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Study on characteristic fingerprint of Mesona chinensis

凉粉草的特征指纹图谱研究



全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 11 期 2012 年 11 月

• 2284 •
凉粉草的特征指纹图谱研究
丁 婕 1,黄 松 1, 2*,张柏明 1,吕渭彰 1,赖小平 1, 2
1. 广州中医药大学 新药开发研究中心,广东 广州 510006
2. 东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院,广东 东莞 523808
摘 要:目的 建立凉粉草特征指纹图谱,为凉粉草的质量控制提供依据。方法 采用 HPLC 法测定,色谱柱为 Dikma
Diamonsil(2)C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-2%甲酸,梯度洗脱;检测波长为 320 nm;体积流量为 0.8 mL/min;
柱温为 25 ℃。结果 建立了凉粉草的特征指纹图谱,34 批次凉粉草确定 10 个共有峰。结论 该法准确可靠,重复性好,
为凉粉草质量控制提供了依据。
关键词:凉粉草;特征指纹图谱;质量控制;聚类分析;HPLC
中图分类号:R286.022 文献标志码:A 文章编号: 0253 - 2670(2012)11 - 2284 - 05
Study on characteristic fingerprint of Mesona chinensis
DING Jie1, HUANG Song1, 2, ZHANG Bo-ming1, LV Wei-zhang1, LAI Xiao-ping1, 2
1. Center of New drug R&D, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510006, China
2. Institution for Mathematics and Theoretics Engineering Research, Guangzhou University of Chinese Medicine, Dongguan
523808, China
Key words: Mesona chinensis Benth.; characteristic fingerprint; quality control; clustering analysis; HPLC

凉粉草 Mesona chinensis Benth.,又名仙人草、
仙人冻、仙草、薪草等,为唇形科一年生草本植物,
是一种重要的药食两用的植物资源[1]。据《本草求
原》记载,仙草有“清暑热、解脏腑结热毒、治酒
风”的功效,《岭南采药录》中记载,仙草可治花柳
毒入骨。中医认为,仙草性凉寒,味甘淡涩,嚼之
有胶性,具有清热利湿、凉血解暑、解渴利水和除
热毒之功效[2]。
文献报道凉粉草中主要含有黄酮类、酚类、萜
类、鞣质、氨基酸及多糖等成分[3-4]。目前为止,尚
无凉粉草的质量控制研究。因此,为全面评价凉粉
草质量,本实验进行了系统的指纹图谱方法学研究,
建立凉粉草特征指纹图谱分析方法,为凉粉草的质
量评价提供参考依据,也为后期的凉粉草的开发利
用奠定基础。
1 材料
超纯水机(重庆利迪现代水技术设备有限公
司),KQ—250B 型超声波清洗器(昆山市超声仪
器有限公司),电热恒温水浴锅DK9811A,FEJ—200
电子称,万分之一电子天平(Sartorius BP110s,
德国 sartorius 公司),十万分之一电子天平
(Sartorius CP225D,德国 sartorius 公司),戴安
P580 高效液相色谱仪:P580 Pump、ASI-100
Automated Sample Injector、PDA-100 Photodiode
Array Detector)、Chromeleon 色谱工作站,Dikma
Diamonsil C18(2)柱。
34 批次凉粉草(表 1)由广州中医药大学中
药资源中心提供,经广州中医药大学新药开发研
究中心陈建南研究员鉴定为凉粉草 Mesona
chinensis Benth.的干燥全草,标本存放于广州中
医药大学新药开发研究中心。咖啡酸对照品由中
国 药 品 生 物 制 品 检 定 所 提 供 , 批 号
110885-200102。乙腈为色谱纯,其他试剂均为
分析纯。

收稿日期:2012-02-01
基金项目:国家自然科学基金重点资助项目(U0732004);广东省科技厅中药现代化专项(K5080016)
作者简介:丁 婕,女,在读博士,从事新药研究开发。E-mail: dingjie135@163.com
*通讯作者 黄 松 Tel: (020)32503212 E-mail: hsl318@yahoo.com.cn
网络出版时间:2012-10-19 网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/12.1108.R.20121019.1043.011.html
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 11 期 2012 年 11 月

