全 文 ：Vol. 29 , No. 5
pp. 744～749 　Sept. , 2003
作 　物 　学 　报
ACTA AGRONOMICA SINICA
第 29 卷 第 5 期
2003 年 9 月 　744～749 页
油菜小孢子培养和双单倍体育种研究
Ⅱ. 影响甘蓝型油菜和芥菜型油菜种间杂种胚产量的因素
李　　　官春云　陈社元　王国槐　刘忠松
(湖南农业大学 ,湖南长沙 410128)
摘 　要 　对甘蓝型油菜与芥菜型油菜种间杂交 F1 代杂种进行离体小孢子培养研究。结果表明 : (1) F1 杂种胚产量受亲
本基因型的影响 ; (2)在 F1 杂种花粉可育率为 30 %～43 %的范围内 ,F1 杂种花粉可育率对有效胚产量无明显影响 ; (3) 供
体植株年龄对高胚产量的材料无明显影响 ,对低胚产量的材料有明显影响。(4)提出用花药颜色来选择适合的小孢子培
养的花蕾的指标 ,花药颜色以绿带点黄或绿带黄为宜 ; (5)提出胚从 NLN 液体培养基转到半固体 B5 培养基培养 3 d 后再
转至固体 B5 培养基 ,比从 NLN 液体培养基直接转到固体培养基的培养方式相对较好 ,可提高胚再生频率 ; (6) 诱导植株
再生最适合的胚龄是 27 d ,0. 2～0. 3 cm大小的胚比 0. 6～0. 8 cm的胚好。Ξ
关键词 　甘蓝型油菜 ;芥菜型油菜 ;小孢子 ;胚发生 ;基因型
中图分类号 : S565 　　　文献标识码 : A
Studies on Microspore Culture and Double Haploid Breeding on Rape
Ⅱ1 Influencing Factors on Microspore Culture of F1 Hybrids between Brassica napus and Brassica
juncea
LI Xun 　GUAN Chun2Yun 　CHEN She2Yuan 　WANG Guo2Huai 　LIU Zhong2Song
( Hunan Agricultural University , Changsha , Hunan 410128 , China)
Abstract 　　The microspore culture of the interspecific F1 hybrids between Brassica napus and Brassica juncea was inves2
tigated. The results showed : (1) The embryo output of the F1 hybrids was related to the genotype of their parents ; (2) The
pollen fertility of the F1 hybrids with a rate from 30 % to 43 % had no obvious effect on the efficient embryo output ; (3)
The donor plant age had obvious effect on those hybrids with lower embryo yield and no much effect on those with higher
yield ; (4) The anther color with yellowish green was the most suitable for the induction of embryogenesis ; (5) It was better
to transfer the embryo cultures from liquid NLN to semisolid B5 medium for 3 days and then to the solid B5 medium increas2
ing regeneration as comparing with the transfer from the liquid directly to the solid ; (6) The embryos with 27 days in age
and 0. 2 cm to 0. 3 cm in size were ideal explants for getting the regeneration.
Key words 　　Brassica napus ; B . juncea ; Microspore culture ;Embryogenesis ; Genotype
　　油菜小孢子培养是生物工程研究的重要内
容[1～3 ] ,由于小孢子培养长成的植株是单倍体 ,只具
有配子染色体数 ,因此当外源基因导入时 ,它不会出
现嵌合体 ,也不会有显、隐性遮盖的现象 ,是基因工
程的理想受体。自 1982 年 Licher 首次进行甘蓝型
油菜小孢子培养并获得胚及再生植株以来[4 ] ,在甘
蓝型油菜小孢子培养技术 (如小孢子密度、培养条
件、培养基) 等方面都作了大量的研究[6～9 ] ,其培养
技术日益成熟 ,已成为甘蓝型油菜获得单倍体的主
要途径。近年来 ,在白菜型油菜[10 ,11 ] 、芥菜型油
菜[12 ] 、甘蓝[11 ,13 ] 、埃塞俄比亚芥[14 ]等都有报道 ,说明
这一技术已引起国内外广泛的重视。但甘蓝型油菜Ξ基金项目 :湖南省科技厅重点项目 (97J KY1005) 。
作者简介 :李　 (1939 - ) ,女 ,湖南溆浦人 ,教授 ,博导 ,主要从事植物遗传教学和科学研究。Tel : + 862073124618782 ,E2mail :lixun39 @163. net
Received(收稿日期) :2001207210 ,Accepted(接受日期) :2002207212.

