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Induction and Culture of Rhizome of Lotus (Nelumbo nucifera Gaertn.)in Test Tubes

试管藕诱导技术研究



全 文 :武汉植物学研究 2001, 19( 2) : 173~175
Journal of Wuhan Botanical Research
试管藕诱导技术研究
柯卫东 彭 静 刘玉平 黄新芳
(武汉市蔬菜科学研究所水生蔬菜研究室, 武汉 430065)
Induction and Culture of Rhizome of Lotus
( Nelumbo nucif era Gaertn. ) in Test Tubes
KE Wei-Dong, PENG Jing , LIU Yu-Ping , HU ANG Xin-Fang
(T he A quat ic Vegetable L aboratory , Wuhan I nst itute of Vegetable S ci ences, Wuhan 430065, Ch ina)
关键词: 莲; 茎尖; 试管藕
Key words: L otus(N elumbo nucif era Gaer tn. ) ; Shoot-tip; Rhizome of Lo tus in test tubes
  中图分类号: S 645. 1; Q813. 1+ 2 文献标识码: A 文章编号: 1000-470X ( 2001) 02-0173-03
莲藕( N elumbo nucif er a Gaertn. )在我国有着悠久的栽培历史, 分布极为广泛,是一
种重要的水生蔬菜和水生观赏植物, 但其繁殖系数较低( 1∶10) ,远途运输费用高。为此,
我们已进行了快繁技术研究 [ 1] , 但试管苗的成活率较低, 因此我们开展了试管藕的诱导工
作。试管藕作为一种休眠和繁殖器官,利于成活, 便于运输。此外, 还可以进行离体保存及
其他的生理、生化方面的研究工作,为这些研究提供一个可操作的简单系统。
1 材料与方法
1. 1 材料
取国家种质水生蔬菜资源圃试验田的鄂莲一号和鄂莲四号的茎尖。
1. 2 方法
将取回的鄂莲一号和鄂莲四号莲藕的茎尖,经常规消毒后,接种到 MS+ 6-BA 0. 5~
2. 0 mg / L+ NA A 0. 5 mg/ L+ 3. 0%蔗糖的分化培养基中, 1个月后观察比较不同 BA 浓
度培养基的启动速度和分化率; 将分化出的鄂莲四号丛芽,分别接种到 MS+ 6-BA 0. 1~
1. 0 mg/ L+ NAA 0. 5mg/ L + 3. 0%蔗糖的增殖培养基中, 1个月后观察比较不同 BA 浓
度培养基的增殖速率; 将继代后的不定芽分别接种到 MS+ 6-BA 1. 0 mg / L + NAA
0. 5 mg / L+ GA 0. 2~2. 0 mg / L+ 3. 0%~12. 0%蔗糖的培养基上, 1个月后观察比较不
同 GA 浓度和不同蔗糖浓度的培养基中试管藕的诱导率。将“鄂莲一号”和“鄂莲四号”的

