全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 6 期 2015 年 3 月
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建昌帮蜜糠炒白术炮制工艺优化
王文凯,翁 萍,张晓婷,杨 梅
江西中医药大学,江西 南昌 330004
摘 要:目的 优选建昌帮蜜糠炒白术的炮制工艺。方法 以白术内酯 I、白术内酯 II、白术内酯 III、苍术酮、醇浸出物质
量分数为指标,HPLC 法及《中国药典》2010 年版中的醇浸出物法测定各个指标,采用 L9(34) 正交试验,确定其最佳炮制
工艺参数:蜜糠用量、炒制温度和炒制时间。结果 蜜糠炒白术的最佳工艺:辅料蜜糠用量为 50%(占药材质量的百分比),
炒制温度为 200 ℃,炒制时间为 5 min。结论 最佳炮制工艺经验证,稳定可行。
关键词:白术;建昌帮;蜜糠;炮制工艺;白术内酯 I;白术内酯 II;白术内酯 III;苍术酮;醇浸出物
中图分类号:R283.1 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2015)06 - 0857 - 04
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.06.013
Optimization of processing technology for Atractylodis Macrocephalae Rhizoma
fried with honey rice chaff in Jian Chang Bang
WANG Wen-kai, WENG Ping, ZHANG Xiao-ting, YANG Mei
Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China
Abstract: Objective To optimize the processing technology of Atractylodis Macrocephalae Rhizoma fried with honey rice chaff in
Jian Chang Bang. Methods With the contents of atractylenolide I, atractylenolide II, atractylenolide III, atractylone, and alcohol
extract as indexes, which were determined by HPLC and alcohol extract method in Pharmacopoeia 2010 edition, L9(34) orthogonal test
was used to determine the best processing technology. Results The optimum processing technology of Atractylodis Macrocephalae
Rhizoma fried with honey rice chaff was as following: the amount of honey rice chaff 50%, frying temperature 200 ℃, and frying time
5 min. Conclusion The optimum processing technology is stable and feasible by verification.
Key words: Atractylodis Macrocephalae Rhizoma; Jian Chang Bang; honey rice chaff; processing technology; atractylenolide I;
atractylenolide II; atractylenolide III; atractylone; alcohol extract
“建昌帮”发祥于江西南城县,是我国南方古药
帮和中药炮制的重要流派之一,以擅长传统饮片加
工炮制、药材集散交易著称,与“樟树帮”合称为
江西帮,为全国 13 个大药帮之一。药界至今还有“药
不到樟树不齐,药不过建昌不灵”之说。
目前《中国药典》2010 年版收载了麸炒白术[1],
近年,进行了麸炒白术系列研究[2-3]。而建昌帮白术
炮制品有漂白术、蜜糠炒白术、土炒白术、焦白术
等,建昌帮的炮制工艺、炮制辅料及炮制工具都颇
具特色,如在辅料方面,选料独特,其中犹以辅料
砻糠的运用最具特色、用途最广,有蜜糠炙、糠煨、
糠炆、糠煅、糠炒 5 种特色炮制方法,使“南糠北
麸”成为南北药帮炮制流派的一个显著区别[4]。
但是,传统特色炮制工艺的可控性差,经验性
强,为了减少主观因素,增加客观控制指标,本实
