全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 22 期 2013 年 11 月

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淫羊藿水提取物对大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化的影响及其机制
杨 丽 1，朱晓峰 2，王攀攀 2，黄 丰 1，张荣华 1*
1. 暨南大学药学院，广东 广州 510632
2. 暨南大学附属第一医院，广东 广州 510630
摘 要：目的 观察淫羊藿水提取物对 SD 大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）骨向分化能力及转化生长因子 β1（TGF-β1）、骨形
态发生蛋白 2（BMP-2）表达的影响，阐释其防治骨质疏松症的作用机制。方法 全骨髓贴壁法分离、纯化大鼠 MSCs；以碱
性磷酸酶（ALP）活性及 ALP 染色阳性率确定淫羊藿水提取物促 MSCs 骨向分化的最佳质量浓度，并以该质量浓度进行 MSCs
骨向分化实验。按是否添加经典成骨诱导液将大鼠分为对照组、成骨诱导剂组、淫羊藿水提取物（500 μg/mL）组、淫羊藿水
提取物（500 μg/mL）＋成骨诱导剂组，每 3～4 d 各组更换含相应物质培养液 1 次，连续干预 14 d。通过检测各组 ALP、I 型
胶原（Col I）、骨钙素（BGP）和钙化结节等骨向分化指标的变化，以评价淫羊藿水提取物对 MSCs 骨向分化能力的影响；通
过检测 TGF-β1、BMP-2 的表达，研究淫羊藿水提取物促 MSCs 骨向分化的作用机制。结果 淫羊藿水提取物最佳促 MSCs 骨
向分化的质量浓度为 500 μg/mL；成骨诱导剂组、淫羊藿水提取物组及淫羊藿水提取物＋成骨诱导剂组均能促进 MSCs 骨向分
化及上调 TGF-β1和 BMP-2 的表达。结论 淫羊藿促进 MSCs 骨向分化，上调 TGF-β1、BMP-2 的表达可能是其作用机制之一。
关键词：淫羊藿水提取物；骨髓间充质干细胞；骨向分化；转化生长因子 β1；骨形态发生蛋白 2
中图分类号：R282.710.5 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2013)22 - 3182 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.22.016
Effect of epimedium water extract on osteogenic differentiation in bone marrow
derived mesenchymal stem cells of rats and its mechanism
YANG Li1, ZHU Xiao-feng2, WANG Pan-pan2, HUANG Feng1, ZHANG Rong-hua1
1. Pharmacy College of Jinan University, Guangzhou 510632, China
2. The first Affiliated Hospital of Jinan University, Guangzhou 510630, China
Abstract: Objective To investigate the effects of epimedium water extract (EWE) on the ability of osteogenic differentiation and the
expression of TGF-β1 and BMP-2 in inducing mesenchymal stem cells (MSCs) differenting into osteoblast and to further explain its
mechanism. Methods MSCs were isolated and purified by differential time adherent method; the most effective concentration of
EWE on the osteogenic differentiation of MSCs was confirmed by the activity of alkaline phosphatase (ALP) and positive rates of ALP
staining; according to the differently induced condition, MSCs were divided into four groups: control, classic (induced by the classic
osteoblast-induced system), EWE (induced by the most effective concentration of EWE on the osteogenic differentiation), and EWE +
classic (induced by the combination of classic osteoblast-induced system and the most effective concentration of EWE on osteogenic
differentiation) groups. ALP, type I collagen (Col I), bone gla protein (BGP), and calcium nodes in each group were detected and
compared to indicate the osteogenic differentiation of each group. TGF-β1 and BMP-2 in each group were detected by ELISA. Results
The most effective concentration of the EWE on the osteogenic differentiation of MSCs was 500 μg/mL. The classic, EWE, and EWE +
classic groups could promote the osteogenic differentiation of MSCs and increase the expression of TGF-β1 and BMP-2. Conclusion
The EWE could promote the osteogenic differentiation of MSCs. The increase of the expression of TGF-β1 and BMP-2 in the induced
groups of EWE may be the mechanism of improving the differentiation of MSCs into osteoblast.