与芥菜型油菜种间杂种小孢子培养迄今很少见到报
道。由于甘蓝型油菜具有较好的丰产性 ,而芥菜型
油菜具有耐旱、耐瘠、抗裂荚黄籽等优良特性 ,育种
家企图将两者优良性状集中于一体 ,育成新的品种。
以往采用杂交、自交、回交等常规育种的方法 ,要获
得具双亲优良特性的稳定杂种一般要 7～8 年 ,而小
孢子培养技术可以大大缩短育种年限。为了以高效
快速获得甘蓝型油菜与芥菜型油菜种间杂种的优良
植株 ,本文对其 F1 代种间杂种胚产量与亲本的关
系 ,与 F1 花粉可育性的关系 ,F1 代种间杂种胚产量
与株龄 ,与花药颜色的关系 ,以及胚转移方式 ,胚大
小和胚龄对 F1 胚产量的影响进行了研究。
1 　材料与方法
1. 1 　研究材料
　　本试验所使用的亲本共 8 个 ,其中甘蓝型油菜
( Brassica napus) 4 个 ,芥菜型油菜 ( Brassica juncea) 4
个。按常规杂交方法共配制了 5 个组合 ,其组合名
称及编号列于表 1。
表 1 甘×芥 F1 代亲本组合名称及编号
Table 1 Combination of F1 hybrid between
Brassica napus and Brassica juncea
亲本组合
Combination
F1 杂种编号
Numbering of F1 hybrid
970220 ×HL970 No. 22
970230 ×TJ658 No. 23
970240 ×TY523 No. 24
970250 ×SD620 No. 25
970220 ×SD620 No. 26
1. 2 　小孢子培养方法
按 Coventry 等 (1988) [15 ]方法进行。所有用于小
孢子培养的亲本和杂种植株均种植在昼Π夜温度为
24 ±2 ℃Π21 ±2 ℃,至现蕾后昼Π夜温度控制在 10Π
5 ℃,每天 16 h 光照的生长室中 ,所取的花蕾首先用
7 %次氯酸钙消毒处理 10～15 min ,进行表面消毒 ,
然后用无菌水冲洗 3 次 ,再将蕾倒入已灭菌的研钵
中 ,加 B521 洗液把蕾研碎 ,过滤、离心 4 次 ,调节小
孢子浓度为 0. 75～1 ×105 个小孢子ΠmL。再让小孢
子悬浮在 NLN 液体培养基中 ,在 30 ℃黑暗条件下培
养 14 d ,然后放在摇床上 (60 rΠmin) 振动培养 7 d ,温
度控制在 25 ℃,并保持良好的通气状况 ,促进胚的
形成。当胚龄达 21 d 时 ,再转入 B5 固体培养基上 ,
放在 4 ℃、每天光照 8 h 条件下培养 10 d ,进行冷处
理 ,再转到 27 ℃12 hΠ12 h 光照Π黑暗交替条件下培
养 ,使胚发育成小植株 ,再转入土壤中。
采用这一方法对不同组合、不同株龄、不同药
色、不同胚转移方式、不同胚龄、大小对胚产量的影
响进行了比较。比较试验采用完全随机区组设计 ,
重复 3 次。
1. 3 　培养方式
将组合 970220 ×HL970 的 F1 杂种 (编号为 No.
