全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 16期 2016年 8月

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鸦胆子油交联环糊精包合物的制备及其急性毒性研究
陈 琳，吴欢欢，黄小丽，宋先宏，周云龙，李晓梅，胡 荣*，卜 平
扬州大学医学院，江苏 扬州 225000
摘 要：目的 制备鸦胆子油（BFO）交联环糊精（CDP）包合物（BFO-CDP-IC），并通过急性毒性实验比较 BFO-CDP-IC
与市售 BFO乳剂的安全性。方法 提取 BFO及合成 CDP；采用均质法制备 BFO-CDP-IC，通过单因素试验及正交试验设计
优化 BFO-CDP-IC 处方及制备工艺；通过扫描电镜（SEM）法、红外光谱（FTIR）法、核磁共振（1H-NMR）法验证 CDP
及 BFO-CDP-IC的形成；HPLC法测定 BFO-CDP-IC中 BFO的包封率；通过小鼠急性毒性实验并与市售 BFO乳剂进行比较，
考察其安全性。结果 BFO得率为 17.3%；CDP产率 49.26%，交联度 8.47；BFO-CDP-IC最佳包合工艺为 BFO与 CDP投
料比 1∶10，包合温度 20 ℃，均质时间 6 min，稀释BFO的乙醚用量 0.5 g；经 SEM、FTIR和 1H-NMR表明了CDP及BFO-CDP-
IC形成；HPLC法测得 BFO包封率达 80%，载药量为 7.1%。BFO-CDP-IC的半数致死量（LD50）未测出，安全性显著高于
市售 BFO乳剂（LD50为 9.780 g/kg）。结论 制备的 BFO-CDP-IC包封率高，且与市售 BFO乳剂相比毒性降低，安全性高。
关键词：鸦胆子油；交联环糊精；包合物；核磁共振；红外光谱；急性毒性试验
中图分类号：R283.6 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2016)16 - 2843 - 07
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.16.011
Preparation and acute toxicity test of Bruceae Fructus oil and β-cyclodextrin
polymer inclusion complexes
CHEN Lin, WU Huan-huan, HUANG Xiao-li, SONG Xian-hong, ZHOU Yun-long, LI Xiao-mei, HU Rong,
BO Ping
School of Medicine, Yangzhou University, Yangzhou 225000, China
Abstract: Objective To prepare Bruceae Fructus oil (BFO) β-cyclodextrin polymer (CDP) inclusion complexes (BFO-CDP-IC), and
investigate its safety by acute toxicity test. Methods BFO was extracted and CDP was prepared according to the literature, the IC of
BFO with CDP (BFO-CDP) was prepared by homogenizing method and characterized by SEM, 1H-NMR, and FT-IR. The optimum
preparation process was determined by single factor test and L9(34) orthogonal test. Entrapment efficiency (EE) was determined by
HPLC. Acute toxicity of BFO-CDP-IC was assessed by determining the number of deaths of ICR mice over gavage treatment for 2
weeks. The commercial emulsion of BFO (BFOE) was used as a reference. Results The extraction rate of BFO was 17.3%, the yield
of CDP was 49.26%, and the degree of crosslinking was 8.47. The optimal conditions for preparation were as follows, ratio of BFO
and CDP was 1:10, preparation temperature and time was 20 ℃ and 6 min, the amount of ether was 0.5 g. Additionally, the HPLC
data showed that drug loading of complexes was 7.1%, and EE was 80%. In the acute toxicity test, the median lethal dose (LD50) of
BFOE was 9.78 g/kg. In contrast, all mice treated with IC survived even at the highest dosage (15.36 g/kg). Conclusion The prepared
BFO-IC has high EE compared with commercially available BFOE, BFO-CDP polymer significantly decreased toxicity of BFO.
Key words: Bruceae Fructus oil; β-cyclodextrin polymers; inclusion complexes; 1H-NMR; FT-IR; acute toxicity test

鸦胆子油（Bruceae Fructus oil，BFO）是从苦
木科鸦胆子属植物鸦胆子Brucea javanica (L.) Merr.
成熟果实中提取而得的油脂类物质。现代药理学研
究表明 BFO具有抗癌、抗病原体、抗氧化、抗胃溃
疡等作用。临床上将其制成 10% BFO 乳剂，作为
辅助抗肿瘤药物[1-4]，用于治疗消化系统肿瘤。乳剂
属于多相动力学不稳定分散体系，在受热、受冷及
长期储存过程中均能引起乳析和破裂，渗漏的 BFO

