ANALYSIS OF LYCHEE POLYPHENOL OXIDASE ACTIVITY UNDER DIFFERENT CONDITIONS-文献传递-植物通论文库

摘要：经硫酸铵盐析和SephadesG-100、Q-Sepharose和Phenyl Sepharose柱层析分别纯化后,得到了电泳均一的荔枝多酚氧化酶。荔枝多酚氧化酶在SDS和CATB存在下测得的酶活性略有降低,但在Triton X-100下活性有所增加。丁酸等短链的脂肪酸对酶活性起抑制作用,而亚油酸等长链的不饱和脂肪酸则起促进作用。另外,荔枝多酚氧化酶活性还明显受FeSO₄和SnCl₂所抑制,但能被Ca(²⁺)和Mn(²⁺)所激活。该酶被Ca(²⁺)和Mn(²⁺)激活与所用的浓度和反应介质的pH值有关。激活效应以pH 7．0最好;半激活浓度为0．8mmol／L(Mn²⁺)和1．2mmol／L(Ca(²⁺)。对该酶动力学参数研究表明,在二价阳离子Mn(²⁺)和Ca(²⁺)(5mmol／L)存在下,K_m值下降,V_max值增加。

Abstract:Lychee polyphenol oxidase was purified by ammonium sulfate fractionation,gel fiLtration and ion exchange chromatography. The enzyme was found to be homogenous by SDSP-AGE and shown to be activated by divalent canons such as Mn²⁺ and Ca²⁺ and long chainfatty acids,especially those with a high degree of unstaturation,and was markedly inhibitedby FeSO₄ and SnCl₂ and short chain fatty acids such as butyric acid using 4-methylcatechol assubstrate. Aslight decrease or increase was observed by added sodium dodecyl sulfate(SDS), hexadecyltri-methylammonium bromide (CATs) or triton X-100, respectively. Furthermore the effect of divalent cations on the activity of polyphenol oxidase was analysed.The optimum conditions for the activation process produced by the divalent canons had beenexamined with respect to canon concentration and pll of the reaction medium. This activationhad also been studied with regard to the kinetic parameters of the enzyme,which half-activation constants were in the order of 0. 8 mmol/L for Mn²⁺ and 1. 2 mmol/L for Ca²⁺. The K_m decreased and the V_max increased when Mn²⁺ and Ca²⁺ (5 mmol/L) were present.

