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Study on HPLC-DAD-ELSD fingerprint of Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix

虎杖药材的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱研究



全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 12 期 2015 年 6 月

• 1830 •
虎杖药材的 HPLC-DAD-ELSD 指纹图谱研究
杨 航 1,尹春梅 1*,焦连庆 1, 2*,曹 扬 1,于 敏 2
1. 吉林农业大学中药材学院,吉林 长春 130118
2. 吉林省中医药科学院植物化学所,吉林 长春 130112
摘 要:目的 建立虎杖药材的 HPLC-DAD-ELSD 指纹图谱,对 10 个不同产地的虎杖药材进行质量评价。方法 使用 Luna
C18(2)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,体积流量 1.0 mL/min,柱温 35 ℃,检测波长
254 nm,进样量 10 μL。蒸发光检测器漂移管温度 109 ℃,载气体积流量 3.0 L/min。结果 通过 10 批虎杖药材建立了指纹
图谱的共有模式,其中 HPLC-DAD 指纹图谱共有峰 19 个,相似度为 0.938~0.993;HPLC-ELSD 指纹图谱共有峰 14 个,相
似度为 0.905~0.999。确认了虎杖苷、白藜芦醇、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素和大黄
素甲醚。结论 方法准确、稳定,为客观评价虎杖药材的质量提供了科学依据。
关键词:虎杖;指纹图谱;高效液相色谱法-二极管阵列检测器-蒸发光检测器;虎杖苷;白藜芦醇
中图分类号:R286.6 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2015)12 - 1830 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.12.023
Study on HPLC-DAD-ELSD fingerprint of Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix
YANG Hang1, YIN Chun-mei1, JIAO Lian-qing1, 2, CAO Yang1, YU Min2
1. College of Chinese Medicine Materials, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China
2. Jilin Academy of Chinese Traditional Medicine, Changchun 130112, China
Abstract: Objective To establish the chromatography fingerprint of Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix with hyphenated
technique of HPLC-DAD-ELSD and to evaluate Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix from 10 different origins. Methods Luna
C18 (2) column (250 mm × 4.6 mm, 5 μm) was used. Mobile phase was acetonitrile-H2O; Flow speed was 1.0 mL/min; Temperature
of column was set at 35 ℃; Detective wavelength was at 254 nm; Injection volume was 10 μL. The temperature of drift tube was 109
℃ and the flow speed was 3.0 L/min. Results The chromatography fingerprint of Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix from 10
different origins was established. In the chromatography fingerprint with HPLC-DAD of Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix, 19
common peaks were demarcated and the similarities of Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix were between 0.938—0.993. In the
chromatography fingerprint with HPLC-ELSD of Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix, 14 common peaks were demarcated and the
similarities of Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix were between 0.905—0.999. Polydatin, resveratrol,
emodin-8-O-β-D-glucoside, physcion-8-O-β-D-glucoside, emodin, and physcion were identified. Conclusion The method is
accurate and stable, which can be used as the evidence for the quality evaluation of Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix.
Key words: Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.; chromatography fingerprint; HPLC-DAD-ELSD; polydatin; resveratrol

虎杖 Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix 为蓼
科(Polygonaceae)植物虎杖 Polygonum cuspidatum
Sieb. et Zucc. 的干燥根及根茎,主要化学成分为蒽
醌及蒽醌苷、二苯乙烯类、黄酮类及酚性成分等,
具有抗菌、抗肿瘤、抗氧化及调节代谢等作用[1-2]。
已有虎杖药材指纹图谱研究报道[3-7],但采用高效液
相色谱法 -二极管阵列检测器 -蒸发光检测器
(HPLC-DAD-ELSD)联用技术进行虎杖药材指纹图
谱的研究尚未见报道。HPLC-DAD-ELSD 联用技术
弥补了 HPLC-DAD 只能检测到对紫外有吸收的化