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表 1 凉粉草的来源
Table 1 Resources of M. chinensis
编号 产 地 编号 产 地
S1 越南-1 S18 福建武平当地-3
S2 越南-2 S19 福建武平当地-4
S3 广西灵山 S20 福建武平露丰 1 号
S4 台湾关西-1 S21 福建武平露丰下坎 1 号
S5 台湾关西-2 S22 福建永定新南
S6 广东新田上村 S23 福建永安-1
S7 广东新田山上 S24 福建永安-2
S8 广东凤凰山 S25 广东省平远基地
S9 广东增城 S26 广东省平远基地
S10 广东平远(采) S27 广东省揭阳市
S11 广东阳春 S28 广东省揭阳市
S12 广东朝阳 S29 广东省(市售)
S13 朝阳-印尼杂交 S30 广东省平远县长田镇
S14 印尼 S31 广东省平远县仁居镇
S15 福建武平当地 S32 广东省平远县八尺镇
S16 福建武平当地-1 S33 广东省平远县差干镇
S17 福建武平当地-2 S34 广东省平远县上举镇

2 方法与结果
2.1 色谱条件
采用 Dikma Diamonsil C18 ( 2)柱( 250
mm×4.6 mm,5 μm);体积流量为 0.8 mL/min,
柱温为 25 ℃,检测波长为 320 nm,进样量 20 μL,
流动相为乙腈(A)-2.0%甲酸水(B)溶液。梯度洗
脱,0~18 min,10%~16.5% A;18~25 min,16.5% A;
25~60 min,16.5%~24% A;60~65 min,24%~34% A;
65~80 min,34%~45% A;80~90 min,45%~60% A;
90~95 min,60%~10% A。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取咖啡酸对照品适量,加甲醇制成咖啡
酸为 56 μg/L 的对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备
准确称取凉粉草粗粉 1.0 g,置具塞锥形瓶中,
加入 50%乙醇 50 mL,密塞,称定质量,于 100 ℃
水浴中回流 1 h,放冷,再称定质量,用 50%乙醇
补足减失的质量,摇匀,滤过,取续滤液适量,以
0.22 μm 微孔滤膜滤过,即得。
2.4 方法学考察
2.4.1 精密度试验 取 S25 样品,连续进样 6 次,
记录色谱图,以咖啡酸峰(1 号峰)作为参照物,
指纹图谱中各特征峰的相对保留时间和相对峰面积
的 RSD 分别在 0.47%~0.96%和 0.97%~2.80%,均
小于 3%。
2.4.2 稳定性试验 取 S25 样品,制备供试品溶液,
分别在 0、2、4、8、24、48 h 进样,记录色谱图,
以咖啡酸峰(1 号峰)作为参照物,指纹图谱中各
特征峰的相对保留时间和相对峰面积的 RSD 分别
在 0.50%~1.62%和 2.34%~4.54%,表明供试品溶
液在 48 h 内基本稳定。
2.4.3 重复性试验 取 S25 样品 6 份,以优选的
提取方法、流动相及梯度进行洗脱,进样并记录色
谱图,各特征峰相对于咖啡酸峰(1 号峰)的相对
保留时间和相对峰面积的 RSD 分别在 0.31%~
0.71%和 1.94%~4.96%,均小于 5%,符合指纹图
谱的要求。
2.5 对照指纹图谱的建立及共有峰的确定
分别制备 34 批样品的供试品溶液,按以上色谱
条件测定。采用国家药典委员会中药色谱指纹图谱
相似度评价系统软件(2004A 版),以中位数生成特
征指纹图谱共有模式,结果见图 1。共确定 10 个共
有峰,不同批次间相同共有峰的紫外光谱一致,因
此,选择这 10 个特征峰作为指纹图谱共有峰,从各
共有峰的紫外光谱图看出凉粉草中主要含有黄酮类
和酚酸类成分。34 批凉粉草的特征指纹图谱重叠图
谱见图 2。

1-咖啡酸
1-caffeic acid
图 1 凉粉草特征指纹图谱的共有模式
Fig. 1 Common mode of M. chinensis
characteristic fingerprint

图 2 34 批次凉粉草的特征指纹图谱
Fig. 2 Characteristic fingerprint of 34 batches
of M. chinensis

0 13.04 26.09 39.13 52.17 65.22 78.26 91.30
S34
S1
0 13.04 26.09 39.10 52.17 65.22 78.26 91.30
1 2
3
4 5
6
7
8 9
10
t / min
t / min
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 11 期 2012 年 11 月