全文：武汉植物学研究 , ! ∀# ∃ % & ∋ () & &
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收稿日 % ( 一 ∋⊥ 一∋ , 修回日 % ( 一。一& 。第一作者 % 男 , #⊥ 岁 , 研究员 , 现从事水果采后生理方面的研究 1
, 瑞典国际科学基金和以色列国际合作研究中心资助。
& ∋ 武汉植物学研究第 ! 卷
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Α +8 58 ∗8 5Ρ
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? 38 ∗ : 58 ∗ 8 5Ρ
Α +8 5Χ ∗8 5Ρ
≅ε54 , +8 58 ∗ 8 5Ρ
≅ , 54 , +8 4 58 ∗ 8 5Ρ
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Ι ∗ Θ+8 # Ε −−8 8 3 , − Ζ ∗ : 5, / 9 9∗ +39 , 4 ≅Ω 80 8 8 ς , +Ω ς0 8 4 , + , Τ 5Ρ ∗ 98 ∗ 8 35Ζ 53Ω
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, Τ 5Ρ ∗ 9 8 1 Ι 0 8 , ς 3 5Ν / Ν ςΔ , − ΦΦ Α ∗ 8 3 5Ζ 53Ω Ξ ∗ 9 , Θ 9 8 : Ζ 8 Ρ ∗ 3 ςΔ ( 1 ∋ Ξ 530 ⊥ 一Ν 8 30 Ω+8 ∗ 38 8 0, +
∗ 9 ∗ 9 / Θ 9 3 : ∗ 3 8 ∀/ 4 Φ / Θ+590 8 Ρ Ρ ∗ 3 ∗ ∃1 Β , : 30 59 : 8 ∗ 9 , 4 , Ξ 8 ∗ 4 ∗ +Ω 9 8 Ρ 30 8 8 −−8 8 3 , − ΦΔ , 4
8 4 Σ ΩΝ ∗ 3 58 ∗ 8 3 5Ζ 53 Ω 54 308 ς : 8 9 8 4 8 8 ∗ 4 Ρ ∗ Θ 9 8 4 8 8 , − 8 ∗ 8 0 Ρ 5Ζ ∗ +8 4 3
Υ ∋ Ν , : 8 ς : , 4 , / 4 8 8 Ρ ∗ 3 ς Δ ( 1 ∋ , ∗ 9 8 ∗ 4 Θ 8 9 8 8 4 54 Β5Μ 1 # , Ξ 08 : 8
8 ∗ 3 5, 4 1 Ι 059 8 −−8 8 3 Ξ ∗ 9
308 : ∗ 35, ∀7 ∃ Θ 8 3Ξ 8 8 4 8 4 Ψ
第 # 期蒋跃明等 % 不同条件下荔枝多酚氧化酶活性的分析 &
Σ ΩΝ 8 ∗ 8 3 5Ζ 53Ω 54 308 ς : 8 9 8 4 8 8 ∗ 4 Ρ ∗ Θ9 8 4 8 8 , − 30 8 Ρ 5Ζ ∗ +8 4 3 8 ∗ 3 5, 4 Ξ ∗ 9 ς+, 3 3 8Ρ ∗ Μ ∗ 54 9 3 ςΔ 1
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9 6 7 0445 Χ 5 ; 6 Α . 8 9 #Η 5 < 〕
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∀ Γ, 派, ΓΖ ∋ ∋ , Κ ! Θ Κ ∋ 2 _ Κ ∋ &
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∃ Γ Θ 2 Κ Γ _ 2 ∃ !
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武汉植物学研究第 ! 卷
8 08 Ν 59 3:Ω 1 ! ! , Υ % ⊥ ! ) ⊥ &
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ς : 546 5ς +8 , − ς :, 3 8 54 一Ρ Ω 8 Θ 54Ρ 54 Μ 1 ; 砚∗ + 2‘,6 08 Ν , ( ! , ( & % & ⊥ ) & Υ ⊥
Υ [ ∗ Ω 8 : ; [ 1 Φ , +Ως 08 4 , + , Τ 5Ρ ∗ 9 8 54 ς+∗ 4 3 9— : 8 8 8 4 3 ς : , Μ : 8 9 9 1 尸勺:优触Ν , ( , &‘% ) &∋! ϑ∗ / Μ 04 α Χ , Η / ] 8 Υ ∋ 1 Β / 46 3 5, 4 , − ς , +Ως 08 4 , + , Τ 5Ρ ∗ 9 8 54 05Μ 08 : ς +∗ 4 39 1 ς 0Ω 95,+ ς +∗ , : , ⊥ , ‘∋ % ∋ ! ) &
不同条件下荔枝多酚氧化酶活性的分析
蒋跃明‘ Ο 5, :∗ Π ∗ / Θ8 :Ν ∗ 4 Π > , : ∗Ν Β/ 8 09 Π 傅家瑞#
∀ 中国科学院华南植物研究所广州 Υ ∋ ! Υ∋∃
∀& Η8 ς ∗ : 3Ν 8 4 3 , − Φ, 9 3 0 ∗ : Ζ 8 9 3 反 58 4 8 8 , − Β :8 90 Φ :,Ρ / 8 8 9 , ; Μ : 58 / +3 / : ∗ + 7 8 9 8 ∗ : 8 0 ∀∃ :Μ ∗ 4 5Σ∗ 3 5, 4 , Ι 0 8
ϑ , +8∗ 4 5Χ8 4 38: , Φ1 ∋ 1 助 Τ ! , 28 3 Η ∗ Μ ∗4 Υ ∋ &Υ ∋ ≅9 :8 ∗ +∃
∀# 中 5+Λ 大学生物系广州 Υ ∋ &( Υ ∃
摘要
经硫酸按盐析和 ? 8Φ0 ∗ Ρ 8 9 Ο 一 ∋ ∋ 、δ 一 ?8 ς 0 ∗ : , 9 8 和 ς 08 4 Ω+ ? 8 ς 0 ∗ : , , 8 柱层析分别纯
化后 , 得到了电泳均一的荔枝多酚氧化酶。荔枝多酚氧化酶在 9 Η 9 和 6 ; Ι 2 存在下测得
的酶活性略有降低 , 但在 Ι :53 , 4 Γ 一 ∋ 下活性有所增加。丁酸等短链的脂肪酸对酶活性
起抑制作用 , 而亚油酸等长链的不饱和脂肪酸则起促进作用。另外 , 荔枝多酚氧化酶活性
还明显受 Β8 ?Α ι 和 ? 4 Χ ≅% 所抑制 ,但能被 Χ ∗ Π ∴ 和 [ 4 , ∴ 所激活。该酶被 Χ ∗ Π ∴ 和 [ 4 Π ∴ 激活
与所用的浓度和反应介质的 ςΔ 值有关。激活效应以 ςΔ ( 1 Α 最好 ι 半激活浓度为
∋ 1 Ν Ν ,+ ⎯ = ∀[ 4 ’∴∃ 和 1 & Ν Ν ,+ ⎯ = ∀Χ ∗ , ∴ ∃ 。对该酶动力学参数研究表明 , 在二价阳离子
[ 4 , ∴ 和 Χ ∗ , ∴ ∀Υ Ν Ν , +⎯ = ∃存在下 , α 。值下降 , Ζ 。 1 值增加。
关键词荔枝 , 多酚氧化酶 , 活性 , 分析

ANALYSIS OF LYCHEE POLYPHENOL OXIDASE ACTIVITY UNDER DIFFERENT CONDITIONS

不同条件下荔枝多酚氧化酶活性的分析(英)

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