全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 3 期 2014 年 2 月
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杜仲雄花中黄酮类化学成分及其抗氧化活性研究
丁艳霞 1, 3,郭洋静 1,任莹璐 1,窦德强 3,李 钦 1, 2*
1. 河南省高校杜仲工程研究中心,河南 开封 475001
2. 河南大学 中药研究所,河南 开封 475001
3. 辽宁中医药大学药学院,辽宁 大连 116600
摘 要:目的 研究杜仲 Eucommia ulmoides 雄花的黄酮类化学成分,并进行抗氧化活性筛选。方法 运用硅胶、Sephadex
LH-20 和 ODS 等各种色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和谱学数据鉴定化合物结构,并运用 DPPH 自由基和 H2O2诱导
PC12 细胞凋亡实验测定其抗氧化活性。结果 从杜仲雄花 95%乙醇提取物中共分离得到 10 个黄酮类化合物,分别鉴定为
柚皮素(1)、槲皮素(2)、槲皮素-3-O-α-L-阿拉伯糖基 (1→2)-β-D-葡萄糖苷(3)、异槲皮苷(4)、江户樱花苷(5)、槲皮
素-3-O-β-D-葡萄糖基 (1→2)-β-D-葡萄糖苷(6)、山柰酚-3-O-β-D-(6″-O-乙酰基)-β-D-葡萄糖苷(7)、芦丁(8)、异鼠李素-
3-O-β-D-葡萄糖苷(9)、紫云英苷(10)。结论 化合物 1、5、6、9 为首次从杜仲雄花中分离得到;活性测试结果表明化合
物 2~4、6、8 具有较强的抗氧化活性,能明显抑制 H2O2 诱导 PC12 细胞凋亡。
关键词:杜仲雄花;黄酮类;抗氧化活性;柚皮素;槲皮素;江户樱花苷;紫云英苷
中图分类号:R284.1 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2014)03 - 0323 - 05
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.03.005
Isolation of flavonoids from male flowers of Eucommia ulmoides and their
anti-oxidantive activities
DING Yan-xia1, 3, GUO Yang-jing1, REN Ying-lu1, DOU De-qiang3, LI Qin1, 2
1. Henan Province University Eucommia ulmoides Cultivation and Utilization Engineering Research Center, Kaifeng 475001, China
2. Institute of Chinese Materia Medica, Henan University, Kaifeng 475001, China
3. School of Pharmacy, Liaoning University of Traditional Chinese Medicine, Dalian 116600, China
Abstract: Objective To isolate the chemical constituents from the male flowers of Eucommia ulmoides and to determine their
antioxidantive activities. Methods Ten flavonoids were isolated and purified by silica gel, Sephadex LH20, and ODS column
chromatographies. Their structures were identified by spectroscopic analyses. The anti-oxidantive activities were evaluated by DPPH
radical scavenging assay and apoptosis of PC12 cells induced by H2O2. Results Ten compounds were isolated from the male flowers
of E. ulmoides and identified as naringenin (1), quercetin (2), quercetin-3-O-α-L-glucopyranosyl (1→2)-β-D-glucopyranoside (3),
isoquercitrin (4), prunin (5), quercetin-3-O-β-D-glucopyranosyl (1→2)-β-D-glucopyranoside (6), kaempferol-3-O-(6″-O-acetyl)-β-D-
glucopyranoside (7), rutin (8), isorhamnetin-3-O-β-D-glucopyranoside (9), and astragalin (10). Conclusion Compounds 1, 5, 6, and
9 are isolated from the male flowers of E. ulmoides for the first time. Compounds 2—4, 6, and 8 are found to have the potent
anti-oxidative activity on DPPH scavenging and inhibit the apoptosis on the PC12 cells.
