全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 24期 2015年 12月
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井冈山产凹叶厚朴挥发油中化学成分分析
曾 红,邓先清,黄玉珊
井冈山大学医学院,江西 吉安 343000
摘 要:目的 对井冈山产凹叶厚朴 Magnolia officinalis var. biloba 果实、花、干皮、叶 4 个部位的挥发油成分进行分析,为
厚朴不同部位的入药性质提供参考。方法 采用水蒸气蒸馏法提取厚朴 4 个部位的挥发油,运用气相色谱-质谱联用(GC-MS)
技术对挥发油成分进行分析和鉴定,采用峰面积归一化法确定各成分的质量分数。结果 从井冈山产凹叶厚朴的挥发油中共
鉴定出 75 个化学成分,其中果实中鉴定出 1-石竹烯、α-蒎烯等 42 个成分,质量分数占 98.7%;花中鉴定出 4-羟基-4-甲基-2-
戊酮、茨烯等 19 个成分,质量分数占 77.59%;干皮中鉴定出 α-桉叶油醇、四十四烷等 24 个成分,质量分数占 77.92%;叶
中鉴定出 1-石竹烯、α-桉叶油醇等 32 个成分,质量分数占 76.48%。1-石竹烯和四十三烷为 4 个部位共有。结论 从凹叶
厚朴挥发油成分角度,凹叶厚朴叶可替代厚朴皮入药,果实可以入药,花活性成分量很少,不建议入药。
关键词:厚朴;凹叶厚朴;挥发油;气相色谱-质谱联用;1-石竹烯
中图分类号:R284.1 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2015)24 - 3649 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.24.006
Analysis on chemical constituents of volatile oil in Magnolia officinalis var. biloba
produced in Jinggangshan
ZENG Hong, DENG Xian-qing, HUANG Yu-shan
College of Pharmacy, Jinggangshan University, Ji’an 343000, China
Abstract: Objective To research the constituents of the volatile oil from the fruits, flowers, skins, and leaves of Magnolia officinalis
var. biloba produced in Jinggangshan. This research will provide the medicinal nature proof for the different parts of M. officinalis var.
biloba. Methods The volatile oil from M. officinalis var. biloba was extracted by steam distillation, and the components of the volatile
oil were separated and structurally identified by gas chromatlgraphy-mass spectrometry. The relative percentage of various volatile oil
ingredients was determined by the area normalizing method in gas chromatography. Results All 75 compounds were identified from
M. officinalis var. biloba in Jinggangshan. Among them 42 compounds like 1-caryophyllene and α-pinene in nuts were identified and
the relative content was 98.7%. Nineteen compounds like 4-hydroxy-4-methyl-2-pentanone and camphene in the flowers were
identified and the relative content was 77.59%. Twenty-four compounds like α-eudesmol, and 44 alkanes in the skins were identified
and the relative content was 77.92%. Thirty-two compounds like 1-caryophyllene and α-eudesmol in the leaves were identified and the
relative content was 76.48%. The common constituents were 1-caryophyllene and triteracontane. The comparative analysis showed
that the volatile oils existed in M. officinalis var. biloba. Conclusion Based on the above research, we suggest that the leaves of M.
officinalis var. biloba can replace the skins of M. officinalis var. biloba as medicine, The fruits of M. officinalis var. biloba also can be
used to heal the desease; The flowers of M. officinalis var. biloba have little active content, which can not be used as medicine.
Key words: Magnoliae Officinalis Cortex; Magnolia officinalis Rehd. et Wils. var. biloba Rehd. et Wils.; volatile oil; gas chromatography-
mass spectrometry; 1-caryophyllene
凹叶厚朴 Magnolia officinalis Rehd. et Wils. var.
