全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 11 期 2014 年 6 月
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半夏和白蔹分别与生川乌合煎过程中淀粉类成分对生川乌生物碱类成分
溶出的影响
王 晖,张艳军*
天津中医药大学中药学院 天津市现代中药重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地,天津 300193
摘 要:目的 分析淀粉类成分在煎煮过程中对生川乌中小分子乌头类生物碱溶出的影响,初步探讨淀粉对生物碱成分的作
用机制。方法 将不同来源的淀粉类成分与生川乌药材合煎,运用 RRLC-Q-TOF-MS 技术分析淀粉对合煎液中乌头类生物
碱溶出的影响;运用 HPLC-UV 技术分析淀粉与生物碱单体合煎后,溶液中生物碱类成分的量;采用方差分析和偏最小二乘
判别法进行差异分析。结果 与淀粉合煎后,生川乌中双酯型、单酯型和醇胺型生物碱溶出率均明显降低,其中单酯型和醇
胺型生物碱在生川乌与白蔹淀粉、半夏淀粉、市售淀粉、白蔹以及半夏药材 5 组配伍后其降低更为显著;而生川乌中双酯型
生物碱量在与除去淀粉的半夏和除去淀粉的白蔹配伍时出现明显的上升趋势。生物碱类成分直接与淀粉类成分合煎时,合煎
液中生物碱量明显低于生物碱单独煎煮。结论 淀粉类成分能够在煎煮液中抑制生川乌中生物碱类成分的溶出,对于游离生
物碱,淀粉类成分能够与其发生一定形式的结合,影响生物碱在水溶液中的量。
关键词:淀粉;乌头类生物碱;生川乌;白蔹;半夏;合煎
中图分类号:R283.21 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2014)11 - 1545 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.11.009
Effect of starch composition on dissolution of alkaloids in Aconiti Radix
co-decocted with Pinelliae Rhizoma or Ampelopsis Radix
WANG Hui, ZHANG Yan-jun
Tianjin State Key Laboratory of Modern Chinese Medicine-Province and Ministry Co-established State Key Laboratory Cultivation
Base, Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 300193, China
Abstract: Objective To analyze the effect of starch composition on the dissolution of small molecular alkaloids in Aconiti Radix
when co-decocted with medicines rich in starch, and to explore the mechanism of the effect of starch on alkaloids. Methods RRLC-Q-
TOF-MS was used to analyze the effect of starch on the dissolution of alkaloids in the decoctions. HPLC-UV was applied to determine
the content of alkaloids in the decoctions of starches with alkaloids, and analysis of variance and partial least square method were used
to analyse the difference. Results The dissolution of alkaloids in Aconiti Radix, including the diester-, monoester-, and amine-
diterpenoid alkaloids, wsa obviously decreased when co-decocted with starch, especially the monoester- and amine-diterpenoid
alkaloids co-decocted with Pinelliae Rhizoma, Ampelopsis Radix, starch of Pinelliae Rhizoma, starch of Ampelopsis Radix, and
normally sold starch, while the content of diester-diterpenoid alkaloids was increased when co-decocted with starch-removed Pinelliae
Rhizoma and Ampelopsis Radix. When co-decocted directly with starch, free alkaloids in water decoction was decreased compared with
the decoction without starch. Conclusion Starch could inhibit the dissolution of alkaloids in Aconiti Radix in the decoction. Free
Aconitum alkaloids could be integrated by the starch, which could finally affect their content in decoction.