Key words: male flowers of Eucommia ulmoides; flavonoids; anti-oxidantive activity; naringenin; quercetin; prunin; astragalin
杜仲又名思仙(《本经》),为杜仲科植物杜仲
Eucommia ulmoides Oliver 的干燥树皮,一属一种,
只在中国的四川、安徽、陕西、湖北、河南、贵州、
云南、江西、甘肃、湖南、广西等地有种植[1]。其
具补肝肾、强筋骨、降血压、安胎等诸多功效[2]。杜
仲是雌雄异株的树,雄花就是杜仲雄树开的花,研
究发现杜仲雄花含 60 多种有效植物成分,如环烯醚
萜类、苯丙素类、黄酮类等活性物质[3-5]。尤其是黄
酮类成分的量远高于杜仲皮和叶,达到 4.01%[6]。
杜仲雄花基本具备植物杜仲所有的保健功效。现代
收稿日期:2013-11-17
基金项目:国家公益性行业专项基金(201004029)
作者简介:丁艳霞,讲师,研究方向为天然产物提取分离。Tel: 13938605302 E-mail: dingyanxia@henu.edu.cn
*通信作者 李 钦 Tel: 13937859989 E-mail: liqin6006@163.com
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研究表明,杜仲中黄酮类成分具有调脂减肥、抗自
由基、抗氧化、抑菌、抗病毒等作用,因此杜仲中
黄酮类化合物的量是判断杜仲生药及其相关产品质
量的重要指标,是杜仲的主要活性成分之一[7-8]。目前
对杜仲黄酮类化合物的研究还仅限于粗提物,具体
活性的物质基础尚未确定。因此本实验对杜仲雄花
中化学成分进行研究,从其 95%乙醇提取物中分离
得到 10 个黄酮类化合物,分别鉴定为柚皮素
(naringenin,1)、槲皮素(quercetin,2)、槲皮素-3-O-
α-L-阿拉伯糖基 (1→2)-β-D-葡萄糖苷 [quercetin-3-
O-α-L-glucopyranosyl (1→2)-β-D-glucopyranoside,
3]、异槲皮苷(isoquercitrin,4)、江户樱花苷(prunin,
5)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖基 (1→2)-β-D-葡萄糖
苷 [quercetin-3-O-β-D-glucopyranosyl (1→2)-β-D-
glucopyranoside,6]、山柰酚-3-O-β-D-(6″-O-乙酰基)-
β-D-葡萄糖苷 [kaempferol-3-O-β-D-(6″-O-acetyl)-β-
D-glucopyranoside,7]、芦丁(rutin,8)、异鼠李素-
3-O-β-D-葡萄糖苷(isorhamnetin-3-O-β-D-glucopyra-
noside,9)、紫云英苷(astragalin,10)。化合物 1、
5、6、9 为首次从杜仲中分离得到;活性测试结果
表明化合物 2~4、6、8 具有较强的抗氧化活性,
能明显抑制 H2O2 诱导 PC12 细胞凋亡。
1 仪器与材料
FA1004N 电子天平(上海精密科学仪器有限责
任公司);X—4 数字显示显微熔点测定仪(北京泰
克仪器有限公司);Bruker AM—300 超导核磁共振
仪;VG Auto Spec—3000 型质谱仪,UV—2100 紫
外分析仪。柱色谱硅胶 G(青岛海洋化工有限公司,
200~300 目);ODS(YMC 公司,50 μm),Sephadex
LH-20(瑞典 Pharmacia 公司),二苯代苦味肼基
(DPPH,1, 1-dipheny-l, 2-picrylhydrazyl)购自 Sigma
公司,叔丁基对苯二酚(TBHQ,郑州颖辉食品化
工有限公司,质量分数>98%),PC12 细胞由中国
科学院上海细胞生物学研究所提供;其余试剂均为
国产分析纯。
杜仲雄花 2012 年 3 月采样于河南汝州,由河南
大学药学院李钦教授鉴定为杜仲科植物杜仲
Eucommia ulmoides Oliver 的雄花,标本(HNCEU-
03)现保存于河南大学杜仲工程研究中心。
2 实验方法
2.1 提取与分离
杜仲雄花(7 kg)干燥后粉碎,用 95%乙醇加
热回流提取 2 次,每次 2 h,减压回收溶剂,得到乙
醇总浸膏。该浸膏用 1.5 倍的水分散后,分别用石
油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取,回收溶剂,得到石
油醚部位(76 g)、醋酸乙酯部位(65 g)、正丁醇部
位(260 g)。醋酸乙酯部位进行硅胶柱色谱,石油
醚-丙酮梯度洗脱(98∶2→9∶1),以 TLC 检测合
并,各组分再经过反复硅胶柱、Sephadex LH-20、
ODS 反相柱色谱和重结晶,得到化合物 1(108 mg)、
2(50 mg)。正丁醇部位经硅胶柱色谱,二氯甲烷-
甲醇梯度洗脱(25∶1→4∶1),以 TLC 检测合并,
各组分再经过反复硅胶柱色谱和反相柱色谱,得到
化合物 3(128 mg)、4(120 mg)、5(20 mg)、6
