全 文 ：植物科学学报　 ２０１４ꎬ ３２(２): １９９~２０４
Ｐｌａｎｔ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｊｏｕｒｎａｌ
　 　 ＤＯＩ: １０􀆰 ３７２４ / ＳＰ􀆰 Ｊ􀆰 １１４２􀆰 ２０１４􀆰 ２０１９９
荧光原位杂交技术的研究进展
何世斌１∗ꎬ 柴连琴１ꎬ 谭珺隽２ꎬ 沈 尧１ꎬ 周 萍１ꎬ 马云峰１ꎬ 李立家２
(１. 河南大学生命科学学院ꎬ 河南开封 ４７５００４ꎻ ２. 武汉大学生命科学学院ꎬ 武汉 ４３００７２)
摘　 要: 荧光原位杂交(ＦＩＳＨ)是在染色体、 间期细胞核和 ＤＮＡ纤维上进行 ＤＮＡ序列定位的一种有效手段ꎮ 近
年来ꎬ 围绕提高检测的分辨率和灵敏性ꎬ 不断将免疫染色、 量子点和微流控芯片等物理化学技术引入到荧光原
位杂交中ꎬ 促进了它的快速发展ꎮ 本文主要综述了荧光原位杂交的基本原理和发展历程ꎬ 重点介绍了免疫染色￣
荧光原位杂交( ｉｍｍｕｎｏ￣ＦＩＳＨ)、 量子点￣荧光原位杂交(ＱＤ￣ＦＩＳＨ)和微流控芯片￣荧光原位杂交(ＦＩＳＨ ｏｎ ｍｉｃｒｏ￣
ｃｈｉｐ)等多种新技术及其检测特点ꎬ 如快速、 灵敏、 动态、 多样化等ꎮ 随着荧光原位杂交技术的不断完善与发
展ꎬ 将在细胞遗传学、 表观遗传学及分子生物学等领域发挥更加重要的作用ꎮ
关键词: 荧光原位杂交ꎻ 免疫染色ꎻ 量子点ꎻ 微流控芯片
中图分类号: Ｑ３４３　 　 　 　 　 文献标识码: Ａ　 　 　 　 　 文章编号: ２０９５￣０８３７(２０１４)０２￣０１９９￣０６
　 　 　 收稿日期: ２０１４￣０１￣１０ꎬ 修回日期: ２０１４￣０３￣０５ꎮ
　 基金项目: 河南大学科研基金项目(２０１２ＹＢＺＲ０２８)ꎻ 河南省博士后科研基金项目ꎮ
　 作者简介: 何世斌(１９８４－)ꎬ 女ꎬ 博士ꎬ 副教授ꎬ 主要从事分子细胞遗传学与表观遗传学方面的研究ꎮ
　 ∗通讯作者(Ａｕｔｈｏｒ ｆｏｒ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅ􀆰 Ｅ￣ｍａｉｌ: ｓｂｈｅ＠ｈｅｎｕ􀆰 ｅｄｕ􀆰 ｃｎ)ꎮ
Ｒｅｃｅｎｔ Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎ ｓｉｔｕ Ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ
ＨＥ Ｓｈｉ￣Ｂｉｎ１∗ꎬ ＣＨＡＩ Ｌｉａｎ￣Ｑｉｎ１ꎬ ＴＡＮ Ｊｕｎ￣Ｊｕｎ２ꎬ ＳＨＥＮ Ｙａｏ１ꎬ ＺＨＯＵ Ｐｉｎｇ１ꎬ ＭＡ Ｙｕｎ￣Ｆｅｎｇ１ꎬ ＬＩ Ｌｉ￣Ｊｉａ２
(１. Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ Ｈｅｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｋａｉｆｅｎｇꎬ Ｈｅｎａｎ ４７５００４ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ
２. Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ Ｗｕｈａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｗｕｈａｎ ４３００７２ꎬ Ｃｈｉｎａ)
Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ(ＦＩＳＨ) ｉｓ ａｎ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｔｏｏｌ ｆｏｒ ｍａｐｐｉｎｇ ｓｐｅｃｉｆｉｃ
ＤＮＡ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｎ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓꎬ ｉｎｔｅｒｐｈａｓｅ ｎｕｃｌｅｉꎬ ａｎｄ ＤＮＡ ｆｉｂｅｒｓ. Ｉｎ ｒｅｃｅｎｔ ｙｅａｒｓꎬ ｒａｐｉｄ
ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ＦＩＳＨ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｍａｄｅ ｂｙ ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｂｙ ｃｏｍｂｉｎｉｎｇ
ｉｍｍｕｎｏｓｔａｉｎｉｎｇꎬ ｑｕａｎｔｕｍ ｄｏｔｓ ａｎｄ ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃ ｃｈｉｐｓꎬ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｐｈｙｓｉｃａｌ ａｎｄ ｃｈｅｍｉｃａｌ
ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ. Ｗｅ ｒｅｖｉｅｗｅｄ ｔｈｅ ｂａｓｉｃ ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ ＦＩＳＨꎬ ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ ｔｈｅ
ｍｏｓｔ ｒｅｃｅｎｔ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏ￣ＦＩＳＨꎬ ｑｕａｎｔｕｍ ｄｏｔ￣ＦＩＳＨꎬ ａｎｄ ＦＩＳＨ ｏｎ ｍｉｃｒｏｃｈｉｐ. Ｔｈｅｉｒ
ｒａｐｉｄꎬ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅꎬ ｄｙｎａｍｉｃꎬ ａｎｄ ｄｉｖｅｒｓｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｗｅｒｅ ａｌｓｏ ｄｉｓｃｕｓｓｅｄ. Ｗｉｔｈ ｉｔｓ ｃｏｎｔｉｎｕｅｄ
ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔꎬ ＦＩＳＨ ｗｉｌｌ ｐｌａｙ ａｎ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｌｙ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｒｏｌｅ ｉｎ ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃｓꎬ
ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃｓꎬ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｒｅａｓ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ(ＦＩＳＨ)ꎻ Ｉｍｍｕｎｏｓｔａｉｎｉｎｇꎻ Ｑｕａｎｔｕｍ ｄｏｔ(ＱＤ)ꎻ
Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃ ｃｈｉｐ
　 　 分子细胞遗传学的发展为宏观细胞学和微观分
子生物学的研究架起了一座桥梁ꎮ 早期细胞遗传学
的研究是建立在细胞核和染色体基本特征上的ꎬ 如
染色体的长短、 臂比、 着丝粒、 端粒、 核仁组织区
等ꎬ 荧光原位杂交技术( ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙ￣
ｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎꎬ ＦＩＳＨ)的出现标志着分子细胞遗传学
一个重要阶段的开始ꎮ 近年来ꎬ 随着物理、 化学技
术的发展与进步ꎬ 免疫染色、 量子点和微流控芯片
等不断被引入到荧光原位杂交中ꎬ 促进了荧光原位
杂交技术和分子细胞遗传学的发展ꎮ
１　 荧光原位杂交技术
１􀆰 １　 荧光原位杂交技术原理
荧光原位杂交技术是根据核酸碱基互补配对原
理ꎬ 用半抗原标记 ＤＮＡ或者 ＲＮＡ探针与经过变性
的单链核酸序列互补配对ꎬ 通过带有荧光基团的抗
体去识别半抗原进行检测ꎬ 或者用荧光基团对探针
进行直接标记并与目标序列结合ꎬ 最后利用荧光显
微镜直接观察目标序列在细胞核、 染色体或切片组
织中的分布情况[１]ꎮ ＦＩＳＨ 技术发展早期ꎬ 是应用
放射性同位素标记探针来定位目标序列的[２]ꎬ 直
到 １９８０年 Ｂａｕｍａｎ等才将荧光染料直接标记 ＲＮＡ
探针的 ３’端ꎬ 并检测到了特异的 ＤＮＡ[３]ꎻ １９８２
年 Ｍａｎｕｅｌｉｄｉｓ等采用生物素标记的探针进行了染
色体原位杂交[４]ꎮ 然而由于植物细胞中细胞壁的
存在ꎬ 非放射性生物素标记探针技术直到 １９８５ 年
才首次应用于黑麦中 １２０ ｂｐ 重复序列在小麦染色
体上的分布研究[５]ꎮ 因荧光原位杂交技术克服了
放射性探针检测周期长且危害人体健康的缺点ꎬ 被
广泛应用于基因定位、 染色体识别、 物理图谱的构
建、 进化分析等研究中[１]ꎮ ＦＩＳＨ 技术常用的半抗
原标记物有生物素和地高辛ꎬ 检测的荧光基团有异
硫氰酸荧光素( ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ ｉｓｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅꎬ ＦＩＴＣ)、
花菁染料 ( ｃｙａｎｉｎｅｄｙｅ) 和罗丹明 ( ｒｈｏｄａｍｉｎｅ)
等[６]ꎮ
１􀆰 ２　 荧光原位杂交技术的发展历程
衡量 ＦＩＳＨ技术两个最重要的参数是分辨率和
灵敏度ꎮ ＦＩＳＨ技术从诞生发展至今已有 ３０多年的
历史ꎬ 期间主要是通过改良靶标序列和探针种类来
不断提高其分辨率和灵敏度的ꎮ 荧光原位杂交是在
染色体、 间期细胞核和 ＤＮＡ 纤维上进行 ＤＮＡ 序
列定位的一种有效手段ꎬ 研究中涉及较多的是有丝
分裂中期的染色体ꎮ 这一时期的染色体形态较好ꎬ
制片技术简单ꎬ 但其分辨率较低(如分辨率水平在
人类中期染色体上只有 １ ~ ３ Ｍｂ)ꎬ 难以进行精细
