全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 12期 2016年 6月

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疏风解毒胶囊 HPLC指纹图谱研究
曹 勇 3，郭 倩 1，田成旺 2，张铁军 2*，任 涛 2，李翔宇 3，成娅婷 4
1. 天津医科大学，天津 300070
2. 天津药物研究院，天津 300193
3. 安徽济人药业有限公司，安徽 亳州 236800
4. 天津大学，天津 300072
摘 要：目的 建立疏风解毒胶囊（SJC）HPLC 指纹图谱分析方法，为全面有效控制其质量提供依据。方法 采用 HPLC
法建立 SJC指纹图谱，色谱条件：Unitary C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相，梯度
洗脱，体积流量 1.0 mL/min，柱温 30 ℃，检测波长 250 nm，进样量 10 μL；对所建指纹图谱进行相似度分析及主成分分析
（PCA），并对共有峰进行药材归属及成分指认。结果 建立了 SJC HPLC指纹图谱共有模式，确定了 22个共有峰；14批 SJC
相似度在 0.915～0.977，PCA表明前 3个主成分代表了原始 HPLC指纹图谱的主要信息；在指纹图谱所标定的 22个共有峰
中，8、12、13、14、15、16、21、22号峰来自虎杖，1、2、3、7、9、10号峰来自连翘，5、6、11号峰来自马鞭草，4号
峰来自败酱草，18、19号峰来自甘草，17、20号峰未能归属到具体药材；通过质谱数据比对，共指认出 16个共有峰，分别
为 1号峰（连翘酯苷 E）、5号峰（戟叶马鞭草苷）、6号峰（马鞭草苷）、7号峰（5′-羟基连翘酯苷 A）、8号峰（虎杖苷）、9
号峰（连翘苷）、10号峰（连翘酯苷 A）、11号峰（毛蕊花糖苷）、12号峰（异连翘酯苷 A）、13号峰（芦荟大黄素）、14号
峰（大黄素-8-O-葡萄糖苷）、15号峰（大黄酸）、18号峰（甘草酸单铵盐）、19号峰（3-羟基光甘草酚）、21号峰（大黄素）、
22号峰（大黄酚）。结论 首次建立了 SJC HPLC指纹图谱分析方法，该法操作简单、准确，精密度、重复性好，可较全面
地反映 SJC中化学成分的信息，为 SJC质量控制提供了可靠的科学依据。
关键词：疏风解毒胶囊；HPLC；指纹图谱；质量控制；药材归属；成分指认；主成分分析；虎杖；连翘；马鞭草；败酱草；
甘草；连翘酯苷 E；戟叶马鞭草苷；马鞭草苷；5′-羟基连翘酯苷 A；虎杖苷；连翘苷；连翘酯苷 A；毛蕊花糖苷；异连翘酯
苷 A；芦荟大黄素；大黄素-8-O-葡萄糖苷；大黄酸；甘草酸单铵盐；3-羟基光甘草酚；大黄素；大黄酚
中图分类号：R286.02 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2016)12 - 2034 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.12.003
HPLC fingerprint of Shufeng Jiedu Capsule
CAO Yong3, GUO Qian1, TIAN Cheng-wang2, ZHANG Tie-jun2, REN Tao2, LI Xiang-yu3, CHENG Ya-ting4
1. Tianjin Medical University, Tianjin 300070, China
2. Tianjin Institute of Pharmaceutical Research, Tianjin 300193, China
3. Anhui Jiren Pharmaceutical Co., Ltd., Bozhou 236800, China
4. Tianjin University, Tianjin 300072, China
Abstract: Objective To establish an HPLC method for the fingerprint analysis of Shufeng Jiedu Capsule (SJC), so as to provide
evidence for the quality control of it. Methods HPLC method was applied with the chromatographic condition as follows: The
chromatographic column was Unitary C18 column (200 mm × 4.6 mm, 5 μm), acetonitrile-0.1% formic acid as the mobile phase with
gradient elution, the flow rate was 1.0 mL/min, the detection wavelength was 250 nm, the column temperature was 30 ℃, and the
injection volume was 10 μL. The HPLC fingerprint of SJC was analyzed with similarity analysis and principal component analysis
(PCA) method. Results The fingerprint chromatography included 22 mutual peaks, of which eight mutual peaks from Polygonum
cuspidatum, six mutual peaks from Forsythia suspensa, three mutual peaks from Verbena officinalis, two mutual peaks from
Glycyrrhiza uralensis, and one mutual peak from Thlaspi arvense. The similarity among 14 batches was more than 0.9. Based on the