收稿日期：2016-03-04
基金项目：研究生创新工程项目（CXLX_1441）
作者简介：陈 琳（1991—），女，在读硕士，研究方向为药物制剂。Tel: 15716286564 E-mail: chenlin910107@163.com
*通信作者 胡 荣（1957—），女，硕士生导师，教授，研究方向为药物制剂。Tel: 18136229836 E-mail: prhurong@163.com
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毒性很大，对胃肠黏膜和血管壁的刺激性也很严重。
环糊精（cyclodextrin，CD）是由 α-1,4葡萄糖
苷键连接的环状低聚糖，其独特的笼状结构可以包
合药物分子形成包合物，此时药物分子被包含于
CD分子空腔中，具有很高的分散度，同时由于 CD
外部多羟基的亲水性，使包合物具有良好的可润湿
性，从而达到对难溶药物的增溶效果，能显著改善
药物的理化性质[5-9]。本实验中所用的交联环糊精
（环糊精聚合物，CDP）是一种将 CD和环氧氯丙烷
（EP）交联得到的聚合物。实验证明该聚合物易溶
于水[10]，当小分子药物与该类聚合物复合后，能使
药物的溶解度增加、稳定性提高、毒副作用降低、
药代动力学改善[11]。本实验研制了 BFO-CDP 包合
物（BFO-CDP-IC），并对其进行表征，通过急性毒
性试验测定其半数致死量（LD50），并与市售 BFO
乳剂进行安全性比较。
1 仪器与材料
磁力搅拌器，上海沪西分析仪器厂；剪切乳化
均质机，上海标本模型厂；Tensor27傅里叶变换红
外光谱（FTIR）仪、AVANCE600 核磁共振仪，德
国 Bruker 公司；S-4800 场发射扫描电子显微镜
（SEM），日本Hitachi High-Technologies公司；Waters
e2695高效液相色谱仪、Waters 2998 PDA检测器，
美国Waters公司。
BFO，实验室自制；鸦胆子苦醇，中国食品药
品检定研究院，批号 140208，质量分数≥98%；BFO
乳剂，广州白云山明兴制药有限公司，批号
0114101412；β-环糊精（β-CD）、EP、NaOH 和其
他试剂均购自国药集团化学试剂公司。清洁级 ICR
小鼠 120只，雌雄各半，体质量 18～22 g。购自扬
州大学比较医学中心，许可证号 SCXK（苏）
2010-0004。
2 方法与结果
2.1 BFO的提取
将鸦胆子仁用万能粉碎机粉碎后，用滤纸包好，
置于索氏提取器中，以石油醚（沸程 60～90 ℃）
为提取溶剂，液料比 6∶1，水浴回流提取，直到提
取液无色为止[12]，BFO得率为 17.3%。以《中国药
典》2015 年版记载方法对本实验中所提 BFO 的理
化性质进行测定，其色草绿，澄明，油状，味苦，
有油脂香。密度 0.900 g/mL；折光率 1.470；酸值
8.142 6 mg KOH/g；皂化值 197.0 mg KOH/g；过氧
化值 6.038 3 mmol/kg；碘值 0.991 7 g碘/g。
2.2 CDP的合成及其表征
2.2.1 CDP的合成 将 15.76 g NaOH加入 32 mL
H2O中，搅拌至溶解后称取 20 g β-CD加入，搅拌
至溶液澄清。将 9.64 mL的 EP加入溶液中，搅拌
24 h，冷却至室温。用透析法除去盐后，将透析后
的溶液用旋转蒸发仪蒸发至黏稠状，加入无水乙醇
析出白色固体，滤过，真空干燥，即得到 CDP[13]，
反应产率为 49.26%。根据苯酚-硫酸法测定水解液
中葡萄糖的量，算出聚合物的交联度为 8.47。
2.2.2 CDP的表征
（1）SEM法：分别取少量 β-CD、CDP均匀固
定于样品台上，导电胶粘样、喷金镀膜后置于 SEM
中观察其表面形态特征。由于 EP 的交联作用致使
两者晶格排列发生变化，产生形态学差异[14]。如图
1所示，β-CD与 CDP的电镜行为有明显不同。β-CD
表面疏松，而 CDP表面光滑，可能是在与 EP聚合
过程中形成了多个支化点，因此得到了具有较好机
械强度、良好稳定性的产物[15]。与聚合前相比，CDP
的表面形态产生了显著变化，说明 CDP的形成。