的物理图谱构建ꎬ 而且对于较小的染色体也无法识
别ꎻ 减数分裂期的染色体浓缩程度大大降低ꎬ 比中
期染色体长 １０ ~ ２０ 倍ꎬ 可提高杂交分辨率[６]ꎮ
番茄粗线期染色体上的 ＦＩＳＨ 结果证明其分辨率可
达到 < １００ ｋｂ的水平ꎬ 适于定位低单拷贝 ＤＮＡ序
列以及遗传图谱和物理图谱的整合ꎬ 但减数分裂期
的染色体取材较难ꎬ 制片技术也不太好掌握[７]ꎻ
间期细胞核比较容易获得ꎬ 染色质浓缩程度也低于
中期染色体ꎬ 可在两个相距 ５０ ｋｂ 左右的 ＤＮＡ 序
列间检测到信号分离ꎮ 但由于缺乏可辨别的染色体
形态结构ꎬ 间期细胞核上的 ＦＩＳＨ 无法识别不同的
染色体ꎻ ＤＮＡ 纤维( ｆｉｂｅｒ) ￣ＦＩＳＨ 的成功应用突破
了分辨率的限制ꎬ 它人为的改变了染色质原本的空
间结构ꎬ 通过裂解间期细胞核释放出染色质纤维ꎬ
去除了组蛋白等蛋白质的束缚使 ＤＮＡ 得到伸展ꎬ
其分辨率可达到 １ ~ ５００ ｋｂ [８ꎬ９]ꎮ 但 ＤＮＡ 纤维
( ｆｉｂｅｒ) ￣ＦＩＳＨ技术需要两个探针进行共同定位才能
鉴别染色体ꎬ 而且 ＤＮＡ 纤维伸展程度不一以及随
机断裂将会导致信号的长度不一ꎮ 荧光原位杂交技
术的探针包括重复序列、 基因组序列、 低单拷贝序
列和大片段克隆(ＢＡＣ、 ＹＡＣ 和 ＭＡＣ 等)ꎬ 其中
ＢＡＣ￣ＦＩＳＨ可以有效的进行低单拷贝 ＤＮＡ 序列定
位作图ꎬ 还可进行遗传图谱的绘制、 染色体识别
等ꎮ 但由于这些大片段的克隆往往含有重复序列ꎬ
导致非特异性杂交信号的产生ꎬ 需进一步通过序列
比对将重复序列去除ꎮ
随着 ＦＩＳＨ技术的不断完善与发展ꎬ 已被广泛
应用于 ＤＮＡ序列或基因的定位、 核型分析、 基因
组进化研究、 物理图谱的构建、 转基因生物的鉴定
等ꎮ 在 ＦＩＳＨ基础上发展起来的多色荧光原位杂交
(ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ￣ＦＩＳＨꎬ Ｍ￣ＦＩＳＨ)ꎬ 可通过多色荧光同时
探测多个目标ꎬ 如用不同颜色的探针组合来识别人
类的 ２４条染色体[１０]ꎮ 继而在 Ｍ￣ＦＩＳＨ 的基础上又
发展了比较基因组原位杂交(ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｇｅｎｏｍｉｃ
ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎꎬ ＣＧＨ)和三维荧光原位杂交( ｔｈｒｅｅ￣
ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ ＦＩＳＨꎬ ３Ｄ￣ＦＩＳＨ)技术ꎮ 比较基因组
原位杂交将供试材料和对照组材料的 ＤＮＡ 用不同
颜色的荧光基团进行标记ꎬ 同时在对照组的染色体
上进行杂交ꎬ 根据产生颜色的差异来判断两个基因
组相对 ＤＮＡ拷贝数的变化ꎬ 并将其定位到染色体
上[１１]ꎮ 根据 ＣＧＨ￣ＦＩＳＨ 的检测分辨原理ꎬ 发展了
ＣＧＨ芯片技术和 ＳＮＰ(ｓｉｎｇｌｅ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｐｏｌｙｍｏｒ￣
ｐｈｉｓｍ)芯片技术ꎬ 然后进行数字化信号采集ꎬ 使
ＦＩＳＨ变成了高通量的检测技术[１２ꎬ１３]ꎮ 三维荧光原
位杂交技术保持了细胞核和染色体原本的形态ꎬ 并
利用改善的激光共聚焦显微镜成像系统和软件的三
维重构处理功能(如 Ｍｅｔａｍｏｒｐｈ 软件)ꎬ 来研究细
胞核或染色体空间结构域的组织与基因表达调控之
间的关系[１４]ꎬ 而 ４Ｄ￣ＦＩＳＨ 则可应用于活细胞的检
００２ 植 物 科 学 学 报 第 ３２卷　
测[１４]ꎮ 此外ꎬ 近年来荧光原位杂交与免疫组化以
及物理、 化学等学科的进一步结合ꎬ 推动了 ＦＩＳＨ
技术的快速发展ꎮ
２　 荧光原位杂交的研究进展
２􀆰 １　 免疫￣荧光原位杂交技术
免疫染色( ｉｍｍｕｎｏｓｔａｉｎｉｎｇ)是生物化学中任何
基于抗体来检测样品中特定蛋白质方法的总称ꎮ 免
疫染色最初是指组织切片的免疫组化染色ꎬ 由
Ｃｏｏｎｓ首先提出的[１５]ꎬ 目前免疫染色已涵盖了组织
学、 细胞生物学和分子生物学中所应用的诸多基于
抗体的染色技术ꎮ 免疫染色和荧光原位杂交技术相
结合( ｉｍｍｕｎｏ￣ＦＩＳＨ)可用来分析单细胞或者单个染
色体水平上的特定序列与其相关联的蛋白质空间结
构的关系ꎬ 拓展了荧光原位杂交技术的应用范围ꎬ
并且可以作为染色质免疫共沉淀结合的测序技术
(ｃｈｒｏｍａｔｉｎ ｉｍｍｕｎｏｐｒｅｃｉｔａｔｉｏｎ￣ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇꎬ ＣｈＩＰ￣
ｓｅｑ)或结合 ＤＮＡ 微阵列技术(ＣｈＩＰ￣ｃｈｉｐ)的一个
互补方法[１６ꎬ１７]ꎮ 由于染色质免疫共沉淀结合的测
序技术或 ＤＮＡ微阵列技术不能辨别处在细胞周期
不同阶段的细胞ꎬ 这样获得的数据只能代表一些基
因不同表达模式的细胞群体或处于不同细胞周期的
细胞群体所产生的平均值ꎬ 而且这些技术也仅适
用于已经测序或者已有芯片开发的物种ꎮ 免疫染
色结合的荧光原位杂交技术可以检测某一时期单