验对建昌帮蜜糠炒白术炮制过程中的具体参数进行
考察,以规范建昌帮特色炮制工艺。
1 仪器与材料
Dionex UltiMate 3000 高效液相色谱仪,赛默飞
世尔科技公司;PDA-3000 二极管阵列紫外检测器;
Chromeleon 工作站;Sartorious 万分之一电子天平、
Sartorious 十万分之一电子天平,梅特勒-托利多仪
器上海有限公司;JZX-9070MBE 数显鼓风干燥箱,
上海博迅实业有限公司医疗设备厂;Raytek Raynger
ST20 红外测温仪,美国 Raytek 公司。SRE 52CS 旋
转蒸发仪,上海亚荣生化仪器厂;HH-S 恒温水浴锅,
收稿日期:2014-11-25
基金项目:江西中医药大学樟帮、建昌帮炮制技术传承研究专项(2012ZX3004)
作者简介:王文凯,男,教授,研究方向为中药炮制工艺及饮片质量控制研究。E-mail: jxwwkyx@163.com
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江苏省金坛市医疗仪器厂;中药粉碎机,长沙旭朗
粉碎机械有限公司;KQ-5200 型数控超声波清洗器,
昆山市超声仪器有限公司。
白术 Atractylodis Macrocephalae Rhizoma,产自
浙江磐安,经江西中医药大学赖学文教授鉴定为菊
科植物白术 Atractylodes macrocephala Koidz. 的干
燥根茎;蜂蜜,上海冠生园蜂制品有限公司,批号
134245H2;谷糠,购自南昌市郊区一农家;白术内
酯 I(批号 130617,质量分数≥98%)、白术内酯 II
(批号 130522,质量分数≥98%)、白术内酯 III(批
号 130526,质量分数≥98%),四川省维克奇生物
科技有限公司;苍术酮,批号 130329,质量分数≥
98%,四川普菲德生物科技有限公司;甲醇,色谱
纯,西陇化工股份有限公司;乙醇,分析纯,天津
市恒兴化学试剂制造有限公司。
2 方法与结果
2.1 白术内酯及苍术酮定量测定
2.1.1 色谱条件 色谱柱为 Hypersil ODS2 柱(250
mm×4.6 mm,5 μm),苍术酮流动相为甲醇-水
(95∶5),体积流量 1 mL/min,柱温 30 ℃;白术内
酯 I、II、III 流动相为甲醇-水(65∶35),体积流量
1 mL/min,柱温 30 ℃;白术内酯 I、白术内酯 III、
苍术酮检测波长为 220 nm,白术内酯 II 检测波长为
276 nm,进样量 10 μL,色谱图见图 1。
1-苍术酮 2-白术内酯 III 3-白术内酯 I 4-白术内酯 II
1-atractrylone 2-atractylenolide III 3-atractylenolide I 4-atractylenolide II
图 1 对照品 (A) 及白术样品 (B) 的 HPLC 图
Fig. 1 HPLC of reference substance (A) and sample of Atractylodis Macrocephalae Rhizoma (B)
2.1.2 对照品溶液的制备
(1)对照品储备溶液制备:精密称取苍术酮对
照品 16.52 mg 于 10 mL 量瓶中,加甲醇定容制成苍
术酮质量浓度为 1.652 mg/mL 的对照品储备溶液;
分别称取对照品白术内酯 I 5.23 mg、白术内酯 II
4.93 mg、白术内酯 III 6.06 mg于 3个 25 mL量瓶中,
加甲醇定容制成白术内酯 I、II、III 对照品储备溶液,
其质量浓度分别为 209.2、197.2、242.4 μg/mL。
(2)对照品溶液制备:精密量取苍术酮对照品
储备溶液 1.25 mL 于 25 mL 量瓶中,加甲醇定容制
成苍术酮质量浓度为 82.6 μg/mL 的对照品溶液;分
别精密量取白术内酯 I、II、III 对照品储备溶液各 1
mL 于 10 mL 量瓶中,加甲醇定容制成白术内酯 I、
II、III 质量浓度分别为 20.92、19.72、24.24 μg/mL
的混合对照品溶液。
2.1.3 供试品溶液的制备 取白术生品及其炮制品
适量,粉碎,过 4 号筛,分别取样品粉末 0.5 g,精
密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇 10 mL,
称定质量,超声 30 min 后,称定质量,用甲醇补足
减失的质量,摇匀,静置,取上清液过 0.45 μm 滤
膜,即得。
2.1.4 线性关系考察 精密吸取苍术酮对照品溶液
5、10、15、20、25、30 μL,按“2.1.1”项色谱条
件进样,记录色谱峰面积。以峰面积为纵坐标(Y),
对照品质量为横坐标(X),进行线性回归,回归方
程为 Y=85.293 X+1.155 8,r=0.999 9,结果表明,