图 1 β-CD (a) 和 CDP (b) 的 SEM图
Fig. 1 SEM pictures of β-CD (a) and CDP (b)
（2）FTIR 法：分别取 β-CD、CDP 适量，与
KBr充分混合研磨，置于压片机中压片。扫描波数
范围设定为 4 000～400 cm−1，于相同条件下对两者
进行测定。比较两者-OH、-CH2、C-O-C 键吸收峰
强度变化，判断是否成功合成 CDP。
CD聚合反应过程为 CD外部 O-H键断裂，与
EP 键合，此过程中-OH 减少，同时引入碳链和仲
-OH，因此可以通过观察 FTIR 和 1H-NMR 图谱中
羟基和质子峰的强弱或化学位移（δ）来判断是否合
成 CDP[16]。
如图 2所示，与 β-CD相比，CDP的红外吸收
光谱在 3 400～3 300 cm−1处的吸收减弱，而 1 100～
1 000 cm−1左右-OH伸缩振动吸收变弱，这说明-OH
的伸缩振动和平面弯曲也有所降低，这和 EP 与 β-
CD上-OH交联反应使-OH减少有关；在 2 920 cm−1
左右的吸收峰是-CH和-CH2的伸缩振动，CDP在此
a b
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a





图 2 β-CD (a) 和 CDP (b) FTIR谱图
Fig. 2 FTIR spectra of β-CD (a) and CDP (b)

处的吸收峰增强，且在 1 450 cm−1附近出现了-CH
的弯曲振动，这进一步说明 EP和 β-CD反应；CDP
经过交联聚合后仍保留了β-CD的C-O-C和C-O键，
因此，在 CDP中-OH的减少，-CH2和-CH链增长，
极性较 β-CD降低且保留了 β-CD的原有空腔结构。
（3）1H-NMR法：分别取适量 β-CD、CDP，以
重水（D2O）为溶剂分别溶解，测定它们的 1H-NMR
谱图。1H-NMR 法是一种运用较为广泛的分析检测
和验证的方法，如图 3所示，图中 δ 3.55～4.00的
吸收峰为 β-CD氢的化学位移，δ 4.02、3.97（双峰）
为 β-CD与 EP发生交联反应后出现的新峰，说明发
生了交联反应从而出现了新的羟基峰；δ 5.15（单峰）
为碳链上-OH的峰，因此证明已成功合成 CDP。EP
与 CD反应之后，会在 δ 3.0～4.0出现新峰，和 CD
原有的峰重叠，所以出现谱图上的峰形。
2.3 BFO-CDP-IC的制备及其表征
2.3.1 BFO-CDP-IC的制备 精密称取 10 g CDP置
于烧杯中，加蒸馏水溶解，以 300 r/min速度边均质
边缓慢滴加 1.7 mL BFO乙醚溶液，室温条件下均
质 6 min使成糊状，真空干燥，即得。
2.3.2 单因素考察
（1）主客体分子 BFO与 CDP投料比的影响：
主客体分子的投料比是影响包封率的关键因素，本
实验分别采用质量为 2、4、6、8、10、12 g的 CDP
对 BFO 进行包合，其他工艺参数设置为包合温度
20 ℃，均质时间 6 min，稀释 BFO 的乙醚用量为
0.5 g。结果表明，当 CDP用量为 10 g时，包封率
最高。因此在正交设计中，将 CDP的投料量设定为
8、10、12 g。
（2）包合温度的影响：保持其他条件不变，分




