全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 23 期 2014 年 12 月

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国产沉香 HPLC 指纹图谱研究
杨锦玲 1, 2，梅文莉 2，余海谦 2，杨德兰 2，王佳媛 2，李 薇 2，戴好富 2*
1. 海南大学园艺园林学院，海南 海口 570228
2. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所，农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室，海南 海口 571101
摘 要：目的 建立沉香药材 HPLC 特征指纹图谱分析方法，为其科学鉴定和质量控制提供依据。方法 Dionex-Acclaim 120
C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.5%甲酸水溶液梯度洗脱；体积流量 0.4 mL/min；检测波长 254 nm；
柱温 26 ℃。利用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统 2004A 版”和 SPSS 软件分别对其进行相似度评价和聚类分析。结果
建立了沉香药材 HPLC 指纹图谱共用模式，确定 24 个共有峰，并根据对照品指认 9 个共有峰。10 批沉香药材相似度分析结
果与聚类分析结果基本一致。结论 首次建立了沉香药材 HPLC 指纹图谱分析方法。该分析方法简便、快速，可较全面地
反映沉香药材中化学成分的信息，为沉香药材的鉴定和质量评价提供了科学依据。
关键词：沉香；HPLC 指纹图谱；相似度分析；聚类分析法；超声波法
中图分类号：R286.022 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2014)23 - 3456 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.23.019
HPLC fingerprint of Aquilariae Resinatum Lignum in China
YANG Jin-ling1, 2, MEI Wen-li2, YU Hai-qian2, YANG De-lan2, WANG Jia-yuan2, LI Wei2, DAI Hao-fu2
1. College of Horticultural and Garden, Hainan University, Haikou 570228, China
2. Key Laboratory of Biology and Genetic Resources of Tropical Crops, Ministry of Agriculture, Institute of Tropical Bioscience
and Biotechnology, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Haikou 571101, China
Abstract: Objective To establish an HPLC method for the fingerprint analysis of Aquilariae Resinatum Lignum (ARL), so as to
provide evidence for the identification and quality control of ARL. Methods The analysis was carried out on a Dionex-Acclaim 120
C18 column (250 mm × 4.6 mm, 5 μm). The mobile phase consisted of acetonitrile and water-acetic acid (99.5:0.5) with the flow rate of
0.4 mL/min at 254 nm and the separation was performed at 26 . The similarity was analyzed with “℃ Similarity Evaluation System for
Chromatographic Fingerprint of Chinese Materia Medica 2004A” and the cluster analysis was performed by SPSS software. Results
The HPLC characteristic fingerprint of ARL has been established. A total of 24 common peaks were characterized, and nine of them
were identified by comparing their retention time with reference subslances. The values of similarity evaluation mostly agreed with the
result of cluster analysis. Conclusion It is the first time to establish the HPLC fingerprint of ARL. The method is simple and quick,
and reflects the information of chemical composition of ARL comprehensively, which provides the scientific basis for the identification
and quality evaluation of ARL.