收稿日期:2015-01-26
基金项目:吉林省科技厅课题“虎杖有效部位治疗高脂型糖尿病的研究”(201307026YY)
作者简介:杨 航(1989—),女,吉林长春人,硕士在读,从事天然产物化学研究。Tel: 13578794072 E-mail: yanghang0601@126.com
*通信作者 焦连庆,男,博士,研究员,从事天然产物化学研究。Tel: 18686602593 E-mail: jlq51@tom.com
尹春梅,女,硕士,教授,硕士生导师,从事药用植物栽培学研究。Tel: 18943009604 E-mail: 18943009604@163.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 12 期 2015 年 6 月

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合物的缺点,同时补充了对药材中各化学成分量的
宏观了解。本实验研究了 10 批虎杖药材的
HPLC-DAD-ELSD 指纹图谱,相似度均大于 0.90,
表明建立的指纹图谱方法准确、稳定、重复性好,
为虎杖药材的质量控制提供了科学依据。
1 材料与仪器
1.1 仪器
LC-20A 高效液相色谱仪,SPD-M20A 二极管
阵列检测器,SIL-10AF 自动进样器,LC-15C 二元
梯度泵,LC-solution 色谱工作站(日本岛津公司),
蒸发光散射检测器(Alltech ELSD2000),XWK-III
空气泵(天津市华生分析仪器厂),AK-400A 粉碎
机(温岭市奥力中药机械有限公司),BT-25S 天平
(德国赛多利斯),HH-4 数显恒温水浴锅(常州中
捷实验仪器制造有限公司)。
1.2 试剂
大黄素对照品(批号 D-029-140728-1)购自成
都瑞芬思生物科技有限公司,大黄素甲醚(批号
D-004-140728-1)、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷(批号
D-055-140728)、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷(批
号 D-056-140728),虎杖苷(批号 H-012-140729),
白藜芦醇(B-002-140727)均购自成都瑞芬思生物
科技有限公司,质量分数均大于 98%,纯净水为超
纯水,乙腈为色谱纯,其余均为分析纯。
1.3 药材
10 批虎杖药材产地依次为四川、山东、安徽、
湖北、陕西、贵州、福建、云南、河南、江西,依
次编号为 S1~S10,由吉林省中医药科学院牛志多
研究员鉴定为蓼科植物虎杖 Polygonum cuspidatum
Sied. et Zucc. 的干燥根茎。
2 方法
2.1 色谱条件
Luna C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动
相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱,0~8 min,13%~
23% A,8~14 min,23% A,14~34 min,23%~50% A,
34~46 min,50%~80% A,46~51 min,80%~13% A,
51~56 min,13% A。体积流量 1 mL/min,柱温 35 ℃,
进样量 10 μL,检测波长 254 nm,蒸发光检测器漂移
管温度为 109 ℃,载气体积流量 3.0 L/min。
2.2 溶液的配制
2.2.1 对照品溶液的制备 分别称取虎杖苷、白藜
芦醇、大黄素、大黄素甲醚、大黄素-8-O-β-D-葡萄
糖苷及大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷适量,甲醇溶
解,配制成质量浓度分别为 20.2、19.4、3.2、29.2、
43.6、55.5 μg/mL。
2.2.2 供试品溶液的制备 精密称定虎杖药材粉末
(过 60 目)1.0 g,置于 50 mL 圆底烧瓶中,70%乙
醇 30 mL,称质量,加热回流提取 0.5 h,冷却至室
温,补足减失的质量,用 0.45 μm 微孔滤膜滤过,
续滤液备用。
2.3 HPLC-DAD-ELSD 指纹图谱的方法学考察
2.3.1 精密度试验 取 S3 药材供试品溶液,连续
进样 5 次,进样量为 10 μL,统计并计算所得谱图
的相似度及 RSD。结果表明,HPLC-DAD 指纹图
谱的相似度均大于 0.99,相似度 RSD 小于 0.33%;
HPLC-ELSD 指纹图谱的相似度均大于 0.99,相似
度的 RSD 均小于 0.26%。
2.3.2 稳定性试验 取 S3 药材按供试品溶液方法制
备,室温放置,分别于 0、2、4、6、12、24 h 进样,
进样量为 10 μL,统计并计算所得谱图的相似度及
RSD。结果表明,HPLC-DAD 指纹图谱的相似度均
大于 0.98,相似度 RSD 小于 1.5%;HPLC-ELSD 指
纹图谱的相似度均大于 0.98,相似度的 RSD 小于
0.83%,表明仪器精密度良好。
2.3.3 重复性试验 取 S3 药材粉末 5 份,按供试
品溶液方法制备,按上述条件测定,统计并计算所
得谱图的相似度及 RSD。结果表明,6 份样品的
HPLC-DAD 指纹图谱相似度大于 0.98,相似度 RSD
小于 1.0%;6 份样品的 HPLC-ELSD 指纹图谱的相
似度均大于 0.98,相似度的 RSD 小于 0.04%,证明
此方法重复性良好。
3 结果与分析
3.1 虎杖药材 HPLC-DAD 指纹图谱的建立
运用中药指纹图谱相似度软件(2004A 版)对
10 批不同产地的虎杖药材指纹图谱数据进行处理,
以 S3 样品为参照谱图,时间窗宽度为 0.50,采用
多点校正的方法生成指纹图谱。为保证不同批次虎
杖药材指纹图谱匹配时校正时间的准确性,选择了
主要色谱峰作为校正的 Mark 峰。10 批药材的
HPLC-DAD 指纹图谱见图 1。采用中位数法生成 10
批不同产地虎杖药材的对照谱图(图 2),建立
HPLC-DAD 指纹图谱的共有模式。
10 批虎杖药材经 HPLC-DAD 分离得到 70 多个
色谱峰,比较所测定的色谱图,获得 19 个共有峰。
共有峰经与对照品比对,保留时间和紫外吸收光谱
均与对照品一致,18 号共有峰(大黄素)峰面积超
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 12 期 2015 年 6 月

