全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 4期 2016年 2月 ·599·
大孔吸附树脂分离纯化香青兰提取液工艺研究
于 宁，何承辉，邢建国*，曾 诚，赵 军
新疆维吾尔自治区药物研究所，新疆 乌鲁木齐 830004
摘 要：目的 考察大孔吸附树脂分离纯化香青兰提取液的最佳工艺条件。方法 以总黄酮、田蓟苷、木犀草素-7-O-β-D-
葡萄糖醛酸苷、迷迭香酸为检测指标，利用静态吸附实验对 7种大孔吸附树脂进行筛选，并通过与动态吸附实验相结合的方
法，优选大孔吸附树脂分离纯化香青兰提取液的最佳工艺条件。结果 HPD600型大孔树脂宜于香青兰提取液的纯化，最佳
纯化工艺参数为香青兰提取液质量浓度为 80 mg/mL，柱径高比为 1∶9，上样量为生药 0.32 g/mL树脂，上样体积流量为 1.5
BV/h（BV为柱体积），吸附时间为 12 h，水除杂用量 4 BV，洗脱溶剂为 70%乙醇，洗脱体积为 6 BV，洗脱体积流量为 1.5
BV/h，纯化后总黄酮、田蓟苷、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和迷迭香酸的质量分数分别达到 53%、5.5%、4.7%和 2.5%
以上。结论 HPD600型大孔树脂分离纯化香青兰提取液的方法可行。
关键词：香青兰；大孔吸附树脂；总黄酮；田蓟苷；木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷；迷迭香酸
中图分类号：R284.2 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2016)04 - 0599 - 07
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.04.012
Research on separation and purification of extract from Dracocephalum moldevica
with macroporous resins
YU Ning, HE Cheng-hui, XING Jian-guo, ZENG Cheng, ZHAO Jun
Xinjiang Institute of MeteriaMedica, Urumqi 830004, China
Abstract: Objective To investigate the technology for the separation and purification of extract in Dracocephalum moldevica (EDM)
by macroporous resin. Methods Static and dynamic adsorption-desorption were used to select the best one from seven different type
macroporous resins; With the content of total flavonoids, tilianin, luteolin-7-O-β-D-glucuronide, and rosmarinic acid as indexes, the
purification technology parameters of EDM were optimized. Results HPD600 resin showed the best purifying profile, its optimum
technology conditions were as follows: The optimum concentration of the sample liquid was 0.08 g/mL equivalent to raw material, the
resin column diameter-height ratio was 1∶9, the amount of used adsorption was 0.32 g dried medicinal herb/mL resin, sample flow
rate was 1.5 BV/h, and adsorption time was 12 h. In the course of elution, the resin column chromatography was eluted with 6 BV of
70% ethanol after removing impurities with 4 BV of water by flow rate of 1.5 BV/h. The contents of total flavonoids, tilianin,
luteolin-7-O-β-D-glucuronide, and rosmarinic acid were more than 53%, 5.5%, 4.7%, and 2.5%. Conclusion Macroporous resin
HPD600 is suitable to separate and purify EDM.
Key words: Dracocephalum moldavica L.; macroporous adsorption resins; total flavonoids; tilianin; luteolin-7-O-β-D-glucuronide;
rosmarinic acid

香青兰为唇形科植物香青兰 Dracocephalum
moldevica L. 的干燥地上部分，具有活血化瘀、补
益心脑、通路开窍、止痛解毒等功效，效果良好，
为维吾尔医学常用药，在维吾尔医学和民间用于治
疗冠心病、寒性神经性头疼等疾病[1]。香青兰单味
药材制剂（益心巴迪然吉布亚颗粒）收载于《中华
人民共和国卫生部药品标准•维吾尔药分册》1999
年版。益心巴迪然吉布亚颗粒由香青兰药材通过简
单的水提取后，加入辅料制成颗粒剂，其服用剂量
大，患者依从性差，并且物质基础不清楚。为了使
香青兰药材更好地发挥临床疗效，亟需研究有效物
质成分明确且质量分数高、依从性好的香青兰制剂。

