全 文 ：鸦胆子油乳颗粒剂中油酸含量测定及其稳定性考察
沈阳药学院 孔令辉 王淑丽 卢 铮 姚崇舜 陈济民
沈阳市沈河区妇幼保健院 黄 菲
摘要 利用 法对鸦胆子油乳颗粒剂中油酸含量的测定方法进行了研究 , 并对 其稳定性进行 了
考察 。采用石油醚 、丙酮两步萃取 , 可除去乳化剂豆磷脂的干扰 , 再加氢氧化钾一甲醇液和 三氟化
硼一乙醚 甲醇液 , 分别皂化和甲醋化 。 油酸甲醋用正辛烷提取后 , 以苯甲酸苯酷为内标定量 。 本法
重现性好 , 定量准确 , 线性范围。 , 回收率为 肠 。 可作为含鸦胆 子 油 的制剂
中油酸的定量方法 。
关键词 鸦胆子油 颗粒剂 含量测定
鸦胆子油是苦木科植物鸦胆子 。。。。 。如 。‘。。 的成熟果实 中 所 含 的植物
油 。 鸦胆子油制剂如乳剂 已在临床上治疗癌症 , 目前发现其对消化道溃疡也有较好的疗效 。
一般认为鸦胆子油制剂的临床作用与其含有丰富的不饱和脂肪酸特别是 油 酸 有 密 切 的 关
系 〔〕, 所以对含有鸦胆子油的制剂以测定其中油酸含量作为质量标准之一 。 利用 法对鸦
胆子油中油酸的含量测定已有报道〔〕, 但对其制剂中油酸含量的测定方法 目前未 见 报道 。
在参考现有方法〔〕, 测定鸦胆子油乳颗粒剂 的油酸含量 时, 发现乳化剂 大豆 磷脂对 测定有
干扰 , 回收率高。若先后用石油醚和丙酮两步萃取 , 则可除去豆磷脂的千扰 建 立了 用 法
测定含鸦胆子油制剂的油酸定量方法 , 并对鸦胆子油乳颗粒剂的稳定性进行了考察 。
鸦胆子油乳颗粒剂中油酸含量测定
仪器与药品 日本岛津 一 气相色谱仪 , 岛决 一 数据处理机 , 液相 快 速混合
机 。 鸦胆子油乳颗粒剂 号 批号 、 、 , 沈阳东陵制药厂 , 鸦胆子油乳
颗粒剂 亚号 批号 , , 沈阳东陵制药厂 , 油酸对 照
, 。, 。 , , 实验 ’刁其他试剂均为市售分析纯试剂 。
气相 色谱条件 固定液 , 担体 一 目 , 玻璃柱
小 , 理论塔板数 片 , 载气 氮气 流速 , 氢气流 速 ,
空气流速 , 检测 柱温 ℃ , 气化室温 度 ℃ , 检测器量程范围 沪 记录
器灵敏度 “ , 油酸和 内标物分离度 二 。
标准 曲线 的制备
标准溶液的配制 油酸标准品用正辛烷配成 的溶液 , 内标物苯 甲酸苯醋
用正辛烷配成 的溶液 , 置低温冰箱中备用 。
标准曲线的绘制 分取 的油酸标准品溶液 。, 。 , 。 , 。 , 。 至
容量瓶中 , 用 吹干 , 加 八 一甲酸液 , 在 恒温水浴 中皂化 , 待油
珠完全溶解 , 放冷 , 加三氟化硼一乙醚液 。 , 甲醉 】, 摇匀 , 在 ℃水 浴中甲醋化
, 冰冷 , 加入 苯甲酸苯隋内标液 , 振摇 , 加入饱 和氧化钠溶液至 刻度 , 将
上层液体转移到另一试管中, 充 , 进样 测定 , 以油酸与内标物峰面积 比值
对油酸浓度 进行线性回归 , 得回归方程 二 一 , 。
, 之 ,
精密度试验 分别取 油酸对照品 。, 。 , , 用 吹干 , 按标准曲
线制作项方法操作 , 测定天内和天间精密度 , 天间精密度连做 , 结果见表 。 精密 度结果
符合测试要求 。
专一性考察 鸦胆子油、 鸦胆子油加内标物色谱峰见 图 。 可 见 鸦 胆子
油中油酸峰处无干扰 , 鸦胆子油加内标物后 , 内标峰处无干扰 , 且油酸与内标 物分 离 效果
好。
阵日以。
。
圈
一 内标物 苯甲酸苯醋 一油酸对照品
鸦胆子油气相圈谱
一布洛沙姆 ·豆磷脂石油醚萃取 卜豆磷脂用石油醚和丙酮两步萃取
一鸦胆子油 一鸦胆子油和内标物
校正因子测定 按 年版 《中国 药典 》
二部 附录 方法 。 分别取 油酸
标准液 、 、 , 吹干 , 按 以
上方法操作 , 每个浓度连续进样 次 , 分别求
得校正因子 , 个浓度校正因子的平均值 分 别
为 士 , 土 ,
牛 ! , 将以上3个校正因子平均 , 再求变
异系数 , 结果为 了= 0 .7564 士0.00 75 , C v =
0
.
