全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 10 期 2015 年 5 月

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RP-HPLC 法同时测定舒胸方中 7 种有效成分
冯彬彬 1，张建海 1*，阳文武 2，何世新 2
1. 重庆三峡医药高等专科学校，重庆 404120
2. 重庆万州食品药品检验所，重庆 400716
摘 要：目的 建立 RP-HPLC 同时测定舒胸方中盐酸川芎嗪、阿魏酸、羟基红花黄色素 A、人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Rb1、
人参皂苷 Re、三七皂苷 R1的方法。方法 以舒胸方为研究对象，采用 RP-HPLC 法，以 Inertsil ODS-SP（250 mm×4.6 mm，
5 μm）为分析柱，乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱（0～45 min，15%乙腈；45～60 min，15%～20%乙腈；60～
80 min，20%～38%乙腈；80～90 min，15%乙腈），检测波长为 203 nm，柱温 30 ℃，体积流量 1.0 mL/min，进样量为 20 μL。
结果 7 种成分盐酸川芎嗪、阿魏酸、羟基红花黄色素 A、人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Rb1、人参皂苷 Re、三七皂苷 R1线性范
围分别为 0.101 0～1.364、0.064 0～0.867 0、1.020～13.77、1.699～22.95、1.869～25.23、0.171 4～2.314、0.516 0～6.966 μg/mL，
线性关系良好，r 值均在 0.999 3～0.999 9，平均加样回收率在 97.25%～103.52%，RSD 均＜3%。结论 该方法简便、准确
可靠，重复性好，分离度好，适用于同时测定舒胸方中主要 7 种有效成分。
关键词：舒胸方；盐酸川芎嗪；阿魏酸；羟基红花黄色素 A；人参皂苷 Rg1；人参皂苷 Rb1；人参皂苷 Re；三七皂苷 R1
中图分类号：R286.02 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2015)10 - 1477 - 04
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.10.013
Simultaneous determination of seven effective constituents from Shuxiong
prescription by RP-HPLC
FENG Bin-bin1, ZHANG Jian-hai1, YANG Wen-wu2, HE Shi-xin2
1. Chong Qing Three Gorges Medical College, Chongqing 404120, China
2. Chongqing Wanzhou Institute for Food and Drug Control, Chongqing 400716, China
Abstract: Objective To establish a RP-HPLC method for the determination of ligustrazine hydrochloride, ferulic acid,
hydrosafflower yellow A, ginsenoside Rg1, ginsenoside Rb1, ginsenoside Re, and notoginsenoside R1 in Shuxiong prescription.
Methods The Inertsil ODS-SP (250 mm × 4.6 mm, 5 μm) was used. The mobile phase, consisting of acetonitrile-0.05% phosphoric
acid solution, was programmed for a gradient elution. The flow rate was 1.0 mL/min, the detection wavelength was 203 nm, and the
column temperature was 30 ℃. Results The excellent linearity with correlation coefficients (r) of 0.999 3—0.999 9 was obtained.
The average recoveries of the seven compounds were 97.25%—103.52% and all RSD values were less than 3%. Conclusion The
method appears to be simple, accurate, and well reproducible, which could be used for the simultaneous determination of the
above-mentioned seven compounds in Shuxiong prescription.