(14 mg)、7(130 mg)、8(28 mg)、9(15 mg)、
10(15 mg)。
2.2 抗氧化活性评价
采用 DPPH 自由基对化合物 1~10 的体外抗氧
化活性进行评价,方法参照 Vattemda 等[9]的报道并
做了相应改动。在 5 mL 离心管中加入 2 mL 新鲜配
置的 0.05 mmol/L DPPH 乙醇溶液,加入以无水乙醇
配制的不同浓度待测溶液各 300 μL,摇匀,于室温
下避光静置 30 min,以无水乙醇作为参比测定其在
517 nm 下的吸光度(As)值,以 300 μL 无水乙醇
代替待测溶液作为空白对照,测定其吸光度(A0)
值,以样品溶液与 2 mL 无水乙醇混合作为样品对
照,测定其吸光度(Ax)值,以消除样品本身的颜
色,并以 TBHQ 作为阳性对照。
DPPH 清除率=1-(As-Ax) / A0
2.3 MTT 法检测细胞活性
各组细胞接种于 96 孔培养板,于培养结束前 4
h,加入 5 g/LMTT 液 10 μL,2 h 后待形成蓝紫色的
结晶沉淀后加入 150 μL DMSO 使沉淀溶解,用酶联
免疫检测仪于 570 nm 波长处测定其吸光度(A)值,
计算细胞存活率。
3 结果
3.1 结构鉴定
化合物 1:无色针晶(甲醇);ESI-MS m/z: 272.2
[M+H]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 5.81 (2H,
d, J = 2.4 Hz, H-6, 8), 7.23 (2H, d, J = 8.4 Hz, H-2′,
6′), 6.74 (2H, d, J = 8.4 Hz, H-3′, 5′), 5.23 (1H, dd, J =
13.1, 2.7 Hz, H-2), 3.28 (1H, dd, J = 17.3, 3.0 Hz,
H-3α), 3.01 (1H, dd, J = 17.3, 3.0 Hz, H-3β);
13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ: 80.5 (C-2), 44.1
(C-3), 197.8 (C-4), 164.9 (C-5), 97.2 (C-6), 168.6
(C-7), 6.3 (C-8), 165.5 (C-9), 103.43 (C-10), 131.2
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(C-1′), 129.2 (C-2′, 6′), 116.4 (C-3′, 5′), 159.1 (C-4′)。
以上数据与文献报道基本一致[10],故鉴定化合物 1
为柚皮素。
化合物 2:黄色粉末(甲醇);ESI-MS m/z: 302.2
[M+H]+。1H-NMR (400 MHz, C5D5N) δ: 13.38 (1H,
s, 5-OH), 6.75 (1H, s, 6-H), 6.79 (1H, s, H-8), 8.15
(1H, d, J = 8.0 Hz, H-5′), 7.55 (1H, d, J = 8.0 Hz,
H-6′), 8.66 (1H, s, H-2′); 13C-NMR (125 MHz,
C5D5N) δ: 158.3 (C-2), 138.8 (C-3), 178.2 (C-4),
163.3 (C-5), 100.1 (C-6), 166.4 (C-7), 95.1 (C-8),
158.3 (C-9), 105.3 (C-10), 121.9 (C-1′), 117.5 (C-2′),
147.9 (C-3′), 148.6 (C-4′), 117.5 (C-5′), 121.9 (C-6′)。
以上数据与文献报道基本一致[11-12],故鉴定化合物
2 为槲皮素。
化合物 3:黄色粉末(甲醇);ESI-MS m/z: 596.1
[M+H]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 6.1 (1H, s,
H-6), 6.32 (1H, s, H-8), 7.58 (1H, s, H-2′), 6.82 (1H,
d, J = 8.4 Hz, H-5′), 7.60 (1H, d, J = 8.4 Hz, H-6′),
5.45 (1H, d, J = 7.6 Hz, Glc-H-1), 4.72 (1H, d, J = 6.8
Hz, Ara-H-1′);13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ: 158.4
(C-2), 135.2 (C-3), 179.6 (C-4), 163.1 (C-5), 100.8
(C-6), 165.8 (C-7), 94.6 (C-8), 158.3 (C-9), 105.7
(C-10), 123.2 (C-1′), 117.3 (C-2′), 146 (C-3′), 149.7
(C-4′), 116.1 (C-5′), 123.4 (C-6′), 100.8 (Glc-C-1),
