全 文 ：·668· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 5 期 2014 年 3 月

• 药理与临床 •
侧柏叶炮制前后对血热复合出血模型大鼠的止血作用比较
刘 晨 1，柳 佳 1，张 丽 1，李帅锋 1，周丽娜 1，丁安伟 1*，喻 斌 2
1. 南京中医药大学 江苏省方剂高技术研究重点实验室，江苏 南京 210023
2. 南京中医药大学 中药药理省部共建实验室，江苏 南京 210023
摘 要：目的 考察侧柏叶炮制前后对干酵母致血热复合出血模型大鼠的止血作用。方法 以云南白药为阳性药，对照组和
模型组 ig 羧甲基纤维素钠（CMC-Na），阳性组、侧柏叶生品组、侧柏叶炭品组分别 ig 给予相应的药物，连续给药 7 d，第 7
天给药后复制血热复合出血模型，考察大鼠全血及血浆黏度、血浆凝血酶时间（TT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝
血酶原时间（PT）、纤维蛋白原（FIB）的量、红细胞计数（RBC）、血红蛋白的量（HGb）、红细胞压积（HCT）、血小板计
数（PLT）、血小板压积（PCT）、平均血小板体积（MPV）、血小板分布宽度（PDW）及肺组织病理学变化。结果 与对照
组比较，模型组大鼠各切变率下全血黏度及血浆黏度明显增加（P＜0.05、0.01），RBC、HGb 及 HCT 显著升高（P＜0.01）；
TT 和 APTT 显著延长，PT 显著缩短，FIB 的量显著增加（P＜0.01）；PLT、PCT、MPV 和 PDW 明显增加（P＜0.05、0.01）；
侧柏叶生品及炭品均可明显降低血热复合出血模型大鼠全血低切黏度及血浆黏度（P＜0.05）；生品组及炭品组均可不同程度降
低 RBC、HGb 和 HCT（P＜0.05、0.01）；生品组可明显缩短 TT 和 APTT（P＜0.05、0.01），明显降低 FIB 的量（P＜0.05）；炭
品组可显著缩短 TT 和 APTT（P＜0.01），显著降低 FIB 的量（P＜0.01），明显降低大鼠 PLT、PCT、MPV 及 PDW（P＜0.05）；
生品组及炭品组均可使肺损伤得到明显修复（P＜0.05、0.01）。结论 侧柏叶生品和炭品均有一定的止血作用，可不同程
度地改善血热复合出血模型大鼠的血液流变学及血小板相关参数，改善肺出血等病理性损伤，主要通过作用于内源性凝血途
径改善凝血功能，且炒炭后止血作用增强。
关键词：侧柏叶；侧柏炭；血热出血；止血；凝血
中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2014)05 - 0668 - 05
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.05.014
Comparison on hemostasis of Platycladi Cacumen before and after processing
on blood heat and hemorrhage syndrome rat model
LIU Chen1, LIU Jia1, ZHANG Li1, LI Shuai-feng1, ZHOU Li-na1, DING An-wei1, YU Bin2
1. Jiangsu Key Laboratory for High Technology Research of Traditional Chinese Medicine Fornulae, Nanjing University of Chinese
Medicine, Nanjing 210023, China
2. Province and Ministry Cooperation Laboratory of Pharmacology of Chinese Materia Medica, Nanjing University of Chinese
Medicine, Nanjing 210023, China
Abstract: Objective To discuss the hemostasis of Platycladi Cacumen (PC) before and after processing on the blood heat and
hemorrhage syndrome rat model induced by dry yeast. Methods The SD rats were divided into five groups. Yunnan Baiyao was taken
as the positive control drug. The rats in the control and model groups were fed with CMC-Na for 7 d, and the rats in other groups were
fed with corresponding drugs simultaneously. On day 7, the blood heat and hemorrhage syndrome rat model was established. Indexes
including the whole blood viscosity, plasma viscosity, thrombin time (TT), activated partial thromboplastin time (APTT), prothrombin
time (PT), fibrinogen content (FIB), red blood cell (RBC), hemoglobin (HGb), hematocrit (HCT), blood platelet count (PLT),
thrombocytocrit (PCT), mean platelet volume (MPV), and platelet distribution width (PDW) were detected, and the histopathological
examinations of lungs among each group were compared. Results Compared with the control group, the RBC, HGb, and HCT of rats

收稿日期：2013-09-21
基金项目：国家自然科学基金资助项目（81173547）；江苏省普通高校研究生创新计划（CXZZ12-0621）
作者简介：刘 晨（1991—），女，硕士研究生，研究方向为中药炮制机制、中药质量标准。Tel: 13852292660 E-mail: chenliumoon@163.com
*通信作者 丁安伟 Tel: (025)85811523 E-mail: awding105@163.com
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in the model group increased significantly ( P < 0.01 ), with significant increase in high, middle and low whole blood viscosities and
plasma viscosity (P < 0.05, 0.01) of rats in the model group; TT and APTT were notably prolonged, while PT was notably shortened,
with significant increase in FIB content (P < 0.01); Additionally, PLT, PCT, MPV, and PDW remarkably increased (P < 0.05, 0.01).