Key words: Shuxiong prescription; ligustrazine hydrochloride; ferulic acid; hydrosafflower yellow A; ginsenoside Rg1; ginsenoside
Rb1; ginsenoside Re; notoginsenoside R1

舒胸方以片剂和胶囊剂收载于《中国药典》2010
年版一部，由三七、红花、川芎 3 味饮片制成的中
药制剂，具有活血化瘀、通络止痛功效，临床用于
瘀血阻滞所致的胸痹等症[1]。方中君药三七的主要
有效成分是 20 余种皂苷成分，约占方中总皂苷的
98%[2-3]；川芎是一味常用中药，具有镇静、解痉，
改善血液循环等药理作用，临床上对冠心病、血栓
闭塞性脉管炎、缺血性血管病等有效，其主要有效
成分有川芎嗪、阿魏酸等；红花的主要成分有羟基
红花黄色素 A 等，研究表明红花黄色素 A 具有降血

收稿日期：2014-10-17
基金项目：重庆市科委自然科学基金项目（CSTC2012jjA10012）
作者简介：冯彬彬，女，博士，副教授，研究方向为中药资源开发利用。E-mail: fengbin1024@sina.com
*通信作者 张建海，男，教授，研究方向为药用资源开发及有效成分分析。E-mail: zhjh200596@126.com
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压、扩张冠脉、改善心肌缺血和脑保护等多种药理
学功效，临床上多用于治疗心血管疾病[4-7]。《中国
药典》2010 年版仅对舒胸片和舒胸胶囊中三七以人
参皂苷 Rg1、人参皂苷 Rb1和三七皂苷 R1总量进行
定量控制，对红花和川芎均没有进行定量控制，文
献报道舒胸方定量测定仅限于盐酸川芎嗪、阿魏酸、
羟基红花黄色素 A 的测定[4-7]，及皂苷类成分的同时
测定[8-11]，同时测定方中盐酸川芎嗪、阿魏酸、羟基
红花黄色素 A、人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Rb1、人参
皂苷 Re、三七皂苷 R1 7 种主要成分未见报道。为了
更全面地控制舒胸方质量，本实验建立了同时测定
舒胸方 7 种主要药效成分的量，使舒胸方中每种饮
片都有相应的质控标准，能更有效地控制该方的质
量，也为后续的药动学研究提供一定的实验依据。
1 仪器与材料
日本岛津 LC-30A 高效液相色谱仪，H1650-W
台式微量高速离心机，长沙湘仪离心机仪器有限公
司；EL-204 电子天平，梅特勒-托利多仪器（上海）
有限公司。
三七（130718、130811、130821）、川芎（130201、
130206、130211）、红花（13050401、13050601、
13050805）各 3 批购自桐君阁药业有限公司，经重
庆三峡医药高等专科学校张建海教授鉴定，三七为
五加科植物三七 Panax notoginseng (Burk.) F. H.
Chen 的干燥根、川芎为伞形科植物川芎 Ligusticum
chuanxiong Hort. 的干燥根茎、红花为菊科植物红花
Carthamus tinctorius L. 的干燥花，均符合《中国药
典》2010 年版规定。对照品盐酸川芎嗪（批号
110817-200307）、阿魏酸（批号 110773-201313）、
羟基红花黄色素 A（批号 110615-200516）、人参皂
苷 Rg1（批号 110703-201128）、人参皂苷 Rb1（批
号 110704-201223）、人参皂苷 Re（批号 110754-
201324）和三七皂苷 R1（批号 110745-201318）均
购自中国药品生物制品检定研究院，质量分数均为
98%以上，舒胸方样品（自制，参照“2.2”项制备
方法并结合《中国药典》2010 版一部），乙腈、甲
醇均为色谱纯，乙醇、磷酸为分析纯，水为超纯水。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
精密称取各对照品适量，加甲醇配分别制成含
盐酸川芎嗪 0.101 mg/mL、羟基红花黄色素 A 1.020
mg/mL、三七皂苷 R1 516.0 μg/mL、人参皂苷 Re
171.4 μg/mL、人参皂苷 Rg1 1.699 mg/mL、人参皂
苷 Rb1 1.869 mg/mL、阿魏酸 64.2 μg/mL 的混合溶
