全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 7 期 2012 年 7 月

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毛冬青根中的新三萜皂苷
赵钟祥 1，曾瑞鑫 1，金 晶 2，林朝展 1，熊天琴 1，蔡金艳 3，祝晨蔯 1*
1. 广州中医药大学中药学院，广东 广州 510006
2. 中山大学药学院，广东 广州 510006
3. 广东药学院药科学院，广东 广州 510006
摘 要：目的 研究毛冬青 Ilex pubescens 根的化学成分。方法 采用硅胶、Sephadex LH-20 等柱色谱法对毛冬青根中的化
学成分进行分离纯化，应用谱学技术和化学方法鉴定化合物的结构。结果 分离鉴定了 1 个三萜苷皂类化合物 3-O-β-D-吡喃
木糖基-3β, 19α, 24-三羟基齐墩果酸（1）。结论 化合物 1 为新的化合物，命名为毛冬青皂苷 D。
关键词：毛冬青；3-O-β-D-吡喃木糖基-3β, 19α, 24-三羟基齐墩果酸；毛冬青皂苷 D；齐墩果酸；三萜皂苷
中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2012)07 - 1267 - 03
A new triterpenoid glycoside from roots of Ilex pubescens
ZHAO Zhong-xiang1, ZENG Rui-xin1, JIN Jing2, LIN Chao-zhan1, XIONG Tian-qin1, CAI Jin-yan3,
ZHU Chen-chen1
1. School of Chinese Materia Medica, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510006, China
2. School of Pharmaceutical Sciences, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510006, China
3. School of Pharmacology, Guangdong Pharmacological University, Guangzhou 510006, China
Abstract: Objective To investigate the chemical constituents from the roots of Ilex pubescens. Methods The compounds were
separated and purified by chromatography on silica gel, and Sephadex LH-20 columns. Their chemical structures were elucidated on
the basis of spectroscopic methods and chemical evidences. Results A triterpenoid glycoside was purified and its structure was
identified as 3-O-β-D-xylopyranosylspathodic acid (1). Conclusion Compound 1 is a new triterpenoid glycoside, named ilexsaponin D.
Key words: Ilex pubescens Hook. et Arm.; 3-O-β-D-xylopyranosylspathodic acid; ilexsaponin D; oleanic acid; triterpenoid glycoside

毛冬青为冬青科冬青属 Ilex L. 植物毛冬青 Ilex
pubescens Hook. et Arm. 的根或叶，具有活血通脉、
消肿止痛、清热解毒的功效，是我国南方常用的中
药材。毛冬青各类制剂对冠心病、脑血栓、血栓性
脉管炎等与血栓形成有密切联系的心脑血管疾病有
显著疗效[1-2]。化学成分研究表明毛冬青中主要含有
三萜及其苷、木脂素、环烯醚萜等类型化合物[2]，
其中三萜及其苷类是毛冬青的主要成分。为探讨该
植物的药效物质基础，本实验对毛冬青的化学成分
进行研究。本课题组曾报道从该植物根的甲醇提取
物中分离得到 16 个三萜苷类化合物[3-5]，本实验从
该部位中分离得到 1 个新的三萜苷类化合物，命名
为毛冬青皂苷 D（ilexsaponin D），结构见图 1。

图 1 化合物 1 的结构
Fig. 1 Chemical structure of compound 1
1 仪器与试剂
Perkin—Elmer Spectrum One FT-IR 红外光谱仪
（Perkin—Elmer，美国）；Bruker AV 400 型核磁共振
仪（Bruker，瑞士）；Waters Q—TOF micro 质谱仪

收稿日期：2012-04-26
基金项目：国家自然科学基金资助项目（30901954）；广东省自然科学基金资助项目（9451040701003203）；高等学校博士学科点专项科研基
金资助项目（20094425110008）；广州市珠江科技新星专项（2011J2200047）
*通讯作者 祝晨蔯 Tel/Fax: (020)39358047 E-mail: zhuchenchen@vip.sina.com
网络出版时间：2012-06-04 网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/12.1108.R.20120604.1103.005.html
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 7 期 2012 年 7 月