Key words: Aquilariae Resinatum Lignum; HPLC fingerprint; similarity analysis; cluster analysis; ultrasonic method

国产沉香为瑞香科植物白木香 Aquilaria
sinensis (Lour.) Gilg 含有树脂的木材[1]，主产于我国
海南、广东等地，是我国传统的名贵药材[2-3]。沉香
具有行气止痛、温中止呕、纳气平喘功能，用于胸
腹胀闷疼痛、胃寒呕吐呃逆、肾虚气逆喘急[4]。化
学研究表明沉香中的特征性成分为 2-(2-苯乙基) 色
酮类化合物（41%）和倍半萜类化合物（52%）[5]。
沉香药材中所含倍半萜类和色酮类化合物种类较
多，各成分相对量较少。目前，除奇楠沉香被报道
其化学成分中 2-(4′-甲氧基-2-苯乙基) 色酮和 2-(2-
苯乙基) 色酮相对量之和达到 37.03%以上[6]，其他
沉香药材中未见有相对量较高的共有成分报道。由

收稿日期：2014-05-28
基金项目：国家科技支撑计划课题（2013BAI11B04）；海南省重大科技项目（ZDZX2013013）；公益性行业（农业）科研专项（201303117）
作者简介：杨锦玲（1990—），女，硕士在读，研究方向为天然产物化学。E-mail: jinlyang@126.com
*通信作者 戴好富，男，博士，研究员，博士生导师，主要从事天然产物化学研究。
Tel: (0898)66961869 Fax: (0898)66961869 E-mail: daihaofu@itbb.org.cn
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于市面上的沉香药材质量良莠不齐，而且假冒伪劣、
以次充好的情况时有发生，所以建立一套可靠的沉
香真伪鉴定与质量评价的方法意义重大。据文献报
道，主要通过 GC-MS 的方法来评价沉香质量[2,5-11]，
鉴定的化合物主要是倍半萜以及芳香族类成分，近
年来色酮类成分也得到了鉴定[2,6,10-11]，但一些极性
较大不易挥发的成分特别是四氢色原酮类化合物
尚未鉴定。而利用 HPLC 分析沉香样品的文献仅
见少量报道 [12-13]，如采用 HPLC 检测沉香中的
2-(2-苯乙基) 色酮类和四氢色原酮类化合物[12]，
以及采用 HPLC 来测定沉香中化合物 6-羟基-2-
(4′-甲氧基-2-苯乙基) 色酮和 6-羟基-2-(2-苯乙基)
色酮的量。HPLC 指纹图谱是一种顺应中药多组
分、多靶点，从“全成分”的角度出发的现代中
药质量控制方法，现已成为国内外广泛接受的中
药质量控制评价模型 [14-16]。目前尚未有利用
HPLC 指纹图谱法对沉香药材进行真伪鉴定和质
量评价的文献报道。本课题组从沉香药材分离鉴
定了一系列 2-(2-苯乙基) 色酮类化合物[17-22]，本
实验在此基础上对 10 批沉香药材进行分析，建立
乙醚提取物的 HPLC 指纹图谱，并进行相似度评
价和聚类分析，以期为沉香的科学鉴定和质量标
准提供参考依据。
1 材料
Agilent 1260 Infinity 高效液相色谱仪，配备
G1311C 四元泵、G1329B 标准自动进样器、G1316A
柱温箱、G1315D DAD 检测器（Agilent 公司，美国）；
Sartorius BP221S 电子天平（塞多利斯公司，德国）；
BRANSONIC — 5510E — DTH 超 声 波 清 洗 仪
（Branson，美国）。
乙腈（色谱纯，Tedia 公司），甲醇（色谱纯，
Tedia 公司），甲酸（分析纯），超纯水。所有对照
品均为课题组分离鉴定得到，9 个对照品分别为
(5S*, 6R*, 7R*)-4′-甲氧基-5, 6, 7, 3′-四羟基-2-(2-苯
乙基)-5, 6, 7, 8-四氢色原酮、8-氯-4′-甲氧基-5, 6,
7, 3′-四羟基-2-(2-苯乙基)-5, 6, 7, 8-四氢色原酮、
8-羟基-2-(2-苯乙基) 色酮、6-甲氧基-2-(3′-甲氧基-
4′-羟基-2-苯乙基) 色酮、6-羟基-2-(4′-甲氧基-2-
苯乙基) 色酮、6-羟基-2-(2-苯乙基)色酮、6, 7-甲
氧基-2-(2-苯乙基)色酮、2-(4′-甲氧基-2-苯乙基)
色酮、2-(2-苯乙基) 色酮。经 HPLC 峰面积归一
化法计算，各质量分数均大于 98%。10 批沉香药
材于 2013 年收集，均由中国热带农业科学院热带
生物技术研究所戴好富研究员鉴定，其沉香原植
物均为瑞香科沉香属白木香 Aquilaria sinensis
(Lour.) Gilg。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Dionex-Acclaim 120 C18 色谱柱（250 mm×4.6
mm，5 μm），流动相为乙腈（A）-0.5%甲酸水溶液