Key words: starch; Aconitum alkaloids; Aconiti Radix; Pinelliae Rhizoma; Ampelopsis Radix; decoction
配伍是中医辨证用药的特色之一。中药复方的
配伍机制的阐明,解释组方的科学性和合理性,能
够为指导临床用药和中药新药研制提供理论依据。
随着中药分离技术、方剂药效物质和作用机制等基
础研究的深入,逐步形成了组分配伍的研究理论和
思路[1]。复方组分配伍是建立在方剂药效物质和作
收稿日期:2014-01-14
基金项目:国家重点基础研究发展计划(“973”计划)项目(2011CB505300,2011CB505302)
作者简介:王 晖,女,博士,讲师,研究方向为中药炮制学。Tel: (022)59596221 E-mail: tgwanghui@163.com
*通信作者 张艳军,男,博士生导师,教授,研究方向为中药药理(中药毒理)。Tel: (022)59596221 E-mail: zyjsunye@163.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 11 期 2014 年 6 月
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用机制研究的基础上的,药效物质基础应是广义的
化学成分,包括无机物、小分子有机物及生物大分
子,多种物质协同产生疗效[2]。目前关于药效组分
物质基础及其配伍的研究多关注小分子活性成分,
如黄酮、蒽醌、生物碱、皂苷、萜类、强心苷、有
机酸等[3-5]。然而淀粉作为中药中的非活性物质很少
被中药学研究者所关注。在前期研究中发现,在与
富含淀粉的药物白蔹配伍时,随着白蔹配伍比例的
增加生川乌中小分子物质乌头类生物碱的量在煎煮
液中呈降低趋势,而在沉淀中呈现上升趋势[6]。淀
粉性质稳定,可以在水中分散,高温时溶胀形成半
透明凝胶,具有很大黏性[7],能够对溶液中小分子
物质产生影响。
本实验在前期研究的基础上进一步深入研究,
从淀粉大分子物质的角度,阐明水煎液中淀粉类成
分对小分子生物碱物质的影响及其作用规律。
1 仪器和材料
Agilent 1200/API 4000 型 RRLC-Q-TOF-MS/
MS 色谱-串联质谱联用仪(Agilent 公司);KDM 型
调温电热套(山东省鄄城永兴仪器厂);岛津 AC—
20AT 高效液相色谱仪(Shimadzu 公司);湘仪 6—
WS 台式高速离心机(湘仪离心机仪器有限公司);
RE—52AA 旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)。
白蔹、生川乌购于四川江油饮片厂,半夏购于
北京华邈中药技术开发中心,均经天津中医药大学
李天祥副教授鉴定,分别为葡萄科白蔹Ampelopsis
japonica (Thunb.) Makino的块根、毛茛科乌头属植
物乌头Aconitum carmichaeli Debx. 的干燥母根、天
南星科植物半夏Pinellia ternata (Thunb.) Breit. 的
干燥块茎。色谱纯甲酸(批号40212010)购于天津
市光复精细化工研究所;色谱纯乙腈(批号34851)
购于Sigma-ALD;超纯水(杭州娃哈哈集团有限公
司);对照品乌头碱(批号110720200410)、苯甲酰
次乌头原碱(批号111796201002)、次乌头碱(批号
110798200805)、新乌头碱(批号110799200505)、
苯甲酰新乌头原碱(批号111795200901),均购自中
国食品药品检定研究院;对照品苯甲酰乌头原碱(批
号B-010110916)购于成都瑞芬思生物科技有限公
司;分析纯乙醚(批号3216083)购于天津市化学试
剂供销公司。
2 方法和结果
2.1 白蔹及半夏药材中淀粉提取和去除
2.1.1 淀粉提取[8-9] 将药材干燥后粉碎,过 160 目
筛,分别称取白蔹和半夏药材粉末用 95%乙醇 700
mL 冷浸提取 24 h,重复 3 次,滤过后残渣用蒸馏
水悬浮和沉降,更换蒸馏水反复操作至上清液无色
透明。将底层的淀粉乳以 3 000 r/min 离心 20 min,