收稿日期：2015-09-15
基金项目：国家科技重大专项“重大新药创制”课题（2012ZX09102201-009）
作者简介：于 宁，女，助理研究员，硕士，研究方向为中药新药研究。Tel: (0991)2318172 E-mail: ynjy798@163.com
*通信作者 邢建国，男，研究员，硕士生导师，研究方向为中药新药研究。Tel: (0991)2300682 E-mail: xjguodd@163.com

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香青兰的化学成分主要包括黄酮类[2]、三萜类、苯
丙素类、甾体类、环烯醚萜类和多糖类等[3-4]。近年
来，随着分离纯化技术的进步，对香青兰的化学成
分有了新的认识，田蓟苷和木犀草素-7-O-β-D-葡萄
糖醛酸苷是香青兰中主要黄酮类活性成分，并且质
量分数较高，具有扩张冠脉、降低冠脉血管阻力的
作用[5-8]；迷迭香酸也是香青兰药材中质量分数较高
的成分，具有明确的抗血栓和抗血小板凝集作用，
对心血管系统具有明显保护作用[9-10]。
目前，有文献报道采用大孔吸附树脂分离香青
兰中有效成分[11]，以单一成分木犀草素为考察指
标，忽视了提取液中组分的复杂性。本实验在前期
研究的基础上，选择 LX-11、LX-17、XDA-6、AB-8、
HPD100、HPD300、HPD600 7 种大孔吸附树脂，
以总黄酮、田蓟苷、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸
苷和迷迭香酸为测定指标，对香青兰提取液进行分
离纯化研究，初步筛选香青兰提取液分离方法，为
后期香青兰制剂工艺的改进提供参考。
1 仪器与材料
SPD-10AVP型高效液相色谱仪，日本岛津制造
所；Millipore simplicity-185超纯水器，美国密理博
公司；LD4-2离心机，北京医用离心机厂；SHB-IV
循环水式多用真空泵，郑州长城科工贸有限公司；
LS-3120超声波发生器，美国科学系统公司；SHA-B
水浴恒温振荡器，江苏金坛市亿通电子有限公司；
EYELA 旋转蒸发仪 N-1000，上海爱朗仪器有限公
司；72-1型电热恒温干燥箱，湖北省黄石市医疗器
械厂；色谱柱（30 cm×1.4 cm），中国科学技术大
学玻璃仪器厂。
木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷（LG）对照品，
货号：YLS1169，质量分数大于 98%，购自上海一
林生物科技有限公司；田蓟苷对照品为实验室自制，
其结构通过 1H-NMR 和 13C-NMR 数据与文献报道
的数据比对确定，经 HPLC归一法测定质量分数在
98%以上；迷迭香酸对照品（批号 111871-201001，
质量分数 98.8%），购自中国食品药品检定研究院。
LX-11、LX-17、XDA-6 型大孔吸附树脂，西安蓝
晓科技有限公司；AB-8、HPD100、HPD300、HPD600
型大孔吸附树脂，沧州宝恩化工有限公司；乙腈，
美国 Fisher 公司，色谱纯；蒸馏水，Millipore
simplicity-185超纯水器制备；其他试剂均为分析纯。
香青兰采自新疆吉木萨尔县，经新疆维吾尔自
治区药物研究所何江副研究员鉴定为唇形科植物香
青兰 Dracocephalum Moldevica L. 的干燥地上部
分，收载于《中华人民共和国卫生部药品标准•维吾
尔药分册》1999年版。
2 方法与结果
2.1 指标性成分检测方法
2.1.1 紫外分光光度法测定总黄酮[12]
（1）对照品溶液的制备：精密称取田蓟苷对照
品适量，置 25 mL的量瓶中，加入 70%乙醇溶液，
配制成含田蓟苷 395.2 μg/mL的对照品溶液。
（2）线性关系考察：精密吸取上述田蓟苷溶液
0.30、0.50、1.0、2.0、3.0 mL，分别置 5个 25 mL
量瓶中，加入 70%乙醇溶液稀释至刻度，配制成质
量浓度分别为 4.742 4、7.904 0、15.808、31.616、
47.424 μg/mL的溶液。按上述方法制备加试剂的空
白溶液，在 200～400 nm波长扫描，对照品溶液在
330 nm处有最大吸收。将上述溶液在 330 nm处测
定吸光度（A）值，以 A 值为纵坐标，质量浓度为
横坐标，进行线性回归，得回归方程 Y＝0.131 X－
0.031 5，r＝0.999 2，表明田蓟苷在 4.742 4～47.424
μg/mL线性关系良好。
2.1.2 HPLC法同时测定田蓟苷、LG、迷迭香酸[13-14]
（1）色谱条件：色谱柱为 Purospher® STAR LP
RP18 endcapped（250 mm×4.6 mm，5 μm）；柱温
35 ℃；流动相为乙睛-0.5%甲酸水溶液，梯度洗脱：
0～30 min，17%乙腈；30～60 min，17%～30%乙
腈；60～75 min，30%乙腈；体积流量为 1.0 mL/min；
检测波长 330 nm；进样体积 10 μL。
（2）标准曲线绘制：分别精密称取 LG 对照品
3.74 mg、迷迭香酸对照品 5.184 mg和田蓟苷对照
品 9.88 mg，置 25 mL量瓶中，加入 70%乙醇溶液
稀释至刻度，制成含 LG 149.6 μg/mL、迷迭香酸
207.2 μg/mL、田蓟苷 395.2 μg/mL的混合对照品储
备液。再分别精密吸取上述照品储备液 0.5、1.0、
2.0、3.0、4.0 mL，分别置于不同的 10 mL量瓶中，
并分别加入 70%乙醇溶液稀释至刻度，得到田蓟苷、
LG 和迷迭香酸对照品的系列混合对照品溶液，通
过HPLC检测，以质量浓度对峰面积进行线性回归，
得田蓟苷的回归方程为 Y＝30 882 X－6 629.5，r＝
0.999 5，线性范围 19.76～158.08 μg/mL；LG回归
方程为 Y＝14 784 X＋4 201.2，r＝0.999 7，线性范围
7.48～59.84 μg/mL；迷迭香酸回归方程为 Y＝36 953
X＋651.62，r＝0.999 6，线性范围 10.36～82.88
μg/mL。色谱图见图 1。