液，作为混合对照品溶液。
2.2 供试品溶液的制备[1,12-13]
取三七粉末 10 g，加 8 倍量 70%乙醇回流提取
2 h，滤过，药渣再加 6 倍量 70%乙醇回流提取 1.5 h，
滤过，合并 2 次滤液，回收乙醇，浓缩至含生药量
为 0.5 g/mL，备用；取粉碎的川芎 20 g，加 10 倍量
水煎煮 2 h，滤过，药渣和 10 g 红花加 10 倍量水煎
煮 2 次，每次 1 h，合并 3 次滤液，离心，上清液浓
缩至含生药量为 0.5 g/mL，备用。取川芎红花合并
浓缩液与三七浓缩液合并、摇匀。取混合液 1 mL，
加入甲醇稀释至 10 mL，用 0.45 μm 微孔滤膜滤过，
即得。
2.3 色谱条件
色谱柱为 Inertsil ODS-SP（编号 4CI92243，250
mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.05%磷酸水
溶液，梯度洗脱：0～45 min，15%乙腈；45～60 min，
15%～20%乙腈；60～80 min，20%～38%乙腈；80～
90 min，15%乙腈；柱温 30 ℃；体积流量 1.0
mL/min；检测波长 203 nm；进样量为 20 μL。
根据该色谱条件，取空白溶剂、阴性对照溶液、
对照品溶液与供试品溶液各 20 μL，分别进样，记
录色谱图。结果见图 1。
2.4 方法学考察
2.4.1 标准曲线的制备 分别取“2.1”项下混合对
照品溶液，配成不同系列质量浓度，按“2.3”项下
条件取 20 μL 进样，以进样量为横坐标（X）对峰
面积积分值（Y）进行回归处理，计算得线性回归
方程、相关系数及线性范围，结果分别为盐酸川芎
嗪：Y＝3 407.8 X＋24.197，r＝0.999 6，线性范围
0.101 0～1.364 μg/mL；阿魏酸：Y＝4 001 432 X＋
10 804，r＝0.999 8，线性范围 64.0～867.0 ng/mL；
羟基红花黄色素 A：Y＝497.43 X－82.215，r＝
0.999 3，线性范围 1.020～13.77 μg/mL；人参皂苷
Rb1：Y＝301 299 X＋34 520，r＝0.999 5，线性范围
1.869～25.23 μg/mL；人参皂苷 Rg1：Y＝338 695
X＋17 207，r＝0.999 5，线性范围 1.699～22.95
μg/mL；人参皂苷 Re：Y＝410 768 X＋7 551.4，r＝
0.999 9，线性范围 0.171 4～2.314 μg/mL；三七皂苷
R1：Y＝289 722 X＋9 451.51，r＝0.999 9，线性范围
0.516 0～6.966 μg/mL。
2.4.2 精密度试验 取混合对照品溶液，按上述色
谱条件，连续进样 6 次，记录色谱图，分别测其峰
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1-盐酸川芎嗪 2-羟基红花黄色素 A 3-阿魏酸 4-三七皂苷 R1 5-人参皂苷 Re 6-人参皂苷 Rg1 7-人参皂苷 Rb1
1-ligustrazine hydrochloride 2-hydrosafflower yellow A 3-ferulic acid 4-notoginsenoside R1 5-ginsenoside Re 6-ginsenoside Rg1 7-ginsenoside Rb1
图 1 舒胸方定量测定的 HPLC 图
Fig. 1 HPLC of quantitative determination of Shuxiong prescription

面积，结果盐酸川芎嗪、阿魏酸、羟基红花黄色素
A、人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Rb1、人参皂苷 Re、
三七皂苷 R1的 RSD 分别为 0.25%、0.31%、0.46%、
0.54%、0.38%、0.61%、0.43%，表明精密度良好。
2.4.3 重复性试验 取同一样品（20130206），按
“2.2”项下方法制备 6 份供试品溶液，按照“2.3”
项下条件测定，记录峰面积，测定结果盐酸川芎嗪、
阿魏酸、羟基红花黄色素 A、人参皂苷 Rg1、人参
皂苷 Rb1、人参皂苷 Re、三七皂苷 R1的 RSD 分别
为 1.69%、1.04%、0.86%、1.35%、1.72%、1.43%、