Key words: epimedium water extract; mesenchymal stem cells; osteogenic differentiation; TGF-β1; BMP-2

收稿日期：2013-02-26
基金项目：国家自然科学基金资助项目（81173619）；广东省教育厅育苗工程项目（LYM10025）；广东省自然科学基金博士启动（S2012040007531）
作者简介：杨 丽（1979—），女，湖北荆门人，博士研究生，主要从事干细胞和临床中药学研究。E-mail: doctormoney@126.com
*通信作者 张荣华 Tel: (020)85220023 E-mail: tzrh@jnu.edu.cn
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骨髓间充质干细胞（MSCs）是在骨髓中发现
的一种起源于中胚层、具有自我复制和多向分化潜
能的非造血干细胞，在不同的诱导条件下，其能向
成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等中胚层组织分化。
成骨细胞数量和功能的不足或相对不足，是骨质疏
松症发生的重要因素之一，而作为成骨细胞起源的
MSCs，其骨向分化能力又直接影响成骨细胞的数
量和功能，故与骨质疏松症密切相关[1]。
淫羊藿具有补肾壮阳、强筋健骨、祛风除湿之
功效，药理和临床研究均证实其具有良好的防治骨
质疏松症的作用，能促进成骨细胞增殖、矿化，抑
制破骨细胞活性[2-4]。本实验观察淫羊藿水提取物对
MSCs 骨向分化能力及转化生长因子 β1（TGF-β1）、
骨形态发生蛋白 2（BMP-2）表达的影响，从干细
胞角度阐释淫羊藿防治骨质疏松症的作用机制。
1 材料
1.1 药物与试剂
淫羊藿免煎颗粒，深圳三九医药股份有限公司，
批号 0605129s；DMEM 培养基，美国 Gibco 公司；
地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素 C，美国 Sigma
公司；碱性磷酸酶（ALP）检测试剂盒，南京建成
生物工程研究所；大鼠 I 型胶原（Col I）ELISA 试
剂盒，美国 ADL 诊断实验室；骨钙素（BGP）放
射免疫分析药盒，解放军总医院科技开发中心放免
所；大鼠 TGF-β1 ELISA 试剂盒，澳大利亚 Bender
MedSystems 公司；大鼠 BMP-2 ELISA 试剂盒，美
国 R&D 公司。
1.2 动物
清洁级 SD 雌性大鼠，3 月龄，体质量（230±
10 g），由中山大学实验动物中心提供，许可证号：
粤监证字 2005A010。
1.3 仪器
CO2 培养箱，美国 Revco 公司；CK40—F200
型倒置相差显微镜，日本 Olympus 公司；紫外分光
光度计，美国 Perkin Elmer 公司；Safire 2 全波长多
功能酶标仪，瑞士 TECAN 集团公司；FJ—2008PS
型 γ放射免疫计数器，西安核仪器厂。
2 方法
2.1 淫羊藿水提取物的制备
取 1 g 淫羊藿免煎颗粒（相当于饮片 10 g）溶
于 10 mL 双蒸水中，充分溶解，制备成质量浓度为
1 g/mL 的淫羊藿水提取物（淫羊藿苷质量分数为
0.797%，符合《中国药典》规定），0.22 μm 微孔过
滤器滤过、除菌，4 ℃保存，以此质量浓度的提取
物作为母液进行相应梯度的稀释。
2.2 经典成骨诱导液的配制
取 1×10−8 mol/L 地塞米松、10 mmol/L β-甘油
磷酸钠、50 μmol/L 维生素 C、10%胎牛血清（FBS），
无菌条件下用高糖 DMEM 培养基定容至 100 mL，
充分混匀，4 ℃保存。
2.3 MSCs 的分离、培养与传代
采用全骨髓贴壁法[5]分离 SD 大鼠 MSCs，以
1×106/mL 的密度将 MSCs 接种到 25 cm2 塑料培养
瓶中，于 37 ℃、5% CO2、饱和湿度的培养箱中培
养，24 h 后首次半量换液，之后每 3 d 换液 1 次。
待细胞达到 80%～90%融合后以 1∶2 传代。
2.4 淫羊藿水提取物促 MSCs 骨向分化最佳浓度
的确定
第 3 代 MSCs 以 1×105/mL 接种于 24 孔板。
细胞分成对照组（有细胞但未加药物）、5 个淫羊藿