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图 1 混合对照品 (A) 与样品 (B) 的 HPLC色谱图
Fig. 1 HPLC of mixed reference substances (A) and sample (B)

2.1.3 香青兰提取液的制备 取香青兰粗粉，加入
30倍量 40%乙醇水溶液，加热回流提取 1次，5 h，
滤过提取液，将滤液减压回收乙醇，浓缩至无醇味，
加入适量的蒸馏水，搅拌均匀，滤过，制成适宜质
量浓度的香青兰提取液（含生药 80 mg/mL，其中含
总黄酮 1.120 mg/mL，田蓟苷 334.0 μg/mL，LG 291.4
μg/mL，迷迭香酸 154.1 μg/mL），备用。
2.2 香青兰提取液大孔吸附树脂分离纯化工艺研究
2.2.1 树脂的预处理 大孔吸附树脂用 95%乙醇浸
泡树脂 24 h，充分溶胀后，取适量，装柱，然后用
蒸馏水冲洗至无醇味。再用 3 BV的 5% HCl溶液，
以 4 BV/h的体积流量通过树脂柱，并浸泡 4 h，再
用蒸馏水以同样流速洗至流出液呈中性。然后用 3
BV的 4% NaOH溶液，以 4 BV/h的体积流量通过
树脂层，并浸泡 4 h，最后用蒸馏水以同样流速洗至
流出液呈中性。备用。
2.2.2 树脂干燥曲线的测定 取经预处理的
HPD600、HPD300、HPD100、LX-11、LX-17、XDA-6、
AB-8大孔吸附树脂，各量取 5 mL，置 40 ℃烘箱
中放置 4 h，每隔 0.5 h测定树脂的质量。以时间为
横坐标，树脂的质量为纵坐标，绘制上述 7种大孔
吸附树脂的干燥曲线。结果见图 2，表明 40 ℃条件
下，干燥 2.0 h时，7种大孔吸附树脂质量保持基本
恒定，因此，干燥时间确定为 2.0 h。
2.2.3 树脂型号考察[15-20] 取经预处理的 HPD
600、HPD300、HPD100、LX-11、LX-17、XDA-6、
AB-8大孔吸附树脂各 2 g，分别加入 25 mL质量浓
度为 80 mg/mL的香青兰提取液，于摇床（25 ℃，
100 r/min）中振摇 24 h，分别于 0.5、1.0、1.5、2.0、
3.0、4.0、5.0、6.0、8.0、10.0、12.0、14.0 h取样，
并经 0.45 μm微孔滤膜滤过，得溶液 1；取吸附饱