22) ,在小孢子培养的过程中 ,采用了将胚由 NLN 液
体培养基 ,经 B5 半固体培养基再转入 B5 固体培养
基的培养方式与直接由 NLN 培养基转入固体培养
基的培养方式进行比较。B5 半固体培养基是指培
养基其他成分完全相同 ,仅加入琼脂的量由每 1000
mL 加入 8 g 降至 4 g ,使 B5 培养基成糊状。
1. 4 　细胞学观察
花药颜色和小孢子发育时期的关系 ,参照文献
[16 ,17 ]进行。取自油菜始花期主花序或分枝上的
完整花盘 ,逐个花药进行观察。花粉育性的观察参
照文献[18 ]进行 ,取油菜植株不同部位的花蕾 ,共计
30 个 ,每个蕾中取 1 个花药 ,观察 1000 粒花粉 ,然后
计算花粉的可育率。凡是花粉育性不正常者 ,就确
认为真杂种。
2 　主要结果
2. 1 　甘蓝型油菜 ×芥菜型油菜杂种胚产量与亲本
基因型的关系
　　甘蓝型油菜 ×芥菜型油菜 F1 杂种胚产量与亲
本基因型的关系密切。由表 2 可以看出 :1) 不同组
合 F1 杂种胚产量有差异 ;2) 高胚产量的双亲 ,F1 杂
种胚产量也高 ,如 No. 22 ;3) 低胚产量的双亲 ,F1 杂
种胚产量也低 ,如 No. 23。高胚产量与低胚产量的
亲本杂交 ,杂种的胚产量似乎受母本的影响较大 ,如
No. 25、No. 26 ,这两个组合父本都是 SD620 ,母本一
个为高胚产量的 970220 , 另一个为低胚产量的
970250 ,结果与高胚产量的母本杂交 ,其杂种的胚产
量要高 ,为 310 ±10 ,与低胚产量的母本杂交 ,其杂
种胚产量相对较低 ,仅 23 ±4 个胚。对这结果 ,本实
验未作反交 ,因此还有待进一步证实。
2. 2 　甘蓝型油菜 ×芥菜型油菜 F1 花粉育性对胚产
量的影响
甘蓝型油菜 ×芥菜型油菜F1 花粉可育率平均
547　5 期 李 　　等 :油菜小孢子培养和双单倍体育种研究

表 2 甘蓝型油菜×芥菜型油菜 F1 杂
种胚产量与亲本基因型的关系
Table 2 Embryo yield of parents and their F1 hybrids
from B . napus × B . juncea
亲本或杂种
Parent or hybrid
有效胚产量 (120 个蕾)
Efficient embryo yield
(120 buds) X±SE
甘 970220 280 ±6
芥 HL970 8 ±2
970220 ×HL970 362 ±10
甘 970230 12 ±10
芥 TJ658 0
970230 ×TJ658 21 ±4
甘 970240 20 ±12
芥 TY523 0
970240 ×TY523 28 ±5
甘 970250 18 ±5
芥 SD620 3 ±2
970250 ×SD620 23 ±4
甘 970220 280 ±6
芥 SD620 3 ±2
970220 ×SD620 310 ±10
为 38. 4 % ,变异范围为 30 %～43 % ,从表 3 可以看
出花粉可育率与有效胚产量关系并不密切 ,如 No.
22 ,可育率为 39 % ,有效胚产量为 362 ±10 ,而 No.
25 ,可育率为 38 % ,有效胚产量仅 23 ±4 胚。在本试
验中 ,还观察到不同组合的 F1 杂种胚的发育状况很
不一致。高胚产量的材料 ,如 No. 22、No. 26 ,胚出现
时间最早 ,小孢子悬浮在 NLN 液体培养基中 ,在
30 ℃黑暗条件下培养 10 d ,肉眼就可见到胚 ,再放在
摇床上 ,振动培养 7 d ,就可见许多鱼雷状胚出现 ,小
孢子在发育进程中 ,同步性较好。而其他材料 (No.
23～25)出现胚的时间是 12～14 d ,经摇床振动培养
7 d 后 ,可见到少量 1～1. 2 cm 以上大胚 ,余下均为
心形胚、球状胚或一些畸形胚 ,小孢子发育同步性
差。
2. 3 　甘蓝型油菜和芥菜型油菜 F1 植株的株龄对胚
产量的影响
　　株龄是指种子播种后到进行小孢子培养取样这
段时期的长短。株龄对胚产量低的材料的有效胚产
量的影响大于胚产量高的材料 (表 4) 。如 No. 23 ,当
株龄为 75 d 时 ,接种 120 个蕾 ,3 次重复平均获 5 ±
1. 5 ,No. 24 获 2. 3 ±1. 5 个胚 ; 株龄增加 ,则有效胚
产量明显增加。但对胚产量高的材料 ,株龄影响不
十分明显 ,如 No. 22 当株龄为 75 d 时 ,获 298 ±10
胚 ,当株龄为 95 d 时获 362 ±10 胚。
2. 4 　甘蓝型油菜 ×芥菜型油菜 F1 花药颜色对胚产
量的影响
根据我们的观察[16 ] ,一个花盘上的花药色可分
为 6 级 :黄色、黄带点绿、黄带绿、绿带黄、绿带点黄
和绿色 (图 1) 。本研究中对花药颜色与小孢子发育
时期与胚产量的关系作了研究。结果表明 :当花药
色为黄色或黄带点绿时 ,小孢子发育时期为三核期
(图 2) ;当花药色为黄带绿时 ,大多数小孢子发育时
期为二核期 (图 3) ,少数为单核晚期 ;当花药色为绿