水提取物不同质量浓度组，共 6 组。待细胞接种 24
h 后，换入无血清培养基，24 h 细胞周期同步化后
加入药物及含 10% FBS 的 L-DMEM 完全培养液完
全培养基，使药物终质量浓度分别为 0、5、50、500、
5×103、5×104 μg/mL，每孔终体积 1 mL，每组 6
个复孔。培养板置于 37 ℃、5% CO2培养箱中继续
培养，每 3～4 d 各组更换含相应物质培养液 1 次，
连续干预 14 d。取细胞上清液，对硝基苯磷酸盐
（pNPP）法检测 ALP 的量；钙钴法对细胞进行 ALP
染色，光镜下随机取 10 个非重叠视野，高倍镜下记
数 ALP 阳性细胞和总细胞数，计算阳性染色率。综
合上述 2 种方法检测的结果进行统计学分析，确定
淫羊藿水提取物最佳促 MSCs 骨向分化质量浓度。
2.5 对 MSCs 骨向分化的影响
2.5.1 分组 实验分为 4 组：对照组（含 10% FBS
的 L-DMEM 完全培养液），成骨诱导剂组（含 10%
FBS 的 L-DMEM 完全培养液＋经典成骨诱导剂地
塞米松 1×10−8 mol/L＋β-甘油磷酸钠 10 mmol/L＋
维生素 C 50 μmol/L），淫羊藿水提取物组（含 10%
FBS 的 L-DMEM 培养液＋淫羊藿水提取物 500
μg/mL），淫羊藿水提取物＋成骨诱导剂组（含 10%
FBS的L-DMEM完全培养液＋淫羊藿水提取物 500
μg/mL＋地塞米松 1×10−8 mol/L）。
2.5.2 对 MSCs ALP 活性的影响 第 3 代 MSCs 以
5×104/mL 接种于 24 孔板，24 h 后更换无血清的培
养基，待细胞周期同步化24 h后各组加入相应药物，
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每孔终体积为 1.0 mL，每 3～4 d 换液 1 次，持续处
理 14 d，每组 6 个复孔。分别取给药第 3、7、10、
14 天细胞上清液，−20 ℃保存，按照 ALP 试剂盒
说明检测 ALP 活性。
2.5.3 对 MSCs Col I、BGP 量的影响 取“2.5.2”
项下各组给药第 7、14、21 天的细胞上清液，−20 ℃
保存，ELISA 法检测 Col I 的分泌量，放射免疫法
（RIA）法检测 BGP 的分泌量。
2.5.4 对 MSCs 矿化能力的影响 第 3 代 MSCs
以 1×105/mL 接种于预先置有小盖玻片的 6 孔板
中，共 4 组，细胞处理同“2.5.2”项，每孔终体积
2.5 mL，每组 3 个复孔，每 3 d 换液 1 次，持续处
理 21 d。第 21 天弃培养液，磷酸盐缓冲液（PBS）
清洗，95%乙醇固定 30 min，0.1%茜素红染色 30
min，清水冲洗，低倍镜（×40）下进行矿化结节
计数，每孔细胞随机计数 10 个视野。
2.5.5 对 TGF-β1、BMP-2 量的影响 取“2.5.2”
项下各组给药第 7、14、21 天细胞上清液，−20 ℃
保存，ELISA 法检测 TGF-β1 和 BMP-2 的量。
2.6 统计学分析
采用 SPSS13.0 统计软件进行单因素及双因素方
差分析，数据以 ±x s 表示，检验水准取双侧 α＝0.05。
3 结果
3.1 淫羊藿水提取物促 MSCs 骨向分化最佳浓度
的确定
3.1.1 对 ALP 活性的影响 与对照组相比，淫羊藿
水提取物 500 μg/mL 组 ALP 的活性增强（P＜0.01），
而 50 mg/mL 组 ALP 的活性减弱（P＜0.05），淫羊
藿水提取物其他质量浓度组的 ALP 的活性与对照
组比较均无显著差异，表明淫羊藿水提取物 500
μg/mL 促 MSCs 分泌 ALP 的能力最强。结果见图 1。


与对照组比较：*P＜0.05 **P＜0.01
*P < 0.05 **P < 0.01 vs control group
图 1 淫羊藿水提取物对 ALP 活性的影响
Fig. 1 Effects of EWE on ALP activity
3.1.2 对 ALP 染色的影响 淫羊藿水提取物 5、50、
500、5×103 μg/mL 组 ALP 阳性染色率均显著高于
对照组（P＜0.01），其中 500 μg/mL 组的作用最显
著（P＜0.01）；而 5×104 μg/mL 组 ALP 阳性染色