刮去上层的残余蛋白质、纤维素等比淀粉轻的物质,
舍弃下层比淀粉重的组织等杂质,经过 7~8 次反复
沉降离心后,得到白色淀粉。50 ℃干燥,将淀粉块
研细,过 160 目筛,备用。
2.1.2 白蔹及半夏药材中淀粉的去除 分别取 1.00
g 白蔹和半夏药材加入 10 倍量蒸馏水浸泡 1 h,回
流提取 30 min(从沸腾开始计时),冷却,转移至
离心管中,3 500 r/min 离心 15 min,将上清液转移
至 100 mL 量瓶中,沉淀加入 8 倍量的水再回流 15
min,待冷却后离心,合并 2 次上清液,加乙醇量
至 50%,静置沉淀,滤过,滤液挥去溶液,留残渣
在圆底烧瓶底部,备用,平行 3 份。
2.2 白蔹和半夏淀粉对生川乌生物碱溶出的影响
2.2.1 供试液制备 分别称取 1.00 g 生川乌于圆底
烧瓶中,加入 10 倍量蒸馏水浸泡 1 h,回流提取 15
min 时(从沸腾开始计时),配伍组(分别为白蔹药
材 1.00 g、白蔹淀粉 0.25 g、除去淀粉的白蔹、半夏
药材 1.00 g、半夏淀粉 0.75 g、除去淀粉的半夏、纯
淀粉 1.00 g),以不加淀粉的生川乌单煎作为对照。
继续回流提取 30 min,冷却后 3 500 r/min 离心 15
min,将上清液转移至 100 mL 量瓶中,沉淀加入 8
倍量的水再回流 15 min(从沸腾开始计时),待冷
却后离心,合并 2 次提取的上清液,用蒸馏水定容
至 100 mL 量瓶中,每组平行 3 份。
2.2.2 RRLC-Q-TOF-MS/MS 色谱条件 色谱柱为
Agilent Zorbax Eclipse Plus C18 柱(100 mm×2.1
mm,1.8 μm);进样量为 5 μL;流动相体积流量为
0.3 mL/min;柱温为 40 ℃;流动相组成为 0.1%甲
酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B),梯度洗脱
程序:0~2 min,1% B;2~5 min,1%~6% B;5~
15 min,6%~10% B;15~30 min,10%~20% B;
30~31 min,20%~30% B;31~36 min,30%~50%
B;36~38 min,50%~70% B。
2.2.3 质谱条件 采用 RRLC-Q-TOF/MS 系统在电
喷雾正离子模式下采集数据,质量范围:m/z 200~
800;锥孔电压为 35 V;干燥器温度为 350 ℃;雾
化温度为 300 ℃;毛细管电压为 4 kV;离子源温度
为 120 ℃;壳气体积流量为 900 L/h;选取 [M+H]+
m/z 556.277 1 的亮氨酸-脑啡肽进行精确质量数校正。
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2.2.4 精密度试验[10] 取生川乌按照“2.2.1”项下
的方法制备生川乌单煎液供试品溶液,连续进样 6
次,提物乌头类生物碱的质谱信息,记录峰面积及
保留时间,以内标氧化苦参碱作为参照,计算其相
对保留时间和相对峰面积的 RSD 值,结果见表 1。
结果表明该方法精密度良好。
2.2.5 重复性试验[10] 平行制备生川乌单煎液供
试品溶液 6 份,依次进样分析,记录乌头类生物碱
的峰面积和保留时间,以内标氧化苦参碱作为参照,
计算其相对保留时间和相对峰面积的 RSD 值,结果
见表 1。结果表明供试品溶液在 24 h 内稳定。
2.2.6 稳定性试验[10] 取生川乌单煎液供试品溶
液,分别在 0、2、6、8、12、24 h 进样分析,记录
各峰峰面积和保留时间,计算相对保留时间和相对
峰面积的 RSD 值,结果见表 1。结果表明方法重复
性良好。
表 1 方法学考察结果
Table 1 Results of methodological investigation
精密度 RSD / % 稳定性 RSD / % 重复性 RSD / % 化合物
相对保留时间 相对峰面积 相对保留时间 相对峰面积 相对保留时间 相对峰面积
中乌头原碱 1.71 1.20 3.59 3.79 4.02 2.79
乌头原碱 1.72 1.07 2.84 2.55 3.64 3.16