82.2 (Glc-C-2), 78.1 (Glc-C-3), 70.92 (Glc-C-4), 76.9
(Glc-C-5), 62.3 (Glc-C-6), 105.8 (Ara-C-1), 74.8 (Ara-
C-2), 78.2 (Ara-C-3), 71.0 (Ara-C-4), 66.6 (Ara-C-5)。
以上数据与文献报道基本一致[13],故鉴定化合物 3 为
槲皮素-3-O-α-L-阿拉伯糖基 (1→2)-β-D-葡萄糖苷。
化合物 4:黄色粉末(甲醇);ESI-MS m/z: 464
[M+H]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 6.19 (1H,
s, H-6), 6.38 (1H, s, H-8), 7.69 (1H, s, H-2′), 6.85 (1H,
d, J = 8.5 Hz, H-5′), 7.56 (1H, d, J = 8.5 Hz, H-6′),
5.24 (1H, d, J = 7.6 Hz, Glc-H-1), 3.69 (1H, d, J =
11.8 Hz, Glc-H-6α), 3.55 (1H, d, J = 11.8 Hz,
Glc-H-6β);13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ: 159.5
(C-2), 136 (C-3), 179.9 (C-4), 163.5 (C-5), 100.3
(C-6), 166.5 (C-7), 95.1 (C-8), 158.9 (C-9), 106.1
(C-10), 123.6 (C-1′), 117.9 (C-2′), 146.3 (C-3′), 150.3
(C-4′), 116.4 (C-5′), 123.5 (C-6′), 104.6 (Glc-C-1),
76.1 (Glc-C-2), 78.5 (Glc-C-3), 71.6 (Glc-C-4), 78.7
(Glc-C-5), 62.9 (Glc-C-6)。以上数据与文献报道基本
一致[13],故鉴定化合物 4 为异槲皮苷。
化合物 5:淡黄色针晶(甲醇);ESI-MS m/z: 435
[M+H]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 7.30 (2H,
d, J = 8.5 Hz, H-2′, 6′), 6.80 (2H, d, J = 8.5 Hz, H-3′,
5′), 6.19 (1H, d, J = 1.2 Hz, H-6), 6.17 (1H, d, J = 1.2
Hz, H-8), 5.33 (1H, dd, J = 10.5, 2.0 Hz, H-2), 3.15
(1H, dd, J = 17.6, 6.0 Hz, H-3α), 2.72 (1H, dd, J =
17.6, 6.0 Hz, H-3β);13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ:
80.9 (C-2), 44.3 (C-3), 198.9 (C-4), 165.2 (C-5), 98.2
(C-6), 167.3 (C-7), 97.1 (C-8), 164.9 (C-9), 105.3
(C-10), 131.1 (C-1′), 129.4 (C-2′, 6′), 116.5 (C-3′, 5′),
159.3 (C-4′), 101.4 (Glc-C-1), 74.8 (Glc-C-2), 77.9
(Glc-C-3), 71.3 (Glc-C-4), 78.4 (Glc-C-5), 62.5 (Glc-
C-6)。以上数据与文献报道基本一致[14],故鉴定化
合物 5 为江户樱花苷。
化合物 6:黄色粉末(甲醇)。1H-NMR (400 MHz,
CD3OD) δ: 12.42 (1H, brs, H-5), 7.51 (1H, dd, J = 2.2,
8.3 Hz, H-6′), 6.86 (1H, d, J = 8.5 Hz, H-5′), 7.65 (1H,
d, J = 2.2 Hz, H-2′), 6.35 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-8),
6.14 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-6), 5.32 (1H, d, J = 7.6 Hz,
Glc-H-1), 4.75 (1H, d, J = 7.1 Hz, Glc-H-1′);13C-NMR
(125 MHz, CD3OD) δ: 159.4 (C-2), 135.7 (C-3), 180.3
(C-4), 163.7 (C-5), 100.4 (C-6), 166.5 (C-7), 95.2
(C-8), 159.0 (C-9), 106.3 (C-10), 123.6 (C-1′), 118.3
(C-2′), 146.5 (C-3′), 150.4 (C-4′), 116.7 (C-5′), 123.6