苍术酮在 0.413~2.478 μg 呈良好的线性关系。精密
吸取白术内酯混合对照品溶液 2、5、8、10、15、
20 μL,按上述方法操作,得白术内酯 I 回归方程
Y=66.770 X-0.030 6,r=0.999 7,结果表明白术
内酯 I 在 41.84~418.4 ng 呈良好的线性关系;白术
内酯 II 回归方程 Y=86.245 X-0.134 5,r=0.999 9,
结果表明,白术内酯 II 在 39.44~394.4 ng 呈良好
的线性关系;白术内酯 III 回归方程 Y=40.825 X-
0.085 6,r=0.999 9,结果表明,白术内酯 III 在
48.48~484.8 ng 呈良好的线性关系。
2.1.5 精密度试验 精密吸取各对照品溶液 10
μL,连续进样 6 次,测定峰面积,得到苍术酮、白
术内酯 I、白术内酯 II、白术内酯 III 峰面积的 RSD
分别为 0.49%、0.09%、0.06%、0.03%,表明仪器
A 1
1
2 3
2 3
4
4
B
0 5 10 15 0 10 20 30 40 50 0 10 20 30 40 50
t/min
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精密度良好。
2.1.6 稳定性试验 精密称取生白术粉末 0.5 g,按
“2.1.3”项下操作制备供试品溶液,在“2.1.1”项色
谱条件下测定,分别在 0、3、6、12、15、24 h 进
样 10 μL,记录色谱峰面积,得到苍术酮、白术内
酯 I、白术内酯 II、白术内酯 III 峰面积的 RSD 分别
为 0.03%、0.01%、0.06%、0.17%,表明供试品溶
液在 24 h 内稳定性良好。
2.1.7 重复性试验 精密称取生白术粉末 0.5 g共 6
份,按“2.1.3”项下操作制备供试品溶液,在“2.1.1”
项色谱条件下测定,记录色谱峰面积,计算质量分
数,得到苍术酮、白术内酯 I、白术内酯 II、白术内
酯 III质量分数的RSD分别为 0.49%、0.92%、1.12%、
1.19%,符合分析要求,说明该方法重复性良好。
2.1.8 加样回收率试验 精密称取已知质量分数的
生白术粉末(苍术酮、白术内酯 I、白术内酯 II、白
术内酯 III质量分数分别为 3.778、0.190、0.165、0.441
mg/g)6 份,分别加入苍术酮、白术内酯 I、白术内
酯 II、白术内酯 III 的对照品储备溶液 1.25、0.5、
0.5、1.0 mL,按“2.1.3”项方法制备,在“2.1.1”
项色谱条件下测定,进样量 10 μL,计算回收率,
得到苍术酮、白术内酯 I、白术内酯 II、白术内酯
III 的平均回收率分别为 98.99%、98.90%、99.90%、
99.34%,RSD 分别为 0.78%、1.24%、0.32%、0.56%,
表明此方法回收率较好。
2.1.9 样品测定 取正交试验制备的 9 份蜜糠炒白
术样品,按“2.1.3”项下操作制备供试品溶液,按
“2.1.1”项色谱条件进样测定,测得各个指标成分的
峰面积,计算其质量分数,结果见表 1。
2.2 白术醇溶性浸出物测定
取正交试验制备的 9 份蜜糠炒白术样品粉末各
2 g,精密称定,置 150 mL 锥形瓶中,精密加入 60%
乙醇溶液 80 mL,按《中国药典》2010 年版一部[2]
醇溶性浸出物测定法(附录 X A)项下的热浸法测
定,结果见表 1。
2.3 正交试验优选
2.3.1 白术药材的炮制 先将锅预热至锅底微红,
撒入一定量蜜糠至冒烟时,投入干燥白术片,在一
定温度下不断翻炒一定的时间,至药片松脆易折,
呈黄色,透香气,取出,筛去蜜糠及灰屑,趁热入
容器内密闭转橘黄色时即得。
蜜糠的制备:取净糠加蜜水(定量的炼蜜加适
量开水稀释,净糠每 100 kg,用炼蜜 20 kg),文火
加热炒至表皮光亮,色泽加深,微粘手,取出摊凉。
2.3.2 正交试验设计 通过文献资料并结合预试验
确定因素水平。选择蜜糠用量(A,占药材质量的
百分比)、炒制温度(B)、炒制时间(C)为考察因
素,以白术内酯 I、白术内酯 II、白术内酯 III、苍
术酮、醇浸出物质量分数为指标,按 L9(34) 安排正
交试验,试验设计与结果见表 1。
用综合加权评分法对其进行评价,白术内酯 I
的权重系数为 0.3、白术内酯 II、白术内酯 III、苍术
表 1 L9(34) 正交试验设计与结果
Table 1 Design and results of L9(34) orthogonal test
质量分数/% 试验号 A/% B/℃ C/min D (空白)
白术内酯 I 白术内酯 II 白术内酯 III 苍术酮
醇浸出物/% 综合评分
1 40 (1) 170 (1) 3 (1) (1) 0.017 0.013 0.036 0.278 43.26 40.71