次乌头原碱 1.66 1.31 2.20 8.14 2.88 2.47
14-苯甲酰-10-OH-中乌头原碱 0.42 1.65 1.43 5.35 0.55 7.53
10-OH-苯甲酰乌头原碱 0.43 2.24 1.30 4.03 0.65 9.23
10-OH-乌头碱 0.44 1.37 4.32 1.17 0.39 2.06
14-苯甲酰中乌头原碱 0.44 1.69 1.14 4.80 0.63 3.88
14-苯甲酰乌头原碱 0.43 1.92 0.99 3.40 0.58 6.80
14-苯甲酰次乌头原碱 0.44 1.92 8.69 2.52 0.55 8.73
10-OH-中乌头碱 0.44 1.57 6.88 3.56 0.51 3.81
中乌头碱 0.43 1.62 4.64 3.22 0.43 1.35
次乌头碱 0.29 2.17 3.33 3.61 0.22 1.55
乌头碱 0.26 2.22 3.20 1.34 0.21 6.37
2.2.7 样品测定 在方法学考察合格的基础上,按
照“2.2.1”项下方法制备生川乌与不同配伍组的合
煎液供试品溶液(n=3),进样前样品用 0.22 μm 的
滤膜滤过,精密量取 500 μL 续滤液,加入 20 μL 氧
化苦参碱溶液(50 μg/mL)作为内标,涡旋混匀 1
min,作为各供试品溶液。结果采用内标半定量方
法进行测定,使用 Mass Hunter Workstation 提取质
谱数据。
2.2.8 数据处理 提取生物碱类成分的质谱信息,
使用 Profile Analysis 软件处理后,运用 Simca-p 12.0
统计软件进行偏最小二乘判别分析(PLS-DA),比
较不同配伍组别之间的差异。
2.2.9 乌头类生物碱成分的鉴定 14-苯甲酰中乌
头原碱、14-苯甲酰乌头原碱、14-苯甲酰次乌头原
碱、中乌头碱、次乌头碱、乌头碱通过与对照品的
质谱图比较进行了鉴定。中乌头原碱、乌头原碱、
次乌头原碱、14-苯甲酰-10-OH-中乌头原碱、10-OH-
苯甲酰乌头原碱、10-OH-乌头碱、10-OH-中乌头碱
则依据相关文献报道进行质谱峰指认[11-13]。
2.2.10 淀粉类成分对生川乌中生物碱溶出的影响
生川乌分别与白蔹药材、白蔹淀粉、除去淀粉的白
蔹、半夏药材、半夏淀粉、除去淀粉的半夏、市售
淀粉进行配伍,为了从整体上比较各组别之间的差
异,运用 Simca-p 11.5 统计软件 PLS-DA 法对数据
进行了分析。结果见图 1。
由图 1 可见,生川乌与不同配伍组合煎后有明
显区分,生川乌单独煎煮为一区,生川乌与除去淀
粉的半夏和除去淀粉的白蔹合煎较为相近,而生川
乌与不同来源的淀粉以及含淀粉的半夏-白蔹合煎
较为接近。可见,淀粉类成分对生川乌药材中生物
碱类型成分的溶出具有一定的影响。
以各生物碱峰面积与内标物峰面积的比值来表
示各生物碱的相对质量分数,以各配伍组与生川乌
单煎组之比的相对溶出率来反映各生物碱的溶出变
化[8]。各配伍组生物碱的溶出差异见图 2~4。与生
川乌单煎相比,配伍后的合煎液中单酯型和醇胺型
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图 1 生川乌与不同配伍组煎煮液的 PLS-DA 得分图 (RX2=0.996,RY2=0.796,Q2=0.531)
Fig. 1 Score plots of PLS-DA for co-decoction of Aconiti Radix with different compatibility groups
(RX2=0.996, RY2=0.796, Q2=0.531)
图 2 生川乌与各配伍组煎煮液中双酯型生物碱成分溶出度的差异
Fig. 2 Dissolution difference of diester-diterpenoid alkaloids in Aconiti Radix co-decocted with different compatibility groups
图 3 生川乌与各配伍组煎煮液中单酯型生物碱成分溶出度的差异