(C-6′), 101.7 (Glc-C-1), 83.5 (Glc-C-2), 78.5 (Glc-C-
3), 71.6 (Glc-C-4), 78.8 (Glc-C-5), 62.9 (Glc-C-6),
105.6 (Glc-C-1′), 76.1 (Glc-C-2′), 78.5 (Glc-C-3′),
71.5 (Glc-C-4′), 78.6 (Glc-C-5′), 62.9 (Glc-C-6′)。以上
数据与文献报道基本一致[15],故鉴定化合物 6 为槲
皮素-3-O-β-D-葡萄糖基 (1→2)-β-D-葡萄糖苷。
化合物 7:淡黄色粉末(甲醇)。1H-NMR (400
MHz, CD3OD) δ: 7.98 (2H, d, J = 7.0 Hz, H-2′, 6′),
6.83 (2H, d, J = 7.0 Hz, H-3′, 5′), 6.15 (1H, d, J = 1.2
Hz, H-6), 6.34 (1H, J = 1.2 Hz, H-8), 5.13 (1H, d, J =
7.6 Hz, Glc-H-1), 4.15 (1H, d, J = 11.6 Hz, Glc-H-6α),
4.03 (1H, d, J = 11.6 Hz, Glc-H-6β), 1.80 (3H, s,
-COCH3);13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ: 159.8
(C-2), 135.8 (C-3), 179.8 (C-4), 163.4 (C-5), 100.3
(C-6), 166.5 (C-7), 95.2 (C-8), 158.9 (C-9), 106
(C-10), 123.1 (C-1′), 132.7 (C-2′), 116.4 (C-3′), 162
(C-4′), 116.4 (C-5′), 132.7 (C-6′), 104.7 (Glc-C-1),
75.8 (Glc-C-2), 76 (Glc-C-3), 71.7 (Glc-C-4), 78.2
(Glc-C-5), 64.6 (Glc-C-6), 173.0, 20.8 (COCH3)。以上
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数据与文献报道基本一致[16],故鉴定化合物 7 为山
柰酚-3-O-β-D-(6′′-O-乙酰基)-β-D-葡萄糖苷。
化合物 8:淡黄色针状结晶(甲醇);mp 214~
216 ℃。与芦丁对照品共薄层,在 3 种不同的展开
系统中 Rf 值及显色行为一致,与芦丁对照品混合熔
点不下降,故鉴定化合物 8 为芦丁。
化合物 9:黄色粉末(甲醇);ESI-MS m/z: 501.1
[M+Na]+。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 12.31
(1H, brs, 5-OH), 7.88 (1H, d, J = 1.5 Hz, H-2′), 7.52
(1H, dd, J = 8.5, 1.5 Hz, H-6′), 6.85 (1H, d, J = 8.5
Hz, H-5′), 6.31 (1H, s, H-8), 6.13 (1H, s, H-6), 5.37
(1H, d, J = 7.5 Hz, Glc-H-1), 3.84 (3H, s, -OCH3);
13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6) δ: 177.8 (C-4), 164.9
(C-7), 161.7 (C-5), 156.7 (C-2), 156.7 (C-9), 149.9
(C-3′), 147.4 (C-4′), 133.4 (C-3), 122.5 (C-6′), 121.5
(C-1′), 115.7 (C-5′), 113.9 (C-2′), 104.4 (C-10), 101.3
(Glc-C-1), 99.2 (C-6), 94.2 (C-8), 78.0 (Glc-C-5), 76.9
(Glc-C-3), 74.8 (Glc-C-2), 70.4 (Glc-C-4), 61.3 (Glc-C-
6), 56.1 (3′-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[15],
故鉴定化合物 9 为异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷。
化合物 10:黄色粉末(甲醇);ESI-MS m/z: 471.1
[M+Na]+。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 12.33
(1H, s, 5-OH), 8.00 (2H, d, J = 8.0 Hz, H-2′, 6′), 6.83
(2H, d, J = 8.0 Hz, H-3′, 5′), 6.31 (1H, d, J = 1.5 Hz,
H-8), 6.13 (1H, d, J = 11.5 Hz, H-6), 5.20 (1H, d, J =