After ig administration of PC or Platycladi Cacumen Carbonisatum (PCC), the low whole blood viscosities and plasma viscosity were
remarkably decreased (P < 0.05, 0.01), and RBC, HGb, and HCT were remarkably decreased (P < 0.05, 0.01); TT and APTT of PC
group were remarkably shortened (P < 0.05, 0.01), with remarkable decrease in FIB content (P < 0.05); TT and APTT of PCC group
were significantly shortened (P < 0.01), with significant decrease in FIB content (P < 0.01); Meanwhile, PLT, PCT, MPV, and PDW of
PCC group remarkably decreased (P < 0.05); The injury of lungs was also improved in both groups. Conclusion Both PC and PCC
show the effect of hemostasis by ameliorating hemorheological parameters and platelet parameters to different degrees, improving
coagulation function mainly by acting on the endogenous coagulation. Simultaneously, they could ameliorate the damaged lungs, but
the therapeutical effect is stronger after being carbonized.
Key words: Platycladi Cacumen; Platycladi Cacumen Carbonisatum; blood heat and hemorrhage syndromes; hemostasis; blood coagulation

侧柏叶又名柏叶、丛柏叶、扁柏、云片柏等，
为柏科植物侧柏Platycladus orientalis (L.) Franco的
干燥枝梢和叶[1]；始载于《神农本草经》，列为木部
上品，味苦涩，性寒，归肺、肝、脾经，具凉血止
血、化痰止咳、生发乌发之功效，临床用于治疗出
血、痛风、风湿性关节炎、感冒、咳嗽、支气管炎、
哮喘、高血压及激素混乱引起的多毛症和脱发等疾
病[2]。侧柏叶炒炭后，寒凉之性减弱，止血功效增
强，临床用于血热所致各种出血证[3]，但其止血作
用机制尚不明确。以往学者大多采用正常动物或体
外实验研究侧柏叶的止血功效，而对侧柏炭的研究
甚少。近年来研究发现，干酵母致血热出血模型成
熟稳定[4-5]，可引起炎症损伤，导致血液流变学和凝
血功能相关指标异常及肺组织出血等现象。本实验
拟在干酵母致大鼠血热出血模型上从血液流变学、
凝血功能、血小板功能等方面探讨侧柏叶炮制前后
止血作用的异同。
1 材料
1.1 动物
SD 大鼠，SPF 级，雄性，体质量 180～220 g，
由浙江省实验动物中心提供，合格证号 SCXK（浙）
2008-0033。
1.2 仪器及试剂
血液流变仪（北京中勤世帝科学仪器有限公
司）；全自动血细胞分析仪（日本光电工业株式会
社）；离心机（上海安亭科学仪器厂）；LG-PABER
血小板聚集凝血因子分析仪（北京世帝科学仪器公
司）。无水乙醇（无锡市亚盛化工有限公司）；羧甲
基纤维素钠（CMC-Na）、EDTA（国药集团化学试
剂有限公司）；枸橼酸纳、水合氯醛（天津市科密
欧化学试剂开发中心）；试剂盒：凝血酶时间（TT，
批号 STG20301-35A）、纤维蛋白原（FIB，批号
STG20401-34 ）、 凝 血 酶 原 时 间 （ PT ， 批 号
STG20101-49）、活化部分凝血活酶时间（APTT，
批号 ST20201-56），均购自北京中勤世帝科学仪器
有限公司。
1.3 药物
侧柏叶生品（Platycladi Cacumen，PC）购自河
南辉县，经南京中医药大学中药鉴定教研室吴启南
教授鉴定为柏科植物侧柏 Platycladus orientalis (L.)