biloba Rehd. et Wils. 为木兰科(Magnoliaceae)木兰
属 Magnolia L. 植物凹叶厚朴的干燥干皮、根皮及
枝皮,始载于《神农本草经》,其后历代本草与《中
国药典》均有记载,具燥湿消痰、下气除满之功效,
用于湿滞伤中、脱痞吐泻、食积气滞、腹胀便秘、
痰饮喘咳[1]。挥发油是其主要药效成分之一,具有
镇静、驱风健胃等药理作用[2-3]。已有文献分别对日
收稿日期:2015-09-01
基金项目:国家科技支撑计划项目(2012BAC11B02-6);吉安市科技局项目(吉市科技字[2013]18 号 3)
作者简介:曾 红(1982—),女,讲师,理学硕士,研究方向为天然产物活性成分。Tel: (0796)8108842 E-mail: 66562768@qq.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 24期 2015年 12月
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本[4],我国福建[5]、贵州[6-7]、四川[8]、云南、河南、
贵州、浙江[9]等省以及湖南道县[10]、湖北恩施[11]、
陕南秦巴山区[12]、浙江龙泉[13]、福建泰宁[14]等产地
的厚朴挥发油进行研究,发现其主要含有萜类及其
含氧衍生物、有机醇类等成分。中药所含化学成分
是植物的次生代谢物,受植物生长环境的影响较大。
厚朴药材的产地不同,必然带来其所含化学成分的
差异,这种差异可能带来临床药效上的差异。
方小平等[7]采用顶空固相微萃取提取贵州产凹
叶厚朴挥发油,气相色谱-质谱分析根、茎、叶、枝
中挥发油成分,通过对比分析认为不同部位挥发油
的成分及量存在一定差异。李宗等[5]考察了福建产
凹叶厚朴不同树龄及干皮、根皮和枝皮不同部位的
挥发油量,研究认为挥发油量与树龄和生长部位没
有明显的相关性。卢永书等[6]研究认为不同地区凹
叶厚朴的挥发油在成分及量上存在一定的差异。井
冈山自然保护区地处罗霄山脉中段,属亚热带温暖
湿润气候,是江西日照最短、雨量最大、湿度最大
的地方。井冈山自然保护区管理处与药材部门合作,
种植了大批凹叶厚朴,此外在井冈山长坪、下七、
黄坳、大小五井、荆竹山等村庄房前屋后、庭园内
外都有种植凹叶厚朴,产量极大。为深入研究井冈
山产凹叶厚朴的质量情况,考察井冈山产凹叶厚朴
挥发油量和化学成分与其他产地的差异,本课题组
在井冈山自然保护区采集了 30 年生凹叶厚朴的果
实、花、干皮、叶,采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)
技术分别对其挥发油类成分进行了定性与定量研
究,为凹叶厚朴挥发油的药理活性研究提供物质基
础,同时也为凹叶厚朴不同药用部位的筛选及新的
药用价值提供一定参考。
1 仪器与材料
Clarus 500 型气质联用仪(美国铂金埃尔默公
司),DG160C 型万能粉碎机(浙江瑞安飞达药材器
械厂),FA1004N 型电子天平(上海菁海仪器有限公
司),2WHW 型电热套(上海羌强仪器设备有限公司)。
厚朴采自江西省井冈山自然保护区,经井冈山
国家级自然保护区管理局黄子发工程师鉴定为凹
叶厚朴 Magnolia officinalis Rehd. et Wils. var.
biloba Rehd. et Wils.,标本存放于井冈山大学中药
材标本室。
2 方法与结果
2.1 挥发油的提取
分别剥取 30 年生厚朴果实、花、干皮、叶适量,
阴干后适当粉碎,依照《中国药典》2010 年版一部
“附录Ⅹ”挥发油测定法项下“甲法”测定厚朴挥发
油的量。各称取厚朴粉末 10.0 g,置 500 mL 圆底烧
瓶中,加 200 mL 蒸馏水浸泡过夜。连接挥发油提
取器与回流冷凝管,自冷凝管上端加水充满挥发油
提取器的刻度部分,溢出流回烧瓶为止,再加 2 mL
正己烷于测定器上端刻度处,回流 10 h,吸取正己
烷层,待用。
2.2 挥发油的检测
2.2.1 色谱条件 色谱柱:DB-1701 ms(30 m×0.25
mm,0.25 μm)弹性石英毛细管柱(VARIAN 公司);
程序升温:起始温度 50 ℃,保持 1 min,以 10 ℃/min
升至 150 ℃,保持 5 min,再以 15 ℃/min 升至 270
℃,保持 6 min。进样口温度:260 ℃;汽化室温
度 250 ℃;载气:氦气;进样量 1 μL(样品液浓度
1.0 μL/mL,溶剂为正己烷);不分流进样。
