全 文 ：第 18 卷 第 4 期
Vol. 18 No. 4
草 地 学 报
ACTA AGRESTIA SINICA
2010 年 7 月
Jul. 2010
杂花苜蓿种质 SRAP标记遗传多样性研究
周良彬, 卢欣石1* , 王铁梅1 , 关 潇2 , 王红柳1
( 1.北京林业大学草业科学系 , 北京 100083; 2.中国环境科学研究院, 北京 100012)
摘要: 利用 SRAP( Sequencer elated Amplified Po lymorphism)分子标记技术, 于2009年 5 月对来自中国新疆、哈萨
克斯坦、波兰等地区的 31 份杂花苜蓿(Medicago var ia Mar tyn. )种质进行遗传多样性研究, 旨在探究中亚及欧洲
等地区杂花苜蓿种质的遗传变异和亲缘关系,为杂花苜蓿品种选育和利用提供参考。结果表明: 17 对引物组合共
检测出 179条清晰条带, 平均每对引物扩增出 8. 41 条具有多态性的条带,多态性条带比率( PPB)为 79. 89% , 材料
间的相似性系数在 0. 59 到 0. 874 之间,平均相似性系数值为 0. 723, 与中亚和欧洲的参试种质材料相比, 新疆的材
料具有较为丰富的遗传多样性; UPGMA 聚类结果显示, 可将供试材料分为 3 类, 来自中国新疆的 7 份材料分别聚
在第 1类和第 3类, 反映出中国新疆的供试材料间遗传变异丰富, 与中亚材料有着密切的亲缘关系; 不同杂花苜蓿
材料的亲缘关系与地理环境具有密切的联系。
关键词:杂花苜蓿; SRAP;遗传多样性; 亲缘关系
中图分类号: Q943 文献标识码: A 文章编号: 10070435( 2010) 04054406
Genetic Diversity of Medicago varia Martyn. Germplasms Detected by SRAP Markers
ZHOU Liangbin1 , LU Xinshi1* , WANG Tiemei1 , GUAN Xiao2 , WANG Hongliu1
( 1. Department of Grass lan d S cien ces , Beijing Forest ry University, Beijing 100083, China;
2. Ch ines e Research Academy of Environmental S cien ce, Beijin g 100012, China)
Abstract: SRAP ( sequencer elated amplified polymorphism) molecular markers w ere used to detect the ge
netic div er sity o f 31 accessions of M edicago v ar ia Martyn. fr om China ( Xinjiang ) , Kazakhstan, and Po
land, etc. in M ay 2009. T he object iv es o f this research w ere to explore the genet ic variat ion and r elat ion
ship among M . var ia accessions from Central Asia, Europe, and other regions and prov ide a theoret ical
basis for its breeding and rat ional ut ilization. T he results show: a total of 179 bands w er e detected in 17
pairs of primer combinat ions, 8. 41 polymorphic bands in aver age w er e amplif ied for each pair of primers,
and the percentag e of polymorphic bands ( PPB) w as 79. 89% . T he Neis g enet ic similarity coef f icient of
the tested accessions r anged from 0. 59 to 0. 874 and the average w as 0. 723. T hese results suggest that
there is a rich genetic diversity w ith the Xinjiang resources in comparison w ith those f rom Central Asia and
Europe. U PGMA cluster analysis indicates the tested materials could be divided into 3 g roups, and the ma
terials f rom China ( Xinjiang) w ere gathered in the f ir st group and third group; they w ere rich in the genet
ic variat ion and had a clo se phylog enetic relat ionship w ith those f rom Central Asia. Mo reover, the phylo
genet ic relat ionship among differ ent M . var ia accessions w as closely related to the geographic env iron
ment .