图 2 树脂的干燥曲线
Fig. 2 Drying curves of seven resins

和的 7种大孔吸附树脂（14 h取样后的大孔吸附树
脂），沥干药液，分别加入 70%乙醇溶液 100 mL，
于摇床（25 ℃，100 r/min）中振摇 12 h，滤过，得
溶液 2。分别照“2.1.1”项和“2.1.2”项下方法测
定溶液 1 和溶液 2 中总黄酮、田蓟苷、LG 和迷迭
香酸的量，根据下列公式，分别计算上述 7种大孔
吸附树脂对各指标成分的吸附率和解吸率。以吸附
时间为横坐标，吸附率为纵坐标，分别绘制上述 7
种树脂对各指标成分的静态吸附动力学曲线，结果
见图 3。饱和吸附率和解吸率结果见表 1。
吸附率＝(C0V0－C1Vl)/C0V0
解吸率＝C2V2/(C0V0－C1Vl)
C0为香青兰提取液中指标成分的质量浓度，V0为香青兰提取
液体积，C1为溶液 1中指标成分的质量浓度，Vl为溶液 1体
积，C2为溶液 2中指标成分的质量浓度，V2为溶液 2体积
由静态吸附动力学曲线可知，HPD600 大孔吸
附树脂对香青兰提取液中总黄酮、田蓟苷、LG 和
迷迭香酸的吸附率均较高，并且各指标成分的吸附
率在 8 h内升高最快，8 h后吸附率趋于稳定，基本
达到吸附平衡。
由饱和吸附率和解吸率结果可确定选择
HPD600 大孔吸附树脂进行香青兰提取液下一步的
纯化实验。
2.2.4 上样液质量浓度的考察 取经预处理好的
HPD600大孔吸附树脂 4 g，平行取 4份，湿法装柱。
取质量浓度为 0.16 g/mL香青兰提取液 40 mL，平
行取 4份，其中后 3份分别加入一定量的蒸馏水，
稀释至质量浓度分别为 80、40、20 mg/mL，以相同
上样体积流量通过树脂柱，完全吸附后，依次用 80
mL蒸馏水和 6 BV 70%乙醇冲洗，分别照“2.1.1”
项和“2.1.2”项下方法测定 70%乙醇洗脱液中总黄
酮、田蓟苷、LG 和迷迭香酸的量，计算解吸率，
LG
迷迭香酸
田蓟苷
LG 迷迭香酸
田蓟苷
A
B
0 15 30 45 60 75
t/min
HPD600
HPD300
HPD100
LX-11
LX-17
XDA-6
AB-8
4

3

2

1

0
0 1 2 3 4
t/h
树
脂
质
量
/g


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图 3 7种大孔树脂的静态吸附动力学曲线
Fig. 3 Static adsorption kinetic curves on seven kinds of macroporous resins

表 1 7种大孔吸附树脂对指标成分吸附率和解吸率
Table 1 Influence of seven macroporous adsorbing resins on adsorption and desorption rates
树脂型号
总黄酮 田蓟苷 LG 迷迭香酸
吸附率/% 解吸率/% 吸附率/% 解吸率/% 吸附率/% 解吸率/% 吸附率/% 解吸率/%
HPD600 86.32 91.12 88.22 94.23 77.59 82.65 69.20 82.75
HPD300 66.53 86.23 84.21 99.22 62.20 91.43 54.24 88.25
HPD100 75.11 62.45 86.26 53.95 63.88 69.47 46.16 69.16
LX-11 85.15 92.62 71.69 90.94 68.72 77.58 62.70 73.21
LX-17 71.18 90.78 88.56 93.95 60.19 87.75 40.42 86.66
XDA-6 71.59 95.16 81.20 98.07 67.59 83.87 57.69 79.46
AB-8 83.43 81.19 83.43 88.33 65.33 77.55 50.34 80.21

结果见表 2。上样液质量浓度为 80、40、20 mg/mL
时，各指标成分的解吸率均在 90%以上，由于上样
液质量浓度越低，导致吸附效率越低，工作量增大。
因此，上样液质量浓度为 80 mg/mL较合理。