（B）。梯度洗脱程序：0～60 min，25%～55% A，
60～80 min，55%～80% A，80～90 min，80%～100%
A，90～95 min，100% A。体积流量 0.4 mL/min，
检测波长 254 nm，柱温 26 ℃，进样量 20 μL。
2.2 供试品和对照品溶液制备
10 批药材均为野生国产沉香，药材信息见表 1。
表 1 沉香药材样品信息
Table 1 Introduction of ARL medicinal materials
编号 样品描述 产地 提取得率 / %
S1 表面黄白色，凹凸不平，纵纹理，散布褐色油脂；较硬，气微香 海南 1.25
S2 表面灰白色，散布棕褐色油脂，树皮；干而脆，气香 海南 1.53
S3 表面黄白色，纵纹理，密布褐色油脂；质硬，气香 广西 1.67
S4 表面灰白色，密布棕褐色油脂；较坚硬，气香 海南 1.27
S5 表面黄棕色，散布褐色油脂；干而脆，气微香 海南 0.76
S6 表面黄棕色，散布褐色油脂；干而脆，气微香 广东 2.19
S7 表面土黄色，密布褐色油脂；干而脆，气香 云南 0.57
S8 表面黄棕色，密布黑褐色油脂；较坚硬，气香 海南 1.18
S9 表面黄白色，凹凸不平，纵纹理，散布黄褐色油脂；质硬，气微香 海南 1.04
S10 表面黄白色，散布黑色油脂，有虫洞；干而脆，气香 海南 1.92

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样品提取采用《中国药典》2010 年版规定的乙醚超
声波提取法[4]。将沉香药材粉碎，精确称量粉末
1.000 g，置于三角瓶中，加乙醚 30 mL，封口膜
密封，15 ℃超声提取 30 min，滤过，重复 3 次。
待乙醚挥干，得棕黄色油状物。利用公式计算提
取率（提取率＝提取物质量/药材质量）。取提取
物 5.0 mg，置于 5 mL 量瓶中用甲醇溶解、定容，
并用 0.45μm 微孔滤膜滤过，得供试品溶液，4 ℃
保存备用。
精确称取对照品，分别配制成 1.0 mg/mL 的对
照品溶液，用 0.45 μm 微孔滤膜滤过，4 ℃保存备
用。分别取配制的对照品溶液适量混匀，制成混合
对照品溶液。
2.3 方法学考察
2.3.1 精密度考察 取同一对照品混合溶液，在
“2.1”项的色谱条件下重复进样 5 次，测得各共有
峰相对峰面积的 RSD 均小于 1%，表明仪器精密度
良好，符合指纹图谱的技术要求。
2.3.2 稳定性考察 取同一供试品溶液，在“2.1”
项的色谱条件下，分别在 0、2、4、8、12、36、60
h 进样，测得各共有峰相对峰面积的 RSD 均小于
2%，表明供试品溶液在 60 h 内稳定。
2.3.3 重复性考察 称取同一样品 5 份，按“2.2”
项的方法制备样品，按照“2.1”项的色谱条件进样
测定，结果表明，共有峰相对峰面积的 RSD 均小于
2.5%，符合指纹图谱的技术要求。
2.4 沉香药材指纹图谱的建立及共有峰的鉴定
分别取 10 批沉香药材样品，按上述方法制
备并检测，记录其指纹图谱。运用中国药典委员
会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统 2004A
版”对 10 批样品的指纹图谱进行分析，设定 S1
为参照图谱，选取“时间窗宽度”为 0.2 min，
选定 2 个峰面积相对较大的峰进行多点校正，自
动匹配，建立了沉香药材指纹图谱，结果见图 1，
其中 R 为指纹图谱共有模式。混合对照品 HPLC
图见图 2。10 批药材共确定了 24 个共有峰，编
号 1～24。
2.5 共有指纹峰的相对保留时间和相对峰面积
在所建立的色谱条件下，沉香样品的特征峰有
较好的分离，保留时间较为稳定，同时 24 个共有峰
均能稳定出现，以 2-(4′-甲氧基-2-苯乙基) 色酮（19
号峰）为对照峰，计算其他 23 个特征峰的相对保留
时间和相对峰面积，具体见表 2 和表 3。

1～24: 24 个共有峰 2-(5S*, 6R*, 7R*)-4′-甲氧基-5, 6, 7, 8-四羟基-2-(2-苯乙
基)-5, 6, 7, 8-四氢色原酮，4-8-氯-4′-甲氧基-5, 6, 7, 3′-四羟基-2-(2-苯乙
基)-5, 6, 7, 8-四氢色原酮，10-8-羟基-2-(2-苯乙基)色酮，11-6-甲氧基-
2-(3′-甲氧基-4′-羟基-2-苯乙基)色酮，13-6-羟基-2-(4′-甲氧基-2-苯乙基)
色酮，14-6-羟基-2-(2-苯乙基)色酮，17-6, 7-甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮
19-2-(4′-甲氧基-2-苯乙基) 色酮，20-2-(2-苯乙基)色酮，下同
1—24: represents 24 common peaks 2-(5S*, 6R*, 7R*)-4′-methoxy-5, 6, 7,