Key words: Medicago varia Martyn. ; SRAP; Genet ic diversity; Phylo genet ic relat ionship
杂花苜蓿(M edicago varia Mar tyn. )又名多变
苜蓿,属豆科苜蓿属(M edicago L. ) ,是由紫花苜蓿
(M. sat iv a L. )与黄花苜蓿( M . f alcata L. )天然
杂交形成具有紫花绛色蓝色绿色黄色白色等多
种花色杂合的复合体 [ 1]。部分西方学者又称其为紫
花苜蓿天然杂交复合体 ( M. sativa complex ) [ 2]。
杂花苜蓿通过异花授粉和杂交可产生大量的遗传变
异,从而使种群内形成广泛的遗传多样性[ 3]。杂花
苜蓿既有紫花苜蓿产量高、草质优、再生快、长势好
的优点,又具有黄花苜蓿抗寒、抗旱、抗逆性强的特
点,营养价值与紫花苜蓿相近,在畜牧业中占有举足
轻重的地位[ 4] 。苜蓿起源于近东和中亚,在高纬度、
高寒干旱地区扩展很快,南北半球都有广泛分布,中
国拥有丰富的苜蓿遗传资源,已经记载的种类较多,
收稿日期: 20091120;修回日期: 20100420
基金项目: 863国家高技术研究发展计划重大项目( 2008AA10Z149)资助
作者简介:周良彬( 1985) ,男,四川简阳人,硕士研究生,研究方向为草地资源与生态, Email: z houlbin@ 163. com; * 通讯作者 Author for
corr espondence, Email : lu xinsh i304@ 126. com
第 4期 周良彬等:杂花苜蓿种质 SRAP 标记遗传多样性研究
新疆是我国苜蓿种类最多的省区之一[ 5~ 8] 。杂花苜
蓿在苜蓿种质资源遗传进化和经济类型多样性的形
成中发挥了重要作用,成为当今研究遗传多样性、生
态保护和发展农业经济的重要物种。
国内外对苜蓿种质的研究已发展到利用分子标
记技术研究其不同种群间的遗传关系[ 9~ 11] 。相关
序列扩增多态性( Sequencer elated Amplified Po ly
morphism,简称 SRAP) ,是由美国加州大学蔬菜作
物系 Li与 Quir os[ 12] 于 2001年提出的一种新型的
基于 PCR的分子标记方法,又名基于序列扩增多态
性 ( Sequencebased Amplif ied Polymorphism,
SBAP)。其原理是利用独特的引物设计对 ORFs
( Open Reading Frames, 开放阅读框架)进行扩增,
正向引物主要集中对外显子区域进行特异扩增, 而
反向引物主要作用于富含 A T 区域序列的内含子和
启动子区域。它是一种新型的基于 PCR 的随机引
物标记系统,除了方便可靠和经济外,还具有中等产
量、高共显性、易于分离条带及易于测序等优点。
SRAP 标记被证实能很好地划分野牛草( Buchloe
d acty loides ( Nutt . ) Engelm. )种群、小麦 ( T r it ic
um aesti vum L. )种群和南瓜种群 ( Cucurbi ta mos
chata ( Duch. ) Poiret )等 [ 13~ 16]。在苜蓿种质资源
的研究中,国内还未见 SRAP 标记方面的研究报道。
本试验旨在利用 SRAP 标记对收集自国内外的 31
份杂花苜蓿种质进行遗传多样性研究, 从分子水平
了解杂花苜蓿的遗传变异和亲缘关系, 为杂花苜蓿
种质资源的科学保护和合理利用提供理论依据。
1 材料和方法
1. 1 植物材料
供试材料为 31份杂花苜蓿资源,种子来源于中
国新疆、波兰、乌克兰及哈萨克斯坦等国家(表 1) ,
2008年 8月种植于北京林业大学草业科学学科顺
义实验基地, 2009年 5月开始试验。
表 1 供试杂花苜蓿品种(系)的名称及来源
Table 1 Name and or ig in of M. varia accessions tested in this study
序号
Code
资源编号
Acces sion no.
产地及来源
Origin
序号
Code
资源编号
Access ion n o.