带黄和绿带点黄时为单核期 (图 4 ,5) ;当花药色为
绿色时为单核早期 ———四分子 ———减数分裂期。根
据花药的不同颜色分别进行接种时 ,只有花药色为
绿带黄或绿带点黄可产生大量胚 ,分别为 362 ±10
和 280 ±14 (表 5) 。因此 ,在小孢子培养中 ,取花药
色为绿带黄或绿带点黄最为适宜 ,此时的小孢子发
育时期为单核期。生长在生长室的油菜植株 ,处于
抽薹期 ,大约有 40 %的花蕾的花药色为绿带黄。因
此 ,在小孢子培养中 ,根据花药色取材 ,是一个十分
快捷、准确的好方法。对提高胚产量起着决定性的
作用。
表 3 甘蓝型油菜×芥菜型油菜 F1 花粉育性对有效胚产量的影响
Table 3 Effect of pollen fertility on efficient embryo yield from the microspore culture of B . napus × B . juncea
F1 杂种编号
No. of F1
hybrid
F1 花粉可育率
Rate of F1 pollen
fertility ( %)
有效胚产量
(120 个蕾)
Efficient embryo
yield (120 buds)
胚出现的最早时间
Earliest time of embryo
emergence (d)
胚发育状况 (21 d)
Embryo development state
(21 days old)
No. 22 39 362 ±10 10 胚发育同步性好 ,多数为鱼雷胚 ,0. 8～1 cm 大小
No. 23
　
30
　
21 ±4
　
14
　
胚发育同步性差 ,球状胚 ,心形胚 ,少数鱼雷胚 ,胚大于
1. 2 cm
No. 24 42 28 ±5 12 胚发育同步性差 ,胚大于 1 cm
No. 25 38 23 ±4 14 胚发育同步性差 ,胚大于 1. 2 cm
No. 26 43 310 ±10 10 胚发育同步性好 ,胚小于 1 cm
647 　　　作 　　物 　　学 　　报 29 卷 　

表 4 甘蓝型油菜×芥菜型油菜 F1 杂种株龄对胚产量的影响
Table 4 Effect of donor plant age on microspore embryogenesis
in F1 hybrid between B . napus ×B . juncea
株　龄
Age of
donor plant
(d)
有效胚产量 3 (有效胚Π120 个蕾)
Efficient embryo yield ( Efficient embryo Π120 buds)
No. 22
X ±S E
No. 23
X ±S E
No. 24
X ±S E
70 0 0 0
75 298 ±10 5 ±1. 5 2. 3 ±1. 5
80 280 ±6 4 ±2. 6 1. 6 ±1. 4
85 306 ±8 6 ±2. 3 10 ±1. 6
90 222 ±12 21 ±4 28 ±5
95 362 ±10 10 ±3. 2 6 ±3. 6
100 37 ±6 7 ±2 0
　　3 注 :有效胚产量 :指在小孢子培养 21 d 后 ,所获得的单倍体胚
状体 ,从液体培养基上转入固体培养基上的鱼雷形胚的数目。
Note : Efficient embryo yield : The number of haploid embryo in the de2
velopment of torpedo stage obtained from the microspores culture for 21 days
or more after transferred from liquid medium to solid medium.
2. 5 　甘蓝型油菜 ×芥菜型油菜 F1 杂种胚转移方式
对胚产量的影响
　　本实验设计了两种转移胚的方式 :一种是当胚
龄 21 d 时 ,由液体 NLN 培养基转移到 B5 半固体培
养基上 ,3 d 后 ,再转到 B5 固体培养基上。另一种方
式是当胚培养到 27 d 时直接转到 B5 固体培养基
上 ,然后 ,都放入 4 ℃8 h 光照的生长室中 10 d ,结果
如表 6。前一种培养方式可促进再生和营养生长 ,
如叶片色深绿且较厚 ,有的一个培养皿中有 17 个胚
都长成小植株 (图 6) ,再生率平均由 10. 7 %提高到
20. 7 %。故经过半固体培养基再转到固体培养基的
培养方式比由液体培养基直接转到固体培养基相对
要好 ,可提高胚的再生率。
　　
表 5 甘蓝型油菜×芥菜型油菜 F1 花药颜色与胚产量的关系 (材料 :No. 22)
Table 5 Anther color and microspore embryogenesis in F1 hybrid No. 22 of B . napus × B . juncea
花药颜色
Anther color
小孢子发育时期
Microspore development stage