95
5
%
, 符合 《中国药典 》规定 。
1
.
7 空白试验
表1 精密度试验
理论值
(m g / m l)
实测值
(m g/ m l)
S D C V
(% )
了n舀0八“bU内O,山O通q片‘n月
:…,山勺甲口,曰.上n1咬UZ,曰月任g“n甘On:…天 内精密度 。
.5
n = 3 1 。 5
2
。
5
0
。
5 0 7
1
。
4 9 9 5
2 。 4 8 5
天间密精度 0
。
4 9 6
: : ;
1
.
7
.
1 布洛沙姆为乳化剂的空白试验:按处方规定的成分配比 , 制成不含鸦胆子油的样品,
用石油醚提取 , 提取液用N :吹干 , 按标准曲线制作项方法操作 。 结果见图l ( c ) 。
1
.
7
.
2 豆磷脂为乳化剂的空白试验: 按处方规定的成分配比 , 制成不含鸦胆 子 油 的样品
( 以油酸的标示量为 1.om g为基准 : 淀粉sm g , 豆磷脂o.sm g ) 加石油醚4m l分 3次 萃取 ,
每次振荡Zm in , 萃取液用N :吹干, 加丙酮4m l, 分3次萃取 , 每次振 荡 Zm in , 萃 取 液 用
N :吹干 , 按 标 准 曲线制作项方法操作 , 测定结果见图 l ( e ) , 表 明经提取后豆磷 脂 不干
扰测定 。
1
.
8 回收率试验
1.8 .1 样品对照袱: 精称 卫号鸦胆子油乳颗粒剂sm g ( 含油酸标示量 1.叫m g ) , 按豆 磷脂
《中草药 》1 9 9 5年第26 卷第2期
为乳化剂的空白试验项方法先后用石油醚和丙酮萃取 , 萃取掖川N :吹于 , 按标 准 曲线制作
项方法操作 , 测定油酸含量 ( A :) 。
1
。
8
。
2 样品中加油酸对照品: 精称 I 号鸦胆子油乳颗粒剂sm g3份 ,
酸对照品 0.3 2、
表2
加人量 测得量
A : 一 A l
( 口g ) (m g )
o · 4 0 、 。. 48 m l , 按上述方法 , 测定油酸含量 ( A : )
分别加入2.sm g/m l油
。 计算结果见 表2o
回收率测定结果
回收率 平 均值 S D
(% ) (% )
C V
(% ).~.~~~~~--~~~. 一— -- -一一‘ ~一一0。 8 0 。 7 9 8 9 9 。 7 51 。 0 0 . 9 8 9 9 8 。 9 0 9 9 。 4 4 0 。 4 6 9 0 。 4 7 21 . 2 1 . 1 9 6 9 9 。 6 7... .. . 了 ... . . , . ‘. ‘.‘. 口... ... 曰. . . . , ‘ 曰. . . . . 口. . . . . . . .. . . . . . ‘, 万侧‘. .. .. . . .. . .. . .