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图 1 10 批虎杖药材的 HPLC-DAD 指纹图谱
Fig. 1 HPLC-DAD fingerprint of 10 batches of Polygoni
Cuspidati Rhizoma et Radix

6-虎杖苷 13-白藜芦醇 15-大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷 16-大黄
素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷 18-大黄素 19-大黄素甲醚
6-polydatin 13-resveratrol 15-emodin-8-O-β-D-glucoside
16-physcion-8-O-β-D-glucoside 18-emodin 19-physcion
图 2 10 批虎杖药材的 HPLC-DAD 指纹图谱的对照图谱
Fig. 2 HPLC-DAD control fingerprint of 10 batches of
Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix
过总峰面积的 10%,且结构稳定,因此选大黄素作
为参比峰,计算各共有峰的相对保留时间和相对峰
面积(表 1 和表 2)。测得 S1~S10 10 批虎杖药材
与共有模式间的相似度依次为 0.958、0.971、0.993、
0.983、0.980、0.945、0.979、0.950、0.938、0.956,
相似度均大于 0.90,表明 10 批不同产地的药材具有
良好的相关性。
3.2 虎杖药材 HPLC-ELSD 指纹图谱的建立
虎杖药材 HPLC-ELSD 指纹图谱软件处理技术
参数与 HPLC-DAD 指纹图谱一致,10 批药材的
HPLC-ELSD 指纹图谱见图 3。采用中位数法生成
10 批不同产地虎杖药材的对照谱图见图 4,建立
HPLC-ELSD 指纹图谱的共有模式。
10 批虎杖药材经 HPLC-ELSD 分离得到 40 多
个色谱峰,比较所测定的色谱图,获得 14 个共有峰,
峰面积占总峰面积 90.372%~99.206%,能够代表
10 批药材 HPLC-ELSD 指纹图谱的主要特征。共有
峰经与对照品比对,保留时间与紫外吸收光谱均与
对照品一致。10 批药材中二苯乙烯类峰面积占总峰
面积约 22%,蒽醌类峰面积占总峰面积约 28%。大
黄素峰面积超过总峰面积的 10%,,且结构稳定。
因此选作参比峰,计算各共有峰的相对保留时间和
相对峰面积(表 3、4)。测得 10 批虎杖药材与共有
表 1 10 批药材 HPLC-DAD 指纹图谱共有峰相对保留时间
Table 1 Relative retention time of common peaks of HPLC-DAD fingerprint from 10 batches of Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix
共有峰相对保留时间 峰号
S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10
RSD/%
1 0.075 0.075 0.075 0.075 0.074 0.073 0.075 0.075 0.075 0.075 0.900
2 0.234 0.234 0.237 0.236 0.232 0.231 0.235 0.236 0.238 0.235 0.915
3 0.254 0.254 0.257 0.255 0.251 0.250 0.254 0.256 0.258 0.256 0.983
4 0.284 0.284 0.286 0.285 0.281 0.280 0.284 0.286 0.287 0.285 0.775
5 0.312 0.312 0.315 0.313 0.308 0.307 0.312 0.314 0.315 0.313 0.861
6 0.348 0.348 0.351 0.349 0.345 0.344 0.348 0.349 0.351 0.350 0.664
7 0.363 0.363 0.366 0.363 0.357 0.356 0.362 0.364 0.366 0.364 0.932
8 0.403 0.403 0.406 0.403 0.395 0.393 0.401 0.404 0.406 0.404 1.093
9 0.419 0.419 0.422 0.419 0.411 0.410 0.417 0.420 0.423 0.419 1.018
10 0.455 0.455 0.458 0.454 0.444 0.442 0.452 0.455 0.459 0.455 1.233
11 0.510 0.510 0.512 0.511 0.504 0.472 0.510 0.511 0.515 0.511 2.457
12 0.531 0.531 0.525 0.525 0.522 0.520 0.524 0.529 0.529 0.525 0.714