胚产量 (胚Π120 蕾)
Embryo yield (embryosΠ120 buds)
黄色 Yellow 三核期 Trinucleate 0
黄带点绿 Somewhat greenish yellow 三核期 Trinucleate 0
黄带绿 Greenish yellow 二核—单核晚期 Binucleate —late uninucleate 60 ±16
绿带黄 Yellowish green
单核晚期—单核中期 Late uninucleate —Mid
uninucleate
362 ±10
绿带点黄 Somewhat yellowish green
单核中期—单核早期 Mid Uninucleate —Early
uninucleate
280 ±14
绿色 Green
单核早期—四分子—减数分裂期 Early uninu2
cleate —Tetrad —Meiosis
21 ±7
表 6 甘蓝型油菜×芥菜型油菜 F1 杂种胚 No. 22 转移方式对胚产量的影响
Table 6 Effect of transfer method on embryo yield in F1 hybrid No. 22 of B . napus × B . juncea
液体培养基→固体培养基
Liquid media →Solid media
液体培养基→半固体培养基→固体培养基
Liquid media →Semisolid media →Solid media
胚　数
No. of embryos(X±SE)
再生率
Regeneration rate ( %)
胚　数
No. of embryos(X±SE)
再生率
Regeneration rate ( %)
224 ±20 10. 7 226 ±40 20. 7
2. 6 　甘蓝型油菜 ×芥菜型油菜 F1 杂种胚龄和胚的
大小对胚产量的影响
　　胚龄是指从接种到胚被转移到固体培养基上 ,
这段时间的长短。杂交组合 No. 22 ,胚龄为 27 d 的
胚 ,再生率最高为 15. 14 %(表 7) 。胚的大小对植株
再生也有一定影响 ,No. 22 以接种 0. 2～0. 3 cm 的
胚 ,其胚的再生植株的频率最高 ,为 41. 3 % (表 8) 。
这些植株大部分为畸形小植株 ,叶皱缩 ,茎膨大变
粗 ,移栽不可能成活 (图 7) ,少数是正常植株 (如图
8) ,移栽后可成为单倍体小植株。
747　5 期 李 　　等 :油菜小孢子培养和双单倍体育种研究

表 7 甘蓝型油菜×芥菜型油菜 F1 杂种 No. 22 的
胚龄对胚产量的影响
Table 7 Effect of embryo age on embryo yield in F1
hybrid No. 22 of B . napus × B . juncea
胚　龄
Embryo age
胚　数
Embryos
再生植株 Regeneration
植株数
Plantlets
植株百分率
Plantlet rate ( %)
17 59 7 11. 90
22 149 15 10. 06
23 292 32 10. 95
27 845 128 15. 14
30 186 16 8. 60
34 320 38 11. 87
表 8 甘蓝型油菜×芥菜型油菜 F1 杂种 No. 22 的
胚大小对胚产量的影响
Table 8 Effect of embryo size on embryo yield in F1
hybrid No. 22 of B . napus × B . juncea
胚的大小
Embryo size (cm)
胚的数目
Embryos…X ±S E 再生植株数Regenerationplantlet 再生植株率Regenerationrate ( %)
0. 2～0. 3 126 ±10 52 41. 3
0. 4～0. 5 176 ±15 41 23. 3
0. 6～0. 8 91 ±6 6 6. 5
3 　讨论
3. 1 　F1 杂种胚产量与亲本基因型的关系
　　本试验所用的甘 ×芥 F1 杂种不同组合材料的
胚产量有明显差异 ,说明胚产量这一性状是受基因
所控制。近年来 ,在几种植物中利用分子标记技术 ,
已证实了基因位点控制了胚产量和再生能力[19 ,20 ] 。
3. 2 　F1 杂种的育性与胚的染色体组成
甘蓝型油菜 ×芥菜型油菜的 F1 代花粉育性有
一个广泛的范围。本试验材料的花粉育性、不育花
粉的产生是由于染色体分配不均衡 ,染色体行为异
常所致。因为甘蓝型油菜染色体组型为 aacc = 38 ,
芥菜型油菜染色体组型为 aabb = 36 ,这两个亲本杂
交所获得的 F1 代的染色体组型为 aabc = 20 Ⅱ+ 8 Ⅰ
+ 9 Ⅰ= 37。在减数分裂时有 10 对染色体联会形成
二价体 ,其余 b 组的 8 条染色体和 c 组的 9 条染色
体均为单价体 ,不能均衡的分向细胞的两极 ,在后
期 Ⅰ将随机进入细胞的某一级或在赤道板上消失 ,