率与对照组比较无显著差异。结果见图 2。结果表
明淫羊藿水提取物 500 μg/mL具有最佳促ALP表达
的作用，采用该质量浓度进行后续实验。


与对照组比较：**P＜0.01
与淫羊藿水提取物 500 μg/mL 组比较：▲▲P＜0.01
**P < 0.01 vs control group; ▲▲P < 0.01 vs 500 μg/mL EWE group
图 2 淫羊藿水提取物对 ALP 染色阳性率的影响
Fig. 2 Effects of EWE on positive rates of ALP staining
3.2 对 MSCs 骨向分化的影响
3.2.1 对 ALP 活性的影响 给药第 3 天，淫羊藿水
提取物组、成骨诱导剂组的 ALP 活性显著强于对照
组（P＜0.05）；淫羊藿水提取物组的 ALP 活性还显
著强于淫羊藿水提取物＋成骨诱导剂组（P＜0.05）。
给药第 7 天，仅淫羊藿水提取物组的 ALP 值明显强
于对照组（P＜0.05）。给药第 10 天，淫羊藿水提取
物组 ALP 活性显著强于对照组、淫羊藿水提取物＋
成骨诱导剂组（P＜0.05、0.01）。给药第 14 天，淫
羊藿水提取物组 ALP 活性显著强于对照组（P＜
0.05）。给药第 3 天，成骨诱导剂组 ALP 的活性明
显强于对照组和淫羊藿水提取物＋成骨诱导剂组
（P＜0.05），而与淫羊藿水提取物组无显著差异。上
述结果提示淫羊藿水提取物和经典的成骨诱导剂均
能促进 ALP 的表达，且二者作用强度相当。结果见
表 1。
3.2.2 对 Col I 和 BGP 量的影响 给药第 7 天，淫
羊藿水提取物的 Col I 的量显著高于成骨诱导剂组
（P＜0.01），而低于淫羊藿水提取物＋成骨诱导剂组
（P＜0.01）。给药第 14 天，淫羊藿水提取物组 Col I
的量显著高于其他各组（P＜0.01）。给药第 21 天，
淫羊藿水提取物组 Col I 的量低于成骨诱导剂组和
淫羊藿水提取物＋成骨诱导剂组（P＜0.05、0.01）。

6
5
4
3
2
1
0
对照 5 50 500 5×103 5×104
淫羊藿水提取物 / (μg·mL−1)
A
LP
(金
氏
单
位
)
**
*

0.30
0.25
0.20
0.15
0.10
0.05
0
A
LP
染
色
阳
性
率

对照 5 50 500 5×103 5×104
淫羊藿水提取物 / (μg·mL−1)
▲▲
▲▲**
▲▲**
**
▲▲**
▲▲
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结果表明，淫羊藿水提取物、淫羊藿水提取物＋成
骨诱导剂、成骨诱导剂均能促进 Col I 的分泌，其
中淫羊藿水提取物组及淫羊藿水提取物＋成骨诱导
剂的作用更为显著。结果见表 2。
给药第 7、14、21 天，淫羊藿水提取物组、成
骨诱导剂组、淫羊藿水提取物＋成骨诱导剂组
BGP 的量均高于对照组（P＜0.05、0.01）其中给药
第 7 天时，淫羊藿水提取物组 BGP 的量高于成骨诱
导剂组（P＜0.01）。结果见表 2。
3.2.3 对 MSCs 矿化能力的影响 淫羊藿水提取物
组、成骨诱导剂组 MSCs 矿化结节数均显著多于对
照组和淫羊藿水提取物＋成骨诱导剂组（P＜0.05），
提示淫羊藿水提取物和成骨诱导剂均能显著增强
MSCs 的矿化能力。结果见表 3。
表 1 淫羊藿水提取物对 MSCs ALP 活性的影响 ( ± = 6x s , n )
Table 1 Effect of EWE on ALP activity of MSCs ( ± = 6x s , n )
ALP / (U·L−1)
组 别 ρ / (μg·mL−1)
给药第 3 天 给药第 7 天 给药第 10 天 给药第 14 天
对照 － 111.47±7.15▲ 116.50±6.96▲ 118.74±3.47▲ 100.50±5.20▲
成骨诱导剂 － 130.67±9.14* 121.75±9.00 124.18±1.33 109.31±7.34
淫羊藿水提取物 500 133.13±4.95* 137.52±5.76* 131.26±6.34* 100.01±6.32*
淫羊藿水提取物＋成骨诱导剂 － 114.20±3.07▲ 123.85±3.96 110.37±1.87▲▲ 107.68±2.96