7.6 Hz, Glc-H-1);13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6) δ:
177.9 (C-4), 164.9 (C-7), 161.7 (C-5), 156.8 (C-2),
156.8 (C-9), 115.6 (C-3′), 160.4 (C-4′), 133.6 (C-3),
131.4 (C-6′), 121.4 (C-1′), 115.6 (C-5′), 131.4 (C-2′),
104.4 (C-10), 101.3 (Glc-C-1), 99.3 (C-6), 94.2 (C-8),
77.9 (Glc-C-5), 76.9 (Glc-C-3), 74.7 (Glc-C-2), 70.3
(Glc-C-4), 61.1 (Glc-C-6)。以上数据与文献报道基本
一致[17],故鉴定化合物 10 为紫云英苷。
3.2 化合物对 DPPH 自由基的清除
由表 1 可知,化合物 2、3、4 抗氧化活性较强,
超过人工抗氧化剂 TBHQ;6、7、8、9、10 的活性
比 TBHQ 略低,这可能是由于黄酮 B 环上的羟基数
目所致。通常 B 环上羟基越多,黄酮的抗氧化活性
越强,所以山柰酚-3-O-β-D-(6″-O-乙酰基)-β-D-葡萄
糖苷、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷和紫云英苷活性
比槲皮素及其苷类低。双键对活性影响较大,一旦
C-2, 3 双键被氢化后,缩短了共轭体系,改变了分
子的平面结构,降低了羟基的作用,不利于黄酮类
物质的抗氧化活性[18],因此二氢黄酮类化合物柚皮
素和江户樱花苷活性极低。
3.3 化合物对 PC12 细胞活性的影响
模型组PC12细胞活性与对照组比较明显下降,
说明所选模型有意义。化合物 2、3、4、6、8 在浓
度为 500 μmol/L 对 H2O2造成的 PC12 细胞损伤有
明显的保护作用(P<0.01),结果见表 2。由结果
表 1 化合物 1~10 对 DPPH 自由基清除的 IC50
Table 1 IC50 of compounds 1—10 on scavenging DPPH
free radicals
化合物 IC50 / (μmol·L−1) 化合物 IC50 / (μmol·L−1)
1 — 6 69.20
2 1.34 7 73.70
3 1.90 8 65.20
4 30.90 9 70.15
5 — 10 72.36
TBHQ 54.00
表 2 化合物 1~10 对 H2O2诱导 PC12 细胞凋亡的影响
( ± = 3x s n, )
Table 2 Effects of compounds 1—10 on survival rate
of PC12 cells induced by H2O2 ( ± = 3x s n, )
组别 剂量 /
(μmol·L−1)
存活率 组别 剂量/
(μmol·L−1)
存活率
对照组 — 0.87±0.11 模型组 — 0.32±0.04△△
1 500 0.10±0.05 6 500 0.43±0.12**
50 0.09±0.06 50 0.12±0.05
5 0.11±0.02 5 0.13±0.06
0.5 0.11±0.01 0.5 0.11±0.02
2 500 0.75±0.12** 7 500 0.22±0.12
50 0.58±0.07 50 0.18±0.03
5 0.51±0.04 5 0.19±0.06
0.5 0.44±0.02 0.5 0.17±0.04
3 500 0.49±0.13** 8 500 0.41±0.03**
50 0.18±0.15 50 0.18±0.01
5 0.20±0.06 5 0.21±0.02
0.5 0.17±0.08 0.5 0.20±0.04
4 500 0.84±0.05** 9 500 0.19±0.05
50 0.17±0.03 50 0.18±0.01
5 0.12±0.02 5 0.14±0.03
0.5 0.12±0.04 0.5 0.20±0.05
5 500 0.19±0.07 10 500 0.19±0.04
50 0.10±0.05 50 0.19±0.02
5 0.12±0.02 5 0.18±0.04
0.5 0.13±0.05 0.5 0.21±0.06
与对照组比较: △△P<0.01; 与模型组比较: **P<0.01
△△P < 0.01 vs control group; **P < 0.01 vs model group
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 3 期 2014 年 2 月
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可见,体外抗氧化活性强的化合物对 H2O2 造成的
PC12 细胞的凋亡保护作用越明显,因此推测,化合
物通过抗氧化作用达到对 PC12 细胞的保护作用。
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