细胞水平的某一 ＤＮＡ序列和与之相关联的蛋白质
关系及其分布情况ꎬ 这样有利于消除细胞间的差
异性ꎮ
传统的制片方法常采用卡诺固定液ꎬ 其中的乙
酸会破坏蛋白质的结构ꎬ 所以在进行 ｉｍｍｕｎｏ￣
ＦＩＳＨ实验时通常采用 ４％的多聚甲醛来固定材料ꎻ
由于荧光原位杂交中有加热的处理步骤ꎬ 为避免蛋
白质结构遭到破坏ꎬ 需先使用相关抗体进行免疫染
色并检测相关蛋白的分布情况ꎬ 然后再进行荧光原
位杂交ꎮ 另外ꎬ 当免疫染色与多色荧光原位杂交相
结合时ꎬ 蛋白质检测的信号不能太强以免干扰到
ＤＮＡ序列的检测ꎬ 其最理想的结果就是 ＤＮＡ和蛋
白质都能被检测到ꎮ Ｈｅｎｇ 等利用多色荧光原位杂
交和免疫染色相结合的方法研究了减数分裂前期的
染色体和联会复合体之间的关系[１８]ꎮ ｉｍｍｕｎｏ￣
ＦＩＳＨ还可用来检测特定区域的组蛋白修饰情况ꎬ
如 Ｚｉｎｎｅｒ等利用三维技术分析了不同染色体组蛋
白修饰的差异[１９]ꎻ Ｚｈａｎｇ 等检测了 ｒＤＮＡ 重复序
列区域组蛋白修饰的分布情况[２０]ꎮ 免疫染色还可
以和 ｆｉｂｅｒ￣ＦＩＳＨ相结合ꎬ 检测被拉伸的染色质区域
一些序列和相关蛋白的关系ꎬ 大大提高了检测的分
辨率ꎮ Ｊｉｎ等利用免疫染色和 ｆｉｂｅｒ￣ＦＩＳＨ 检测了着
丝粒序列和着丝粒蛋白的关系[２１]ꎮ 近年来ꎬ ｉｍ￣
ｍｕｎｏ￣ＦＩＳＨ在研究表观遗传学、 细胞分裂以及探
讨染色质的结构与基因表达的关系等方面发挥了重
要的作用ꎮ
２􀆰 ２　 量子点￣荧光原位杂交技术
量子点(ｑｕａｎｔｕｍ ｄｏｔꎬ ＱＤ)ꎬ 又名半导体纳
米晶体ꎬ 具有独特的光化学和物理性质ꎮ 自从成功
地解决了量子点的水溶性和生物相容性的问题之
后[２２ꎬ２３]ꎬ 量子点作为一种新型的荧光染料ꎬ 已被
广泛应用于免疫组化、 细胞追踪、 活体成像、 流式
细胞术和荧光原位杂交技术等[２４ꎬ２５]ꎮ 与传统有机
荧光标记物相比ꎬ 量子点具有很多优点ꎬ 如量子点
的激发光波长范围宽ꎬ 而发射光波长范围窄ꎬ 可以
在一个激发光下观察到多个不同的量子点标记物ꎻ
通过调节量子点的大小和组成ꎬ 得到不同发射光谱
的量子点ꎬ 适用于多色标记ꎻ 量子点的荧光强度
强ꎬ 不易发生光淬灭等ꎮ
荧光原位杂交技术一般采用有机荧光染料来检
测杂交信号ꎬ 但是有机荧光基团容易发生淬灭ꎬ 而
且发射光波长范围宽ꎬ 做多色杂交并在不同激发光
下观察时ꎬ 很容易串色ꎮ 将量子点引入到荧光原位
杂交体系中ꎬ 不但可以解决这些问题ꎬ 而且还大大
提高了 ＦＩＳＨ 检测的灵敏度[２６ꎬ２７]ꎮ 量子点￣荧光原
位杂交技术(ＱＤ￣ＦＩＳＨ)常通过两种方法来实现:
一是间接标记法ꎬ 即使用链霉亲和素￣量子点偶联
物来检测生物素标记的探针ꎬ 目前市场上已有商业
化的试剂盒出售ꎻ 二是直接标记法ꎬ 即使用量子点
直接标记探针[２８]ꎮ 尽管 ＱＤ￣ＦＩＳＨ技术还不是很成
熟ꎬ 但还是有一些应用研究报道ꎮ Ｘｉａｏ 和 Ｂａｒｋｅｒ
首先将链霉亲合素偶联的量子点应用到检测人类中
期染色体上的荧光原位杂交信号ꎬ 并且证明量子点
比传统的有机荧光染料更耐光漂ꎬ 其中 ｐＨ 值对量
子点荧光原位杂交的成功实施是非常关键的[２７]ꎻ
１０２　 第 ２期　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 何世斌等: 荧光原位杂交技术的研究进展
Ｂｅｎｔｏｌｉｌａ和 Ｗｅｉｓｓ 进行了小鼠的量子点多色荧光
原位杂交[２９]ꎻ Ｗｕ 等使用合成的巯基乙酸量子点
标记的 ＤＮＡ应用于大肠杆菌的荧光原位杂交[３０]ꎻ
Ｍａ等成功应用量子点来检测植物染色体的微卫星
杂交信号[３１]ꎻ Ｈｅ 等采用量子点标记的长链 ＤＮＡ
片段实现了植物单拷贝基因的检测[３２]ꎮ 随着 ＱＤ￣
ＦＩＳＨ技术的改进与成熟ꎬ 量子点作为一种新颖的
荧光染料ꎬ 将会进一步推动分子细胞遗传学的
发展ꎮ
２􀆰 ３　 微流控芯片￣荧光原位杂交技术
微流控芯片(ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃ ｃｈｉｐ)技术是把医学、
生物、 化学等分析过程中的样品制备、 反应、 分
离、 检测等步骤集成到一块纳米级的芯片上ꎬ 称为
“芯片实验室” ( ｌａｂ ｏｎ ａ ｃｈｉｐ)ꎮ 整个过程可通过
计算机操作ꎬ 具有液体流动可控性、 所需样品和试
剂量较少、 反应时间短等特点ꎬ 而且还可以自动化
进行大规模的样品分析[３３]ꎮ 而传统的荧光原位杂
交中探针的价格十分昂贵(尤其是医学诊断上需要
的探针)ꎬ 且杂交的整个操作过程繁琐、 耗时长ꎬ
限制了 ＦＩＳＨ技术的广泛应用ꎮ 将微流控芯片与荧
光原位杂交相结合(ＦＩＳＨ ｏｎ ｍｉｃｒｏｃｈｉｐ)ꎬ 可以避
免这些缺点ꎬ 并将杂交检测的时间缩短到传统荧光
原位杂交所需时间的 １ / ２０(１小时基本可以完成整
个操作)ꎬ 而试剂量仅为原来的 １ / １０ꎬ 大大降低了
成本ꎬ 并且可以自动化一次分析多个样本[３４]ꎮ 此
外ꎬ 在微流控芯片的平台上ꎬ 免疫染色￣荧光原位
杂交技术和量子点￣荧光原位杂交技术都是可以实
现的ꎬ 并且还可以大大提高检测效率和灵敏度ꎮ