与对照组比较：*P＜0.05；与淫羊藿水提取物组比较：▲P＜0.05 ▲▲P＜0.01
*P < 0.05 vs control group; ▲P < 0.05 ▲▲P < 0.01 vs EWE group
表 2 淫羊藿水提取物对 MSCs Col I 和 BGP 量的影响 ( ± = 6x s , n )
Table 2 Effect of EWE on Col I and BGP amount of MSCs ( ± = 6x s , n )
Col I / (μg·mL−1) BGP / (ng·mL−1)
组 别 ρ / (μg·mL−1)
给药第 7 天 给药第 14 天 给药第 21 天 给药第 7 天 给药第 14 天 给药第 21 天
对照 － 0.41±0.06▲▲ 0.43±0.05▲▲ 0.66±0.06▲▲ 1.28±0.03▲▲ 3.83±0.77▲▲ 4.11±0.49▲▲
成骨诱导剂 － 1.62±0.06**▲▲ 1.63±0.04**▲▲ 1.54±0.12**▲ 3.29±0.77*▲▲ 7.11±0.30** 6.81±0.75**
淫羊藿水提取物 500 1.91±0.11** 2.68±0.06** 1.27±0.08** 6.44±0.63** 6.03±0.92* 7.88±0.80**
淫羊藿水提取物＋成骨诱导剂 － 2.37±0.11**▲▲ 1.94±0.03**▲▲ 1.70±0.10**▲▲ 6.17±0.74** 7.63±0.65** 7.36±0.51**
与对照组比较：*P＜0.05 **P＜0.01；与淫羊藿水提取物组比较：▲P＜0.05 ▲▲P＜0.01，表 3 同
*P < 0.05 **P < 0.01 vs control group; ▲P < 0.05 ▲▲P < 0.01 vs EWE group, same as Table 3
表 3 淫羊藿水提取物对 MSCs 中矿化结节数的影响
( ± = 30,x s n )
Table 3 Effect of EWE on calcium nodes of MSCs
( ± = 30,x s n )
组 别 ρ / (μg·mL−1) 矿化结节数 / 个
对照 － 5.30±0.40▲▲
成骨诱导剂 － 10.23±1.91*▲
淫羊藿水提取物 500 14.63±1.90**
淫羊藿水提取物＋成骨诱导剂 － 5.90±2.01▲▲

3.2.4 对 MSCs TGF-β1 和 BMP-2 表达的影响 给
药第 7 天，淫羊藿水提取物组、淫羊藿水提取物＋
成骨诱导剂组、成骨诱导剂组 TGF-β1 的值均显著高
于对照组（P＜0.05、0.01）。给药第 14 天，各组
TGF-β1 的值均有所下降，但淫羊藿水提取物＋成骨
诱导剂组的 TGF-β1 值仍高于其他各组（P＜0.05、
0.01），而其他 3 组之间无显著差异。给药第 21 天，
淫羊藿水提取物组 TGF-β1 的值显著高于其他各组
（P＜0.01）。淫羊藿水提取物和成骨诱导剂均能促进
TGF-β1 的表达。结果见表 4。
给药第 7 天，淫羊藿水提取物组、淫羊藿水提
取物＋成骨诱导剂组、成骨诱导剂组 BMP-2 的值均
高于对照组（P＜0.01），其中成骨诱导剂组 BMP-2
的值最高（P＜0.01）。给药第 14 天，成骨诱导剂组
BMP-2 的值显著高于其他 3 组（P＜0.01）。给药第
21 天，淫羊藿水提取物组、淫羊藿水提取物＋成骨
诱导剂组、成骨诱导剂组 BMP-2 的值均显著高于对
照组（P＜0.05、0.01），其中淫羊藿水提取物组、
淫羊藿水提取物＋成骨诱导剂组 BMP-2 值高于成
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表 4 淫羊藿水提取物对 MSCs 中 TGF-β1和 BMP-2 表达的影响 ( ± = 6x s , n )
Table 4 Effect of EWE on expression of TGF-β1 and BMP-2 of MSCs ( ± = 6x s , n )
TGF-β1 / (ng·mL−1) BMP-2 / (pg·mL−1) 组 别
ρ /
(μg·mL−1) 给药第 7 天 给药第 14 天 给药第 21 天 给药第 7 天 给药第 14 天 给药第 21 天