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（Waters，美国）；Agilent 6890N 气相色谱仪，HP—
5 Phenyl Methyl Siloxane capillary column 色谱柱
（30 m×0.32 mm, 0.25 μm）；FID 检测器；载气为
N2；进样口温度为 230 ℃；检测器温度为 250 ℃；
升温程序：150 ℃ 保持 1 min，然后以 5 ℃/min
的速率升至 280 ℃；反相硅胶 I（GHODSA12S50），
反相硅胶 II（AA12S50/ODS-A）；柱色谱硅胶和薄
层色谱硅胶（青岛海洋化工厂）；D-木糖和 L-木糖
对照品均购自上海华蓝化学科技有限公司（质量分
数＞99%）。其余试剂均为分析纯，购自广州化学试
剂厂。
毛冬青药材于 2009 年购自广州致信中药饮片
有限公司，经广州中医药大学中药学院祝晨蔯教授
鉴定为冬青属植物毛冬青 Ilex pubescens Hook. et
Arn. 的干燥根。
2 提取与分离
毛冬青干燥根 12.0 kg，粉碎，用甲醇（100 L）
渗漉提取，渗漉液减压浓缩挥去甲醇后混悬于 4 L
蒸馏水中，充分分散后滤去沉淀，滤液依次用醋酸
乙酯（3×4 L）和水饱和正丁醇（3×4 L）萃取，萃
取液减压回收溶剂至干，分别得到醋酸乙酯萃取物
350 g 和正丁醇萃取物 300 g。取醋酸乙酯部位 300
g，经硅胶柱色谱，三氯甲烷-甲醇（100∶1→2∶1）
梯度洗脱，再反复运用正、反相硅胶、Sephadex
LH-20等色谱方法分离纯化，得到化合物 1（29 mg）。
3 化合物的酸水解
将化合物 1（3 mg）溶于 9%盐酸（1 mL）中，
90 ℃水解 6 h。然后将水解液冷却后滤过，滤液冷
冻干燥。用 100 μL 无水吡啶将干燥后残留物溶解，
然后加入 0.1 mol/L 的 L-半胱氨酸甲酯盐酸盐 200
μL，60 ℃搅拌反应 1 h。然后向上述反应液中加入
六甲基二硅氮烷-三甲基氯硅烷（2∶1）150 μL，在
60 ℃再反应 30 min。反应结束后将反应液离心，取
上清液直接进行 GC 分析。另取 D-木糖和 L-木糖的
对照品按上述同样方法处理和分析，两者手性衍生
物的保留时间分别为 18.6 min 和 19.3 min，最后将
样品与对照品衍生物的保留时间进行对比分析。
4 结构鉴定
化合物 1：白色粉末，Libermann-Burchard 反
应呈阳性，10%硫酸-乙醇显红色斑点，提示该化
合物为三萜类化合物。红外光谱显示结构中含有羟
基（3 432 cm−1）和羧基（1 693 cm−1）；HR-ESI-MS
显示 [M ＋Cl]− 准分子离子峰 m/z 655.364 3
（C35H56O9Cl, 计算值 655.361 3），结合核磁数据确
定化合物 1 的分子式为 C35H56O9，不饱和度为 8。
1H-NMR (400 MHz, C5D5N) 谱在高场区显示 6个甲
基信号 δ 0.79, 1.00, 1.12, 1.19, 1.53, 1.65（各 3H, s,
-CH3），为三萜化合物特征的甲基信号，在 δ 4.93 (d,
J = 7.6 Hz) 显示 1 个端基质子信号，在 δ 5.53 (brt,
J = 4.0 Hz) 出现 1 个烯质子信号，提示该化合物结
构中可能含有双键。13C-NMR (100 MHz, C5D5N) 谱
显示 δ 144.6、123.1 为 1 组双键信号，提示该化合
物的母核为 Δ12-齐墩果烯类，还显示 1 个糖的端基
碳（δ 106.9）和 1 个羰基碳（δ 180.7）信号。化合
物 1 的 1H-NMR 和 13C-NMR 谱与文献报道[6]的
3-O-β-D-吡喃木糖基-3β, 19α, 24-三羟基齐墩果酸-
28-β-D-吡喃葡萄糖酯苷进行对比分析后发现，两者
苷元部分数据非常相似，推测两者都含有相同的苷
元 3β, 19α, 24-三羟基取代齐墩果酸，它们的主要差
别在糖基部分，化合物 1 结构中只含有 1 个糖基。
化合物 1 酸水解生成的糖经手性衍生化后，采
用 GC 分析，只检测出单一的 D-木糖衍生物，表明
该化合物中的糖基为 D-木糖基。HMBC 谱（图 2）
中观察到 H-1′ (δ 4.93) 与 C-3 (δ 88.6) 相关，表明
D-木糖基连接于苷元的 C-3 位；H-24 (δ 4.39, 3.59) 与
C-3 (δ 88.6) 相关，表明羟甲基可能位于 C-23 或 C-24
位。在 NOESY 谱中可观察到 H-23 (δ 1.53) 与 H-3 (δ
3.54), H-24 (δ 4.39, 3.59) 与 H-25 (δ 0.79) 分别有
NOE 相关（图 2），进一步证实羟甲基位于 C-24 位。
综合运用 HSQC、COSY、HMBC 谱以及文献
报道[6-7]对苷元和糖基部分的核磁共振数据进行归
属，具体如下：1H-NMR (400 MHz, C5D5N): δ 5.53
(1H, brt, J = 4.0 Hz, H-12), 4.93 (1H, d, J = 7.6 Hz,
H-1′), 4.40 (1H, dd, J = 11.2, 4.8 Hz, H-5′a), 3.80 (1H,
dd, J = 11.2, 9.6 Hz, H-5′b), 4.39 (1H, d, J = 11.2 Hz,
H-24a), 3.59 (1H, d, J = 11.2 Hz, H-24b), 4.19 (1H, m,

