全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 13 期 2013 年 7 月

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响应面法优选虎耳草抗前列腺癌活性部位提取工艺
周 欣，陈华国，黄志金，先 春，杨世林
贵州师范大学，贵州 贵阳 550001
摘 要：目的 优选虎耳草 Saxifraga stolonifera 抗前列腺癌活性部位的提取工艺。方法 以岩白菜素、槲皮素-5-O-β-D-吡
喃葡萄糖苷、槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷、槲皮素以及总黄酮的提取率为考察指标，采用单因素试验结合 Box-Behnken 中心组
合设计方法进行提取工艺优化研究。结果 虎耳草抗前列腺癌活性部位的最佳提取工艺条件为回流提取，乙醇体积分数
60.04%，料液比例 1∶13.79，提取时间 89.98 min，提取温度 80 ℃，在此条件下岩白菜素、槲皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、
槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷和槲皮素以及总黄酮的提取率分别为 97.15%、98.13%、98.37%、97.82%、96.33%。结论 采用响应
面法优化了虎耳草中抗前列腺癌活性部位的提取工艺，对虎耳草的综合利用以及产业化发展提供了科学依据。
关键词：虎耳草；前列腺癌；活性部位；响应面法；提取
中图分类号：R284.2 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2013)13 - 1768 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.13.013
Optimization of extracting technology for active fractions from Saxifraga
stolonifera with anti-prostate cancer activity by response surface method
ZHOU Xin, CHEN Hua-guo, HUANG Zhi-jin, XIAN Chun, YANG Shi-lin
Guizhou Normal University, Guiyang 550001, China
Abstract: Objective To optimize the extracting technology for active fractions from Saxifraga stolonifera with anti-prostate cancer
activity. Methods Using the extraction rates of bergenin, quercetin-5-O-β-D-glucopyranoside, quercetin-3-O-L-rhamnopyranoside,
quercetin, and flavonoids as indexes, the single factor experiment combined with Box-Behnken design was used to optimize the
extracting technology. Results The optimal extraction conditions were as follows: ethanol volume fraction 60.04%, liquid-solid ratio
of 1∶13.79 for 89.98 min, and at the temperature of 80 ℃. Under these conditions, the extraction rates of bergenin, quercetin-
5-O-β-D-glucopyranoside, quercetin-3-O-L-rhamnopyranoside, quercetin, and flavonoids were 97.15%, 98.13%, 98.37%, 97.82%, and
96.33%, respectively. Conclusion The response surface analysis could optimize the extracting technology of active fraction from S.
stolonifera with the anti-prostate cancer activity, which provides the basis for the comprehensive utilization and industrialization of S.
stolonifera.
Key words: Saxifraga stolonifera (L.) Meerb.; prostate cancer; active fraction; response surface method; extraction

虎耳草为虎耳草科虎耳草属植物虎耳草