Franco 的干燥枝梢和叶。将侧柏叶生品按《中国药
典》2010 年版规定炒至表面焦褐色、内部焦黄色即
得侧柏叶炭品（Platycladi Cacumen Carbonisatum，
PCC）。分别取侧柏叶生品和炭品适量，加 10 倍量
95%乙醇回流提取 2 次，每次 2 h，趁热滤过，残渣
加 10 倍量水煎煮 2 次，每次 2 h，趁热滤过，合并
4 次滤液并浓缩至浸膏，称取浸膏适量，加 0.5%
CMC-Na 溶解并稀释至 0.2 g/mL（按生药量计算），
即得侧柏叶生品和炭品药液（生品浸膏含槲皮苷
1.160 mg/g、槲皮素 0.015 mg/g，炭品浸膏含槲皮苷
0.218 mg/g、槲皮素 0.149 mg/g）。干酵母（安琪酵
母股份有限公司），云南白药（云南白药集团股份
有限公司，批号 ZI11023）。
2 方法[6]
2.1 分组、造模及给药
取 SD 大鼠 50 只，随机分为对照组、模型组、
阳性组、侧柏叶生品组（以下简称生品组）、侧柏叶
炭品组（以下简称炭品组），每组 10 只。阳性组 ig
给予 0.025 g/mL 云南白药的 0.5% CMC-Na 混悬液
（0.5 g/kg），生品组、炭品组分别 ig 给予侧柏叶生品
药液、炭品药液（生药 4.0 g/kg），对照组和模型组
分别 ig 给予等体积 0.5% CMC-Na 溶液，连续给药 7
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d，每天 2 次，给药体积均为 10 mL/kg。第 7 天给药
后，模型组及各给药组大鼠 sc 20%干酵母混悬液，
对照组 sc 等体积生理盐水，注射体积均为 10 mL/kg；
注射 7 h 后，模型组及各给药组大鼠 ig 给予 1 mL 无
水乙醇，对照组 ig 给予等体积蒸馏水；1 h 后对照组
和模型组 ig 给予 0.5% CMC-Na 溶液，其余各给药
组 ig 给予相对应的药物，给药体积均为 10 mL/kg。
2.2 血液流变学及凝血功能相关指标的测定
第 8 天末次给药 40 min 后，大鼠麻醉，颈总动
脉取血，3.8%枸橼酸钠（1∶9）抗凝，1 mL 全血
分装，测定全血高、中、低切黏度，剩余全血以 3 000
r/min 离心 10 min，取血浆，测定血浆黏度及血浆
TT、APTT、PT 和 FIB 水平；另取 0.5 mL 全血，EDTA
（1∶9）抗凝，测定红细胞计数（RBC）、血红蛋白
的量（HGb）、红细胞压积（HCT）。
2.3 血小板功能指标的测定
取 0.5 mL 全血，EDTA（1∶9）抗凝，测定血
小板计数（PLT）、血小板压积（PCT）、平均血小
板体积（MPV）和血小板分布宽度（PDW）。
2.4 组织学检查
取肺组织，生理盐水冲洗，肉眼观察出血状
况，10%甲醛溶液浸泡固定，浸蜡、包埋、苏木素-
伊红染色、切片，光镜下观察病理变化。在 100
倍光镜下选取 5 个不重叠的视野，根据肺泡壁增厚
及肺泡腔狭窄程度、肺间隔充血、间质出血及炎症
细胞浸润评价肺损伤程度，每项评 0～4 分，正常：
0 分；轻度即累及＜25%肺组织：1 分；中度即累及
25%～50%肺组织：2 分；重度即累及 50%～75%肺
组织：3 分；极严重即累及＞75%肺组织：4 分[7]。
2.5 统计学方法
采用 SPSS 16.0 统计软件对数据进行双样本 t
检验及方差分析，实验数据以 ±x s 表示。
3 结果
3.1 侧柏叶炮制前后对血热复合出血模型大鼠血
常规及血液流变学相关指标的影响
与对照组比较，模型组大鼠 RBC、HGb 和 HCT
显著增加，全血高、中、低切黏度及血浆黏度显著
增加（P＜0.05、0.01）。与模型组比较，云南白药
可使大鼠 HGb 和 HCT 明显减少（P＜0.05），RBC