收稿日期：2016-02-18
作者简介：郭 倩（1991—），女，甘肃庆阳人，硕士研究生，主要从事中药质量控制研究。Tel: (022)23006845 E-mail: grq1413@163.com
*通信作者 张铁军，研究员，主要研究方向为中药新药的研究与开发。Tel: (022)23006848 E-mail: zhangtj@tjipr.com
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HPLC-MS2 data, 16 components were identified, which were forsythosid E, hastatoside, verbenalin, 5′-hydroxy-forsythiaside A,
polydatin, phillyrin, forsythosid A, acteoside, iso-forsythosid A, aloe-emodin, emodin-8-O-grapeglycosides, parietic acid,
monoammonium glycyrrhizinate, 3-hydroxyglabrol, emodin, and chrysophanol. Conclusion It is the first time to establish the
HPLC fingerprint of SJC. The method is simple, accurate, and reproducible, which could reflect the chemical composition
information of SJC comprehensively and provide scientific evidence for the quality control.
Key words: Shufeng Jiedu Capluse; HPLC; fingerprint; quality control; medicinal attribute; component identification; principal
component analysis; Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.; Forsythia suspensa (Thunb.) Vahl; Verbena officinalis L.; Thlaspi
arvense Linn.; Glycyrrhiza uralensis Fisch.; forsythosid E; hastatoside; verbenalin; 5′-hydroxy-forsythiaside A; polydatin; phillyrin;
forsythosid A; acteoside; iso-forsythosid A; aloe-emodin; emodin-8-O-grapeglycosides; parietic acid; monoammonium
glycyrrhizinate; 3-hydroxyglabrol; emodin; chrysophanol