Saxifraga stolonifera (L.) Meerb. 的新鲜或干燥全
草，具有疏风清热、凉血解毒的功效，传统用于治
疗急性中耳炎、风热咳嗽、大泡性鼓膜炎、风疹瘙
痒等疾病[1]。通过查阅文献及预试验发现，虎耳草
除了具有上述功效外，还具有很好的抗前列腺癌作
用，对前列腺癌细胞的生长有明显的抑制作用[2-3]。
虎耳草抗前列腺癌是其新的药用用途，作为贵州道
地药材虎耳草的新用途，值得深入开发研究。
本课题组前期对虎耳草药材开展了一定的生物
活性试验，优选出了虎耳草抗前列腺癌的活性部位，
在此基础上进行了系统的化学成分研究工作，岩白
菜素、槲皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-3-O-
L-鼠李糖苷以及槲皮素均是从活性部位中分离出的

收稿日期：2013-01-17
基金项目：贵州省中药现代化科技产业研究开发专项项目（黔科合中药字 [2010] 5023 号）；贵阳市科学技术计划项目（[2010] 筑科合同字第
1-中-23 号）；贵州省科技创新人才团队建设项目（黔科合人才团队[2011]4008）；贵州省教育厅特色重点实验室项目（黔科合
KY[2012]005 号）
作者简介：周 欣，博士，教授，研究方向为中药质量控制、新药研究开发。Tel: (0851)6702167 13985028916 E-mail: alice9800@sina.com
网络出版时间：2013-05-16 网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/12.1108.R.20130516.0919.003.html
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量较大的化合物，同时，活性部位中还含有大量的
黄酮类化合物[4]。
槲皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-3-O-L-
鼠李糖苷 [4-5]和槲皮素 [6]具有较好的抗前列腺癌
PC-3 细胞凋亡作用，岩白菜素和总黄酮是前期研究
发现的虎耳草抗前列腺癌活性部位中的主要化合
物，因此，为了进一步优化虎耳草抗前列腺癌活性
部位提取工艺，为其后续深入研究及产业化发展提
供科学依据，本实验以岩白菜素、槲皮素-5-O-β-D-
吡喃葡萄糖苷、槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷、槲皮素以
及总黄酮提取率为考察指标，应用 Design-Expert
软件的 Box-Behnken[7-8]中心组合设计方法设计响
应面试验进行虎耳草抗前列腺癌活性部位提取工艺
优化研究。
1 仪器与材料
Agilent 1100 高效液相色谱系统（Agilent 科技
有限公司）；AL204 型电子分析天平（美国 Mettler
Toledo 公司）；旋转蒸发仪（Buchi 公司）；CARY 100
紫外-可见分光光度计（Cary 公司）；KQ5200E 超声
波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。
虎耳草，经贵阳中医学院何顺志研究员鉴定为
虎耳草科虎耳草属植物虎耳草 Saxifraga stolonifera
(L.) Meerb. 的干燥全草，产地为贵州；岩白菜素（批
号 111532-200202）、槲皮素（批号 100081-200406）、
芦丁（批号 100080-200306）对照品均购自中国药
品生物制品检定所；槲皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖
苷、槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷（实验室自备，经 NMR、
MS、IR、UV 鉴定其结构，HPLC 测定其质量分数＞
98%）；乙醇、甲醇、磷酸、氢氧化钠、亚硝酸钠、
硝酸铝为分析纯，水为蒸馏水，乙腈为色谱纯。
2 方法与结果
2.1 岩白菜素、槲皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲
皮素-3-O-L-鼠李糖苷和槲皮素的测定
2.1.1 色谱条件 色谱柱为 Diamonsil C18 柱（250
mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.05%磷酸水
溶液，梯度系统洗脱，洗脱程序为 0～8 min，10%
乙腈；8～10 min，10%～15%乙腈；10～20 min，
15%乙腈；20～25 min，15%～18%乙腈；25～35
min，18%乙腈；35～50 min，18%～20%乙腈；50～
85 min，20%～30%乙腈；85～90 min，30%～100%
乙腈；90～100 min，100%乙腈；柱温 30 ℃；检测
波长 256 nm；体积流量 1 mL/min；进样量 10 μL。
2.1.2 对照品溶液的制备 取各对照品适量，精密
称定，置 10 mL 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，
即得含岩白菜素 66.0 μg/mL，槲皮素-5-O-β-D-吡喃