表 2 不同上样液质量浓度对吸附性的影响
Table 2 Influence of different sample concentration on
adsorption properties
药液质量浓度/
(g·mL−1)
解吸率/%
总黄酮 田蓟苷 LG 迷迭香酸
0.16 85.23 83.88 91.26 78.93
0.08 90.56 95.36 97.42 96.73
0.04 91.89 94.79 98.70 97.95
0.02 91.72 95.68 97.74 98.97
2.2.5 上样量的考察 取经预处理好的 HPD600大
孔吸附树脂 4 g，湿法装柱，取质量浓度为 80 mg/mL
的香青兰提取液 160 mL，进行动态吸附，香青兰提
取液以一定的体积流量上样，分段收集流出液，每
份 10 mL，收集 16份。分别照“2.1.1”项和“2.1.2”
项下方法测定每份流出液中总黄酮、田蓟苷、LG
和迷迭香酸的量，绘制泄漏曲线，结果见图 4。当
流出液收集到第 8个 10 mL的时候，各指标成分均
开始泄漏，故最大上样量定为 80 mL，则上样量为
生药 0.32 g/mL树脂。
2.2.6 上样体积流量的考察 取经预处理好的
HPD600大孔吸附树脂 4 g，平行取 4份，湿法装柱。
取质量浓度为 80 mg/mL的香青兰提取液 80 mL上
柱，以不同的体积流量（1.0、1.5、2.0、2.5 BV/h）
HPD600
HPD300
HPD100
LX-11
LX-17
XDA-6
AB-8
吸
附
率
/%

90


60


30


0
0 200 400 600 800
t/min
90


60


30


0
吸
附
率
/%

0 200 400 600 800
t/min
80


60


40


20


0
吸
附
率
/%

0 200 400 600 800
t/min
70
60
50
40
30
20
10
0
吸
附
率
/%

0 200 400 600 800
t/min
总黄酮 田蓟苷
LG 迷迭香酸

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图 4 泄漏曲线
Fig. 4 Leakage curves

通过树脂柱，静置一定时间后，依次用 80 mL蒸馏
水和 6 BV 70%乙醇冲洗，分别按照“2.1.1”项和
“2.1.2”项下方法测定 70%乙醇洗脱液中总黄酮、
田蓟苷、LG 和迷迭香酸的量，计算解吸率，结果
见表 3。上样体积流量越大，各指标成分的解吸率
越低。上样体积流量为 1.0、1.5 BV/h时，各指标成
分解吸率均达到 93%以上，但上样体积流量过小，
上样周期过长，因此，选择 1.5 BV/h为最佳上样体
积流量。

表 3 上样液不同吸附体积流量对吸附性能的影响
Table 3 Influence of different adsorption flow rates on
adsorption properties
体积流量/(BV·h−1)
解吸率/%
总黄酮 田蓟苷 LG 迷迭香酸
1.0 94.12 95.12 95.51 95.49
1.5 93.89 96.85 96.84 96.44
2.0 90.32 96.03 95.70 95.90
2.5 87.67 80.78 86.82 87.37

2.2.7 吸附时间的考察 取经预处理好的 HPD600
大孔吸附树脂 4 g，平行取 5份，湿法装柱。取质量
浓度为 0.08 g/mL的香青兰上样液 80 mL上柱，进
行动态吸附。上样体积流量为 1.5 BV/h，分别静置
0、3、6、9、12 h后，依次用 80 mL蒸馏水和 6 BV
70%乙醇冲洗，分别照“2.1.1”项和“2.1.2”项下
方法测定 70%乙醇洗脱液中总黄酮、田蓟苷、LG
和迷迭香酸的量，计算解吸率，结果见表 4。表明
吸附时间对总黄酮、LG 和迷迭香酸的解吸率有显
著影响，对田蓟苷影响不大，随着吸附时间的延长
各指标的解吸率呈上升趋势，吸附 9、12 h时，各
指标的解吸率均达到 92%以上，因此，为便于工业
化操作，确定吸附时间为 12 h。
表 4 吸附时间对吸附性能的影响
Table 4 Influence of different aabsorbing time on
adsorption properties
吸附时间/h
解吸率/%
总黄酮 田蓟苷 LG 迷迭香酸
0 68.45 86.55 70.22 72.42
3 72.67 91.55 76.99 78.48
6 84.01 92.36 83.67 88.66
9 92.34 93.11 95.29 95.46
12 93.22 94.78 97.45 96.37