图 3 β-CD (a)、CDP (b) 的 1H-NMR谱图
Fig. 3 1H-NMR spectra of β-CD (a) and CDP (b)
别在 20、30、40、50、60 ℃条件下对 BFO进行包
合，结果表明在 20～40 ℃，随着温度的升高，包
封率增加明显，当温度高于 40 ℃以后，包封率升
高不明显。考虑到 BFO受热不稳定，温度升高易导
致其挥发，影响 BFO的包封率。综合考虑将正交温
度定为 20、30、40 ℃。
（3）均质时间的影响：保持其他条件不变，将
均质时间分别设为 3、6、9、12、15 min，考察均
质时间对 BFO包封率的影响。结果表明，当均质时
间为 6 min时，所得包封率最高。6 min后随着均质
时间延长包封率下降，可能是因为 CDP 分子空穴
大，均质时间延长易导致 BFO从空腔析出，因此正
交试验中将均质时间设定为 3、6、9 min。
（4）稀释 BFO的乙醚用量的影响：保持其他条
件不变，改变稀释 BFO的乙醚用量，将溶液中稀释
BFO的乙醚用量分别设为 0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 g，
考察其对 BFO包封率的影响。随着稀释 BFO的乙
醚用量的增加包封率逐渐升高，但稀释 BFO的乙醚
用量过高时，也会导致包封率降低，故将正交试验
中稀释 BFO的乙醚用量设定为 0.3、0.4、0.5 g。
2.3.3 HPLC定量测定方法的建立
（1）色谱条件：色谱柱为 Symmetry C18柱（250
mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇-水（5∶5），
体积流量为 0.8 mL/min，柱温为（25±5）℃，进样
量 40 μL，检测波长为 220 nm。对照品、BFO-CDP-IC
供试品及空白样品的色谱图见图 4。
（2）对照品溶液的配制：精密称取鸦胆子苦醇
对照品 4 mg，溶于 10 mL甲醇，配制成 0.4 mg/mL
鸦胆子苦醇的对照品储备液。
（3）BFO供试品溶液的配制：精密称取 5 g BFO
4 000 3 000 2 000 1 000
ν/cm−1
a
b
b
a
6 5 4 3 2 1 0
δ
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图 4 鸦胆子苦醇对照品 (A)、CDP空白样品 (B)、BFO (C)
和 BFO-CDP-IC (D) 的 HPLC图
Fig. 4 HPLC of brusatol reference substance (A), blank
sample of CDP (B), BFO (C), and BFO-CDP-IC (D)