葡萄糖苷 200.0 μg/mL，槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷 24.0
μg/mL，槲皮素 26.0 μg/mL 的混合对照品溶液。
2.1.3 供试品溶液的制备 取虎耳草提取物浸膏
0.1 g，精密称定，置 10 mL 量瓶中，加甲醇溶解后
定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.1.4 线性关系考察 取“2.1.2”项下混合对照品
溶液，按 1、2、4、6、8、10、20 μL 进样，在高效
液相色谱仪上分析。结果表明，岩白菜素线性方程
为 Y＝984.67 X－16.098，r＝0.999 8，线性范围：
0.066～1.320 μg；槲皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷线
性方程为 Y＝448.17 X－8.895 1，r＝0.999 4，线性
范围：0.20～4.00 μg；槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷线性
方程为 Y＝2 781.5 X－10.962，r＝0.999 6，线性范
围：0.024～0.480 μg；槲皮素线性方程为 Y＝3 077.6
X＋20.104，r＝0.999 3，线性范围：0.026～0.520 μg。
2.1.5 精密度试验 分别精密吸取“2.1.2”项下混
合对照品溶液 5 μL，注入液相色谱仪，连续重复 6
次，测定峰面积。结果表明，4 种成分峰面积的 RSD
在 0.3%～1.2%。
2.1.6 重复性试验 取同一虎耳草提取物浸膏样
品，制备 6 份供试品溶液，进行测定，计算 4 种成
分质量分数的 RSD 在 1.25%～1.86%。
2.1.7 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于 0、
2、4、6、8、12 h 进样分析，计算 4 种成分峰面积
的 RSD 在 1.17%～1.95%。
2.1.8 加样回收率试验 取虎耳草提取物浸膏 0.05
g，精密称定，置 10 mL 量瓶中，精密加入“2.1.2”
项下混合对照品溶液 2 mL，再加甲醇溶解后定容至
刻度，平行操作 6 份。进样测定，4 种成分的平均
回收率在 98.66%～101.31%，RSD 在 1.22%～
2.18%。
2.1.9 样品测定 精密吸取对照品溶液和供试品溶
液各 10 μL，注入液相色谱仪，测定峰面积，计算
各成分的量。色谱图见图 1。
2.2 总黄酮的测定
2.2.1 对照品溶液的制备 取芦丁对照品 5 mg，精
密称定，置 25 mL 量瓶中，加入适量的 60%乙醇溶
液，超声助溶，补足溶剂至刻度，即得。
2.2.2 供试品溶液的制备 准确称取 0.1 g 虎耳草
提取物，加甲醇溶解并定容至 10 mL 量瓶中，摇匀，
即得。
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1-岩白菜素 2-槲皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 3-槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷 4-槲皮素
1-bergenin 2-quercetin-5-O-β-D-glucopyranoside 3-quercetin-3-O-L-rhamnopyranoside 4-quercetin

图 1 虎耳草提取物 (A) 及混合对照品 (B) 的 HPLC 色谱图
Fig. 1 HPLC chromatograms of extract (A) and mixed reference substance (B) of S. stolonifera

2.2.3 显色及测定条件 取 1.0 mL 待测溶液置 10
mL 量瓶中，加入 5%亚硝酸钠试液 0.3 mL，摇匀，
静置 6 min 后，再加入 10%硝酸铝试液 0.3 mL，摇
匀，静置 6 min 后，再加入 4% NaOH 溶液 4.0 mL，
用 60%乙醇稀释至刻度，摇匀，静置 15 min，于紫
外-可见分光光度计上测定吸光度（A）值，检测波
长 504 nm。
2.2.4 线性关系考察 分别精密吸取芦丁对照品溶
液 1.0、1.5、2.0、3.0、4.0 mL 置 10 mL 量瓶中，
分别加入 5%亚硝酸钠试液 0.3 mL 摇匀，静置 6 min
后，再加入 10%硝酸铝试液 0.3 mL，摇匀，静置 6 min
后，再加入 4% NaOH 溶液 4.0 mL，用 60%乙醇稀
释至刻度，摇匀，静置 15 min，以 60%乙醇加显色
剂为空白，于 504 nm 处测定 A 值。线性回归得回
归方程为 A＝10.12 C＋0.007 9，r＝0.999 8，线性范
围为 0.02～0.08 mg/mL。
2.2.5 精密度试验 分别精密吸取对照品溶液 1.0
mL，按照“2.2.3”项下条件测定 A 值，连续重复 6
次。结果表明，芦丁 A 值的 RSD 为 0.33%。
2.2.6 重复性试验 取同一虎耳草提取物浸膏样
品，制备 6 份供试品溶液，进行测定，计算总黄酮
质量分数的 RSD 为 1.37%。