有减少趋势，但无显著差异；全血高、中、低切黏
度及血浆黏度均明显降低（P＜0.05、0.01）；生品
组及炭品组均可不同程度降低 RBC、HGb 和 HCT
（P＜0.05、0.01），明显降低大鼠全血低切黏度及血
浆黏度（P＜0.05），结果见表 1 和 2。
表 1 侧柏叶炮制前后对血热复合出血模型大鼠血常规指标的影响 ( 8=± n , sx )
Table 1 Effects of PC and PCC on blood routine index in blood heat and hemorrhage model rats ( 8=± n , sx )
组别 剂量 / (g·kg−1) RBC / (×1012·L−1) HGb / (g·L−1) HCT / %
对照 — 6.82±0.59 109.67±10.31 38.40±3.53
模型 — 8.64±0.78△△ 142.00± 9.70△△ 48.62±3.74△△
云南白药 0.5 7.45±0.94 120.50±15.59* 41.75±5.04*
生品 7.16±0.67** 116.00±10.39** 38.50±2.96**
炭品
4.0
4.0 7.28±0.61* 114.60±11.46** 39.70±3.41**
与对照组比较：△P＜0.05 △△P＜0.01；与模型组比较：*P＜0.05 * *P＜0.01，下表同
△P < 0.05 △△P < 0.01 vs control group; *P < 0.05 * *P < 0.01 vs model group, same as below
3.2 侧柏叶炮制前后对血热复合出血模型大鼠凝
血功能的影响
与对照组比较，模型组大鼠 PT 显著缩短（P＜
0.01），TT 和 APTT 显著延长（P＜0.01），FIB 水平显
著升高（P＜0.01）。与模型组比较，阳性药可使 PT
显著缩短（P＜0.01），TT和APTT显著缩短（P＜0.01），
FIB 水平显著降低（P＜0.01）；生品组可明显缩短 TT
和 APTT（P＜0.05、0.01），明显降低 FIB 水平（P＜
0.05）；炭品组可显著缩短 TT 和 APTT（P＜0.01），显
著降低 FIB 水平（P＜0.01）。与生品组比较，炭品组
可显著缩短 APTT（P＜0.01）；生品组及炭品组均可
不同程度缩短 PT，但均无显著差异。结果见表 3。
3.3 侧柏叶炮制前后对血热复合出血模型大鼠血
小板参数的影响
与对照组比较，模型组大鼠 PLT、PCT、MPV 及
PDW 明显增加（P＜0.05、0.01）。与模型组比较，云
南白药可明显降低大鼠 MPV 和 PDW（P＜0.05），PLT
和 PCT 有减小趋势，但无显著差异；生品组可显著
减小 MPV（P＜0.01），而 PLT、PCT、PDW 虽有下
降趋势，但无显著差异；炭品组可明显降低大鼠 PLT、
PCT、MPV 及 PDW（P＜0.05）。与生品组比较，炭
品组 PLT、PCT、PDW 均有减小趋势，结果见表 4。
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表 2 侧柏叶炮制前后对血热复合出血模型大鼠全血及血浆黏度的影响 ( 8=± n , sx )
Table 2 Effects of PC and PCC on blood and plasma viscosity in blood heat and hemorrhage model rats ( 8=± n , sx )
全血黏度 / (mPa·s) 组别 剂量 / (g·kg−1)
200 s−1 30 s−1 5 s−1 1 s−1
血浆黏度 /
(mPa·s)
对照 — 4.55±0.22 6.11±0.44 10.74±0.87 23.23±2.15 2.17±0.08