因此便会产生 n = 10～27 ,具有不同数目染色体的
小孢子 ,与作者在甘蓝型油菜 ×白菜型油菜 F1 代细
胞学观察的染色体行为是一致的[21 ] 。从本试验证
明了 ,具有不同数目染色体组成的小孢子 ,在离体培
养条件下 ,有发生胚胎的能力。
据 Struss 等报道[22 ] ,a、b、c 三染色体组可能有某
种同源性 ,平均配对为 :10. 42 Ⅰ+ 8. 18 Ⅱ+ 0. 066 Ⅲ
+ 0. 004 Ⅳ。Truco 和 Quiros 等[19 ]利用同工酶、RFLP、
RAPD 等分子标记技术 ,建立了芸薹属 a、b、c 基因组
遗传图 ,结果发现 :a、b 基因组间同源区段的图距为
312 cM ,b、c 基因组间为 588. 7 cM ,a、c 基因组间为
824. 4 cM。这从细胞水平和分子水平都说明 a、b、c
基因组间相互联会和交换提供了理论基础。以甘蓝
型油菜 ×芥菜型油菜 F1 代为材料 ,就有可能产生各
种染色体数目的异附加系和异代换系。种间杂种小
孢子培养为创造新的种质资源提供了一条快速的新
途径。
3. 3 　株龄与胚产量的问题
本试验表明 ,株龄是影响胚产量低材料的重要
因素。当株龄在 75～95 d 时 ,它们的胚产量随株龄
增加而增加 ,而胚产量高的材料 ,无论株龄长或短 ,
均可获得大量的胚。以上结果说明在小孢子培养过
程中 ,小孢子再生成完整植株的遗传潜力与它的发
育过程有关。株龄的差异 ,反映了发育过程的差异 ,
处在不同发育过程 ,生理状况有差异 ,导致胚产量的
差异。
3. 4 　花药颜色与胚产量的问题
本试验的结果表明 :花药颜色与胚产量关系很
大。根据花药颜色来确定小孢子发育时期 ,简单、方
便、准确、容易掌握 ,而且不易受环境的影响。过去
采用蕾的大小确定小孢子发育时期 ,由于花蕾大小
不但受基因型影响也受环境影响 ,实际掌握难以准
确。后来 ,提出用花药长度为花瓣长度的 1Π3～3Π4 ,
一般蕾长不超过 4. 5 mm 的形态指标[15 ] ,由于用于
小孢子培养的花蕾较小 ,要确定它的相对比例也并
不容易。鉴于以上原因 ,我们提出并实践了用花药
颜色的形态指标来确定小孢子发育时期是简单易
行 ,可大大提高小孢子培养接种效率。
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947　5 期 李 　　等 :油菜小孢子培养和双单倍体育种研究

李　　等 :油菜小孢子培养和双单倍体育种研究 Ⅱ. 图版
LI Xun et al . : Studies on Microspore Culture and Double Haploid Breeding on Rape Ⅱ. Plate Ⅰ
图版Ⅰ说明 : 1. 甘蓝型油菜×芥菜型油菜 F1 杂种在一个花盘上花药颜色变化规律。2. 当花药颜色为黄色和黄带点绿时 (12a ,b ,c) 小孢子发育
时期为三核期。3. 当花药颜色为黄带绿时 (12d ,e)小孢子发育时期为二核期。4 - 5. 花药颜色为绿带黄和绿带点黄时 (12f ,g ,h)小孢子发育时期
为单核晚期和单核中期。6. 甘蓝型油菜×芥菜型油菜 F1 杂种小孢子再生的小植株。7. 甘蓝型油菜 ×芥菜型油菜 F1 杂种小孢子培育的畸形
小植株。8. 甘蓝型油菜×芥菜型油菜 F1 杂种小孢子培育的正常小植株。
Explanation of Plate Ⅰ: 1. Color change of the anther in a disc from the F1 hybrid of B . napus ×B . juncea. 2. Yellow and somewhat greenish yellow (12a ,
b ,c) anther color was coincident with the microspore development stage of trinucleate. 3. Greenish yellow (12d ,e) anther color mean the microspore development
at binucleate stage. 425. Greenish yellow (12f ,g ,h) anther color and the microspore development at late2uninucleate or mid2uninucleate stage. 6. Regeneration
plantlet from embryogenesis of F1 hybrid of B . napus × B . juncea. 7. Abnormal plantlet from microspore culture of F1 hybrid of B . napus × B . juncea. 8.
Normal plantlet from microspore culture of F1 hybrid of B . napus × B . juncea .