2.2.2 质谱条件 电子轰击源 EI;离子源温度 250
℃;扫描质量范围 m/z 35~300;溶剂延迟 4.0 min。
2.3 定性定量方法
用气相色谱法分离并经质谱扫描后检出色谱峰
及对应的质谱,凹叶厚朴不同部位TIC图见图1~4。
用 NIST2008 质谱数据库对各色谱峰对应的质谱图
进行定性分析,并综合文献分析鉴定,确定其中化
学成分,采用峰面积归一化法计算各组分质量分数。
结果见表 1。
井冈山产凹叶厚朴挥发油得率分别为果实
2.6%、花 3.0%、干皮 3.5%、叶 1.02%。从果实中
鉴定出 42 个成分,质量分数占 98.7%;花中鉴定出
19 个成分,质量分数占 77.59%;干皮中鉴定出 24
个成分,质量分数占 77.92%;叶中鉴定出 32 个成
分,质量分数占 76.48%。
果实中特有的成分为 β-月桂烯、β-水芹烯、萜
品烯、萜品油烯、β-松油醇、顺-4-守醇、反-2-蒎醇、
葑醇、异蒲勒醇、反式松香芹醇、水合樟烯、4-萜
品醇、2-莰醇、对甲基苯异丙醇、D-香茅醇、乙酸
冰片酯、咕巴烯、芳姜黄烯、β-蛇床烯、α-蛇床烯、
α-荜澄茄烯、α-绿叶烯、凤蝶醇和三十五烷;花中
特有的成分为柏木脑、百秋李醇和 1-己基-2-硝基环
己烷;干皮中特有的成分为 4-甲基-3-戊烯-2-酮、β-
桉叶烯、α-桉叶烯和 1-己基-2-硝基环己烷。叶中特
有的成分为橙花醇、乙酸橙花酯、2-亚甲基-5-(1-甲
基乙烯)-8-甲基-双环 [5.3.0] 癸烷、a-selinene、杜
松烯、菖蒲烯、α-愈创木烯、β-愈创木烯、香树烯
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图 1 井冈山产凹叶厚朴果实总离子流图
Fig. 1 TLC of fruits of M. officinalis produced in Jinggangshan
图 2 井冈山产凹叶厚朴干皮总离子流图
Fig. 2 TLC of skins of M. officinalis produced in
Jinggangshan
图 3 井冈山产凹叶厚朴花总离子流图
Fig. 3 TLC of flowers of M. officinalis produced in
Jinggangshan
图 4 井冈山产凹叶厚朴叶总离子流图
Fig. 4 TLC of leaves of M. officinalis produced in Jinggangshan
氧化物、二十一烷、3,4-环氧四氢呋喃、二十四烷
和三十一烷。其中,1-石竹烯和四十三烷为井冈山
产凹叶厚朴 4 个部位共有的成分。
果实中量较高的化合物是 1-石竹烯(19.89%)、
α-蒎烯(18.32%)、β-蒎烯(9.92%)。花中量较高的
化合物是 4-羟基-4-甲基-2-戊酮(57.57%)、茨烯
3
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
28
29
30
31
32
37
38
4041
44
45
47
485354
55
56
57
62
64
4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30
t/min
1
4
30 44
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54
53
55 56
58
65
68
69
63
62
70
71
4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30
t/min
65
4
5
2 62 66
67
72
73
5 10 15 20 25 30 35 40 45
t/min
4
30
26
31
35
36
42 43
44
45
46
48
51
52
55
56
58
59
60
61
65
74
69 75
63
68
66
62
4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30
t/min
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表 1 井冈山产凹叶厚朴挥发油成分分析
Table 1 Chemical constituents of volatile oil in M. officinalis produced in Jinggangshan