8-tetrahydroxy-2-(2-phenylethyl)-5, 6, 7, 8-tetrahydrochromone 4-8-chloro-
5, 6, 7-trihydroxy-2-[2-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)ethyl]-5, 6, 7 ,8-tetra-
hydrochromone 10-8-hydroxy-2-(2-phenylethyl)chromone 11-6-methoxy-
2-[2-(3-methoxy-4-hydroxyphenyl)ethyl] chromone 13-6-hydroxy-2-[2-
(4-methoxyphenyl)-ethyl]chromone 14-6-hydroxy-2-(2-phenylethyl) chromone
17-6, 7-dimethoxy-2-(2-phenylethyl) chromone 19-2-[2-(4-methoxyphenyl)
ethyl]chromone 20-2-(2-phenylethyl) chromone, same as below
图 1 10 批沉香药材 HPLC 指纹图谱和共有模式
Fig. 1 HPLC fingerprint and common mode of 10 batches
of ARL medicinal materials

图 2 混合对照品 HPLC 图谱
Fig. 2 HPLC of mixed reference substances
3 数据分析
3.1 指纹图谱的相似度评价
采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似
度评价系统 2004A 版”系统评价软件，以特征指纹
图谱共有模式为对照，计算各批次样品的相似度，
S1～S10 的相似度分别为 0.924、0.882、0.878、0.867、
0.864、0.857、0.850、0.837、0.823、0.754。相似度
可以体现不同批次样品间各成分在种类及其相对量
上的整体相似程度。分析结果表明，各药材相似度
值在 0.754～0.924，相似度在 0.850 以上的沉香药材
占 70%，说明药材中化学成分相似度较高，但仍然
存在一定差异。从各样品色谱图整体分析，保留时
2
4
10 11
13
14 17 19 20
0 15.21 30.42 45.63 60.83 76.04
t / min
1
2
3
4 5
6 7
8 9 10
11
12
13
14 15
16
17
18 19
20
21 22 23 24
0 15.84 31.67 47.51 63.34 79.18 95.01
t / min
R
S10
S9
S8
S7
S6
S5
S4
S3
S2
S1
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表 2 10 批样品共有峰的相对保留时间
Table 2 Relative retention time of common peaks for 10 batcges of samples
相对保留时间 共有峰
S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 平均值 RSD / %
1 0.198 5 0.200 1 0.196 3 0.200 7 0.200 5 0.200 5 0.200 1 0.200 2 0.199 4 0.199 8 0.199 6 0.66
2 0.222 8 0.224 9 0.220 4 0.225 5 0.225 2 0.225 1 0.225 0 0.225 0 0.224 1 0.224 7 0.224 3 0.70
3 0.233 9 0.236 2 0.231 7 0.236 6 0.236 3 0.236 3 0.236 0 0.236 1 0.235 5 0.236 0 0.235 5 0.65
4 0.239 6 0.241 7 0.236 8 0.242 4 0.242 3 0.242 1 0.241 7 0.241 6 0.241 4 0.241 4 0.241 1 0.71
5 0.328 2 0.330 5 0.324 0 0.331 1 0.331 1 0.331 8 0.330 3 0.330 9 0.330 1 0.329 9 0.329 8 0.69
6 0.424 1 0.425 9 0.419 1 0.427 0 0.426 3 0.426 7 0.425 7 0.426 5 0.425 6 0.425 9 0.425 3 0.54
7 0.502 7 0.504 6 0.498 3 0.505 8 0.505 4 0.505 3 0.504 7 0.505 0 0.504 9 0.504 5 0.504 1 0.44