对照 － 0.48±0.02▲ 0.36±0.04△△ 0.32±0.01 1 273.33±25.17▲▲ 835.00±265.00## 1 795.00±190.20#
成骨诱导剂 － 2.50±0.43** 0.29±0.06△△ 0.36±0.06 2 866.67±30.55** 2 072.67±76.43** 2 198.33±67.52*
淫羊藿水提取物 500 1.96±0.41** 0.40±0.05△ 0.95±0.07**△△ 1 686.67±15.28**▲▲ 1 216.67±20.82## 2 860.00±40.00**##
淫羊藿水提取物＋成骨诱导剂 － 1.64±0.12* 0.58±0.03** 0.39±0.07 1 668.33±16.07**▲▲ 1 420.00±20.00**## 2 756.67±58.59**##
与对照组比较：*P＜0.05 **P＜0.01；与淫羊藿水提取物组比较：▲P＜0.05 ▲▲P＜0.01
与淫羊藿水提取物＋成骨诱导剂组比较：△P＜0.05 △△P＜0.01；与成骨诱导剂组比较：#P＜0.05 ##P＜0.01
*P < 0.05 **P < 0.01 vs control group; ▲P < 0.05 ▲▲P < 0.01 vs EWE group
△P < 0.05 △△P < 0.01 vs EWE + classic group; #P < 0.05 ##P < 0.01 vs classic group
骨诱导剂组（P＜0.01）。结果表明淫羊藿水提取物、
淫羊藿水提取物＋成骨诱导剂、成骨诱导剂均能促
进 BMP-2 的表达。
4 讨论
本实验选用的淫羊藿免煎颗粒是经现代工艺提
取、浓缩、干燥而成，其功效与中药饮片一致，以
制备的水提取物与原药材煎煮液中成分基本一致。
实验结果显示，淫羊藿水提取物和经典成骨诱导剂
均能显著增强 ALP，增加 Col I、BGP 的分泌量和
矿化结节的数量，其在实验早中期增强 Col I 活性
的作用优于经典成骨诱导剂，后期反下降，在实验
早期增强 BGP 活性的作用优于经典成骨诱导剂。淫
羊藿水提取物与经典成骨诱导剂联合给药不能显著
增强 ALP 的活性和增加矿化结节的数量，但能明显
促进 Col I、BGP 分泌，且在实验早期促 Col I 表达
的作用最佳。各组给药第 3、7、10 天时 ALP 活性
均显著高于第 14 天，表明 ALP 是反映 MSCs 骨向
分化的一个早期指标；给药第 7、14 天的 Col I 值
显著高于第 21 天，表明 Col I 是反映 MSCs 骨向分
化的一个早中期指标；给药第 14、21 天 BGP 值高
于第 7 天，表明 BGP 是反映 MSCs 骨向分化的一个
中晚期指标。
在 TGF-β超家族中，TGF-β1 与骨代谢的关系最
为密切。TGF-β1 能调控多种间充质来源细胞的增殖
和定向分化，尤其在成骨分化、骨基质合成和骨重
建中起重要的作用，成为调控 MSCs 骨向分化的首
选生长因子之一[6-9]。BMPs 也属于 TGF-β超家族成
员，是目前公认的高效骨诱导因子，具有诱导成骨
细胞分化和体外成骨的能力，而且能启动 MSCs 的
成骨过程，其中以 BMP-2 的成骨能力最强[10]。本
实验结果显示，淫羊藿水提取物、经典成骨诱导剂、
淫羊藿水提取物＋经典成骨诱导剂均能促进
TGF-β1 和 BMP-2 的分泌，其中各组 TGF-β1 表达量
在给药第 7 天最高，随后迅速降低，在给药第 14～
21 天维持低水平，提示 TGF-β1 可能是一个在 MSCs
骨向分化过程中早期分泌的促分化因子。各组
BMP-2 在给药第 14 天下降，在给药第 21 天又有所
回升，表明 BMP-2 在各组诱导 MSCs 骨向分化过程
中均有分泌，且在给药第 14 天有所下降。在淫羊藿
水提取物组和淫羊藿水提取物＋经典成骨诱导剂组
诱导过程晚期中，BMP-2 分泌量最高，提示 BMP-2
可能是淫羊藿促 MSCs 骨向分化过程后期非常重要
的细胞因子。
综上所述，补肾中药可能以 MSCs 为作用靶点，
通过促进其增殖和骨向分化，增加成骨细胞数量和
活性，促进骨形成，从而达到治疗骨病的作用。而
在促 MSCs 骨向分化过程中，上调 TGF-β1、BMP-2
的表达可能是其作用机制。
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