2.2.8 柱径高比的考察 取经预处理好的 HPD600
大孔吸附树脂 4 g，平行取 3份，湿法装柱，分别装
入径高比 1∶6、1∶9、1∶12的树脂柱。取质量浓
度为 80 mg/mL的香青兰提取液 80 mL上柱，进行
动态吸附。上样体积流量为 1.5 BV/h，吸附 12 h后，
依次用 80 mL蒸馏水和 6 BV 70%乙醇冲洗，分别
照“2.1.1”项和“2.1.2”项下方法测定 70%乙醇洗
脱液中总黄酮、田蓟苷、LG 和迷迭香酸的量，计
算解吸率，结果见表 5，确定柱径高比选择为 1∶9。

表 5 不同径高比对吸附性能的影响
Table 5 Influence of different resin column diameter-height
ratios on adsorption properties
柱径高比
解吸率/%
总黄酮 田蓟苷 LG 迷迭香酸
1∶ 6 82.45 92.01 93.99 96.44
1∶ 9 85.67 96.22 96.53 94.35
1∶12 78.06 89.03 95.55 92.33

2.2.9 水洗脱体积的考察 取经预处理好的
HPD600大孔吸附树脂 4 g，按上述优选的工艺参数
上样，用 200 mL蒸馏水冲洗，每 1 BV接 1份，按
照“2.1.1”项和“2.1.2”项下方法测定每份流出液
中的总黄酮、田蓟苷、LG 和迷迭香酸的量，并测
定出膏率。结果表明，流出液中各指标成分的量均
较低，且流出液出膏率逐渐降低，第 4份流出液出
膏率仅为 0.11%，因此，为节省工时，水洗脱体积
为 4 BV。
2.2.10 洗脱剂体积分数的考察 取经预处理好的
HPD600大孔吸附树脂 4 g，按上述优选的工艺参数
上样，先用 4 BV（80 mL）蒸馏水冲洗，再依次以
6 BV的 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%
乙醇进行梯度洗脱，洗脱液依次编号为 1～7号。按
照“2.1.1”项和“2.1.2”项下方法测定各洗脱液中
1.4

1.2

1.0

0.8

0.6

0.4

0.2

0
LG
迷迭香酸
田蓟苷
总黄酮
0 4 8 12 16
t/min
流
出
液
质
量
浓
度
/(μ
g∙m
L−
1 )

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 4期 2016年 2月 ·604·
总黄酮、田蓟苷、LG 和迷迭香酸的量，计算解吸
率，以不同洗脱溶剂（编号）为横坐标，相应洗脱
液中各指标成分的解吸率为纵坐标，绘制洗脱曲线，
结果见图 5。表明 70%乙醇洗脱 6 BV时，各指标成
分几乎完全洗脱并富集。



图 5 梯度洗脱曲线
Fig. 5 Gradient elution curves

2.2.11 洗脱剂用量的考察 取经预处理好的
HPD600大孔吸附树脂 4 g，平行取 4份，按上述优
选的工艺参数上样，先用 80 mL蒸馏水冲洗，再用
70%乙醇以一定的体积流量进行解吸，前 80 mL（4
BV）收集 1份，第 5、6、7 BV分别收集，按照“2.1.1”
项和“2.1.2”项下方法测定各流份中总黄酮、田蓟
苷、LG 和迷迭香酸的量，分别计算各指标成分的
解吸率，结果见表 6。收集的第 7 BV洗脱液中各指
标成分解吸率均很低（＜2%），因此，确定洗脱剂
用量为 6 BV。

表 6 洗脱剂用量的考察
Table 6 Investigation of eluant volume
指标成分
解吸率/%
前 4 BV 第 5 BV 第 6 BV 第 7 BV
总黄酮 82.12 6.99 3.01 0.88
田蓟苷 84.66 10.87 1.74 0.53
LG 85.78 7.34 3.73 1.77
迷迭香酸 90.23 4.58 2.57 1.91