产地及来源
Origin
1 WX2042 中国新疆阿尔泰 China 17 BL04489 俄罗斯 Ru ssia
2 BL02288 中国新疆布尔津 China 18 US06002 俄罗斯 Ru ssia
3 GRI0019 中国新疆昌吉 Chin a 19 US06005 俄罗斯 Ru ssia
4 GRI0051 中国新疆和布 Chin a 20 US06018 亚美尼亚 A rmenia
5 BL01111 中国新疆奇台 Chin a 21 SA38456 哈萨克斯坦 Kazakhstan
6 WX2121 中国新疆托斯托别 China 22 SA38516 哈萨克斯坦 Kazakhstan
7 BL01422 波兰 Poland 23 SA38679 哈萨克斯坦 Kazakhstan
8 BL01424 波兰 Poland 24 SA38728 哈萨克斯坦 Kazakhstan
9 BL04423 波兰 Poland 25 SA38764 哈萨克斯坦 Kazakhstan
10 BL04425 波兰 Poland 26 SA38852 哈萨克斯坦 Kazakhstan
11 BL04488 立陶宛 Lithuania 27 SA38947 哈萨克斯坦 Kazakhstan
12 U S06041 瑞典 Sw eden 28 US06007 哈萨克斯坦 Kazakhstan
13 U S06006 乌克兰 Uk rain e 29 US06049 哈萨克斯坦 Kazakhstan
14 U S06008 乌克兰 Uk rain e 30 US06019 塔吉克斯坦 Tajik istan
15 U S06020 乌克兰 Uk rain e 31 BL01121 中国新疆伊犁 Chin a
16 BL04487 白俄罗斯 White Ru ssia
1. 2 DNA提取
每份杂花苜蓿材料随机选取 5株并取健康幼叶
混合进行 DNA 提取。基因组 DNA 的提取采用改
良后的 CTAB 法[ 17] 。通过 1%琼脂糖凝胶电泳和
微量紫外分光光度计检测 DNA 浓度和纯度, 并调
整浓度到 50 ng L- 1 ,合格的 DNA 样品于 4 冰
箱内保存备用。
1. 3 SRAP反应
扩增反应体系为 25 L: dNT P2 L( 0. 20 mmol
L- 1 ) , T aq DNA 聚合酶0. 3 L ( 1. 50 U ) , M g2+
3 L ( 1. 50 mmo l L - 1 ) , 上、下游引物各 1 L
( 0. 40 mol L- 1 ) , 50 ng 模板 DNA1 L, 10 PCR
buffer 2. 5 L (不含 Mg2+ ) ,灭菌水补足 25 L。
参照 Vandemark 等和 Li等发表的引物 [ 11, 12]进
行引物设计, 初步筛选出 17 对引物序列用于
SRAPPCR扩增(表 2) ,引物由上海生工生物工程
技术服务有限公司合成。SRA PPCR 反应采用的
是复性变温法[ 11] : 循环包括 94 预变性 5 min;
94 变性 1 min, 35 退火 1 min, 72 延伸 1 min,
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共 5个循环;之后 35个循环: 94 变性 1 min, 50
退火 1 min, 72 延伸 1 m in,最后 72 延伸 7 m in;
4 保存。所有的 PCR扩增均在 Biometra TGra
dient Thermoblock基因扩增仪上进行。
表 2 杂花苜蓿 SRAP 分析的引物序列
Table 2 Pr imer sequences used in SRAP analysis of M. var ia
引物组合
Prim er combin at ion
序列 S equence( 53 ) 引物组合
Primer combinat ion
序列
Sequence( 53 )
F11em5 F: 5CGAATCTT AGCCGGAT A3 Me4em4 F: 5TGAGTCCAAACCGGACC3
R:5GACTGCGTACGAAT TAAC3 R: 5GACT GCGT ACGAATT T GA3
F12r15 F: 5CGAATCTT AGCCGGAGC3 F12 r9 F: 5CGAATCT T AGCCGGAGC3
R:5CGCACGT CCGTAA TT CCA3 R: 5GACACCGT ACGAATT TGA3
F14r14 F: 5CGAATCTT AGCCGGAAT3 F9 em5 F: 5GTAGCACAAGCCGGACC3
R:5CGCACGT CCGTAA TT AAC3 R: 5GACT GCGT ACGAATT AAC3