模型 — 5.41±0.59△△ 7.19±0.94△ 13.50±1.72△△ 30.97±3.09△△ 2.55±0.19△△
云南白药 0.5 4.58±0.37* 6.23±0.59* 10.76±0.71** 23.51±2.37** 2.19±0.21*
生品 5.14±0.56 6.94±0.77 12.25±1.43 26.72±1.55* 2.27±0.17*
炭品
4.0
4.0 5.30±0.11 7.04±0.14 12.20±0.35 27.24±1.02* 2.17±0.21*
表 3 侧柏叶炮制前后对血热复合出血模型大鼠凝血功能的影响 ( 8=± n , sx )
Table 3 Effects of PC and PCC on coagulation function in blood heat and hemorrhage model rats ( 8=± n , sx )
组别 剂量 / (g·kg−1) TT / s APTT / s PT / s FIB / (g·L−1)
对照 — 20.83±1.30 16.10±1.62 14.08±0.89 5.74±0.15
模型 — 23.31±1.70△△ 20.13±1.11△△ 12.78±1.43△△ 6.01±0.10△△
云南白药 0.5 20.97±1.26** 16.54±1.58** 11.51±1.18** 5.84±0.22**
生品 21.80±1.68* 18.23±1.17** 12.09±0.56 5.88±0.16*
炭品
4.0
4.0 20.23±2.22** 13.27±1.75** ▲▲ 12.62±0.80 5.85±0.19**
与生品组比较：▲▲P＜0.01
▲▲P < 0.01 vs PC group
表 4 侧柏叶炮制前后对血热复合出血模型大鼠血小板参数的影响 ( 8=± n , sx )
Table 4 Effects of PC and PCC on PLT, PCT, MPV, and PDW in blood heat and hemorrhage model rats ( 8=± n , sx )
组别 剂量 / (g·kg−1) PLT / (×109·L−1) PCT MPV / fL PDW / fL
对照 — 387.75±26.76 0.24±0.03 6.14±0.21 14.70±0.21
模型 — 451.40±38.53△ 0.29±0.03△ 6.47±0.15△△ 15.18±0.44△
云南白药 0.5 411.75±71.58 0.25±0.05 6.20±0.24* 14.58±0.18*
生品 431.20±51.06 0.25±0.03 6.02±0.08** 14.70±0.50
炭品
4.0
4.0 386.50±42.75* 0.23±0.02* 6.16±0.23* 14.52±0.27*
3.4 肺组织观察
对照组大鼠肺脏色泽粉红、形态正常，肺间
隔及支气管结构清晰，肺泡结构清晰，上皮完整，
肺泡壁毛细血管无扩张，腔内无渗出物，无出血。
与对照组比较，模型组大鼠肺表面有较多出血
点，肺泡间隔毛细血管扩张充血，纤维组织增生，
肺间质出血，肺泡腔内多有红细胞浸润，部分肺
泡结构被破坏，局部炎细胞浸润（P＜0.01）。与
模型组比较，云南白药可明显改善肺组织间质出
血、间隔出血、肺泡壁增厚及炎细胞浸润等病理
性改变（P＜0.05、0.01）；生品组和炭品组均可
明显降低肺损伤程度（P＜0.05、0.01）。与生品
组比较，炭品组损伤程度有减弱趋势，结果见表
5 和图 1。
表 5 大鼠肺组织损伤评分 ( 8=± n , sx )
Table 5 Scoring of lung tissues in rats ( 8=± n , sx )