３　 展望
荧光原位杂交技术从诞生发展至今ꎬ 经过不断
的改进与完善ꎬ 逐渐形成了快速、 灵敏、 动态、 多
样化等特点ꎬ 在细胞遗传学、 表观遗传学及分子生
物学等领域发挥着重要的作用ꎬ 为基因组研究提供
了强大的工具ꎮ 荧光原位杂交技术已广泛应用于染
色体的识别、 ＤＮＡ序列的定位、 物理图谱的构建、
进化分析等研究ꎮ 随着科技的不断进步ꎬ 免疫染色
与荧光原位杂交尤其是多色荧光原位杂交相结合ꎬ
可以原位地单个细胞水平上检测各种染色体蛋白与
ＤＮＡ、 ＲＮＡ序列的关系ꎻ 而 ＤＮＡ、 ＲＮＡ和蛋白质
提取的方法ꎬ 只是提供了细胞群体的一个平均水
平ꎮ 若要观察多种蛋白和多种 ＤＮＡ、 ＲＮＡ 序列的
关系ꎬ 则需多种荧光基团标记物ꎬ 同时对荧光显微
镜的配置及性能要求也会提高ꎬ 而且还要避免串色
的影响ꎮ 量子点原位杂交技术的发展很好的解决了
这一问题ꎬ 因为量子点激发光波长范围宽ꎬ 而发射
光波长范围窄ꎬ 可以在一个激发光下观察到多个不
同的量子点标记物ꎬ 较适用于多色标记ꎻ 而且量子
点荧光强度强ꎬ 不易发生光淬灭ꎬ 可以进行低单拷
贝序列的定位和长时间的活体检测ꎮ 将量子点荧光
原位杂交技术与免疫染色相结合ꎬ 不但可以同时进
行多种染色体蛋白与多种 ＤＮＡ、 ＲＮＡ 序列的定
位ꎬ 而且还可实现对活体的实时检测ꎮ 而微流控芯
片与荧光原位杂交技术结合ꎬ 则可以减少试剂(探
针和抗体等)的用量ꎬ 节约成本ꎬ 缩短反应时间ꎬ
提高检测效率ꎬ 尤其是一些低单拷贝序列的检测ꎮ
将免疫染色、 量子点荧光原位杂交、 微流控芯片三
者相结合ꎬ 就可以同时对细胞进行各种处理ꎬ 实时
动态的观察各种染色体蛋白和 ＤＮＡ、 ＲＮＡ 序列的
关系ꎮ 但目前微流控芯片需要专业的技术人员来制
作ꎬ 专门的仪器来操作ꎬ 还没有实现市场化ꎬ 有待
进一步的研发和利用ꎮ 今后ꎬ 随着物理、 化学和成
像技术等的发展与应用ꎬ 会有更多更新的技术手段
被引入到荧光原位杂交中ꎬ 推动 ＦＩＳＨ 技术在生物
学、 医学等领域中发挥更加重要的作用ꎮ
参考文献:
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１０５７－１０６８.
[ ７ ] 　 Ｚｈｏｎｇ ＸＢꎬ ｄｅ Ｊｏｎｇ ＪＨꎬ Ｚａｂｅｌ Ｐ. Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ
ｔｏｍａｔｏ ｍｅｉｏｔｉｃ ｐａｃｈｙｔｅｎｅ ａｎｄ ｍｉｔｏｔｉｃ ｍｅｔａｐｈａｓｅ
ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙ￣
ｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ(ＦＩＳＨ) [ Ｊ] . Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ Ｒｅｓꎬ １９９６ꎬ
４(１): ２４－２８.
[ ８ ] 　 Ｒａａｐ ＡＫꎬ Ｆｌｏｒｉｊｎ ＲＪꎬ Ｂｌｏｎｄｅｎ ＬＡＪꎬ Ｗｉｅｇａｎｔ Ｊꎬ
Ｖａａｎｄｒａｇｅｒ ＪＷꎬ Ｖｒｏｌｉｊｋ Ｈꎬ ｄｅｎ Ｄｕｎｎｅｎ Ｊꎬ Ｔａｎｋｅ
ＨＪꎬ ｖａｎ Ｏｍｍｅｎ ＧＪ. Ｆｉｂｅｒ ＦＩＳＨ ａｓ ａ ＤＮＡ Ｍａｐ￣
ｐｉｎｇ Ｔｏｏｌ[Ｊ] . Ｍｅｔｈｏｄｓꎬ １９９６ꎬ ９(１): ６７－７３.
[ ９ ] 　 Ｌｉ Ｌꎬ Ｙａｎｇ Ｊꎬ Ｔｏｎｇ Ｑꎬ Ｚｈａｏ Ｌꎬ Ｓｏｎｇ Ｙ. Ａ ｎｏｖｅｌ
ａｐｐｒｏａｃｈ ｔｏ ｐｒｅｐａｒｅ ｅｘｔｅｎｄｅｄ ＤＮＡ ｆｉｂｅｒｓ ｉｎ
ｐｌａｎｔｓ[ Ｊ] . Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ Ａꎬ ２００５ꎬ ６３ ( ２): １１４ －
１１７.
[１０] 　 Ｓｐｅｉｃｈｅｒ ＭＲꎬ Ｇｗｙｎ ＢＳꎬ Ｗａｒｄ ＤＣ. Ｋａｒｙｏｔｙｐｉｎｇ
ｈｕｍａｎ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ ｂｙ ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ ｍｕｌｔｉ￣ｆｌｕｏｒ
ＦＩＳＨ[Ｊ] . Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔꎬ １９９６ꎬ １２: ３６８－３７５.
[１１] 　 Ｋａｌｌｉｏｎｉｅｍｉ Ａꎬ Ｋａｌｌｉｏｎｉｅｍｉ ＯＰꎬ Ｓｕｄａｒ Ｄꎬ Ｒｕｔｏｖｉｔｚ
Ｄꎬ Ｇｒａｙ ＪＷꎬ Ｗａｌｄｍａｎ Ｆꎬ Ｐｉｎｋｅｌ Ｄ. Ｃｏｍｐａｒａ￣
ｔｉｖｅ ｇｅｎｏｍｉｃ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｙｔｏｇｅｎｅ￣
ｔｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｓｏｌｉｄ ｔｕｍｏｒｓ [ Ｊ] . Ｓｃｉｅｎｃｅꎬ １９９２ꎬ
２５８(５０８３): ８１８－８２１.