1
.
9 样品中油酸定量法: 取样品 10 袋 , 研匀
精称适量 ( 约 相 当于鸦胆子 油 0.1659 ) , 先
后用石油醚和丙酮萃取 , 按豆磷脂为乳化剂的
空白试验项方法操作 。
1
.
10 讨论
1.10 . 1 空白试验表明 , 先后用石油醚和丙酮
两步萃取法萃取 , 萃取 液在油酸处无干扰 , 而
单用石油醚一步萃取有干扰 。 因此两步萃取是可行的 。
1
.
1 0
.
2 实验中发现 , 油酸甲醋化后 , 加入饱和N a C I溶液使有机层上浮 , 若上层溶 液放置
后进样 , 所测油酸甲醋的含量随时间衰减大 , 说明油酸甲酷在此环境中不稳定 。 若将上层液
立即转移到另一试管中并充N :, 测定结果衰减不大 。 如表3所示 。
表3 油曦甲醋在不 同环境中的稳定性
上层溶液不分离 , 不充N :
含量(m g/ m l) 下降百分率(% )
上层液分离充N :
含量(m g / m l) 下降百分率(纬)
甲醋化后立即测定
甲酪化 lh 后定测
甲醋化 3h 后测定
甲醋化 4h 后测定
甲醋化 6h 后测定
1 。 4 5 3
0
。
9 9 0
0
。
8 8 1
0
。
8 1 6
0 。 7 1 0
3 1
。
8 7
3 9
。
3 7
4 3
。
8 4
5 1
。
1 4
1
。
4 5 3
1 。 3 9 2
1
。
3 1 7
l
。
3 3 0
1
。
3 6 1
4
。
2 0
9 。 3 6
8
。
4 7
6
。
3 3
2 鸦胆子油 乳颗粒剂稳定性考察
在确定了可行的定量方法后 , 则利用G C 法对鸦胆子油乳颗粒剂的质量标准进 行 初步考
察 , 本实验采用 留样观察和加速试验法初步考察了制剂的稳定性。
2
.
1 材料及方法: 鸦胆子 油乳颗粒剂 , 沈 阳东陵制药厂 , 批号 93 041 5 . 所用试剂均为化学
纯 。
2
.
1
.
1 光照 : 将颗粒剂置光箱中, 在照度为30 勒的条件下进行加速实验 , 观察样品 于 。、
2
、
4
、
6
、
8
、
时间 (d )
10 d 后含量变化 , 结果见表4。
表4 鸦胆子油乳藕位不同处理条件下含t 变化
光暇 恒温通o OC 恒温6 00C 恒温 80OC
含量(% ) 结果 (% ) 含量(% ) 结果(% ) 含量(% ) 结果(% ) 结果 (% )
n‘丹凡d.1J,J皿叹J6.…城J,O‘UO曰O8
l 0
0 。 1 2 7
0
。
1 2 6
0 。 1
「
2 1
0
。
1 1 9
0
。
1 1 4
0
。 1 1 0
1 0 0
9 9
。
2 1
9 5
。
2 8
9 3
。 了0
8 9 。 7 6
8 6 。 6 1
0 。 1 2 7
0
。
1 2 6
0
。
1 2 5
0
。 1 2 0
0
。
1 1 5
0
。
1 1 0
1 0 0
9 9
。 2 1
0
。
1 2 7
0
。
1 2 6
0
。
1 2 1
0
。
1 1 7
0
。
1 1 3
0
。
1 0 8
1 0 0
9 9
。
2 1
9 5
。
2 8
9 2
。
1 3
8 8
。
9 7
8 5
。
0 4
含量 (% )
0 。 1 2 7
0
。
1 2 0
0
。
1 1 6
0
。
1 1 3
0
。
1 1 0
0
:
1 0 6
1 0 0
9 4
。
4 9
9 1
。
3 4
8 8
。
9 8
8 6
。
6 1
a 3
。 4 6
说明 : 各种处理 结果样 甲均为乳 白色的均匀分薇不石万否靡甄五刃灭骊石提拓豪瓦获
· 了4 .