F16em1 F: 5GATCCAGT T ACCGGCAC3 F16 r15 F: 5GATCCAGT TACCGGCAC3
R:5GACTGCGTACGAAT TAAT3 R: 5CGCACGT CCGTAAT TCCA3
M e1 r14 F: 5T GAGT CCAAACCGGATA3 Me2r9 F: 5TGAGTCCAAACCGGAGC3
R:5CGCACGT CCGTAA TT AAC3 R: 5GACACCGT ACGAATT TGA3
M e2 em4 F: 5T GAGT CCAAACCGGAGC3 F11 r15 F: 5CGAATCT T AGCCGGATA3
R:5GACTGCGTACGAAT TT GA3 R: 5CGCACGT CCGTAAT TCCA3
F16em5 F: 5GATCCAGT T ACCGGCAC3 F7 r9 F: 5GTAGCACAAGCCGGAGC3
R:5GACTGCGTACGAAT TAAC3 R: 5GACACCGT ACGAATT TGA3
F16r14 F: 5GATCCAGT T ACCGGCAC3 F9 r9 F: 5GTAGCACAAGCCGGACC3
R:5CGCACGT CCGTAA TT AAC3 R: 5GACACCGT ACGAATT TGA3
M e2 em5 F: 5T GAGT CCAAACCGGAGC3
R:5GACTGCGTACGAAT TAAC3
注: F: 正向引物; R: 反向引物
Note: F: forw ard p rimer; R: revers e primer
1. 4 电泳检测
扩增产物采用 6%的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
分离[ 18] 。样孔中每样品点样 10 L,以天根公司的
D 2000Marker为对照, 200 V恒定电压下 30 m in 的
预电泳, 400 V 恒定电压下电泳 90 min, 电泳仪为北
京六一电泳仪厂的 DYY6C型。电泳结束后, 凝胶
参照梁宏伟等[ 19] 的方法进行银染色, 凝胶在投摄式
灯箱上用数码相机采集图像, 记录结果。
1. 5 数据统计及分析
对聚丙烯酰胺凝胶图片上清晰可重复并且长度
在 100- 2000 bp范围内的的条带进行统计分析, 将
SRAP 扩增产物每个条带视作一个位点, 统计多态
位点数和位点总数。按迁移位置上条带出现或缺失
分别赋值, 有带记为 1, 无带记为 0, 构建 0, 1 矩阵。
按 NeiLi的方法计算材料间遗传相似系数( GS) ,通
过 SHAN 程序中的 U PGMA 方法进行聚类, 并根
据 GS 值进行主成分分析( PCA) [ 20, 21]。统计分析使
用 NTSYSpc version 2. 10S软件。
2 结果与分析
2. 1 供试材料 SRAP扩增产物的多态性
选用 17 对引物组合对 31 份杂花苜蓿基因组
DNA 进行 SRAP 扩增, 扩增结果共得到 179 条清
晰可辨条带(表 3)。其中,多态性条带 143条,多态
性条带比率( PPB)为 79. 89%, 扩增的 DNA 片段大
多集中在 100 bp 至 2000 bp之间。平均每对引物
扩增出 10. 53条带, 其中 8. 41条具有多态性,表明
SRAP 能检测出较多的遗传位点,获得的 PCR结果
显示出较好的多态性。
2. 2 供试材料的遗传相似性分析
根据得到的 0, 1矩阵,计算居群间的 NeiLi相
似性系数,得到供试材料相似性矩阵。31份杂花苜
蓿材料的相似性系数在 0. 5896 到 0. 8739之间, 平
均相似性系数值为 0. 723,变幅为 0. 284。遗传相似
性系数统计结果显示, 相似性系数绝大部分分布在
0. 7- 0. 8区间,占了总体频率的 68. 2% , 其次分布
在 0. 6- 0. 7区间( 28. 6%) , 0. 5- 0. 6 及 0. 8- 0. 9
区间的数值分布分别只占总体的 0. 2%和 3%。
由遗传相似性系数矩阵可知,来自波兰( BL01
424, 8号)和白俄罗斯( BL04487, 16 号)的材料之
间的遗传相似系数最小( 0. 5896) ,其遗传距离最大。
较低的遗传相似系数显示了来自不同地域(背景)的
苜蓿种质间丰富的遗传多样性。而来自塔吉克斯坦
( U S06019, 30 号) 与来自中国新疆伊犁 ( BL01
121, 31号)之间的遗传相似系数最大( 0. 8739) ,其
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第 4期 周良彬等:杂花苜蓿种质 SRAP 标记遗传多样性研究
表 3 杂花苜蓿 SRAP标记的多态性
T able 3 Polymorphic analy sis for the amplification