8 0.515 2 0.516 5 0.511 2 0.517 4 0.516 9 0.513 5 0.516 4 0.517 1 0.513 6 0.517 1 0.515 5 0.40
9 0.656 1 0.659 0 0.653 6 0.657 0 0.657 0 0.657 0 0.656 7 0.657 1 0.655 7 0.658 0 0.656 7 0.22
10 0.688 6 0.687 8 0.685 2 0.688 4 0.688 8 0.688 1 0.688 1 0.688 7 0.687 3 0.689 2 0.688 0 0.16
11 0.731 0 0.731 3 0.727 5 0.731 4 0.732 1 0.731 3 0.731 3 0.731 6 0.731 1 0.731 9 0.731 0 0.18
12 0.741 2 0.741 2 0.737 8 0.743 1 0.743 1 0.742 2 0.742 3 0.741 5 0.741 8 0.742 3 0.741 6 0.21
13 0.779 7 0.780 0 0.776 9 0.779 9 0.780 1 0.779 9 0.779 7 0.780 0 0.779 5 0.780 2 0.779 6 0.12
14 0.805 1 0.804 8 0.802 4 0.805 2 0.805 2 0.804 8 0.804 9 0.804 9 0.804 7 0.805 4 0.804 7 0.11
15 0.875 0 0.875 4 0.873 5 0.874 1 0.874 2 0.874 8 0.874 7 0.875 4 0.873 9 0.873 8 0.874 5 0.08
16 0.886 5 0.887 1 0.884 5 0.887 0 0.887 4 0.886 4 0.886 3 0.885 8 0.886 8 0.885 2 0.886 3 0.10
17 0.901 9 0.901 7 0.899 7 0.901 9 0.902 5 0.901 5 0.902 1 0.902 0 0.901 3 0.901 7 0.901 6 0.08
18 0.955 4 0.954 1 0.955 3 0.954 3 0.955 3 0.953 7 0.955 5 0.955 6 0.954 1 0.955 8 0.954 9 0.08
19 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 0.00
20 1.026 1 1.025 7 1.027 4 1.026 2 1.026 3 1.024 2 1.026 1 1.025 7 1.024 2 1.026 1 1.025 8 0.09
21 1.068 6 1.066 7 1.071 3 1.066 7 1.067 4 1.065 6 1.068 2 1.068 1 1.066 6 1.068 5 1.067 8 0.15
22 1.123 9 1.121 3 1.127 5 1.121 1 1.122 3 1.119 9 1.123 4 1.123 3 1.121 3 1.123 7 1.122 8 0.19
23 1.200 2 1.197 4 1.202 1 1.197 0 1.198 6 1.195 4 1.199 9 1.199 7 1.195 7 1.200 1 1.198 6 0.18
24 1.226 3 1.222 8 1.231 9 1.222 3 1.224 0 1.220 8 1.225 5 1.225 6 1.223 0 1.226 0 1.224 8 0.25
表 3 10 批样品共有峰的相对峰面积
Table 3 Relative peak areas of common peaks for 10 batches of samples
相对峰面积 共有峰 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 平均值 RSD / %
1 0.696 0 0.855 5 3.048 0 1.084 8 1.883 9 0.343 8 2.596 0 9.351 3 0.576 4 2.515 3 2.295 1 115.75
2 0.141 6 0.418 1 0.243 9 0.392 7 0.374 3 0.076 0 0.360 1 2.254 3 0.208 9 0.317 0 0.478 7 132.46
3 0.627 3 0.244 1 2.932 4 0.587 9 0.749 7 0.086 7 1.635 7 1.683 9 0.205 3 1.244 1 0.999 7 88.68
4 0.241 7 0.365 8 0.700 9 0.721 8 1.003 4 0.108 7 0.557 1 0.156 6 0.406 1 1.298 1 0.556 0 68.79