于 10 mL量瓶中，甲醇定容至刻度，得 0.5 g/mL的
BFO供试品溶液。
（4）BFO-CDP-IC 供试品溶液的配制：精密称
取 BFO-CDP-IC 1.0 g于 10 mL量瓶中，加乙醚至刻
度，置于超声波清洗机中超声 1 h后，离心 5 min，
取上层，回收乙醚，加入甲醇定容至 1 mL，得解包
合 BFO-CDP-IC供试液。
（5）空白样品溶液的制备：按照 BFO-CDP-IC
处方比例，不加鸦胆子油，按“2.3.1”项下方法制
备阴性供试品，按“2.3.3（4）”项方法制得空白样
品溶液。
（6）线性关系考察：精密吸取适量对照品储备
液，用甲醇稀释至质量浓度分别为 0.4、0.2、0.1、
0.05、0.025 mg/mL，分别进样 40 μL，记录色谱图
及峰面积。以质量浓度为横坐标（X），峰面积为纵
坐标（Y）进行线性回归，得鸦胆子苦醇标准曲线
方程：Y＝1×107 X＋987 534，r＝0.999 8，表明鸦
胆子苦醇在 0.025～0.4 mg/mL线性关系良好。
（7）精密度试验：分别精密移取“2.3.3（2）”
项下的鸦胆子苦醇对照品储备液 0.1、0.2、0.4 mL，
置于 10 mL量瓶中，甲醇定容至刻度，得质量浓度
分别为 4.0、8.0、16.0 μg/mL的鸦胆子苦醇对照品
溶液，按“2.3.3（1）”项下色谱条件注入液相色谱
仪，每个质量浓度分别重复进样 6次，以考察精密
度。结果表明不同质量浓度下鸦胆子苦醇峰面积的
RSD值分别为 1.37%、1.44%、1.04%，表明该方法
精密度良好。
（8）重复性试验：分别按“2.3.3（3）”和“2.3.3
（4）”项方法制备 BFO 供试品溶液（0.1 g/mL）和
BFO-CDP-IC供试品溶液，各 6份，按“2.3.3（1）”
项下色谱条件注入液相色谱仪，考察该方法的重复
性。结果表明 2种样品中鸦胆子苦醇的 RSD值分别
为 1.06%、0.98%，表明该方法重复性良好。
（9）稳定性试验：分别按“2.3.3（3）”和“2.3.3
（4）”项方法制备 BFO 供试品溶液（0.1 g/mL）和
BFO-CDP-IC供试品溶液，在室温下放置 0、2、6、
8、12、24 h后，按“2.3.3（1）”项下色谱条件注入
液相色谱仪，考察各供试品溶液稳定性。结果表明，
2 种供试品溶液不同时间下测定的鸦胆子苦醇峰面
积 RSD分别为 0.40%、0.47%，表明 24 h内 2种供
试品溶液稳定性良好。
（10）加样回收率试验：精密吸取按“2.3.3（4）”
项下方法配制的已测定鸦胆子苦醇量的 BFO-CDP-
IC供试品溶液 9份，每份各 1 mL，分别精密加入
一定量的鸦胆子苦醇对照品溶液（相当于鸦胆子苦
醇 0.025、0.050、0.100 mg），混匀，分为低、中、
高 3组，每组 3份，按“2.3.3（1）”项下条件注入
液相色谱仪，重复测定 3次，取峰面积平均值，计
算质量浓度、回收率和 RSD值。测得鸦胆子苦醇加
样回收率平均值为 99.67%，RSD为 1.64%，3个质
量浓度的回收率符合定量测定要求，表明该方法加
样回收率良好。
（11）包封率的测定：精密称取 5 g BFO于 10 mL
容量瓶中，甲醇定容至刻度，得 0.5 g/mL 的 BFO
供试品溶液。精密称取 BFO-CDP-IC 1.0 g于 10 mL
量瓶中，置于超声波清洗机中超声 1 h 后，2 000
r/min 离心 5 min，浓缩至 1 mL，得解包合后的
BFO-CDP-IC供试液。分别进样 40 μL，记录色谱图
及峰面积。按照下式计算 BFO-CDP-IC的包封率及
载药量。经 HPLC 法测得 BFO 中指标成分鸦胆子
苦醇的量推算得 BFO-CDP-IC 中 BFO 的包封率为
80%，载药量为 7.1%。
包封率＝W 包/W 投＝(W 投－W 游)/W 投
载药量＝(W 投－W 游)/W 总
W 投为总投药量，W 包为包入的 BFO量，W 游为游离的 BFO
量，W 总为 BFO-CDP包合物质量
2.3.4 BFO-CDP-IC 制备工艺优化 根据单因素考
察试验及相关文献报道[17-19]，选取主客体分子 BFO
与 CDP投料比（A）、包合温度（B）、均质时间（C）
及稀释 BFO的乙醚用量（D）4个因素进行考察，
0 20 40 60 80
t/min
鸦胆子苦醇
鸦胆子苦醇
鸦胆子苦醇
A
B
C
D
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以包封率为评价指标，采用 L9(34) 正交试验设计筛
选 BFO-CDP-IC最佳工艺参数。因素水平、试验设
计及结果见表 1，方差分析见表 2。

表 1 L9(34) 正交试验设计与结果
Table 1 Design and results of L9(34) orthogonal test
试验号 A B/℃ C/min D/g 包封率/%
1 1∶8 (1) 20 (1) 3 (1) 0.3 (1) 65.75
2 1∶8 (1) 30 (2) 6 (2) 0.4 (2) 72.89
3 1∶8 (1) 40 (3) 9 (3) 0.5 (3) 69.43
4 1∶10 (2) 20 (1) 6 (2) 0.5 (3) 80.53
5 1∶10 (2) 30 (2) 9 (3) 0.3 (1) 75.33
6 1∶10 (2) 40 (3) 3 (1) 0.4 (2) 70.27
7 1∶12 (3) 20 (1) 9 (3) 0.4 (2) 72.83
8 1∶12 (3) 30 (2) 3 (1) 0.5 (3) 66.12
9 1∶12 (3) 40 (3) 6 (2) 0.3 (1) 73.14
K1 208.07 219.11 202.14 214.22
K2 226.13 214.34 226.56 215.99
K3 212.09 212.84 217.59 216.08
R 18.06 6.27 24.42 1.86

表 2 方差分析
Table 2 Analysis of variance
方差来源 偏差平方和 自由度 F值 显著性
A 59.938 2 81.771 P＜0.05
B 7.146 2 9.749
C 101.722 2 138.775 P＜0.01
D 0.733 2
F0.05(2, 2) = 19.00 F0.01(2, 2) = 99.00