2 40 (1) 200 (2) 5 (2) (2) 0.020 0.021 0.048 0.307 42.20 54.58
3 40 (1) 230 (3) 7 (3) (3) 0.018 0.017 0.044 0.262 44.76 49.84
4 50 (2) 170 (1) 5 (2) (3) 0.019 0.022 0.052 0.372 49.48 53.75
5 50 (2) 200 (2) 7 (3) (1) 0.021 0.021 0.050 0.306 45.23 57.26
6 50 (2) 230 (3) 3 (1) (2) 0.023 0.022 0.044 0.328 42.70 56.67
7 60 (3) 170 (1) 7 (3) (2) 0.016 0.016 0.035 0.355 45.11 38.04
8 60 (3) 200 (2) 3 (1) (3) 0.019 0.018 0.047 0.298 44.30 51.12
9 60 (3) 230 (3) 5 (2) (1) 0.024 0.019 0.049 0.358 47.29 56.43
K1 48.37 44.17 49.50 51.47
K2 55.89 54.32 54.92 49.76
K3 48.53 54.31 48.38 51.57
R 7.52 10.15 6.54 1.81
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酮权重系数各为 0.2,醇浸出物权重系数为 0.1,苍
术酮测得评分=−xi/xmax×0.2×100,其余各项评分
均为 y=xi/xmax×权重系数×100,总分为各项指标
评分的总和。结果见表 1,方差分析见表 2。
表 2 方差分析
Table 2 Analysis of variance
方差来源 偏差平方和 自由度 F 值 显著性
A 110.742 2 17.931
B 206.045 2 33.362 P<0.05
C 73.402 2 11.885
D(误差) 6.176 2
由上述直观分析可知,影响因素的大小顺序为
B>A>C,方差分析表明 B 因素对试验结果具有显
著影响。取各因素较高水平的组合,得到最佳工艺
条件为 A2B2C2,即蜜糠用量为 50%,炒制温度为
200 ℃,炒制时间为 5 min。
2.4 验证试验
取适量大小均匀的生白术饮片 3 份,采取优选
出的工艺条件进行炮制,白术内酯 I、II、III 及苍术
酮、醇浸出物的测定及综合评分结果见表 3。可见
其均值分别为 0.022%、0.021%、0.048%、0.303%、
48.52%,综合评分均值为 58.57,说明优选的最佳
炮制工艺稳定、可行。
表 3 验证试验结果
Table 3 Results of verification
批次 白术内酯 I/% 白术内酯 II/% 白术内酯 III/% 苍术酮/% 醇浸出物/%
1 0.023 0.020 0.047 0.293 49.20
2 0.020 0.022 0.048 0.299 47.66
3 0.023 0.021 0.050 0.317 48.71
3 讨论
白术生品含挥发油较多,可用于燥湿,而炒制
品则可利用内酯类或其他成分达到和胃或消导等其
他作用[5],所以,白术炒制后可缓和燥性,增强健
脾作用。郝延军等[6-7]研究白术内酯 I、III 对脾虚大
鼠胃肠道吸收影响和对酶活性的影响,都表明白术
内酯 I 是健脾运脾的有效成分之一。李伟等[8]以唾
液淀粉酶活性、家兔小肠对营养物质的吸收以及家
兔离体肠管的作用为指标,对白术内酯 I、白术内
酯 III 进行活性研究,结果表明白术内酯 I 具有较强
的增强唾液淀粉酶活性、促进肠管吸收、调节肠道
功能的作用。所以,综合评分时将白术内酯 I 设定
的权重系数较高,设为 0.3,白术内酯 II、白术内酯
III、苍术酮都为 0.2,经蜜糠炮制后,炮制品苍术酮
质量分数明显较生品(3.778 mg/g)降低,根据白术
“减酮减燥、增酯增效”的炮制理论[9],苍术酮设为
负数,醇浸出物作为一类总成分评价的参考指标,
故设为 0.1。综合评分得到最佳炮制工艺,即蜜糠用
量为 50%,炒制温度为 200 ℃,炒制时间为 5 min。
糠为稻谷的外壳,其色谷黄,性温,入脾胃经,
具健脾祛湿作用。蜜糠炒制,取糠和蜂蜜的性能,
增强药物滋补健脾的功效。故蜜糠炒白术可借谷糠
之气以增强芳香醒脾和胃作用。与《中国药典》2010
年版[1]收载的麸炒白术相比,在炮制药材过程中发
现蜜糠炒白术受热更均匀,这可能与谷糠表面积较
麦麸大且用量较麦麸多有关。另外,蜜糠炒制后的
白术色泽更黄,这可能与蜜糠更容易着色有关。从
而,蜜糠炒白术与目前主流炮制方法相比是颇具特
色的一种炮制方法。
参考文献
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