉａｌｏｆＤＮＡ
ｍａｒｋｅｒｓｉｎｄｅｔｅｃｔｉｎｇｄｉｖｅｒｇｅｎｃｅａｎｄｉｎａｎａｌｙｚｉｎｇｈｙｓｔｅｒｅｓｉｓｉｎ
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［１２］ＡｈｍａｄＺ，ＭｕｍｔａｚＡＳ，ＮｉｓａｒＭ，犲狋犪犾．Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙａｎａｌｙｓｉｓｏｆ
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ｆｏｒｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎａｎｄｃｒｏｐｂｒｅｅｄｉｎｇ［Ｊ］．ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，
２０１２，３（５）：７２３７３１
［１３］ＺｉｅｔｋｉｅｗｉｃｚＥ．Ｇｅｎｏｍｅｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇｂｙｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅ
ｐｅａｔ（ＳＳＲ）ａｎｃｈｏｒｅｄｐｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ
［Ｊ］．Ｇｅｎｏｍｅｓ，１９９４，２０（２）：１７６１８３
［１４］ＲａｔｎａｐａｒｋｈｅＭＢ，ＳａｎｔｒａＤＫ，ＴｕｌｕＡ，犲狋犪犾．Ｉｎｈｅｒｉｔａｎｃｅｏｆ
ｉｎｔｅｒｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓａｎｄｌｉｎｋａｇｅｗｉｔｈａ
ｆｕｓａｒｉｕｍｗｉｌｔｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｇｅｎｅｉｎｃｈｉｃｋｐｅａ［Ｊ］．Ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌａｎｄ
ＡｐｐｌｉｅｄＧｅｎｅｔｉｃｓ，１９９８，９６（３４）：３４８３５３
［１５］ＲａｔｎａｐａｒｋｈｅＭＢ，ＴｅｋｅｏｇｌｕＭ，ＭｕｅｈｌｂａｕｅｒＦＪ．Ｉｎｔｅｒｓｉｍｐｌｅ
ｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔ（ＩＳＳＲ）ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓａｒｅｕｓｅｆｕｌｆｏｒｆｉｎｄｉｎｇ
ｍａｒｋｅｒｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｄｉｓｅａｓｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｇｅｎｅｃｌｕｓｔｅｒｓ［Ｊ］．
ＴｈｅｏｒｅｔｉｃａｌａｎｄＡｐｐｌｉｅｄＧｅｎｅｔｉｃｓ，１９９８，９７（４）：５１５５１９
［１６］ＩｒｕｅｌａＭ，ＲｕｂｉｏＪ，ＣｕｂｅｒｏＪＩ，犲狋犪犾．Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｉｎ
ｔｈｅｇｅｎｕｓ犆犻犮犲狉ａｎｄｃｕｌｔｉｖａｔｅｄｃｈｉｃｋｐｅａｕｓｉｎｇＲＡＰＤａｎｄＩＳＳＲ
ｍａｒｋｅｒｓ［Ｊ］．ＴｈｅｏｒｅｔｉｃａｌａｎｄＡｐｐｌｉｅｄＧｅｎｅｔｉｃｓ，２００２，１０４（４）：
６４３６５１
［１７］ＣｈｏｗｄｈｕｒｙＭ Ａ，ＶａｎｄｅｎｂｅｒｇＢｅｒｔ，ＷａｒｋｅｎｔｉｎＴ．Ｃｕｌｔｉｖａｒｉ
ｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｇｅｎｅｔｉｃｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐａｍｏｎｇｓｅｌｅｃｔｅｄｂｒｅｅｄｉｎｇ
ｌｉｎｅｓａｎｄｃｕｌｔｉｖａｒｓｉｎｃｈｉｃｋｐｅａ（犆犻犮犲狉犪狉犻犲狋犻狀狌犿 Ｌ．）［Ｊ］．Ｅｕ
ｐｈｙｔｉｃａ，２００２，１２７（３）：３１７３２５
［１８］$óG．ＩＳＳＲxÜ:Y¶ž”ŽçV)DE=ln¢［Ｊ］． çV ，２００２，２４（５）：６１３６１６ ［１９］v¨，ï“G，äô³，¡．vÔùxMx£òz]ＰＣＲ vw ［Ｊ］．.Å;<())，１９９８，２３（４）：４０３４０４ ［２０］8(，DF，5¼，¡．½¾!ŽＩＳＳＲXnÓIlóôez ] ［Ｊ］．Çý)，２００９，２６（２）：１８０１８５ ［２１］$Ò³，ž:,，TÉX．vÔùz]£ÆìÜＩＳＳＲXn
ÓIDE
［Ｊ］．6/Ž)，２００４，２４（５）：８９９９０２
［２２］O“3，)C<，Šç，¡．Ž¢vÔùz]Œ§ÇＩＳＳＲ
ＰＣＲXnÓI［Ｊ］．x܎±J，２００５，３（３）：４４５４５０
［２３］}ôÄ，ￂ，f‹M，¡．¦œＩＳＳＲＰＣＲXnÓIlóô
Az]
［Ｊ］．,ª<)，２００６，４２（６）：２６３１
［２４］¤F，Ñ［Ｊ］．x܎±J，２００９，７（６）：１２３７１２２４
［２５］¡ÆÉ，µ7，€(¦，¡．5ýＩＳＳＲXnÓIlóô¶vÔ
ùz]
［Ｊ］．‚4)，２００７，２１（５）：４７０４７３
［２６］?»，$>²，_À．•˜¦³`ＩＳＳＲXnÓIlóôA
z]
［Ｊ］．`ª)，２０１１，２０（５）：１４２１５０
［２７］ï™，á*，H1．vÔùz]¦ÁÂ<ŽlＩＳＳＲＰＣＲ
XnÓI
［Ｊ］．G®]，２０１２，２２（３）：６１６５
［２８］Lfæ，Fî，Eïœ，¡．vÔùz]ǖＩＳＳＲXnÓI
［Ｊ］．Çý)，２００９，２６（１）：１０８１１２
［２９］ïãG，f¦ç，5óœ，¡．·ＩＳＳＲXnÓIlz]eÄ´
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［Ｊ］．Çý)，２００５，２２（６）：６２６６２９
［３０］Šç，5Vã，ïLŠ，¡．6ýＩＳＳＲＰＣＲXnÓIlz]
［Ｊ］．GH)ZA，２００３，２２（３）：９１９３
［３１］3(，á*，ž7Ã．(îＩＳＳＲＰＣＲXnÓIlz]［Ｊ］．
(î<)
，２０１０，２９（３）：５１０５１３
［３２］OÄÒ，ÞLe，5=+．?ç`ＩＳＳＲXnÓIlóôAz]
［Ｊ］．=5())（XY<)C），２００４，４３（３）：８０８４
［３３］ëôF，l]，lK6，¡．ƒ„#ＩＳＳＲxÜ:Y®]lóô
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［Ｊ］．=``，２０１１，４２（２）：３５３３５７
［３４］lM，1?G．);`ＩＳＳＲxÜ:Y®]lóôeÓIz]
［Ｊ］．=``，２００９，４０（７）：１１３１１１３５
［３５］7ç，Áó<，+M，¡．¸ýＩＳＳＲＰＣＲXnÓIlvÔz]
［Ｊ］．.Å4ª())（XY<)C），２０１０，３６（４）：４１４４１７
［３６］ïÿ，Åã，RLæ，¡．(ÎＩＳＳＲXnÓIlóôAz]
［Ｊ］．=>`?)，２０１０，３２（４）：８０８５
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