13 0.605 0.605 0.610 0.606 0.599 0.597 0.604 0.606 0.610 0.607 0.690
14 0.655 0.654 0.655 0.656 0.654 0.654 0.656 0.655 0.659 0.655 0.228
15 0.676 0.684 0.668 0.669 0.667 0.666 0.668 0.672 0.671 0.668 0.812
16 0.742 0.740 0.742 0.743 0.743 0.742 0.743 0.742 0.743 0.743 0.128
17 0.908 0.907 0.911 0.910 0.907 0.907 0.909 0.909 0.911 0.910 0.178
18 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 0.000
19 1.108 1.108 1.112 1.111 1.109 1.109 1.110 1.108 1.112 1.111 0.146
S10


S1
0 8.12 16.24 24.36 32.47 40.59 48.71
t/min
1 2 3 4 5
6
7 8 9 10 11
12
13
14
15
16 17
18
19
0 8.12 16.24 24.36 32.47 40.59 48.71
t/min
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 12 期 2015 年 6 月

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表 2 10 批药材 HPLC-DAD 指纹图谱共有峰相对峰面积
Table 2 Relative areas of common peaks of HPLC-DAD fingerprint from 10 batches of Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix
共有峰相对峰面积 峰号
S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10
RSD/%
1 0.046 0.023 0.028 0.036 0.011 0.013 0.025 0.040 0.058 0.021 49.338
2 0.022 0.010 0.011 0.026 0.018 0.009 0.006 0.021 0.027 0.012 46.540
3 0.035 0.024 0.016 0.020 0.019 0.010 0.014 0.039 0.029 0.010 46.563
4 0.053 0.039 0.040 0.060 0.044 0.031 0.027 0.057 0.056 0.023 30.813
5 0.062 0.021 0.022 0.023 0.035 0.014 0.016 0.029 0.032 0.018 51.494
6 0.695 0.371 0.049 0.057 0.441 0.292 0.282 0.634 0.752 0.170 67.877
7 0.168 0.076 0.101 0.116 0.104 0.065 0.067 0.171 0.155 0.053 40.963
8 0.030 0.014 0.030 0.025 0.024 0.012 0.019 0.027 0.043 0.018 37.662
9 0.093 0.046 0.067 0.032 0.004 0.034 0.030 0.057 0.075 0.010 63.369
10 0.141 0.082 0.127 0.101 0.109 0.067 0.062 0.098 0.168 0.024 42.675
11 0.044 0.021 0.003 0.043 0.031 0.015 0.020 0.040 0.073 0.013 67.261
12 0.057 0.361 0.194 0.266 0.278 0.105 0.166 0.534 0.477 0.140 61.401
13 0.150 0.136 0.191 0.090 0.146 0.129 0.101 0.165 0.124 0.093 24.420
14 0.265 0,206 0.126 0.245 0.195 0.106 0.114 0.304 0.369 0.080 47.427
15 1.453 0.985 0.886 1.169 0.991 0.524 0.596 1.552 1.880 0.510 43.868
16 0.172 0.169 0.127 0.170 0.191 0.115 0.102 0.225 0.216 0.087 30.237
17 0.029 0.057 0.037 0.084 0.035 0.023 0.034 0.041 0.063 0.021 46.765
18 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 0.000
19 0.268 0.174 0.097 0.205 0.107 0.087 0.105 0.306 0.277 0.130 47.452