2.2.7 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于 0、
2、4、6、8、12 h 进样分析，计总黄酮 A 值的 RSD
为在 1.56%。
2.2.8 加样回收率试验 取虎耳草提取物浸膏 0.05
g，精密称定，置 10 mL 量瓶中，精密加入“2.1.1”
项下对照品溶液 1 mL，再加甲醇溶解后定容至刻
度，平行操作6份。进样测定，平均回收率为98.93%，
RSD 为 1.09%。
2.2.9 样品测定 分别精密吸取供试品溶液和对照
品溶液 1 mL，按照“2.2.3”项下条件测定 A 值，计
算总黄酮的量。
2.3 不同提取方法的比较
取粉碎过60目筛的虎耳草药材9份，每份20 g，
固定溶剂 70%乙醇，料液比 1∶10，分别回流提取
2 h，超声提取（功率 1.5 kW）1 h，冷浸提取 24 h
（各平行 3 份），提取液 80 ℃减压除去溶剂，得虎
耳草浸膏，计算各指标成分提取率，结果见表 1。
可知，3 种提取方式对槲皮素的提取效果无明显差
异，其他 3 个成分及总黄酮提取率均以回流提取为
最高，故选用回流提取法。
提取率＝(浸膏中指标成分质量分数×浸膏质量) / 原
药材中指标成分质量
2.4 单因素试验
2.4.1 溶剂用量对提取效果的影响 取粉碎过 60 目
筛的虎耳草药材 20 g，分别选取料液比 1∶6、1∶8、
1∶10、1∶12、1∶14、1∶16，固定提取温度 80 ℃，

表 1 提取方式考察结果
Table 1 Investigation of extraction methods
提取率 / % 提取方式
岩白菜素 槲皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷 槲皮素 总黄酮
回流 91.23 93.47 94.53 93.24 85.13
超声 80.68 87.33 73.24 92.98 78.09
冷浸 63.55 74.08 62.33 92.85 64.30
1
2
3 4
1 2
3
4
0 20 40 60 80 0 20 40 60 80
t / min
A B
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提取时间 90 min，乙醇体积分数 70%，观察对虎耳
草指标成分提取效果的影响。结果整体的提取效率
呈现上升的趋势，在 1∶10～1∶14 虎耳草指标成分
提取率均达到最好，故选择料液比为 1∶10～1∶14
为进一步优化范围。
2.4.2 乙醇体积分数对提取效果的影响 取粉碎过
60 目筛的虎耳草药材 20 g，分别加入 30%、40%、
50%、60%、70%、80%、90%乙醇 240 mL，固定
提取温度 80 ℃，提取时间 90 min，料液比 1∶10，
改变乙醇体积分数，观察其对虎耳草指标成分提取
效果的影响。结果显示，提取效率呈现上升的趋势，
在乙醇体积分数 60%～80%虎耳草指标成分提取率
均达到最好，故选择乙醇体积分数 60%～80%为进
一步优化范围。
2.4.3 提取温度对提取效果的影响 取粉碎过 60
目筛的虎耳草药材 20 g，固定提取时间 90 min，料
液比 1∶10，乙醇体积分数 70%，以 60、70、80、
90 ℃分别回流提取，观察对虎耳草指标成分提取效
果的影响。结果显示，60、70、80、90 ℃对提取效
率影响不大，考虑到能耗问题以及回流提取实际操
作问题，选择 80 ℃为提取温度。
2.4.4 回流时间对提取效果的影响 取粉碎过 60
目筛的虎耳草药材 20 g，固定提取温度 80 ℃，料
液比 1∶10，乙醇浓度 70%，分别提取 50、60、70、
80、90、100、110、120、130、140 min，观察对虎
耳草指标成分提取效果的影响。结果显示，50～90
min 提取效率呈上升趋势，90～140 min 提取效率变
化不大，处于平衡状态，故选择 80～100 min 为进
一步优化范围。
2.5 响应曲面优化试验设计及其结果
根据中心组合试验设计原理，综合单因素影响
试验结果，选取乙醇体积分数（A）、料液比（B）
和提取时间（C）作为考察对象，采用 Design Expert
8.0 统计分析软件的响应面分析法安排试验，以获取
最适工艺参数。采用 3 因素 3 水平的响应面分析法
进行试验设计，试验设计与结果见表 2。
综合评分＝岩白菜素提取率×0.1＋槲皮素-5-O-β-D-吡
喃葡萄糖苷提取率×0.25＋槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷提取率×
0.25＋槲皮素提取率×0.25＋总黄酮提取率×0.15
使用统计软件 Design Expert 8.0 对表 2 中各指
标性成分提取率的综合权重数据进行多元回归拟合，
得到综合评分对编码自变量 X1、X2、X3 的二次多项
回归方程 Y＝1.934－0.228 X1＋0.108 X2＋0.068 X3－
0.121 X1X2＋0.004 X1X3＋0.082 X2X3＋0.008 X12＋

表 2 响应面法试验设计方案及结果
Table 2 Experimental design and results of response surface method