5 0.446 4 0.264 6 1.559 9 1.029 1 1.441 4 0.296 2 1.004 3 3.400 3 0.140 4 2.379 5 1.196 2 87.55
6 1.469 6 2.873 4 3.968 8 1.842 4 2.358 1 0.737 2 1.635 6 1.734 2 1.613 0 2.437 4 2.067 0 43.18
7 1.218 4 0.994 4 0.176 1 1.343 8 2.865 7 0.292 7 0.737 3 2.954 8 0.130 5 3.585 3 1.429 9 88.18
8 0.695 9 0.042 9 0.207 8 0.420 3 0.373 2 0.142 6 0.700 1 2.758 2 0.332 3 0.576 7 0.625 0 125.08
9 0.516 0 0.047 4 0.437 9 0.164 3 0.458 3 0.352 9 0.309 2 0.983 6 0.536 0 0.266 6 0.407 2 62.61
10 0.125 4 0.056 5 0.433 9 0.200 4 0.296 3 0.164 9 0.215 8 0.629 0 0.256 8 0.493 4 0.287 2 62.37
11 1.127 8 1.532 7 4.245 6 0.244 9 0.267 8 1.166 4 1.432 3 6.021 8 0.746 1 2.628 9 1.941 4 95.95
12 0.234 0 0.256 1 0.154 8 0.492 1 0.782 5 0.651 1 0.291 7 0.294 4 0.310 9 0.330 3 0.379 8 52.50
13 3.126 7 0.482 7 1.606 8 2.175 2 4.548 1 0.883 8 1.809 6 5.802 0 1.474 8 4.390 5 2.630 0 67.07
14 3.898 9 0.856 4 4.079 3 1.006 9 1.979 7 1.674 6 2.402 2 4.178 7 7.241 7 4.309 4 3.162 8 61.93
15 4.121 7 1.244 6 4.234 1 1.465 5 2.684 0 1.918 7 6.975 7 14.461 0 2.579 9 20.055 9 5.974 1 105.76
16 1.582 7 0.987 8 1.567 7 1.906 5 4.456 4 0.248 8 1.702 9 2.293 6 1.714 8 5.628 3 2.208 9 73.12
17 6.407 8 4.592 3 27.163 6 7.427 8 11.628 1 5.529 6 9.560 1 20.918 2 9.954 1 16.279 0 11.946 1 61.57
18 0.833 7 0.181 0 1.350 0 0.516 6 0.940 8 0.272 7 0.585 1 1.627 8 1.034 4 0.655 5 0.799 8 57.03
19 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 0.00
20 1.731 9 0.832 7 1.825 8 0.366 0 0.634 8 0.972 7 0.922 1 0.586 3 7.120 2 2.010 4 1.700 3 116.86
21 0.632 6 1.012 3 0.532 5 0.151 0 0.204 6 1.545 8 0.669 7 1.536 6 3.783 3 0.714 3 1.078 3 98.58
22 0.612 6 0.453 1 1.856 8 0.288 2 0.565 0 0.685 9 0.553 4 1.394 2 1.827 5 0.893 3 0.913 0 62.74
23 0.722 3 0.271 0 0.185 9 0.340 1 0.555 1 1.509 9 2.378 7 2.899 6 1.141 1 2.419 7 1.242 3 81.04
24 0.187 1 0.033 9 0.547 5 0.135 1 0.624 5 0.130 6 0.345 0 1.645 2 0.257 4 0.690 4 0.459 7 102.99
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间在 20～45 min 的色谱峰所代表的化学物差异较
大。S10 与共有模式图谱的相似度最低，仅为 0.754，
主要原因可能是 34.12、42.32、87.82 min 的峰面积
比共有模式图谱中对应的峰面积大许多。
3.2 聚类分析