patterns of M. var ia using different SRAP pr imer pair s
引物对
Primer
pairs
扩增总条带数
T otal no. of
polym orphic band
多态性条带数
No. of polym or phic
band
多态性比率 ( % )
Percentage of
polymorph ic band s
F11em 5 10 9 90. 00
F12r15 9 9 100. 00
F14r14 10 8 80. 00
F16em 1 10 9 90. 00
M e1 r14 7 6 85. 71
M e2 em4 8 7 87. 50
F16em 5 12 11 91. 67
F16r14 9 6 66. 67
M e2 em5 16 12 75. 00
M e4 em4 10 8 80. 00
F12r9 11 9 81. 82
F9em 5 9 7 77. 78
F16r15 8 6 75. 00
M e2 r9 14 11 78. 57
F11r15 12 8 66. 67
F7r9 14 10 71. 43
F9r9 10 7 70. 00
总和 T otal 179 143 79. 89
平均Average 10. 53 8. 41 79. 89
遗传距离最小, 遗传变异相对最小。来自新疆的 7
份材料之间,遗传相似性系数平均值为 0. 7208,与中
亚和欧洲的参试种质材料相比,遗传相似性系数相对
偏小,遗传变异也较为丰富。因此, 供试材料之间遗
传差异明显,具有较为丰富的遗传多样性。
2. 3 供试材料基于 NeiLi( Dice)遗传相似系数的
聚类分析
基于遗传相似系数, 利用 UPGMA 法对 31份
供试材料进行U PGMA 聚类分析(图 1)。从聚类图
可以把 31份供试材料聚为 3类:第 1类材料包含的
材料较广泛, 其中包括来自中国新疆的 1号、5号、6
号、31号材料, 来自中亚哈萨克斯坦和塔吉克斯坦
的共 10份材料,来自俄罗斯( 17号、18 号、19号)和
乌克兰( 13号、14号、15 号)的材料各 3 份, 以及来
自波兰( 10号)、立陶宛( 11 号)、亚美尼亚( 20号)、
白俄罗斯( 16号)和瑞典( 12号)的材料各 1份; 来自
波兰的 3份材料( 7号、8号、9号)聚为第 2类;另外
3份来自新疆的材料( 2 号、3号、4 号)聚为第 3类。
从第 2类和第 3类的分类情况可以看出, 供试材料
的聚类与其地理分布、地形地貌间存在着一定的联
系。而第 1类的聚类结果与来源地及地理分布没有
显著的相关性,这可能是由于杂花苜蓿遗传背景较
为复杂的原因。来自新疆的 7份材料分别聚在了第
1类和第 3类, 其中 4份材料( 1号、5号、6 号和 31
号)与来自中亚、东欧的材料聚为一类, 这从另一个
方面反映出新疆的供试材料间遗传变异丰富,并且
与中亚材料有着密切的亲缘关系。
图 1 31 份材料基于 SRAP遗传相似性系数( NeiLi系数)的 UPGMA聚类图
F ig. 1 UPGMA dendrogr am for 31 accessions based on SRAP NeiL is genetic similarity coefficients
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草 地 学 报 第 18卷
2. 4 主成分( PAC)分析
基于遗传相似系数, 对不同杂花苜蓿材料进行
主成分分析,并根据第一、第二主成分作图。如图 2
所示, A组 23份材料包含了中国新疆、乌克兰、哈萨
克斯坦及塔吉克斯坦等国家的材料; B 组包括了源
自中国新疆( 2号、3号、4 号)和波兰( 8号)的材料;
C组包含了 4 份材料, 分别来自中国新疆 ( 5 号、6
号)和波兰( 7号、9号)。主成分分析结果更直观地
表明了不同杂花苜蓿材料之间的亲缘关系, 位置相
靠近者表示关系密切, 远离者表示关系疏远。来自
中国新疆的材料在 3 个组都有分布,且部分材料与
部分中亚、欧洲的材料在主成分分析图上的位置较
为靠近,亲缘关系较为复杂。这一方面表明供试的
新疆材料之间亲缘关系较远, 遗传变异较大, 另一方
面表明了中国新疆的材料与中亚、欧洲的材料之间
亲缘关系密切。
图 2 基于 SRAP标记的杂花苜蓿种质主成分分析
F ig. 2 P rincipal component analy sis based on
SRAP maker s in M. var ia accessions
2. 5 杂花苜蓿材料遗传基础分析
对 10份中亚材料, 7份中国新疆材料及来自欧
洲的 14份材料进行遗传基础分析(表 4)。结果显
示,遗传相似性系数变辐最大的是来自欧洲和中亚
的材料,变幅分别为 0. 2155和 0. 1914, 中国新疆材