质量分数/% 峰号 化合物名称 分子式 果实 花 干皮 叶
1 4-甲基-3-戊烯-2-酮 C6H10O — — 0.54 —
2 1-溴丙酮 C3H5OBr — 1.93 未知 —
3 α-蒎烯 C10H16 18.32 — 未知 —
4 4-羟基-4-甲基-2-戊酮 C6H12O2 — 57.57 5.32 2.10
5 茨烯 C10H16 4.01 4.07 — —
6 β-蒎烯 C10H16 9.92 未知 — —
7 β-月桂烯 C10H16 0.68 — — —
8 D-柠檬烯 C10H16 9.12 未知 — —
9 β-水芹烯 C10H16 0.24 — — —
10 桉树脑 C10H18O 4.43 未知 — —
11 萜品烯 C10H16 0.21 — — —
12 萜品油烯 C10H16 0.38 — — —
13 β-松油醇 C10H18O 0.25 — — —
14 芳樟醇 C10H18O 8.43 未知 — 未知
15 顺-4-守醇 C10H18O 0.30 — — —
16 反-2-蒎醇 C10H18O 0.25 — — —
17 葑醇 C10H18O 1.66 — — —
18 异蒲勒醇 C10H18O 0.23 — — —
19 反式松香芹醇 C10H16O 0.21 — — —
20 水合樟烯 C10H18O 0.78 — — —
21 4-萜品醇 C10H18O 1.29 — — —
22 2-莰醇 C10H18O 3.07 — — —
23 α-松油醇 C10H18O 4.15 — — 未知
24 对甲基苯异丙醇 C10H14O 0.27 — — —
25 D-香茅醇 C10H20O 0.61 — — —
26 橙花醇 C6H12O2 — — — 1.28
27 乙酸橙花酯 C12H20O2 — — — 未知
28 乙酸冰片酯 C10H20O2 0.44 — — —
29 咕巴烯 C15H24 0.23 — — —
30 1-石竹烯 C15H24 19.89 未知 0.51 11.09
31 α-石竹烯 C15H24 2.55 — 未知 3.47
32 芳姜黄烯 C15H22 0.25 — — —
33 β-桉叶烯 C15H24 — — 未知 —
34 α-桉叶烯 C15H24 — — 未知 —
35 2-亚甲基-5-(1-甲基乙烯)-8-甲基-双环 [5.3.0] 癸烷 C15H24 — — — 1.68
36 a-selinene C15H24 — — — 2.13
37 β-蛇床烯 C15H24 0.77 — — —
38 α-蛇床烯 C15H24 1.33 — — —
39 杜松烯 C15H24 — — — 未知
40 α-荜澄茄烯 C15H24 0.52 — — —
41 α-绿叶烯 C15H24 0.24 — — —
42 菖蒲烯 C15H22 — — — 0.58
43 石竹烯醇 C15H26O — — 未知 0.45
44 石竹烯氧化物 C15H24O 0.64 — 1.18 8.32
45 葎草烯环氧化物 C15H24O 0.21 — 未知 2.15
46 桉叶醇 C15H26O — — 3.62 2.47
47 凤蝶醇 C15H26O 0.25 — — —
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续表 1
质量分数/% 峰号 化合物名称 分子式 果实 花 干皮 叶
48 (−)-愈创醇 C15H26O 0.13 — — 1.75
49 柏木脑 C15H26O — 未知 — —
50 百秋李醇 C15H26O — 未知 — —
51 α-愈创木烯 C15H24 — — — 0.64
52 β-愈创木烯 C15H24 — — — 0.96
53 (−)-马兜铃烯 C15H24 0.16 — 0.69 —
54 茅苍术醇 C15H26O 0.28 — 2.52 —
55 α-桉叶油醇 C15H26O 0.71 — 15.31 9.68
56 β-桉叶油醇 C15H26O 0.54 — 10.14 8.51
57 喇叭茶醇 C15H26O 0.27 — 未知 —
58 1-亚甲基-2-羟甲基-3,3-二甲基-4-(3-异戊烯基)-环己烷 C15H26O — — 0.50 1.87
59 香树烯氧化物 C15H24O — — — 1.13
60 二十一烷 C21H44 — — — 0.60
61 3,4-环氧四氢呋喃 C20H30O4 — — — 0.49
62 四十三烷 C43H88 0.27 1.77 6.92 1.27