收稿日期: 2000-10-02,修回日期: 2001-03-23。
作者简介:柯卫东( 1963- ) ,男,高级农艺师,从事水生蔬菜资源及育种研究。
不定芽分别接种到 MS+ 6-BA 1. 0 mg / L+ NAA 0. 5 mg / L+ GA 1. 0 mg / L+ 10. 0%蔗
糖的培养基上, 1. 5个月后观察比较不同品种间试管藕的诱导情况。以上各培养基加琼
脂 6. 0 g / L , pH5. 8, 培养温度为 24~26℃,每天光照 10 h,光照度为 1 500~2 500 lx。
2 结果与分析
2. 1 外植体的分化与生长情况
2. 1. 1 不同 BA 浓度对外植体分化的影响 当 NAA 浓度为 0. 5 mg / L , 6-BA 浓度在
0. 5~2. 0 mg/ L 时,莲藕茎尖都可以转绿和分化,但以 6-BA 1. 5 mg / L 时转绿率和分化
率最高,鄂莲四号分别为 88. 57%和 65. 70%。说明莲藕茎尖培养的最佳培养基为 MS+
6-BA 1. 5 mg/ L+ NAA 0. 5 mg / L+ 3%蔗糖(图版Ⅰ: 1)。
2. 1. 2 不同品种在同一培养基上外植体分化情况比较 在同一培养基中,鄂莲四号的转
绿速度和萌动速度都比鄂莲一号快且整齐, 24 d 时鄂莲四号转绿率即达 83. 3% ,萌动率
达 58. 3% ,而鄂莲一号的转绿和萌动时间都要长些,分别为 71. 4%和 38. 1%。虽然鄂莲
一号比鄂莲四号的转绿率低, 但二者最终的分化率差异不大, 49 d 时鄂莲一号为
57. 14% ,鄂莲四号为 58. 3%。
2. 2 继代增殖
当 NAA 浓度为0. 5 mg / L , 6-BA 浓度在0. 1~1. 0 mg/ L 时, 继代的外植体基本都可
增殖, BA 为 0. 1、0. 3、0. 5、1. 0 时, 25 d 后增殖系数分别为 0. 6、2. 7、5. 8、2. 9, 即 6-BA
0. 5 mg / L 时的平均增殖芽数最高,且有丛生芽(图版Ⅰ: 2、3)。所以,莲藕继代增殖的最佳
培养基为MS+ 6-BA0. 5 mg/ L+ NAA0. 5 mg / L+ 蔗糖 3%。
2. 3 试管藕的诱导
2. 3. 1 GA浓度对试管藕形成的影响 藕节伸长是形成试管藕的前提,在其他条件一致
的情况下,改变 GA 的浓度( 0. 2~2. 0 mg / L ) , 发现 GA 对促进藕节伸长有较大影响, 浓
度过低( 0. 5 mg / L 以下)时, 茎节很短而密集; 浓度过高( 1. 5 mg / L 以上)时,茎节伸长的
同时,叶柄也会伸长许多。在诱导成藕的实验中, GA 为 1. 0 mg / L 的效果最好,节间长度
在 0. 3~0. 5 cm。(图版Ⅰ: 6)。
2. 3. 2 蔗糖浓度对试管藕形成的影响 切取继代后鄂莲四号的丛芽为单芽, 接种到MS+
6-BA 1. 0 mg / L+ NAA 0. 5 mg/ L+ GA 1. 0 mg/ L+ 蔗糖 3. 0%~12. 0%培养基上,都可
以诱导出试管藕,当蔗糖浓度分别为 3. 0%、5. 0%、8. 0%、10. 0%、12. 0%时,诱导率分别
为 6. 8%、46. 7%、70. 3%、53. 3%、32. 6%, 表明蔗糖浓度为 8. 0%时效果最好, 所以诱导
试管藕的最适培养基为: M S + 6-BA 1. 0 mg/ L + N AA 0. 5 mg/ L + GA 1. 0 mg / L +
8. 0%蔗糖。
2. 3. 3 不同品种形成试管藕的情况比较 鄂莲一号和鄂莲四号都可诱导形成试管藕(图
版Ⅰ: 4、5、6) , 二者的诱导率分别为 61. 7%和 70. 3% ,说明鄂莲四号更易形成试管藕。鄂
莲一号试管藕一般为 3节, 平均藕长 1. 4 cm ,主藕粗 0. 4 cm ,平均单支重 0. 9 g ; 鄂莲四
号试管藕一般 3节,平均藕长 1. 5 cm ,主藕粗 0. 4 cm,平均单支重 0. 8 g。
3 讨论
( 1) 鄂莲一号和鄂莲四号在同一培养基中虽然转绿率不同, 但二者最终的分化率差
异不大,说明在莲藕茎尖培养中,分化率并不完全取决于转绿率。同时我们也发现,外植体
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的质量条件、生长状态及部位(如顶芽和腋芽)等因素,也都会影响其转绿率和分化率。
( 2) 在试管藕的诱导过程中, 蔗糖浓度对其诱导率影响较大, 浓度过低时, 植株生长
旺盛,不易形成试管藕, 浓度过高时,可以形成试管藕, 但植株同时易过早衰老, 所以要掌
握一个适当的浓度。
( 3) 我们已将少量试管藕移栽到盆中,现在长势良好,田间正式生产试验有待于进一
步进行。
目前, 国内对莲藕的组织培养研究已有报道[ 2] ,但有关试管藕的诱导研究未见报道,
如何提高试管的诱导率、整齐度以及试管藕与常规种藕相比的产量、商品性、抗逆性等有
待于进一步观察比较和研究。
参考文献:
[ 1] 柯卫东,彭静,黄新芳. 莲藕茎尖培养.园艺学进展, 2000,第四辑, 432 435.
[ 2]何子灿,刘士佳.莲离体茎尖的培养.水生生物学报, 1987, 11( 2) : 191 193.
175 第 2期              柯卫东等:试管藕诱导技术研究