图 3 10 批虎杖药材的 HPLC-ELSD 指纹图谱
Fig. 3 HPLC-ELSD fingerprint of 10 batches of Polygoni
Cuspidati Rhizoma et Radix

7-虎杖苷 10-白藜芦醇 12-大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷 13-大黄
素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷 14-大黄素
7-polydatin 10-resveratrol 12-emodin-8-O-β-D-glucoside
13-physcion-8-O-β-D-glucoside 14-emodin
图 4 10 批虎杖药材的 HPLC-ELSD 指纹图谱的对照图谱
Fig. 4 HPLC-ELSD control fingerprint of 10 batches of
Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix
模式间的相似度依次为 0.905、0.958、0.995、0.997、
0.999、0.976、0.996、0.977、0.993、0.968,相似度
均大于 0.90,表明 10 批不同产地的药材具有良好的
相关性。此外,14 个共有峰中未包涵大黄素甲醚,
原因为产地为 S3、S5、S6 的药材中大黄素甲醚积
分面积过小(小于 10 000),在其余 7 个产地药材中
其积分面积适中(大于 10 000),且峰面积比例范围
为 0.039%~0.106%。
4 讨论
分别对超声、回流 2 种提取方法;甲醇及 50%、
70%、90%乙醇 4 种不同溶剂;0.5、1、2 h 3 种提
取时间进行考察,表明 70%乙醇回流提取效率高,
提取完全,3 种提取时间无显著性差异,故选择提
取 0.5 h。
同一供试品溶液分别在 254、286、306、430 nm
检测波长下各色谱峰的色谱分离结果表明,254 nm
波长下色谱峰数量较多(52 个),分布均匀,各色
谱峰均能达到基线分离,峰形对称;286 nm 波长下
色谱峰数量较少(47 个),10、31 号色谱峰出现明
显拖尾现象;306 nm 是二苯乙烯类化合物的最适波
长,虎杖苷与白藜芦醇色谱峰分离效果佳,色谱峰
峰数量少(29 个),11、16 号色谱峰仍存在拖尾现
象;430 nm 波长下,只有蒽醌类物质有明显色谱峰
S10




S1
0 8.12 16.24 24.36 32.47 40.59 48.71
t/min
1
2
3 4
5 6
7
8 9 10 11
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0 8.12 16.24 24.36 32.47 40.59 48.71
t/min
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 12 期 2015 年 6 月