Fig. 3 Dissolution defference of monoester-diterpenoid alkaloids in Aconiti Radix co-decocted with different compatibility groups
图 4 生川乌与各配伍组煎煮液中醇胺型生物碱成分溶出度的差异
Fig. 4 Dissolution difference of amine-diterpenoid alkaloids in Aconiti Radix co-decocted with different compalibility groups
生物碱溶出率都明显的降低,特别是与白蔹淀粉、
半夏淀粉、市售淀粉、白蔹以及半夏药材富含淀粉
类成分组配伍后其降低更为显著;而生川乌中双酯
型生物碱溶出量在于除去淀粉的半夏和除去淀粉的
白蔹配伍时出现明显的上升趋势,而与含淀粉的组
别配伍时均是降低的,因此可以确定,淀粉类成分
生川乌
半夏配伍生川乌
半夏淀粉配伍生川乌
除淀粉半夏配伍生川乌
白蔹配伍生川乌
白蔹淀粉配伍生川乌
除淀粉白蔹配伍生川乌
市售淀粉配伍生川乌
3
2
1
0
−1
−2
−3
t[2
]
−9 −6 −3 0 3 6 9
t[1]
生川乌
半夏配伍生川乌
半夏淀粉配伍生川乌
除淀粉半夏配伍生川乌
白蔹配伍生川乌
白蔹淀粉配伍生川乌
除淀粉白蔹配伍生川乌
市售淀粉配伍生川乌
3.0
2.0
1.0
0
相
对
溶
出
率
10-OH-乌头碱 10-OH-中乌头碱 中乌头碱 次乌头碱 乌头碱
生川乌
半夏配伍生川乌
半夏淀粉配伍生川乌
除淀粉半夏配伍生川乌
白蔹配伍生川乌
白蔹淀粉配伍生川乌
除淀粉白蔹配伍生川乌
市售淀粉配伍生川乌
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0
相
对
溶
出
率
14-苯甲酰-10-OH-
中乌头原碱
14-苯甲酰中
乌头原碱
14-苯甲酰乌
头原碱
14-苯甲酰次
乌头原碱
10-OH-苯甲酰
乌头原碱
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0
相
对
溶
出
率
生川乌
半夏配伍生川乌
半夏淀粉配伍生川乌
除淀粉半夏配伍生川乌
白蔹配伍生川乌
白蔹淀粉配伍生川乌
除淀粉白蔹配伍生川乌
市售淀粉配伍生川乌
中乌头原碱 乌头原碱 次乌头原碱
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能够抑制生川乌药材中生物碱类成分在水煎液中的
溶出。
2.3 在水溶液中半夏和白蔹中淀粉类成分对乌头
类生物碱量的影响
2.3.1 供试品溶液制备 6 种乌头类生物碱(乌头
碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲
酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱)各精密称取 2.00
mg 用蒸馏水定容到 2 mL,制成生物碱混合溶液。
取混合液和 10 倍量的白蔹淀粉、半夏淀粉和纯淀粉
置于试管中混合,每组平行 3 份。另量取等量混合
溶液不加淀粉作为对照组。将试管置水浴锅中 100
℃加热 15 min,冷却后,以 0.45 μm 微孔滤膜滤过,
即得。
2.3.2 HPLC-UV 色谱条件 色谱柱为 Agilent
Eclipse XDB-C18 柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),体
积流量 1 mL/min,进样量 20 μL,检测波长 235 nm,
流动相为 0.1%甲酸水溶液(A)-纯乙腈(B),梯
度洗脱程序:0~4 min,1% B;4~11 min,1%~
6% B;11~32 min,6%~10% B;32~43 min,10%~
20% B;43~67 min,20%~30% B;67~78 min,
30%~50% B;78~82 min,50%~70% B。
2.3.3 线性关系考察 取 6 种乌头类生物碱(乌头
碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲
酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱)各精密称取 2.00