[１２] 　 Ｆｉｅｇｌｅｒ Ｈꎬ Ｇｒｉｂｂｌｅ ＳＭꎬ Ｂｕｒｆｏｒｄ ＤＣꎬ Ｃａｒｒ Ｐꎬ
Ｐｒｉｇｍｏｒｅ Ｅꎬ Ｐｏｒｔｅｒ ＫＭꎬ Ｃｌｅｇｇ Ｓꎬ Ｃｒｏｌｌａ ＪＡꎬ
Ｄｅｎｎｉｓ ＮＲꎬ Ｊａｃｏｂｓ Ｐꎬ Ｃａｒｔｅｒ ＮＰ. Ａｒｒａｙ ｐａｉｎ￣
ｔｉｎｇ: ａ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｒａｐｉｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ａｂｅｒｒａｎｔ
ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ ｕｓｉｎｇ ＤＮＡ ｍｉｃｒｏａｒｒａｙｓ[Ｊ] . Ｊ Ｍｅｄ
Ｇｅｎｅｔꎬ ２００３ꎬ ４０(９): ６６４－６７０.
[１３] 　 Ｍａｔｓｕｚａｋｉ Ｈꎬ Ｄｏｎｇ Ｓꎬ Ｌｏｉ Ｈꎬ Ｄｉ Ｘꎬ Ｌｉｕ Ｇꎬ Ｈｕｂ￣
ｂｅｌｌ Ｅꎬ Ｌａｗ Ｊꎬ Ｂｅｒｎｔｓｅｎ Ｔꎬ Ｃｈａｄｈａ Ｍꎬ Ｈｕｉ Ｈꎬ
Ｙａｎｇ Ｇꎬ Ｋｅｎｎｅｄｙ ＧＣꎬ Ｗｅｂｓｔｅｒ ＴＡꎬ Ｃａｗｌｅｙ Ｓꎬ
Ｗａｌｓｈ ＰＳꎬ Ｊｏｎｅｓ ＫＷꎬ Ｆｏｄｏｒ ＳＰꎬ Ｍｅｉ Ｒ. Ｇｅｎｏ￣
ｔｙｐｉｎｇ ｏｖｅｒ １００ꎬ ０００ ＳＮＰｓ ｏｎ ａ ｐａｉｒ ｏｆ ｏｌｉｇｏｎｕｃ￣
ｌｅｏｔｉｄｅ ａｒｒａｙｓ [ Ｊ] . Ｎａｔ Ｍｅｔｈｏｄｓꎬ ２００４ꎬ １ ( ２):
１０９－１１１.
[１４] 　 Ｃｒｅｍｅｒ Ｔꎬ Ｋüｐｐｅｒ Ｋꎬ Ｄｉｅｔｚｅｌ Ｓꎬ Ｆａｋａｎ Ｓ. Ｈｉｇｈ￣
ｅｒ ｏｒｄｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｉｎ ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ ｉｎ ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｎｕｃｌｅｕｓ:
ｏｎ ｔｈｅ ｗａｙ ｆｒｏｍ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｔｏ ｆｕｎｃｔｉｏｎ [ Ｊ] . Ｂｉｏｌ
Ｃｅｌｌꎬ ２００４ꎬ ９６(８): ５５５－５６７.
[１５] 　 Ｃｏｏｎｓ ＡＨꎬ Ｃｒｅｅｃｈ ＨＪꎬ Ｊｏｎｅｓ ＲＮ. Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉ￣
ｃａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ａｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ａ ｆｌｕｏｒｅｓ￣
ｃｅｎｔ ｇｒｏｕｐ[ Ｊ] . Ｅｘｐ Ｂｉｏｌ Ｍｅｄꎬ １９４１ꎬ ４７: ２００－
２０２.
[１６] 　 Ｔｅｒｒｅｎｏｉｒｅ Ｅꎬ ＭｃＲｏｎａｌｄ Ｆꎬ Ｈａｌｓａｌｌ ＪＡꎬ Ｐａｇｅ Ｐꎬ
Ｉｌｌｉｎｇｗｏｒｔｈ ＲＳꎬ Ｔａｙｌｏｒ ＡＭꎬ Ｄａｖｉｓｏｎ Ｖꎬ Ｏ􀆳Ｎｅｉｌｌ
ＬＰꎬ Ｔｕｒｎｅｒ ＢＭ. Ｉｍｍｕｎｏｓｔａｉｎｉｎｇ ｏｆ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｈｉｓ￣
ｔｏｎｅｓ ｄｅｆｉｎｅｓ ｈｉｇｈ￣ｌｅｖｅｌ ｆｅａｔｕｒｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ
ｍｅｔａｐｈａｓｅ ｅｐｉｇｅｎｏｍｅ[ Ｊ] . Ｇｅｎｏｍｅ Ｂｉｏｌꎬ ２０１０ꎬ
１１(１１): Ｒ１１０.
[１７] 　 Ｙｅ ＣＪꎬ Ｓｔｅｖｅｎｓ ＪＢꎬ Ｌｉｕ Ｇꎬ Ｙｅ ＫＪꎬ Ｙａｎｇ Ｆꎬ
Ｂｒｅｍｅｒ ＳＷꎬ Ｈｅｎｇ ＨＨ. Ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｍｕｌｔｉｃｏｌｏｒ￣ＦＩＳＨ
ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｓｔａｉｎｉｎｇ[Ｊ] . Ｃｙｔｏｇｅｎｅｔ Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｓꎬ
２００６ꎬ １１４: ２２７－２３４.
[１８] 　 Ｈｅｎｇ ＨＨꎬ Ｔｓｕｉ ＬＣꎬ Ｍｏｅｎｓ ＰＢ. Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ
ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓ ＤＮＡ ｉｎｓｅｒｔｓ ｏｎ ｔｈｅ ｍｏｕｓｅ ｍｅｉｏｔｉｃ
ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｃｏｒｅ[Ｊ] . Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍａꎬ １９９４ꎬ １０３
(６): ４０１－４０７.