疏风解毒胶囊（SJC）是由虎杖、连翘、板蓝
根、马鞭草、败酱草、柴胡、芦根、甘草 8味药材
组成的中药复方制剂，用于急性上呼吸道感染属风
热证，症见发热、恶心、咽痛、头痛、鼻塞、流浊
涕、咳嗽等。体内外实验研究表明，SJC 具有抗流
感病毒[1]、肠道病毒[2]及其他呼吸道病毒[3]的作用，
还具有保护急性肝损伤 [4]及病毒性心肌炎 [5]的作
用，并具有抗菌、抗炎作用[6]，该药经多年临床实
践与应用，疗效确切[7-10]。
SJC 药味多、化学成分复杂，方中多种成分已
有明确的药理活性，而现有的质量标准仅制定了采
用薄层扫描法测定虎杖中大黄素的量[11]，难以有效
地控制药品的内在质量。本课题组前期已建立了
HPLC法同时测定 SJC中 7种活性成分的方法[12]，
本研究将利用 HPLC法进行 SJC指纹图谱研究，为
SJC质量控制提供参考和依据。
1 仪器与材料
Agilent1100-高效液相色谱仪，美国安捷伦公
司，配置自动进样器、柱温箱、UV检测器、Agilent
1100色谱工作站；Sartovius BT25S型电子天平（十
万分之一），赛多利斯科学仪器（北京）有限公司；
色谱柱为 Unitary C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），
浙江华谱新创科技有限公司；Mettler Toledo
AB204-N型电子天平（万分之一），梅特勒-托利多
仪器（上海）有限公司；AS3120 超声仪，美国
Autoscience公司。
14批 SJC，由安徽济人药业有限公司提供，批
号分别为 140301、140203、140204、140105、140206、
140207、140208、140209、140210、140211、140212、
140213、140214、140215，分别编号为 S1～S14。
乙腈（色谱纯）、乙醇（分析纯），天津市康科德科
技有限公司；甲酸，分析纯，天津市光复科技发展
有限公司；去离子水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Unitary C18色谱柱（200 mm×4.6 mm，5 μm）；
流动相为乙睛-0.1%甲酸水溶液，梯度洗脱：0～65
min，10%～30%乙腈；65～105 min，30%～80%乙
腈；105～107 min，80%～10%乙腈；107～120 min，
10%乙腈；体积流量 1.0 mL/min；检测波长 250 nm；
柱温 30 ℃；进样量 10 μL。
2.2 供试品溶液的制备
取 SJC内容物 1.0 g，精密称定，置于 100 mL
圆底烧瓶中，加入 50 mL 70%乙醇水溶液，称定质
量，回流提取 2 h，冷却后称定质量，用 70%乙醇
溶液补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液作为
供试品溶液。
2.3 精密度试验
精密吸取同一供试品溶液（S8），连续进样 6
次，按“2.1”项下方法测定。结果各共有峰的相对
保留时间和相对峰面积的 RSD 分别为 0.01%～
0.39%、0.85%～2.64%，表明本方法精密度良好。
2.4 重复性试验
取 SJC样品（S8）6份，按“2.2”项下方法制
备供试品溶液，按“2.1”项下方法进样测定。结果
各共有峰的相对保留时间和相对峰面积的 RSD 分
别为 0.06%～0.29%和 1.33%～2.82%，表明本方法
重复性良好。
2.5 稳定性试验
取同一供试品溶液（S8），室温放置，分别于 0、
4、8、12、24 h，按“2.1”项下方法进样测定。结
果各共有峰的相对保留时间和相对峰面积的 RSD
分别为 0.17%～0.97%和 0.25%～2.47%，表明供试
品溶液在 24 h内稳定。
2.6 SJC指纹图谱的建立及相关技术参数分析
2.6.1 指纹图谱的建立及相似度分析 根据 14 批
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SJC检测所得图谱，标定 22个共有峰，采用国家药
典颁布的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”2012
年版进行分析，以中位数法建立对照指纹图谱，见
图 1。对 14批样品进行相似度计算，结果 S1～S14
的相似度分别为 0.920、0.974、0.951、0.960、0.972、
0.974、0.952、0.977、0.974、0.960、0.915、0.919、
0.920、0.962。结果表明不同批次的 SJC 之间相似
性良好，质量稳定。
2.6.2 SJC 指纹图谱主成分分析（PCA） 采用
SPSS 21.0软件对 14批 SJC指纹图谱的 22个共有
峰峰面积做标准化处理，再对其进行运算，主成分
个数的提取原则为主成分对应的特征值大于 1的前
m个主成分。表 1结果表明，前 4个主成分的累积
贡献率可达 92.28%，包含了大部分信息。其中，第
1 主成分特征值为 10.92，贡献率为 49.64%；第 2
主成分特征值为 6.66，贡献率为 30.26%；第 3主成
分特征值为 1.54，贡献率为 6.98%；第 4主成分特
征值为 1.19，贡献率为 5.40%。由因子负荷矩阵表
（表 2）可以看出，第 1主成分主要反映了来自色谱
峰 1、6～20的信息，第 2主成分主要反映了来自色
谱峰 3～5、21、22的信息，第 3主成分主要反映了
来自色谱峰 2 的信息。前 3 个主成分代表了原始
HPLC指纹图谱的主要信息。
2.6.3 主要色谱峰的药材归属 取虎杖药材、连翘
药材、败酱草药材、马鞭草药材、甘草药材粉末（过
三号筛）各约 1.0 g，精密称定置具塞锥形瓶内，加
50%甲醇超声处理 30 min，取续滤液，过 0.45 μm
微孔滤膜，即得。
另按照 SJC处方及制备工艺依次制备缺虎杖、
缺连翘、缺败酱草、缺马鞭草、缺甘草阴性样品，
按“2.2”项下方法制得各阴性供试品溶液。
按“2.1”项下色谱条件进样分析，得到如图 2
所示各样品色谱峰，通过保留时间和各样品比对分
析，指纹图谱中标定的 22个共有峰中，8、12、13、
14、15、16、21、22号峰来自于虎杖，1、2、3、7、
9、10号峰来自于连翘，5、6、11号峰来自于马鞭