以 24 个共有峰的相对峰面积作为变量，运用
SPSS19.0 数据处理软件对 10 批样品进行系统聚类
分析，聚类方法为组间连接法，利用欧式距离作为
样品的测度，得到样品的聚类分析树状图，见图 3。
根据树状图结果，当分类距离取 20 时，可将 10 批
沉香药材大致分为 2 个等级，样品 S2、S6、S4、S1、
S5、S7、S9 和 S3 聚为一类，样品 S8 和 S10 聚为
一类。该结果与样品相似度分析结果基本一致。

图 3 10 批沉香药材聚类分析树状图
Fig. 3 Hierarchical cluster analysis for 10 batches
of ARL medicinal materials
4 讨论
4.1 色谱条件的考察
流动相分别考察了乙腈-水、乙腈-0.5%乙酸水
溶液、乙腈-0.5%甲酸水溶液 3 个系统，结果表明，
采用乙腈-0.5%甲酸水溶液系统时，分离效果好，有
利于指纹图谱的建立，因此，确定乙腈-0.5%甲酸水
溶液作为流动相系统。
检测波长分别选择 210、230、254、280、306、
327 nm 进行试验，通过比较发现 254 nm 波长下色
谱峰较多，峰形较好且吸光度较大，故选择 254 nm
作为检测波长。
色谱柱选择 Kromasil C18 ODS（150 mm×4.6
mm，5 μm）和 Dionex-Acclaim 120 C18 柱（250
mm×4.6 mm，5 μm）对同一样品进行分析，结果
表明，后者所得色谱图峰形较好，分离度高，因此
选择其对样品进行分析。
4.2 结果分析
本研究对 10 批沉香药材进行分析，建立了沉香
药材 HPLC 指纹图谱共用模式，通过相似度评价，
说明药材在化学成分的组成上存在一定差异，药材
产地、结香方法和时间均可导致沉香化学成分上的
差异，影响其质量。本研究发现 24 个共有峰，并通
过对照品指认了其中 9 个共有峰，均为色酮类化合
物。色酮类化合物和倍半萜类化合物是沉香中量最
高的成分也是其特征性成分。共有峰 2 和 4 为四氢
色原酮类化合物，根据文献报道[3]，沉香中已鉴定
四氢色原酮类化合物 10 多个，推测共有峰 1 和 3
以及保留时间较接近的成分可能均属于四氢色原酮
类化合物。其中峰 2 所代表的化合物的相对分子质
量是 348，是鉴定沉香样品真伪的特征性相对分子
质量[23]，报道的文献中利用 DART-TOFMS 检测 125
个沉香样品和其他 25 种有香味的木材，结果证明只
有沉香中能检测到相对分子质量为 348 的色原酮类
化合物，这为利用 HPLC 指纹图谱鉴定沉香提供了
有利证据。共有峰 10、11、13、14、17、19 和 20
根据对照品鉴定为 2-(2-苯乙基) 色酮类成分，其中
19 号共有峰 2-(4′-甲氧基-2-苯乙基) 色酮和 20 号共
有峰 2-(2-苯乙基) 色酮据报道在 150 ℃时即可裂
解产生简单芳香族化合物苯甲醛和对甲氧基苯甲
醛[24]，是沉香加热时散发香味的重要贡献者，两者
在奇楠沉香中相对量之和高达 37.30%～84.71%，而
普通沉香中这两个化合物相对量之和仅为 0.16%～
13.30%，其在样品中的相对量之和也是评价沉香品
质的重要指标之一[6]。沉香的化学成分非常复杂，
目前已经鉴定了 130 多个成分，其中色酮类化合物
50 多个，倍半萜类化合物 70 多个[3,25]。指纹图谱中
其他未鉴定的共有峰未能找到对照品，这些化合物
的分离纯化以及结构鉴定工作正在进行中。根据指
纹图谱分析结果，运用 SPSS 数据处理软件将 24 个
共有峰的相对峰面积作为变量进行聚类分析，得到
树状图，沉香样品分为 2 类，其结果与相似度评价
结果基本一致。
与已报道的 GC-MS 检测方法相比较，本研究
方法指认了 9 个色酮类化合物共有峰，其中 2 个是
极性较大的不易挥发的四氢色原酮类化合物，这一
类色酮化合物在以往的GC-MS报道中未能检测到。
HPLC 指纹图谱可以结合 GC-MS 分析方法，为沉香
的鉴定提供更全面的信息。
4.3 结论
本研究首次采用 HPLC 指纹图谱结合聚类分析
对 10 批国产沉香药材样品进行研究，该方法精密
S2
S6
S4
S1
S5
S7
S9
S3
S8
S10
0 5 10 15 20 25
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度、稳定性、重复性和分离度良好。通过比较确定
了 24 个共有峰，指认其中 9 个峰。通过相似度评价，
发现沉香药材 HPLC 指纹图谱有一定的差别，结合
聚类分析对指纹图谱进行综合评价，评价结果与相
似度结果基本一致。本研究方法能比较直观、全面
地从整体上反映沉香药材的质量，为沉香的鉴定和
质量标准提供科学依据，同时，共有峰中未鉴定的
成分有待进一步研究。
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