[１９] 　 Ｚｉｎｎｅｒ Ｒꎬ Ｔｅｌｌｅｒ Ｋꎬ Ｖｅｒｓｔｅｅｇ Ｒꎬ Ｃｒｅｍｅｒ Ｔꎬ Ｃｒｅ￣
ｍｅｒ Ｍ. Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｍｅｅｔｓ ｎｕｃｌｅａｒ ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ:
ｍｕｌｔｉｃｏｌｏｒ ｉｍｍｕｎｏ￣ＦＩＳＨ ｆｏｒ ｃｏ￣ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ
ｏｆ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｓｅｇｍｅｎｔｓ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ ｅｘ￣
ｐｒｅｓｓｅｄ ｇｅｎｅ ｌｏｃｉ ｗｉｔｈ ｖａｒｉｏｕｓ ｈｉｓｔｏｎｅ ｍｅｔｈｙｌａ￣
ｔｉｏｎｓ [ Ｊ] . Ａｄｖ Ｅｎｚｙｍｅ Ｒｅｇｕｌꎬ ２００７ꎬ ４７ ( １ ):
２２３－２４１.
[２０] 　 Ｚｈａｎｇ Ｌꎬ Ｈｕ Ｙꎬ Ｙａｎ Ｓꎬ Ｌｉ Ｈꎬ Ｈｅ Ｓꎬ Ｈｕａｎｇ Ｍꎬ
Ｌｉ Ｌ. ＡＢＡ￣ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｓｅｅｄ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
ｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｒｉｂｏｓｏｍａｌ ＤＮＡ ｃｈｒｏｍａｔｉｎ ｃｏｎ￣
ｄｅｎｓａｔｉｏｎꎬ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎꎬ ａｎｄ ｒｉｂｏｓｏ￣
ｍａｌ ＲＮＡ ｇｅｎｅ ｈｙｐｏａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎ [ Ｊ ] . Ｐｌａｎｔ Ｍｏｌ
Ｂｉｏｌꎬ ２０１２ꎬ ７９(３): ２８５－２９３.
[２１] 　 Ｊｉｎ Ｗꎬ Ｌａｍｂ ＪＣꎬ Ｖｅｇａ ＪＭꎬ Ｄａｗｅ ＲＫꎬ Ｂｉｒｃｈｌｅｒ
ＪＡꎬ Ｊｉａｎｇ Ｊ. Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎ
ｏｆ ｔｈｅ ｍａｉｚｅ Ｂ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｃｅｎｔｒｏｍｅｒｅ[Ｊ] . Ｐｌａｎｔ
Ｃｅｌｌꎬ ２００５ꎬ １７(５): １４１２－１４２３.
[２２] 　 Ｂｒｕｃｈｅｚ ＪＭꎬ Ｍｏｒｏｎｎｅ Ｍꎬ Ｇｉｎ Ｐꎬ Ｗｅｉｓｓ Ｓꎬ Ａｌｉｖｉ￣
ｓａｔｏｓ ＡＰ. Ｓｅｍｉｃｏｎｄｕｃｔｏｒ ｎａｎｏｃｒｙｓｔａｌｓ ａｓ ｆｌｕｏｒｅｓ￣
ｃｅｎｔ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｌａｂｅｌｓ [ Ｊ] . Ｓｃｉｅｎｃｅꎬ １９９８ꎬ ２８１
(５３８５): ２０１３－２０１６.
[２３] 　 Ｃｈａｎ ＷＣꎬ Ｎｉｅ Ｓ. Ｑｕａｎｔｕｍ ｄｏｔ ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ｆｏｒ
ｕｌｔｒａｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｎｏｎｉｓｏｔｏｐｉｃ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ[ Ｊ] . Ｓｃｉｅｎｃｅꎬ
１９９８ꎬ ２８１(５３８５): ２０１６－２０１８.
３０２　 第 ２期　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 何世斌等: 荧光原位杂交技术的研究进展
[２４] 　 Ｍｉｃｈａｌｅｔ Ｘꎬ Ｐｉｎａｕｄ ＦＦꎬ Ｂｅｎｔｏｌｉｌａ ＬＡꎬ Ｔｓａｙ ＪＭꎬ
Ｄｏｏｓｅ Ｓꎬ Ｌｉ ＪＪꎬ Ｓｕｎｄａｒｅｓａｎ Ｇꎬ Ｗｕ ＡＭꎬ Ｇａｍｂ￣
ｈｉｒ ＳＳꎬ Ｗｅｉｓｓ Ｓ. Ｑｕａｎｔｕｍ ｄｏｔｓ ｆｏｒ ｌｉｖｅ ｃｅｌｌｓꎬ ｉｎ
ｖｉｖｏ ｉｍａｇｉｎｇꎬ ａｎｄ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ [ Ｊ ] . Ｓｃｉｅｎｃｅꎬ
２００５ꎬ ３０７(５７０９): ５３８－５４４.
[２５] 　 Ｍｅｄｉｎｔｚ ＩＬꎬ Ｕｙｅｄａ ＨＴꎬ Ｇｏｌｄｍａｎ ＥＲꎬ Ｍａｔｔｏｕｓｓｉ
Ｈ. Ｑｕａｎｔｕｍ ｄｏｔ ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ｆｏｒ ｉｍａｇｉｎｇꎬ ｌａｂｅｌ￣
ｌｉｎｇ ａｎｄ ｓｅｎｓｉｎｇ[ Ｊ] . Ｎａｔｕｒｅ Ｍａｔｅｒｉａｌｓꎬ ２００５ꎬ ４
(６): ４３５－４４６.
[２６] 　 Ａｌｉｖｉｓａｔｏｓ ＡＰꎬ Ｇｕ Ｗꎬ Ｌａｒａｂｅｌｌ Ｃ. Ｑｕａｎｔｕｍ ｄｏｔｓ
ａｓ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｐｒｏｂｅｓ [ Ｊ] . Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｂｉｏｍｅｄ Ｅｎｇꎬ
２００５ꎬ ７: ５５－７６.