将鸦胆子油乳颗粒剂放于恒温40 、 6 0 、 8 0 ℃条件下 , 。一 10d , 分别取样 测 含 量 , 并
观察外观变化 , 结果见表4 。
2
.
1
.
3 将样品于40 ℃ 、 相对湿度为75 % , 恒温放置3个月 , 每月按规定项 目检 测 一 次 , 结
果见表5 。
通过恒温、 恒湿加速试验考察结果 , 从表中看出颗粒剂中主要成分 ( 油酸 ) 含量应在本
品规定的标示量85 士 15 % 的范围内 , 初步认为本品比较稳定 , 估计在2年保质期内含 量变化
不会超过标示量范围。
另外 , 本品在留样3个月后的样品加水冲溶后 , 分散均匀; 在显微 镜 下 观 察 ( 15ox 理。
倍 ) 油滴仍在5协m 以下 , l 。卜m 以上的粒子不超过5粒 , 故服用仍具乳剂作用 。
2
.
1
.
4 取80 ℃恒温样品层析鉴定: 取标准品油酸 、 鸦胆子油 , 0 、 4 、 8 、 l o d s 。℃下 恒温样
品, 用石油醚提取 , 硅胶G C板层析 , 展开剂: 石油醚一醋酸乙酚 ( 85 : 15 ) , 如 图 2。
表5 鸦胆子油乳颗粒剂干40 OC , 相对湿
度为75 % 下恒温3个月结果
0 0 0 0 乙
外观 洁化性 含量( % ) 结果 (% ) (与原始含量比
0
30
60
90
奶白色 均匀 分散
奶白色 均匀分散
奶白色 均匀分散
奶白色 均匀 分散
0 。 1 2 7
0
。
1 2 0
0 。 1 1 2
0
。
1 0 8
1 0 0
9 4
。
4 9
8 8
。
1 8
8 5
。
0 3
。
{ { { { }
亨一 霭一 闭. 一丈~叫舀~ 一 各 - 一5 6
图2 样品层析图
i一油酸 2 一鸦胆子油
3、 4 、 5 、 s 分别为。、 4 、 s 、 l o d 样品
薄层结果显示 , 鸡胆子油乳颗粒剂在80 ℃恒温下 1od 以内所含成分与鸦胆子油无差 别,
且依然含有油酸 , 所以可以 一肯定同样条件下在40 ℃ 、 60 ℃恒温下 , 样品成分和含量变化不会
超过规定范围 。
参 考 文 献
1 许洪霞 , 等. 辽宁肿瘤防治研 究 , l o a 3 , 1 7 : x g s o . 1 ‘3
2 5 5 宋永青 。 食品工业科技 , 1 9 9 0 , 6 : 5 3
2 中国科学院林业土壤研究所植物化学组 . 东北 油 ( 19 9 4一 01 一 31 收稿)
脂植物及油脂成分测定法.沈阳: 辽宁人民出版 社 ,
( 上接第67 页 )
3 . 1 有关狼毒抗结核活性成分的含量测定至今未报道 , 本文用反相H P L C 法 , 用甲醇一水一
醋酸系统做流动相 , 对 I 、 1 2 种成分做了测定 。 分析过程 在30 m in 左右, 方法简便快速灵
敏 , 重现性好 , 可供该类生药在质量控制及品质评价时参考。
3
.
2 从测定结果中可知 , 不 同产地 的商品药材 , 上述 2种成分的含量有一定的差异 , 同一产
地 ( 燕子矶 ) 的药材 , 春季 ( 3月 ) 比夏季 ( 6月 )含量为高 , 说明本草文献中关于狼毒春天
采收的记载是科学的 。
3
.
3 在所分析的大戟属9种 ( 变种 )狼毒中, 所测组分只存在于月腺大戟中 , 可视为本种的
特征性成分 。
致谢: 承江 苏植物研完所张涵 庆研完员惠赠时照 品并给予指 导。
( ] 。9 4 一 0 2 一 1。‘:戈稿 )
《中草药 》丁亏百5牵第26 卷第2期 · 7 5 ·