图 1 14批 SJC HPLC指纹图谱及对照指纹图谱 (R)
Fig. 1 HPLC fingerprints and control fingerprint (R) for 14 batches of SJC

表 1 特征值与贡献率
Table 1 Characteristic value and contribution rate
成分 特征值 贡献率/% 累积贡献率/% 成分 特征值 贡献率/% 累积贡献率/% 成分 特征值 贡献率/% 累积贡献率/%
1 10.920 49.637 49.637 5 0.516 2.347 94.624 9 0.133 0.603 99.710
2 6.656 30.257 79.894 6 0.451 2.051 96.674 10 0.064 0.290 100.000
3 1.537 6.985 86.879 7 0.331 1.503 98.177 11 4.437×10−16 2.017×10−15 100.000
4 1.188 5.398 92.276 8 0.205 0.930 99.108
1 2 3
10
11
0 17.39 34.77 52.16 69.55 86.94 104.32 121.71
t/min
4
5
6 7
8 9
12 13 14
15 18
19 20
21
22 16 17
R

S14
S13
S12
S11
S10
S9
S8
S7
S6
S5
S4
S3
S2
S1
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表 2 因子负荷矩阵
Table 2 Component matrix
色谱峰
主成分
色谱峰
主成分
色谱峰
主成分
1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4
1 0.704 −0.535 0.360 0.273 9 0.842 −0.482 −0.132 −0.023 17 0.822 0.536 −0.061 0.129
2 0.524 −0.374 0.690 0.297 10 0.837 −0.481 −0.134 −0.044 18 0.720 0.571 0.139 0.265
3 0.477 0.694 −0.305 0.092 11 0.717 0.535 −0.217 −0.148 19 0.788 0.356 −0.150 0.097
4 0.286 0.861 0.088 −0.155 12 0.587 0.405 0.304 −0.543 20 0.625 0.484 −0.292 0.038
5 0.507 0.740 0.396 −0.043 13 0.937 −0.283 −0.058 −0.059 21 −0.310 0.911 0.128 0.129
6 0.638 0.532 0.326 −0.366 14 0.918 −0.217 0.061 −0.161 22 −0.118 0.860 −0.261 0.362
7 0.692 −0.568 −0.274 −0.312 15 0.879 −0.442 −0.066 0.063
8 0.916 −0.225 −0.291 0.106 16 0.886 −0.150 0.076 0.386


图 2 SJC指纹图谱中各共有峰归属色谱图
Fig. 2 HPLC of each common peak attribution in fingerprint of SJC
8 15
0 15 30 45 60 75 90 105 120
t/min
SJC
虎杖药材
虎杖阴性
连翘药材
连翘阴性
马鞭草药材
马鞭草阴性
败酱草药材
败酱草阴性
甘草药材
甘草阴性
8 15
1 2
3 4 5 6 7
9 10 11 12 13 14 16 17
18
19 20
21
22
12
13 14
16
21
22
10
1 2 3 7 9
5 6
11
6
18 19
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草，4号峰来自于败酱草，18、19号峰来自于甘草，
17、20号峰未能归属到药材。
2.6.4 主要色谱峰的成分指认 利用HPLC-MSn方
法对 SJC指纹图谱中各色谱峰进行检测，在对相关
质谱数据进行数据分析和参照相关文献[13]的基础
上，对其中的 16个主要色谱峰进行了结构鉴定和成
分指认，相关实验数据及结果见表 3。
HPLC-MSn 分析条件：Thermo Fishier LCQ