C
O
O
OH
O
OHHO
HO
HO
OH NOESY
HMBC

图 2 化合物 1 的主要 HMBC 和 NOESY 相关
Fig. 2 Key HMBC and NOESY correlations of compound 1
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H-4′), 4.16 (1H, m, H-3′), 3.97 (1H, m, H-2′), 3.61
(2H, brs, H-18, 19), 3.54 (1H, dd, J = 11.6, 4.9 Hz,
H-3), 2.82 (1H, m, H-15a), 2.12 (1H, m, H-15b), 2.20
(1H, m, H-2a), 2.03 (1H, m, H-2b), 2.15 (1H, m,
H-16a), 1.24 (1H, m, H-16b), 2.12 (1H, m, H-22a),
1.32 (1H, m, H-22b), 2.02 (1H, m, H-11a), 1.95 (1H,
m, H-11b), 1.80 (1H, m, H-9), 1.65 (3H, s, H-27), 1.64
(1H, m, H-6a), 1.36 (1H, m, H-6b), 1.53 (3H, s, H-23),
1.48 (1H, m, H-1a), 0.92 (1H, m, H-1b), 1.49 (1H, m,
H-7a), 1.30 (1H, m, H-7b), 1.22 (1H, m, H-21a), 1.27
(1H, m, H-21b), 1.19 (3H, s, H-29), 1.12 (3H, s,
H-30), 1.00 (3H, s, H-26), 0.96 (1H, m, H-5), 0.79
(3H, s, H-25)；13C-NMR (C5D5N, 100 MHz) δ: 180.7
(C-28), 144.6 (C-13), 123.1 (C-12), 106.9 (C-1′), 88.6
(C-3), 81.0 (C-19), 78.3 (C-3′), 75.1 (C-2′), 71.0
(C-4′), 67.0 (C-5′), 63.0 (C-24), 56.1 (C-5), 47.9
(C-9), 45.9 (C-17), 44.4 (C-18), 44.1 (C-4), 41.9
(C-14), 39.7 (C-8), 38.2 (C-1), 36.7 (C-10), 35.5
(C-20), 33.4 (C-7), 33.3 (C-22), 29.0 (C-21), 28.9
(C-16), 28.7 (C-29), 28.1 (C-15), 26.7 (C-2), 24.6
(C-30), 24.5 (C-27), 24.2 (C-11), 23.2 (C-23), 18.7
(C-6), 17.1 (C-26), 15.0 (C-25)。最终确定化合物 1
为 3-O-β-D-吡喃木糖基-3β, 19α, 24-三羟基齐墩果
酸，为 1 个新化合物，命名为毛冬青皂苷 D。
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