• 1834 •
表 3 10 批药材 HPLC-ELSD 指纹图谱共有峰相对保留时间
Table 3 Relative retention time of common peaks of HPLC-ELSD fingerprint from 10 batches of Polygoni Cuspidati Rhizoma
et Radix
共有峰相对保留时间 峰号
S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10
RSD/%
1 0.062 0.063 0.062 0.060 0.060 0.060 0.061 0.060 0.060 0.061 1.804
2 0.079 0.079 0.079 0.079 0.079 0.079 0.079 0.079 0.079 0.079 0.000
3 0.211 0.211 0.215 0.212 0.207 0.206 0.211 0.213 0.215 0.213 1.417
4 0.258 0.258 0.261 0.259 0.255 0.253 0.258 0.260 0.261 0.259 0.981
5 0.292 0.292 0.295 0.292 0.287 0.284 0.291 0.293 0.294 0.293 1.146
6 0.340 0.340 0.342 0.339 0.344 0.332 0.338 0.340 0.341 0.340 0.922
7 0.349 0.349 0.352 0.350 0.346 0.346 0.350 0.351 0.353 0.352 0.684
8 0.366 0.365 0.369 0.336 0.360 0.359 0.365 0.367 0.368 0.367 2.670
9 0.532 0.533 0.527 0.527 0.524 0.523 0.526 0.531 0.531 0.527 0.653
10 0.606 0.606 0.612 0.608 0.600 0.599 0.606 0.608 0.611 0.609 0.696
11 0.656 0.656 0.657 0.657 0.656 0.656 0.657 0.656 0.660 0.657 0.198
12 0.677 0.685 0.669 0.669 0.668 0.668 0.670 0.673 0.671 0.670 0.791
13 0.743 0.741 0.743 0.744 0.744 0.744 0.745 0.743 0.744 0.744 0.139
14 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 0.000
表 4 10 批药材 HPLC-ELSD 指纹图谱共有峰相对峰面积
Table 4 Relative areas of common peaks of HPLC-ELSD fingerprint from 10 batches of Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix
共有峰相对峰面积 峰号
S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10
RSD/%
1 2.445 1.512 2.850 3.666 3.188 3.410 2.744 4.040 5.680 2.972 33.84
2 0.078 0.018 0.036 0.070 0.095 0.098 0.053 0.069 0.070 0.064 37.69
3 0.012 0.006 0.005 0.018 0.005 0.004 0.005 0.014 0.012 0.005 57.54
4 0.038 0.022 0.018 0.024 0.014 0.005 0.011 0.035 0.030 0.006 57.12
5 0.119 0.057 0.070 0.065 0.091 0.037 0.032 0.096 0.070 0.029 44.23
6 0.181 0.082 0.092 0.111 0.098 0.030 0.060 0.133 0.116 0.023 51.29
7 0.219 1.469 1.673 2.152 1.599 1.249 1.334 2.267 3.080 0.746 50.80
8 0.224 0.105 0.102 0.119 0.111 0.046 0.067 0.179 0.122 0.039 50.99
9 0.205 0.108 0.088 0.101 0.118 0.021 0.064 0.135 0.193 0.042 55.27
10 0.131 0.156 0.353 0.085 0.252 0.182 0.148 0.189 0.095 0.113 47.52
11 0.102 0.075 0.052 0.116 0.085 0.029 0.043 0.094 0.169 0.025 56.16
12 2.042 1.282 1.359 1.698 1.412 0.644 0.960 1.930 2.799 0.705 44.58
13 0.067 0.071 0.068 0.092 0.081 0.032 0.052 0.079 0.112 0.036 35.43
14 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 0.00

(10 个),选择 430 nm 作为检测波长不具代表性。
应用 DAD 检测器,通过不同波长的比较确定检测
波长为 254 nm 可较好地体现虎杖中各化学成分的
特征。
HPLC-ELSD 指纹图谱中 1 号(占总峰面积的
20%~50%)、5 号(占总峰面积 0.466%~1.124%)
和 6 号(占总峰面积 0.396%~1.709%)色谱峰,在
HPLC-DAD 指纹图谱中未检测到信号,且 1 号峰经
过确认为非溶剂峰。因此,证明了应用 DAD 与
ELSD 串联技术研究虎杖药材指纹图谱的必要性。
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 12 期 2015 年 6 月

• 1835 •
同时 HPLC-DAD 指纹图谱中 4、10、17、19 号(大
黄素甲醚)色谱峰在 HPLC-ELSD 指纹图谱中并未
检测到,表明上述 4 种成分在虎杖中量较低或者属
于易挥发性成分。
参考文献
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