1.57%，表明该方法重复性良好。
2.4.4 稳定性试验 取同一份（20130206）供试液，
分别于 0、2、4、6、8 h 按照“2.3”项下条件测定，
记录峰面积，测定结果盐酸川芎嗪、阿魏酸、羟基
红花黄色素 A、人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Rb1、人参
皂苷 Re、三七皂苷 R1 的 RSD 分别为 1.01%、0.35%、
0.26%、0.34%、0.18%、0.31%、0.21%，表明该方
法稳定性良好。
2.4.5 加样回收率试验 精密称取 6 份已测定的舒
胸方样品（20130206）适量，分别加混合对照品溶
液适量，按“2.1”项下方法制备供试品溶液，按“2.3”
项下条件测定并计算各成分质量分数的回收率。结
果盐酸川芎嗪、阿魏酸、羟基红花黄色素 A、人参
皂苷 Rg1、人参皂苷 Rb1、人参皂苷 Re、三七皂苷
R1的平均回收率分别是102.52%、98.15%、103.52%、
99.28%、98.87%、97.48%、97.25%；RSD 分别为
2.28%、0.70%、1.18%、0.69%、0.38%、0.89%、0.39%。
表明该方法回收率良好。
2.5 样品测定
取不同批号三七、川芎和红花，按“2.2”项下
方法制备供试品溶液各 3 份，分别取 20 μL 进样，
按“2.3”项下色谱条件测定各成分的量，以外标法
计算，结果见表 1。
3 讨论
3.1 供试品溶液制备方法考察
按《中国药典》规定君药三七以细粉直接压片

表 1 样品测定结果 (n = 3)
Table 1 Results of determinations of samples (n = 3)
批号
质量分数/(mg·g−1)
盐酸川芎嗪 阿魏酸 羟基红花黄色素 A 人参皂苷 Rg1 人参皂苷 Rb1 人参皂苷 Re 三七皂苷 R1
20130301 0.428 1.988 3.994 12.552 7.936 1.144 3.041
20130506 0.417 1.972 4.084 12.584 7.984 1.128 3.032
20130612 0.419 2.008 3.989 12.712 8.192 1.112 3.056
空白 混合对照品 舒胸方样品
1 2
3
4
5 6
7
1
2
3 4
5
6
7
0 30 60 90 0 30 60 90 0 30 60 90
t/min
4
5
6
7
缺川芎和红花样品 缺三七和红花样品 缺三七和川芎样品 1
3
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入药，由于本实验供试品是自制的，故三七采用粉
碎后 70%乙醇回流提取，然后用甲醇处理进样；在
考察川芎提取工艺时，本实验分别采用《中国药典》
方法和 95%乙醇回流方法进行提取，结果表明用
95%乙醇提取有效成分的量较高，但没有显著差
异，考虑到经济节约、污染小，故选择《中国药典》
提取方法；在红花的提取工艺时，由于羟基红花黄
色素 A 是水溶性的物质，故直接考察水作为提取
溶媒。
3.2 色谱条件的确定[5-14]
本实验采用紫外分光光度计在波长 160～430
nm 内进行扫描，发现 7 种对照品成分在 203 nm 处
均有吸收，故选择 203 nm 作为检测波长。本实验
考察了乙腈-水、乙腈-0.1%磷酸水溶液、乙腈- 0.05%
磷酸水溶液、甲醇-0.5%冰醋酸水溶液等多种流动相
系统，发现川芎嗪和阿魏酸在甲醇-0.5%冰醋酸溶液
流动相系统可以很好地分开，但皂苷类成分分离不
理想，乙腈-0.05%磷酸水溶液系统有助于各成分的
分离，且分离度较好。
本研究在文献基础上，采用 HPLC 法同时测定
三七中 4 种皂苷、红花中羟基红花黄色素 A 及川芎
中川芎嗪和阿魏酸 7 种有效成分的量，该方法准确
可靠，分离度好，适用于同时测定舒胸方中 7 种主
要成分的量。本研究对舒胸方中每种饮片都进行了
定量控制，为建立舒胸方全面可行的多指标成分综
合评价提供了实验依据。
3.3 定量测定结果的分析
测定结果表明，与文献报道相比[6,8,15]，本实验
自制的舒胸方中盐酸川芎嗪和羟基红花黄色素A的
量较高，阿魏酸与皂苷类成分的量较低，分析原因
可能是所用药材产地、质量不同，或者是各药厂的
制备工艺不同所造成。
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