mg 用蒸馏水定容到 1 mL,制成生物碱混标溶液,
稀释至 1.5、1.0、0.5、0.2、0.1 mg/mL,0.45 μm 微
孔滤膜滤过,进行 HPLC-UV 检测,用 Excel 软件,
以峰面积为纵坐标(Y),样品质量浓度为横坐标(X),
制备乌头类生物碱标准曲线,进行线性回归,得回
归方程:苯甲酰新乌头原碱 Y=3 125.3 X-282 631,
R2=0.999 2,线性范围为 0.10~2.00 mg/mL;苯甲
酰乌头原碱 Y=2 416.3 X-230 200,R2=0.999 4,
线性范围为 0.10~2.00 mg/mL;苯甲酰次乌头原碱
Y=3 190.4 X-331 794,R2=0.999 4,线性范围为
0.10~2.00 mg/mL;新乌头碱 Y=1 408.1 X-142 187,
R2=0.999 1,线性范围为 0.10~2.00 mg/mL;次乌头
碱 Y=3 794.1 X-284 328,R2=0.999 5,线性范围为
0.10~2.00 mg/mL;乌头碱 Y=3 507.9 X-304 196,
R2=0.999 3,线性范围 0.10~2.00 mg/mL。
2.3.4 精密度试验 将乌头类生物碱混合溶液加市
售淀粉按照“2.3.1”项下方法进行制备,按照“2.3.2”
项下检测方法,连续测定 6 次,记录各个生物碱的
峰面积,计算其 RSD 值小于 5.0%。
2.3.5 稳定性试验 取生物碱与市售淀粉合煎供试
品溶液,分别在 0、2、6、8、12、24 h 进样分析,
记录各峰峰面积,计算其 RSD 值小于 5.0%。
2.3.6 重复性试验 平行制备生物碱混合样品与市
售淀粉合煎供试品溶液 6 份,依次进样分析,记录
乌头类生物碱的峰面积,计算各生物碱量的 RSD 值
值小于 5.0%。
2.3.7 加样回收率试验 精密称取 6 种生物碱,每
种 1.80、1.80、2.00、2.00、2.20、2.20 mg,用蒸馏
水定容到 2 mL,制成混合溶液 6 份,按照“2.3.1”
项下方法进行制备,按照“2.3.2”项下方法进行测
定,计算各生物碱回收率在 98.6%~100.0%。
2.3.8 测定结果 生物碱混合溶液与淀粉类成分合
煎后测定其在水溶液中的量,结果见图 5。与生物
碱单煎相比,与淀粉类成分合煎后其在水溶液中的
溶出量有明显的下降,而生物碱分别与白蔹淀粉、
与半夏淀粉合煎、与市售淀粉合煎之间并没有显著
性的差异,说明淀粉类成分是使水煎液中乌头生物
碱浓度减少的主要物质,淀粉对于游离状态的生物
碱具有一定的结合作用,能够降低其在水煎液中的
溶出量。
与生物碱单煎相比:*P<0.05 **P<0.01
*P < 0.05 **P < 0.01 vs decoctions of Aconitum alkaloids without starches
图 5 生物碱与淀粉合煎液中乌头类生物碱的量比较
Fig. 5 Comparison content changes of Aconitum alkaloids in co-decoctions with starches
0.8
0.6
0.4
0.3
0
质
量
分
数
/
(m
g·
m
L−
1 )
生物碱单煎
生物碱与白蔹淀粉合煎
生物碱与半夏淀粉合煎
生物碱与市售淀粉合煎
苯甲酰新乌头原碱 苯甲酰乌头原碱 苯甲酰次乌头原碱 新乌头碱 次乌头碱 乌头碱
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3 讨论
中药临床应用多为汤剂以水煎煮,而汤剂的体
系较为复杂,煎煮过程中大分子物质,特别是淀粉
类成分对小分子活性物质的影响研究仍是中药研究
领域的空白[14]。本实验从前期研究中所发现的生川
乌中生物碱随配伍药物白蔹的用量增加而降低的现
象出发,进一步研究白蔹中的淀粉类成分对煎煮液
中生川乌生物碱的溶出影响。为了验证淀粉作用的
普遍性,增加了临床上长于生川乌类药材配伍使用
且淀粉量也较高的半夏[15-16],以及市售淀粉,分别
与生川乌进行配伍(白蔹和半夏淀粉的配伍量为相
当于 1 g 药材中所含淀粉量),结果发现无论是白蔹
淀粉、半夏淀粉,还是市售的普通淀粉均能影响生