料的变幅最小( 0. 1024) ; 中亚材料间遗传相似性系
数平均值最大, 其次是中国新疆的材料, 欧洲材料间
的遗传相似性系数平均值却最小。结果表明, 不同
杂花苜蓿材料的亲缘关系与地理环境有着密切的联
系。由于欧洲材料其覆盖区域面积广阔, 不同的地
理分布和不同的气候条件造成其变异较大。中国北
疆的 7份新疆材料, 遗传相似性系数变动幅度较小,
遗传相似性系数平均值居中, 遗传变异较为丰富。
表 4 不同来源地的杂花苜蓿种质间遗传相似性系数
Table 4 Genetic similarity coefficients o f M. v ar ia
accessions fr om different o rig ins
来源地
Origin
材料数
Acces sion
number
最小遗传
相似性系数
Minimum
GS
最大遗传
相似性系数
Maxim um
GS
遗传相似性
系数平均值
Average GS
中亚
Central Asia
10 0. 6512 0. 8426 0. 7555
中国
Ch ina
7 0. 6738 0. 7762 0. 7208
欧洲
Eu rope
14 0. 5896 0. 8051 0. 7169
3 讨论与结论
3. 1 SRAP标记扩增多态性及遗传多样性分析
本试验标记结果显示, 17 对引物组合扩增 31
份杂花苜蓿基因组 DNA 共得到 179条清晰可辨条
带,多态性条带比率 ( PPB)为 79. 89%, 高于王赫
等[ 22] 用 RAPD标记分析苜蓿属种质的遗传多样性
和亲缘关系时所报道的多态性条带比率( 74. 5%)。
易杨杰等[ 23] 用 SRA P 标记分析采自中国四川、重
庆、贵州、西藏四省区野生狗牙根( Cynod on dac
ty lon ( L. ) Pars. )种质, 14对引物可在 32份狗牙根
基因组 DNA 的 164个位点扩增出条带, 多态性条
带比例为 79. 8% ,其扩增效率与本试验较为一致。
结果同时表明, SRA P扩增效果良好, 能扩增出多态
性丰富的条带。
遗传多样性分析显示来源广泛的供试材料之间
差异明显,具有较为丰富的遗传多样性。进一步分
析发现苜蓿的遗传多样性与其地理分布有着密切相
关。卢欣石[ 4] 提出地理变迁等原因促使我国新疆地
区成为多年生苜蓿物种重要起源进化中心和分布中
心,新疆地区也是苜蓿植物遗传多样性最丰富的地
区,是中国苜蓿种质资源的天然基因库。该试验的
聚类和主成分分析等结果也显示了来自中国新疆的
7份苜蓿材料之间遗传变异较大, 遗传多样性较丰
富。魏臻武等[ 24] 采用 SSR和 ISSR标记分析苜蓿
种质时发现, 我国苜蓿地方品种遗传基础广阔, 在
基因型表现特异性的同时又有较强的地域性。综上
所述, SRA P 技术可以作为研究苜蓿遗传多样性快
捷、有效的手段。
3. 2 SRAP标记特点及其在草种质资源研究中的
发展前景
SRAP 标记是在总结了已有的 DNA 分子标记
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第 4期 周良彬等:杂花苜蓿种质 SRAP 标记遗传多样性研究
的优缺点的基础上, 由 Li与 Quir os[ 12] 于 2001年提
出的一种新型的基于 PCR的分子标记方法。其主
要特点体现在: 引物设计简单,实验操作方便、快捷;
不需要使用放射性同位素, 实验相对安全且节省人
力和物力; 引物扩增效率高, 可获得丰富的遗传信
息,且具有高共显性; SRAP 标记不需要预先掌握试
验材料相关基因组信息, 尤其适合大量目前遗传基
础研究比较薄弱的草种质资源研究。
目前, SRAP 标记技术以其独特的优势,在构建
遗传图谱、鉴定种质、遗传多样性分析、抗性连锁基
因选择及标记辅助育种等方面发挥着重要作用。例
如, 郑轶琦等[ 25] 以假俭草 ( E remochloa phiur oides
( Munro) Hack) 2个杂交组合个亲本及其杂交后代
为材料,运用进行杂种真实性鉴定,应用 6对和 4对
SRAP 引物分别鉴定得到 89个和 83个真杂种。陈
宣等[ 26] 应用混合集群分析法, 通过建立结缕草属
( Zoy sia Willd. )植物耐盐性两极端类型材料 DNA
池进行引物筛选,并结合群体各单株对具有耐盐特
异带的引物组合进行验证, 获得了 7个与结缕草属
植物耐盐性紧密相关的 SRAP 分子标记, 依据扩增
条带的大小分别命名为: Me9Em4260、Me9Em18720
和Me13Em18500等。
综上所述, SRAP 技术以方便、快捷、经济以及
实用等优点,将在牧草及草坪草种质资源研究中发
挥巨大作用。
参考文献
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