对考察指标进行直观分析及方差分析，结果显
示 4个影响因素中对 BFO-CDP-IC包封率的影响大
小顺序为 C＞A＞B＞D，优组合为 A2B1C2D3，优选
出的最佳包合工艺为 BFO 与 CDP 投料比 1∶10，
包合温度 20 ℃，均质时间 6 min，稀释 BFO的乙
醚用量 0.5 g。
2.3.5 BFO-CDP-IC的表征
（1）SEM法：对 CDP和 BFO-CDP-IC样品经
导电胶粘样、喷金镀膜后置于场发射扫描电镜中观
察其表面形态特征。图 5-a、b 分别为 CDP、BFO-
CDP-IC的 SEM图，它们显示了 2种不同物质的表
面形态学特征[20]。从图 5-a、b中可以明显看出 CDP
和 BFO-CDP-IC 的区别。CDP 表面光滑，而 BFO-
CDP-IC表面有很多小孔，且能看到油滴状物质，说
明 BFO-CDP-IC的形成，BFO被包进 CDP的空腔。

图 5 CDP (a) 和 BFO-CDP-IC (b) 的 SEM图
Fig. 5 SEM pictures of CDP (a) and BFO-CDP-IC (b)

（2）FTIR法：分别取 BFO、CDP、BFO与 CDP
两者的物理混合物以及 BFO-CDP-IC适量，与 KBr
混合，压片，在扫描波数为 4 000～400 cm−1测定其
FTIR图。图 6为 BFO、CDP、BFO与 CDP物理混
合物以及 BFO-CDP-IC的 FTIR谱图。通过 FTIR法
可以有效地验证客体分子与 CD 是否产生包合作
用，在包合物中可以观察到与包合之前客体分子的
不同之处[21]。BFO 主要成分为油酸，在 BFO 中其
量高达 63.3%，在图 6-a其 FTIR谱图里可以观察到
油酸的特征吸收峰，在图 6-a中可以看到 3 007 cm−1
处的吸收峰为油酸上的烯烃 C-H 伸缩振动，1 700
cm−1左右的吸收峰为油酸的 C=O 峰。图 6-b 中在
3 400～3 300 cm−1处的吸收峰为 O-H的伸缩振动，
在 2 920 cm−1左右的吸收峰是-CH和-CH2的伸缩振
动。以上特征吸收峰在 BFO与 CDP的物理混合物
的 FTIR 谱图中均能找到。但是在图 6-d 中，CDP
的特征吸收峰均能找到，而油酸上的吸收峰有的发
生变化，有的甚至消失，例如在 3 007 cm−1处的 C-H
伸缩振动，在包合物的红外谱图中就完全消失[22]。



图 6 BFO (a)、CDP (b)、BFO与 CDP物理混合物 (c) 和
BFO-CDP-IC (d) 的 FTIR谱图
Fig. 6 FTIR spectra of BFO (a), CDP (b), physical mixture
(c), and BFO-CDP-IC (d)
a b
4 000 3 000 2 000 1 000
ν/cm−1
a
b
c
d

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油酸原有的特征吸收峰应该在 1 700 cm−1左右，而
包合物中 C=O的吸收峰却在 1 745 cm−1。氢键的
形成使电子云密度平均化，从而使伸缩振动频率降
低，但包合物中 C=O的吸收峰没有降低反而升高，
说明 BFO的 C=O没有和 CDP的-OH形成氢键，而
是在环糊精的空腔内部。另外游离羧酸的 C=O键频
率出现在 1 760 cm−1左右，在固体或液体中 C=O键
频率出现在 1 700 cm−1，和 FTIR谱图相符，由此可
以判断进入到空腔内的 BFO是游离分散的状态，也
能进一步说明 BFO在空腔内部，BFO的 C=O吸收
应该为二聚体的 C=O吸收峰。
（3）1H-NMR法：以 D2O为溶剂分别溶解 CDP
和 BFO-CDP-IC，测定它们的 1H-NMR谱图。如图
7所示，CDP中质子受 BFO的影响均发生明显的位
移（表 3），并且在包合物的 1H-NMR 谱图中 BFO
中油酸部分质子的化学位移和 CDP重合，但是也有
所显示，而其他大部分的峰都清楚的显示出来，部
分峰发生位移[23]。在 BFO-CDP-IC的 1H-NMR谱图
中出现了 6组新的化学位移，其中高场区 δ 0.88～
2.26出现的 5组新峰是油酸 α-H以外其他的质子，
而 δ 5.31出现的新峰是油酸上的 α-H。以上证据都
能证明 CDP 中含有 BFO。除此以外，还可以通过
CDP的化学位移变化说明 BFO已经包覆进入 CDP