[２７] 　 Ｘｉａｏ Ｙꎬ Ｂａｒｋｅｒ ＰＥ. Ｓｅｍｉｃｏｎｄｕｃｔｏｒ ｎａｎｏｃｒｙｓｔａｌ
ｐｒｏｂｅｓ ｆｏｒ ｈｕｍａｎ ｍｅｔａｐｈａｓｅ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ [ Ｊ] .
Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓꎬ ２００４ꎬ ３２(３): ｅ２８.
[２８] 　 Ｉｏａｎｎｏｕ Ｄꎬ Ｔｅｍｐｅｓｔ ＨＧꎬ Ｓｋｉｎｎｅｒ ＢＭꎬ Ｔｈｏｒｎｈｉｌｌ
ＡＲꎬ Ｅｌｌｉｓ Ｍꎬ Ｇｒｉｆｆｉｎ ＤＫ. Ｑｕａｎｔｕｍ ｄｏｔｓ ａｓ ｎｅｗ￣
ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｆｌｕｏｒｏｃｈｒｏｍｅｓ ｆｏｒ ＦＩＳＨ: ａｎ ａｐｐｒａｉｓａｌ
[Ｊ] . Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ Ｒｅｓꎬ ２００９ꎬ １７ ( ４ ): ５１９ －
５３０.
[２９] 　 Ｂｅｎｔｏｌｉｌａ ＬＡꎬ Ｗｅｉｓｓ Ｓ. Ｓｉｎｇｌｅ￣ｓｔｅｐ ｍｕｌｔｉｃｏｌｏｒ ｆｌｕｏ￣
ｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ ｕｓｉｎｇ ｓｅｍｉｃｏｎｄｕｃｔｏｒ
ｑｕａｎｔｕｍ ｄｏｔ￣ＤＮＡ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ [ Ｊ] . Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ
Ｂｉｏｐｈｙｓꎬ ２００６ꎬ ４５(１): ５９－７０.
[３０] 　 Ｗｕ ＳＭꎬ Ｚｈａｏ Ｘꎬ Ｚｈａｎｇ ＺＬꎬ Ｘｉｅ ＨＹꎬ Ｔｉａｎ ＺＱꎬ
Ｐｅｎｇ Ｊꎬ Ｌｕ ＺＸꎬ Ｐａｎｇ ＤＷꎬ Ｘｉｅ ＺＸ. Ｑｕａｎｔｕｍ￣
ｄｏｔ￣ｌａｂｅｌｅｄ ＤＮＡ ｐｒｏｂｅｓ ｆｏｒ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎ ｓｉｔｕ
ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ(ＦＩＳＨ) ｉｎ ｔｈｅ ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ Ｅｓｃｈｅ￣
ｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ [ Ｊ] . Ｃｈｅｍｐｈｙｓｃｈｅｍꎬ ２００６ꎬ ７ ( ５ ):
１０６２－１０６７.
[３１] 　 Ｍａ Ｌꎬ Ｗｕ ＳＭꎬ Ｈｕａｎｇ Ｊꎬ Ｄｉｎｇ Ｙꎬ Ｐａｎｇ ＤＷꎬ Ｌｉ
Ｌ. Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ ( ＦＩＳＨ) ｏｎ
ｍａｉｚｅ ｍｅｔａｐｈａｓｅ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ ｗｉｔｈ ｑｕａｎｔｕｍ
ｄｏｔ￣ｌａｂｅｌｅｄ ＤＮＡ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ [ Ｊ] . Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍａꎬ
２００８ꎬ １１７(２): １８１－１８７.
[３２] 　 Ｈｅ Ｓꎬ Ｈｕａｎｇ ＢＨꎬ Ｔａｎ Ｊꎬ Ｌｕｏ ＱＹꎬ Ｌｉｎ Ｙꎬ Ｌｉ Ｊꎬ
Ｈｕ Ｙꎬ Ｚｈａｎｇ Ｌꎬ Ｙａｎ Ｓꎬ Ｚｈａｎｇ Ｑꎬ Ｐａｎｇ ＤＷꎬ Ｌｉ
Ｌ. Ｏｎｅ￣ｔｏ￣ｏｎｅ ｑｕａｎｔｕｍ ｄｏｔ￣ｌａｂｅｌｅｄ ｓｉｎｇｌｅ ｌｏｎｇ
ＤＮＡ ｐｒｏｂｅｓ [ Ｊ] . Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓꎬ ２０１１ꎬ ３２ (２３):
５４７１－５４７７.
[３３] 　 Ａｂｇｒａｌｌ Ｐꎬ Ｇｕｅ ＡＭ. Ｌａｂ￣ｏｎ￣ｃｈｉｐ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ:
ｍａｋｉｎｇ ａ ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃ ｎｅｔｗｏｒｋ ａｎｄ ｃｏｕｐｌｉｎｇ ｉｔ ｉｎｔｏ
ａ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｍｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍ￣ａ ｒｅｖｉｅｗ [ Ｊ] . Ｊ Ｍｉｃｒｏ￣
ｍｅｃｈ Ｍｉｃｒｏｅｎｇꎬ ２００７ꎬ １７(５): Ｒ１５.
[３４] 　 Ｓｉｅｂｅｎ ＶＪꎬ Ｄｅｂｅｓ￣Ｍａｒｕｎ ＣＳꎬ Ｐｉｌａｒｓｋｉ ＬＭꎬ Ｂａｃｋ￣
ｈｏｕｓｅ ＣＪ. Ａｎ ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃ ｃｈｉｐ ｆｏｒ ｃｈｒｏ￣
ｍｏｓｏｍｅ ｅｎｕｍｅｒａｔｉｏｎ ｕｓｉｎｇ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙ￣
ｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ[Ｊ]. Ｌａｂ Ｃｈｉｐꎬ ２００８ꎬ ８(１２): ２１５１－
２１５６.
(责任编辑: 刘艳玲)
４０２ 植 物 科 学 学 报 第 ３２卷