试验号 A / % B C / min 岩白菜素 / % 槲皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 / %
槲皮素-3-O-L-
鼠李糖苷 / %
槲皮素 /
%
总黄酮 /
%
综合评分
1 70 (0) 1∶14 (1) 100 (1) 90.68 95.13 94.53 92.93 97.76 0.943 8
2 70 (0) 1∶12 (0) 90 (0) 89.32 91.89 91.67 92.46 81.71 0.901 9
3 70 (0) 1∶12 (0) 90 (0) 91.23 96.03 91.67 93.87 86.16 0.924 4
4 70 (0) 1∶10 (−1) 80 (−1) 86.04 84.12 88.80 92.32 80.12 0.869 3
5 70 (0) 1∶12 (0) 90 (0) 89.32 93.92 91.67 93.78 85.20 0.915 5
6 80 (1) 1∶12 (0) 100 (1) 86.31 91.36 90.23 93.07 77.39 0.889 0
7 80 (1) 1∶14 (1) 90 (0) 87.41 89.32 91.67 92.55 71.78 0.878 9
8 70 (0) 1∶12 (0) 90 (0) 93.42 96.49 94.53 92.87 86.25 0.932 5
9 70 (0) 1∶14 (1) 80 (−1) 87.13 86.15 87.37 92.69 84.18 0.878 9
10 80 (1) 1∶12 (0) 80 (−1) 88.77 86.76 91.67 92.33 69.38 0.869 7
11 80 (1) 1∶10 (−1) 80 (−1) 83.04 87.36 87.37 92.87 75.24 0.864 9
12 70 (0) 1∶12 (0) 90 (0) 90.68 94.90 91.67 92.87 86.20 0.918 6
13 70 (0) 1∶10 (−1) 100 (1) 85.77 90.15 85.94 92.99 76.60 0.873 4
14 60 (−1) 1∶12 (0) 80 (−1) 83.31 84.04 84.50 93.52 93.31 0.878 4
15 60 (−1) 1∶14 (1) 90 (0) 92.32 99.88 93.10 93.06 91.57 0.944 8
16 60 (−1) 1∶12 (0) 100 (1) 91.78 99.05 93.10 92.97 98.20 0.951 9
17 60 (−1) 1∶10 (−1) 90 (0) 91.50 95.88 93.10 92.98 87.39 0.9275
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0.005 X22－0.034 X32。方差分析及回归系数显著性
检验结果见表 3。所建立的二次多项模型具有高度
的显著性（P＜0.00 1），模型决定系数 R2＝0.960 3，
表明模型拟合度良好。通过求解回归方程，得到最
佳提取工艺条件：乙醇体积分数为 60.04%，料液比
例为 1∶13.79，提取时间为 89.98 min，此条件下，
岩白菜素、槲皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-
3-O-L-鼠李糖苷、槲皮素以及总黄酮的提取率预测
值分别为 97.35%、98.11%、97.84%、96.37%、97.61%。
2.6 验证试验
为了检验试验结果的可靠性，根据以上结果进
行验证试验，但考虑到实际操作的方便性，选用料
液比 1∶13.8、提取温度 80 ℃、提取时间为 90 min
和 60%乙醇的条件下进行 5 次重复验证试验，结果
见表 4，此条件下，岩白菜素、槲皮素-5-O-β-D-吡
喃葡萄糖苷、槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷、槲皮素以及
总黄酮的提取率平均值分别为 95.23%、98.58%、
表 3 方差分析
Table 3 Analysis of variance
方差来源 平方和 自由度 F 值 P 值
模型 0.638 0 9 39.648 4 ＜0.000 1
A 0.417 2 1 233.346 1 ＜0.000 1
B 0.093 5 1 52.306 5 0.000 2
C 0.036 7 1 20.536 3 0.002 7
AB 0.058 8 1 32.888 0 0.000 7
AC 0.000 0 1 0.027 4 0.873 2
BC 0.026 6 1 14.859 0 0.006 3
A2 0.000 3 1 0.151 6 0.708 5
B2 0.000 1 1 0.048 2 0.832 5
C2 0.004 9 1 2.758 3 0.140 7
残差 0.012 5 7
失拟项 0.005 5 3 1.036 3 0.466 7
净误差 0.007 0 4
总离差 0.650 6 16

表 4 验证试验
Table 4 Verification test
提取率 / % 序号
岩白菜素 槲皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷 槲皮素 总黄酮