表 3 SJC指纹图谱主要色谱峰的指认结果[10]
Table 3 Identification results of main peaks in SJC fingerprint
峰号 tR/min 质谱数据 分子式 相对分子质量 鉴定结果
1 7.281 463 [M＋H]+ C20H30O12 462.451 0 连翘酯苷 E
5 13.040 243 [M＋H-Glu]+ C17H24O11 404.371 0 戟叶马鞭草苷
6 15.848 227 [M＋H-Glu]+, 195 [M＋H-Glu-CH4O]+ C17H24O10 388.371 6 马鞭草苷
7 27.324 641 [M＋H]+ C29H36O16 640.196 2 羟基化连翘酯苷 A
8 28.659 391 [M＋H]+ C20H22O8 390.383 9 虎杖苷
9 30.060 557 [M＋Na]+, 355 [M＋H－Glu]+ C27H34O11 534.560 4 连翘苷
10 30.648 643 [M＋H2O＋H] + C29H36O15 624.595 8 连翘酯苷 A
11 32.343 643 [M＋H2O＋H] + C29H36O15 624.595 8 毛蕊花糖苷
12 36.230 643 [M＋H2O＋H] +, 625 [M＋H]+ C29H36O15 624.595 8 异连翘酯苷 A
13 45.268 271 [M＋H]+ C15H10O5 270.236 9 芦荟大黄素
14 58.174 433 [M＋H]+ C21H20O20 432.110 4 大黄素-8-O-葡萄糖苷
15 60.562 285 [M＋H]+ C15H8O6 284.220 4 大黄酸
18 78.012 841 [M＋H]+ C42H65NO16 839.962 6 甘草酸单铵盐
19 79.813 409 [M＋H]+ C25H28O5 408.494 3 3-羟基光甘草酚
21 92.305 271 [M＋H]+, 243 [M＋H－CO]+ C15H10O5 270.241 4 大黄素
22 105.207 255 [M＋H]+ C15H10O4 254.230 4 大黄酚

Advantage Max 离子阱液质联用仪。Nitary C18 柱
（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙睛-0.1%甲
酸水溶液；检测波长 250 nm；体积流量 1 mL/min；
柱温 30 ℃；进样体积 5 μL。流动相梯度为 0～65
min，10%～30%乙腈；65～105 min，30%～80%乙
腈；105～107 min，80%～10%乙腈；107～120 min，
10%～10%乙腈。离子化模式为 ESI；离子检测模式
为全扫描；分析模式为正离子模式；采集范围为
m/z：100～1 000；毛细管温度为 250 ℃；喷雾电压
为 4.5 kV；毛细管电压为 25 V；鞘气体积流量为 3.5
L/min；辅助气体积流量为 2.0 L/min。
3 讨论
本实验考察对比了不同的流动相系统，包括甲
醇-水、乙腈-水、甲醇-0.1%甲酸水溶液、乙腈-0.1%
甲酸水溶液，结果表明，以乙腈-0.1%甲酸水溶液体
系为流动相，采用梯度洗脱方法，能够达到较好的
洗脱效果，各色谱峰的峰形和分离度较好，故选用
乙腈-0.1%甲酸水溶液作为流动相系统。
利用 DAD 检测器对供试品溶液在 200～400
nm进行全波长扫描，并分析比较在 230、250、330
nm波长下 HPLC色谱图，结果显示在 250 nm波长
下色谱峰信息较多，基线平稳，因此选择 250 nm
为检测波长。
本实验通过对比分析供试品溶液HPLC色谱图
优选了供试品溶液制备方法，分别对提取方式、提
取溶剂、提取时间、提取次数进行逐个考察，结果
表明，采用 70%乙醇回流提取 2 h时，供试品色谱
图中色谱峰数量较多，提取收率较高，故选择此法
作为供试品溶液制备方法。
本实验建立了 SJC的 HPLC指纹图谱，共标定
了 22个共有峰，计算了 14批 SJC的相似度均大于
0.9，表明不同批次 SJC 在化学成分组成上差异较
小，质量稳定。同时采用 HPLC-MS2方法对其中主
要色谱峰进行了药材归属和成分指认。
本实验所建立的方法操作简单、稳定性好、结
果可靠，能够全面反映 SJC中多种成分的有无及成
分间的比例，将建立的 SJC特征图谱用于其生产过
程，可为该产品提供更全面可靠的控制手段。
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 12期 2016年 6月

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参考文献
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