图 7 CDP (a) 和 BFO-CDP-IC (b) 的 1H-NMR谱图
Fig. 7 1H-NMR spectra of CDP (a) and BFO-CDP-IC (b)
表 3 CDP包合 BFO前后 1H-NMR化学位移
Table 3 1H-NMR chemical shifts for CH protons of CDP
alone and in complex of BFO
组别
δ 值
H-1 H-2 H-3 H-4 H-5 H-6
CDP 5.055 3.633 3.950 3.563 3.852 3.885
BFO-CDP-IC 5.062 3.630 3.926 3.570 3.829 3.875
Δδ 0.007 −0.003 −0.024 0.007 −0.023 −0.010

的空腔内。包合物的 1H-NMR谱图中可以看出 CDP
的化学位移发生了明显的变化。
首先，BFO和 CDP空腔内的 H-3、H-5作用，
使得其化学位移均发生了变化，向低场移动，说明
客体分子进入了空腔内部，且客体分子插入较深，
甚至位于空腔小口端的 H-6也发生化学位移。同时
其他峰也都有所不同，位于 CDP 分子空腔外部的
H-1、H-2、H-4也发生化学位移，这进一步证明 BFO
已经进入到 CDP内，形成了目标包合物。
2.4 急性毒性实验
小鼠 120只，随机分为 12组，每组 10只，雌
雄各半，BFO-CDP-IC和 BFO乳剂各 6组。在预试
验及参考文献报道[24]的基础上选 1∶0.8为剂量比，
最高剂量为 15.76 g/kg，最低剂量为 6.29 g/kg，按
等比稀释法配制不同质量浓度的 BFO-CDP-IC 和
BFO 乳剂，将其分别一次性 ig 给药后观察动物反
应，连续观察 14 d，并对死亡小鼠进行肉眼尸检，
记录病变情况，试验结果用 Bliss 法计算半数致死
量（LD50）。
运用 Bliss法计算 BFO乳剂的 LD50值（表 4）。
BFO乳剂的 LD50值为 9.780 g/kg，BFO-CDP-IC观
察期内供试组小鼠未见有死亡，仅在给药后出现蜷
缩少动、呼吸急促等症状，但一段时间之后即恢复
正常，说明在 15.36 g/kg的剂量下是安全的。以上
结果表明，BFO-CDP-IC 的安全性明显高于市售
BFO乳剂。

表 4 BFO乳剂的 LD50和置信区间 (CI) (n = 10)
Table 4 LD50 and confidence interval for BFOE (n = 10)
剂量/(g·kg−1) log剂量 (x) 死亡只数 死亡率/% 回归概率 (y) LD50/(g·kg−1) 95% CI/(g·kg−1)
15.36 1.186 4 10 100 6.556 4 9.779 9 8.521 3～11.214 0
12.29 1.089 6 7 70 5.787 6
9.83 0.992 6 5 50 5.017 6
7.86 0.895 4 2 20 4.246 6
6.29 0.798 6 1 10 3.478 4
6 5 4 3 2 1 0
δ
b
a
H-1
H-2
H-4 H-3
H-5
H-6
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 16期 2016年 8月

·2849·
3 讨论
本实验成功制备 CDP，并以 CDP为药物载体，
制备 BFO-CDP-IC，通过 SEM、FTIR、1H-NMR对
包合物进行表征，结果表明包合物制备成功。经
HPLC法测得 BFO中鸦胆子苦醇量为 2 mg/g，测得
BFO-CDP-IC的包封率为 80%，载药量为 7.1%。以
包封率为考察指标通过正交试验优化制备工艺参
数，确定最优工艺参数为 CDP 与 BFO 投料比为
10∶1（质量比），包合温度 20 ℃，均质时间 6 min，
稀释 BFO的乙醚用量为 0.5 g。通过急性毒性实验
将 BFO-CDP-IC 的安全性与市售 BFO 乳剂进行比
较，通过实验测得市售 BFO 乳剂的 LD50为 9.780
g/kg，而 BFO-CDP-IC 的 LD50 未测出，由此可见
BFO-CDP-IC的安全性显著高于市售 BFO乳剂。
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