1 95.06 98.19 95.92 97.27 95.44
2 95.32 98.66 95.63 97.11 95.32
3 95.13 98.89. 95.70 97.03 95.28
4 95.41 98.77 95.15 97.15 95.30
5 95.22 98.71 95.33 97.18 95.19

95.55%、97.15%、95.31%，与理论值的相对误差为
2.3%，说明验证值与回归方程预测值吻合较好。
2.7 药效对比研究
采用 MTT 法[9]对优化前（优化前的相关工艺参
数：料液比 1∶10、提取温度 80 ℃、提取时间为
60 min 和 80%乙醇）后的虎耳草提取物进行了抗
PC-3 细胞的抑制作用研究，研究结果见表 5。结果
表明，优化后的提取物较之优化前对前列腺癌 PC-3
细胞生长抑制作用显著增加，说明该提取工艺有效、
可行。
3 讨论
3.1 实验总体设计
本研究首先通过单因素试验分别考察提取方
式、乙醇体积分数、提取时间、料液比和提取温度
对提取工艺的影响，在此基础上，采用Design-Expert
软件的 Box-Behnken 中心组合设计方法设计响应面
表 5 虎耳草提取物对前列腺癌 PC-3 细胞生长抑制作用
(给药后 48 h)
Table 5 Inhibition of S. stolonifera extract on growth of
prostate cancer cells (48 h after adminstration)
组 别 提取物 / (mg·mL−1) 抑制率 / %
对照组 － －
优化前提取物组 0.15 42.34±0.01*
0.20 45.86±0.01*
0.30 48.87±0.04*
0.40 61.57±0.02**
优化后提取物组 0.15 46.09±0.02*
0.20 55.82±0.01*
0.30 60.17±0.02**
0.40 73.45±0.01**
与对照组比较：*P＜0.05 **P＜0.01
*P < 0.05 **P < 0.01 vs control group
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 13 期 2013 年 7 月

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试验，建立了数学模型，得到了较优的提取工艺条
件。并结合响应面分析得到的数学模型，预测更优
的工艺条件，并进行验证试验，最后得到了最佳提
取工艺条件：乙醇体积分数为 60.04%，料液比例为
1∶13.79，提取时间为 89.98 min。
3.2 权重系数选择依据
相应面分析时，对岩白菜素、槲皮素-5-O-β-D-
吡喃葡萄糖苷、槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷、槲皮素和
总黄酮进行了权重计算，选择依据为把 5 个考察指
标权重系数设置为 1，其中槲皮素-5-O-β-D-吡喃葡
萄糖苷、槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷和槲皮素有明确的
文献支撑具有抗前列腺癌 PC-3 细胞生长活性，故
权重分别设置为 0.25；槲皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖
苷、槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷和槲皮素均属于黄酮类
化合物，故对黄酮类化合物的权重设置时，选 0.15；
剩余 0.10 的权重分配给岩白菜素。
3.3 实验结果验证
本实验从选取的指标性成分的提取率和抗前列
腺癌 PC-3 细胞生长活性 2 个方面对所优选得到的
提取工艺进行了验证，验证结果证明了工艺的可行
性。研究结果对虎耳草的综合利用以及产业化具有
理论指导意义。
参考文献
[1] 贵州省中药材、民族药质量标准 [S]. 2003.
[2] 丁家欣, 张立石, 张 玲, 等. 虎耳草提取物对前列腺
癌细胞凋亡的影响 [J]. 中国中医基础医学杂志, 2005,
11(12): 905-907.
[3] 居龙涛. 虎耳草制剂治疗前列腺增生症 [J]. 中国中医
基础医学杂志, 2007, 13(l): 79.
[4] 先 春. 虎耳草活性部位化学成分的研究 [D]. 贵阳:
贵州师范大学, 2012.
[5] 黄志金. 虎耳草抗前列腺癌活性部位筛选及提取工艺
研究 [D]. 贵阳: 贵州师范大学, 2012.
[6] 朱清毅, 胡 瑞, 刘 丽, 等. 槲皮素对前列腺癌 PC-3
细胞凋亡作用的研究 [J]. 中华男科学杂志 , 2011,
17(9): 790-793.
[7] 杨 磊, 刘婷婷, 卫 蔚, 等. 响应面法优选新疆紫草
总萘醌的匀浆提取工艺研究 [J]. 中草药, 2010, 41(4):
568-573.
[8] 陈 敬, 温庆果, 刘 韶, 等. 正交设计与响应面法优
化壳聚糖对莲子心提取液除杂工艺对比研究 [J]. 中草
药, 2012, 43(11): 2183-2188.
[9] 逯海燕, 郭顺星, 林 晨, 等. 一种真菌菌丝体甲醇提
取物-A7 的抗肿瘤活性研究 [J]. 中草药, 2002, 33(5):
61-63.