川乌中生物碱的溶出。证明了淀粉类成分对小分子
溶出具有普遍的抑制作用。
需要注意的是,对于单酯型和醇胺型生物碱除
去淀粉组中生物碱溶出量降低程度小于含淀粉组,
而双酯型生物碱在除去淀粉组中溶出量没有降低反
而升高,提示半夏和白蔹中有其他成分能够影响生
物碱的溶出[17]。
在研究过程中主要关注了生物碱类型的物质,
为了进一步探索淀粉类成分对生物碱类成分的作
用,本实验将生物碱单体化合物与淀粉类成分进行
合煎,结果同样发现淀粉类成分能够影响煎煮液中
生物碱的溶出量,说明淀粉可能不仅仅影响生物碱
类成分从生川乌药材的溶出,还能与生物碱物质发
生了一定形式的结合,影响其在水溶液中的存在形
式。为了避免实验结论因生物碱受热发生的转化而
产生影响,本实验以生物碱单独煎煮作为对照,同
时对生物碱受热后的转化产物醇胺型生物碱也进行
了检测,结果没有检出醇胺型生物碱。
在后续的研究中,将更深入探索淀粉类成分对
生物碱的作用机制,揭示煎煮过程中淀粉大分子类
成分对生物碱小分子物质的影响。
本实验初步分析了淀粉类成分对生川乌中生物
碱类成分溶出的影响,以及淀粉类成分对水溶液中
游离生物碱的作用,并对其作用机制进行初步的推
测和分析,研究证实煎煮液中淀粉类成分能够抑制
生川乌中生物碱类成分的溶出,淀粉类成分能够结
合水溶液中的生物碱成分,影响生物碱在水溶液中
的溶出量。为揭示配伍机制提供了新的研究思路,
也为研究半夏、白蔹等药物对乌头类药物“相反”
提供了科学数据。
参考文献
[1] 张伯礼, 王永炎, 商洪才. 组分配伍研制现代中药的理
论和方法 [J]. 继续医学教育, 2006, 20(19): 89-91.
[2] 罗国安, 王义明. 中药复方的化学研究体系 [J]. 世界
科学技术—中医药现代化, 1999, 1(1): 11-15.
[3] 刘燕瑜, 张 丹, 金扩世, 等. 中药活性成分皂苷免疫
作用的研究进展 [J]. 中国动物检疫 , 2010, 27(5):
69-74.
[4] 朱海扬, 曾慧兰. 黄酮类化合物药理作用的研究进展
[J]. 山东医药, 2009, 49(17): 114-117.
[5] 欧贤红, 刘华钢, 徐 恒. 天然生物碱及衍生物抗肿瘤
机制研究进展 [J]. 中国药理学通报 , 2010, 26(6):
708-710.
[6] 王 晖, 陈 宁, 许妍妍, 等. 基于 RRLC-Q-TOF-MS
技术分析白蔹对制川乌主要化学成分溶出的影响 [J].
中草药, 2013, 44(15): 2059-2066.
[7] 吕立华, 邓铁宏, 胡容峰. 药剂学 [M]. 北京: 化学工
业出版社, 2010.
[8] 陈艳琰, 钱大玮, 尚尔鑫, 等. 基于化学成分相互作用
探讨芫花与甘草配伍禁忌的机制 [J]. 药学学报, 2012,
47(8): 1043-1048.
[9] 周红英, 王建华, 隋 鹏, 等. 半夏淀粉的理化特性
[J]. 应用化学, 2010, 27(1): 117-121.
[10] 李 霞. 平贝母淀粉改性及抗炎抗氧化作用研究 [D].
天津: 天津大学, 2010.
[11] 许妍妍, 程丽丽, 李遇伯, 等. RRLC-QTOF/MS 研究不
同比例制川乌与瓜蒌配伍前后化学成分变化 [J]. 中草
药, 2013, 44(17): 2372-2379.
[12] 齐 瑶, 皮子凤, 宋凤瑞, 等. 制川乌与川贝母、浙贝
母配伍前后化学成分的变化研究 [J]. 中草药, 2011,
42(12): 2438-2441.
[13] 边宝林, 司 南, 王宏洁, 等. 附子单煎以及与浙贝母
合煎后乌头碱、次乌头碱、新乌头碱等有毒成分的含
量变化研究 [J]. 中国实验方剂学杂志, 2006, 12(4):
9-10.
[14] 王 超. 基于液质联用技术的乌头、藜芦配伍禁忌的化
学研究 [D]. 长沙: 南华大学, 2011.
[15] 王书军. 含淀粉中药贝母、山药中淀粉的研究 [D]. 天
津: 天津大学, 2006.
[16] 范欣生, 尚尔鑫, 陶 静, 等. “十八反”同方配伍探
讨 [J]. 中医杂志, 2011, 52(12): 991-994.
[17] 杜 敏. 附子半夏药对应用考 [J]. 现代中医药, 2008,
28(2): 1-3.