2.2.12 洗脱体积流量的考察 取经预处理好的
HPD600大孔吸附树脂 4 g，平行取 4份，按上述优
选的工艺参数上样，先用 80 mL蒸馏水冲洗，再用
6 BV 70%乙醇分别以 1.0、1.5、2.0、2.5 BV/h的体
积流量解吸，分别照“2.1.1”项和“2.1.2”项下方
法测定 70%乙醇洗脱液中总黄酮、田蓟苷、LG 和
迷迭香酸的量，计算各指标成分的解吸率，结果见
表 7。表明洗脱体积流量越大，各指标成分的解吸
率越低，洗脱体积流量在 1.0、1.5 BV/h时，各标成
表 7 洗脱体积流量对吸附性能的影响
Table 7 Influence of different elution rates on adsorption
properties
洗脱体积流量/
(BV·h−1)
解吸率/%
总黄酮 田蓟苷 LG 迷迭香酸
1.0 93.12 94.69 94.73 95.56
1.5 92.09 97.02 97.39 94.93
2.0 89.34 95.32 96.02 94.86
2.5 85.21 86.66 91.46 89.46

分解吸率均较高，但洗脱体积流量过小，生产周期
也会延长。因此，选择 1.5 BV/h为洗脱体积流量。
2.3 验证实验
取经预处理好的 HPD600 大孔吸附树脂 4 g，
平行取 3 份，湿法装柱，取质量浓度为 80 mg/mL
的香青兰提取液 80 mL上柱，按上述纯化工艺进行
3 次验证试验，收集 70%乙醇洗脱液，照“2.1.1”
项和“2.1.2”项下方法测定 70%乙醇洗脱液中总黄
酮、LG、迷迭香酸和田蓟苷的量，计算各指标成分
的解吸率均在 92%以上，蒸干后测定浸膏质量，其
中总黄酮质量分数分别为 54.55%、53.31%、55.22%，
平均为 54.36%；田蓟苷质量分数分别为 5.67%、
5.74%、5.56%，平均为 5.66%；LG 质量分数分别
为 4.85%、4.74%、4.73%，平均为 4.77%；迷迭香
酸质量分数分别为 2.65%、2.74%、2.56%，平均为
2.65%；说明该纯化工艺重复性良好，所选工艺稳
定可行。
3 讨论
由于迷迭香酸、LG 和田蓟苷的结构中均具有
酚羟基结构，黄酮苷分子结构均有一个极性糖基和
一个非极性黄酮母核（呈弱酸性），故它们有一定的
极性和亲水性，生成氢键能力较强，可作为良好的
氢键供体。因而，易于与非极性和极性树脂发生吸
附作用[16-18]。中极性吸附树脂具有较低的比表面积，
带有孤电子对的羰基官能团，羰基是良好的氢键受
体，能与上述指标化合物形成氢键作用，从而大大
提高了吸附选择性[19-20]，因此，本实验分别选用非
极性、中极性和极性这 3类树脂，即选用 XDA-6、
HPD100、HPD300、HPD600、AB-8、LX-11、LX-17
这 7种不同类型的大孔树脂作为香青兰提取液的分
离树脂。
本实验结果表明，上述 7种大孔吸附树脂中，
HPD600 树脂比较适合于香青兰提取液的分离纯
总黄酮
田蓟苷
LG
迷迭香酸
70
60
50
40
30
20
10
0
解
吸
率
/%

0 1 2 3 4 5 6 7
编号

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 4期 2016年 2月 ·605·
化，最佳纯化工艺参数为香青兰提取液质量浓度为
80 mg/mL，柱径高比为 1∶9，上样量为生药 0.32
g/mL树脂，上样体积流量为 1.5 BV/h，上样后吸附
时间为 12 h，水除杂用量为 4 BV，用 70%乙醇为洗
脱液，洗脱体积为 6 BV，洗脱体积流量为 1.5 BV/h，
总黄酮、田蓟苷、LG 和迷迭香酸的解吸率均达到
92%以上。70%乙醇洗脱液蒸干后测定干浸膏质量，
其中总黄酮、田蓟苷、LG 和迷迭香酸的质量分数
分别达到 53%、5.5%、4.7%和 2.5%以上，该工艺
操作简单、重复性好，可作为分离纯化香青兰提取
液的有效方法，对后期研究依从性较好的香青兰新
制剂工艺有一定的应用价值。
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