肺组织损伤程度评分 组别 剂量 / (g·kg−1)
间质出血 间隔充血 炎细胞浸润 肺泡壁增厚
对照 — 0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00
模型 — 3.67±0.52△△ 3.50±0.55△△ 3.00±0.63△△ 3.67±0.52△△
云南白药 0.5 2.33±0.52** 2.17±0.41** 2.00±0.63* 1.67±0.52**
生品 3.00±0.00** 2.67±0.52 2.33±0.52* 2.83±0.75*
炭品
4.0
4.0 2.83±0.41** 2.50±0.55** 2.17±0.41* 2.17±0.75**

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对照 模型 云南白药 生品 炭品
图 1 大鼠肺组织病理学检查结果
Fig. 1 Histopathological sections of lung tissues in rats
4 讨论
本实验前期工作得出 4 g/kg 侧柏炭有较好的止
血作用，故本实验侧柏叶生品、炭品组的给药剂量
均为临床等效剂量的 3.2 倍，即 4 g/kg。
血液黏度主要由血浆黏度、红细胞压积、红细
胞聚集性、红细胞变形性等内在因素决定，其黏度
值越大，血液流动性越差。sc 干酵母可导致局部溃
烂，无水乙醇 ig 可灼烧胃黏膜，两者结合造模，引
起机体剧烈炎症反应[4,8]，热蕴于脏器，烧灼脉络，
使大鼠体温升高、体液流失、血液浓缩、黏稠度增
加，最终导致 WBC 和 HGb 浓度相对增加。侧柏叶
生品和炭品均可不同程度降低 RBC、HGb、HCT、
全血及血浆黏度，从而改善血液流动性。
干酵母结合无水乙醇诱导的出血可能主要与
干扰内源性凝血系统功能有关，使 TT 和 APTT 延
长，FIB 量增加，机体出血倾向增大，当组织损伤
出血时，组织因子释放增加，外源性凝血系统被激
活，促使 PT 缩短。生品和炭品通过缩短 TT 和
APTT、降低 FIB 量，可不同程度改善血热复合出
血模型大鼠的凝血功能障碍，且炭品效果优于生
品。生品和炭品组大鼠 PT 与模型组比较均有不同
程度缩短，推测可能与生品和炭品本身具有促进外
源性凝血功能，使 PT 缩短有关。但二者主要通过
作用于内源性凝血途径来改善凝血功能。
当血管受损时，血小板表面糖蛋白与内皮下的胶
原物质黏附，聚集增多，PCT 升高。血小板消耗增
加，可刺激骨髓造血系统，生成大体积的血小板，
MPV 及 PLT 增加，血液中血小板形态不均一性增加，
表现为 PDW 升高[9-10]。研究发现，MPV 或 PDW 不
可作为判断血小板活化的独立指标[11]，若二者同时增
加，则可提示血小板活化[12]。干酵母结合无水乙醇
致血热复合出血模型中，血小板活性被激活，大量血
小板参与止血过程，使 PDW 和 MPV 增大，随着血
小板消耗增加，PLT 逐渐升高；云南白药、侧柏叶
生品和炭品均可纠正血小板参数异常，不同程度降
低 PLT、PCT、MPV 和 PDW，且炭品效果优于生品。
综合各生化指标趋势及病理学检查结果，表明
侧柏叶生品和炭品均有一定的止血作用，可不同程
度地改善血液流变学及血小板相关参数，改善肺出
血等病理性损伤，主要通过作用于内源性凝血途径
改善凝血功能。炭品对血热复合出血模型大鼠的治
疗作用优于生品，推测可能与炒炭前后化学成分的
变化有关，该部分的研究有待进一步深入，今后还
需采用细胞、分子生物学等研究手段，结合液质联
用、生物色谱等方法，通过谱效关系分析进行侧柏
炭止血作用的物质基础研究。
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