63 二十七烷 C27H56 — 3.41 5.43 2.84
64 三十五烷 C35H72 0.21 — — —
65 二十八烷 C28H58 — 1.99 2.09 1.13
66 三十四烷 C34H70 — 1.65 — 1.57
67 1-己基-2-硝基环己烷 C12H23O2N — 0.46 — —
68 三十六烷 C36H74 — — 4.13 2.19
69 四十四烷 C44H90 — 1.01 15.22 2.07
70 1,38-二溴三十八烷 C38H76Br2 — — 3.80 —
71 octatriacontane C38H76Br2 — 1.35 — —
72 氯代十八烷 C18H37Cl — 1.39 — —
73 氯代十六烷 C16H33Cl — 0.99 — —
74 二十四烷 C24H50 — — — 1.82
75 三十一烷 C31H64 — — — 2.34
(4.07%)、二十七烷(3.41%)。干皮中量较高的化
合物是 α-桉叶油醇(15.31%)、四十四烷(15.22%)、
β-桉叶油醇(10.14%)。叶中量较高的化合物是 1-
石竹烯(11.09%)、α-桉叶油醇(9.68%)β-桉叶油
醇(8.51%)。石竹烯有平喘、镇咳、祛痰、杀菌、消
毒作用[15]。蒎烯具有抗氧化、抗衰老作用[16]。α-和 β-
桉叶油醇是厚朴药材的主要药效成分之一,对神经
系统具有调节作用[17-19]。
3 讨论
3.1 化学成分种类分析
从表 1 可知,凹叶厚朴不同提取部位所得挥发
油的化学成分主要为萜烯类、萜醇类、倍半萜类及
其含氧衍生物、高级脂肪烷烃类。萜烯类化合物主
要有蒎烯、茨烯、月桂烯、柠檬烯、水芹烯、萜品
烯、萜品油烯等。萜醇类化合物主要有桉树脑、松
油醇、芳樟醇、顺-4-守醇、反-2-蒎醇、葑醇、异蒲
勒醇、4-萜品醇、2-莰醇、D-香茅醇、橙花醇、桉
叶醇、凤蝶醇、(−)-愈创醇、柏木脑、百秋李醇、
茅苍术醇、桉叶油醇、喇叭茶醇等。倍半萜类化合
物主要有石竹烯、芳姜黄烯、桉叶烯、芹子烯、蛇
床烯、杜松烯、α-荜澄茄烯、α-绿叶烯、菖蒲烯、
愈创木烯等,及部分倍半萜含氧衍生物如石竹烯氧
化物、葎草烯环氧化物、香树烯氧化物等。高级脂
肪烷烃类化合物有二十一烷、二十四烷、四十三烷、
二十七烷、三十五烷、三十一烷、三十八烷、三十
四烷、1-己基-2-硝基环己烷、三十六烷、四十四烷、
氯代十六烷、氯代十八烷、1,38-二溴三十八烷等。
3.2 成分差异分析
本实验所鉴定的化学成分与以往文献报道有所
差异,由于厚朴分布区域广泛,生长环境各异,本
次研究进一步证实了不同产地的凹叶厚朴挥发油在
种类和相对质量分数方面都存在一定的差异性[6]。
此外,凹叶厚朴不同部位挥发油的量和成分也存在
一定的差异,有文献报道表明[7],凹叶厚朴中 β-桉
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 24期 2015年 12月
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叶醇的量最高(根皮 7.28%、枝皮 21.44%、茎皮
36.93%、叶 1.06%)。本实验共定性出 75 个化合物,
果实、花、干皮、叶 4 个部位共有成分只有 1-石竹
烯(果实 19.89%、叶 11.09%、干皮 0.51%,花的量
极微)和四十三烷(果实 0.27%、叶 1.27%、干皮
6.92%、花 1.77%)。
3.3 提取方法的选择
本实验所采用的提取方法为水蒸气蒸馏法,有
文献报道[6-7]还可采用顶空固相微萃取(HS-SPME)
法提取挥发油,考虑到实验条件及操作的方便,最
终选择《中国药典》2010 年版的水蒸气蒸馏法。
4 结论
萜类化合物是厚朴中主要活性成分,挥发油总
量及其萜类衍生物的量可以作为厚朴质量的评价指
标之一[11]。本实验研究发现萜类化合物的量为果实
98.22%、花 4.07%、干皮 34.47%、叶 56.88%。鉴
于厚朴传统以皮入药,而皮入药生长年限长,一般
需 15~20 年,且砍树剥皮后树即死亡。因此若以挥
发油成分入药,可以考虑以厚朴果实或叶替代厚朴
皮,而花中含有大量脂肪烃类化合物,高达 73.52%,
无药用价值。本研究结果将为井冈山产凹叶厚朴药
材的质量评价、药用植物资源的开发利用、药理药
效研究提供物质基础。
参考文献
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