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2.6 共有指纹峰的相对保留时间及相对峰面积
在所建立的色谱条件下,凉粉草各样品的特征
峰均有较好的分离,保留时间较为稳定,同时 10
个特征峰均能稳定出现,以咖啡酸(1 号峰)为 S
峰,计算特征峰 2~10 的相对保留时间和相对峰面
积,结果见表 2、3。
2.7 相似度分析
采用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度
评价系统软件,以生成的特征指纹图谱共有模式为对
照计算各批次样品的相似度,结果见表 4。
表 2 34 批次凉粉草特征指纹图谱的相对保留时间
Table 2 Relative retention time of 34 batches of M. chinensis characteristic fingerprint
相对保留时间 批次
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
S1 1.000 0 1.794 4 1.898 9 2.255 3 2.547 9 2.884 9 3.195 7 3.410 6 3.941 6 4.881 4
S2 1.000 0 1.789 1 1.891 9 2.242 4 2.531 0 2.837 6 3.174 1 3.387 3 3.921 7 4.875 6
S3 1.000 0 1.786 2 1.888 3 2.247 6 2.526 8 2.856 2 3.148 3 3.359 8 3.860 1 4.723 6
S4 1.000 0 1.791 2 1.895 3 2.251 6 2.533 3 2.862 3 3.162 5 3.384 0 3.904 6 4.839 2
S5 1.000 0 1.815 6 1.884 2 2.274 6 2.519 5 2.852 8 3.153 0 3.371 7 3.894 1 4.860 4
S6 1.000 0 1.801 0 1.905 0 2.265 7 2.544 4 2.873 9 3.167 9 3.385 0 3.892 0 4.743 9
S7 1.000 0 1.793 1 1.900 1 2.260 4 2.549 7 2.883 6 3.189 3 3.416 2 3.954 7 4.905 3
S8 1.000 0 1.795 3 1.898 8 2.263 0 2.541 5 2.877 1 3.169 2 3.388 2 3.901 7 4.787 3
S9 1.000 0 1.791 3 1.890 4 2.253 6 2.537 6 2.870 0 3.173 8 3.397 1 3.921 3 4.769 7
S10 1.000 0 1.789 9 1.892 9 2.238 6 2.525 6 2.852 7 3.149 6 3.365 0 3.880 7 4.858 6
S11 1.000 0 1.769 3 1.873 5 2.225 7 2.499 2 2.814 2 3.102 1 3.301 2 3.791 5 4.560 2
S12 1.000 0 1.760 0 1.862 2 2.206 7 2.476 3 2.790 6 3.074 8 3.275 0 3.756 7 4.462 3
S13 1.000 0 1.795 5 1.895 1 2.252 0 2.533 0 2.858 1 3.153 0 3.361 0 3.868 5 4.706 3
S14 1.000 0 1.754 0 1.857 9 2.207 8 2.480 1 2.790 6 3.079 1 3.272 3 3.749 7 4.459 6
S15 1.000 0 1.791 3 1.895 7 2.238 2 2.530 8 2.857 7 3.173 1 3.396 3 3.933 7 5.000 0
S16 1.000 0 1.791 3 1.895 7 2.253 7 2.534 8 2.866 6 3.161 9 3.377 4 3.887 7 4.774 8
S17 1.000 0 1.696 2 1.908 0 2.270 7 2.557 6 2.899 9 3.193 8 3.418 5 3.948 2 4.873 1
S18 1.000 0 1.785 1 1.888 5 2.240 3 2.524 6 2.855 0 3.155 4 3.374 9 3.890 8 4.822 6
S19 1.000 0 1.796 1 1.902 5 2.263 4 2.558 9 2.903 1 3.215 2 3.454 2 4.004 2 4.976 2
S20 1.000 0 1.798 6 1.901 7 2.249 1 2.538 0 2.863 7 3.176 1 3.402 3 3.939 7 5.004 8
S21 1.000 0 1.784 9 1.889 6 2.244 5 2.526 9 2.855 7 3.152 8 3.363 9 3.877 8 4.748 7
S22 1.000 0 1.787 4 1.891 5 2.253 7 2.529 2 2.861 6 3.151 3 3.362 2 3.866 1 4.716 5
S23 1.000 0 1.764 7 1.867 5 2.218 5 2.492 2 2.810 7 3.097 9 3.299 6 3.784 2 4.483 0
S24 1.000 0 1.773 4 1.877 3 2.222 0 2.501 4 2.820 6 3.120 4 3.327 7 3.802 4 4.748 4
S25 1.000 0 1.765 7 1.870 9 2.214 2 2.487 5 2.804 7 3.096 8 3.294 4 3.771 8 4.647 2
S26 1.000 0 1.775 2 1.879 8 2.229 2 2.499 4 2.817 3 3.103 5 3.303 4 3.781 3 4.624 6
S27 1.000 0 1.757 6 1.861 1 2.208 1 2.476 6 2.796 3 3.081 7 3.280 5 3.754 4 4.556 6
S28 1.000 0 1.772 1 1.879 2 2.235 0 2.506 9 2.827 0 3.109 3 3.304 2 3.772 1 4.582 6
S29 1.000 0 1.779 3 1.883 8 2.229 7 2.491 2 2.817 0 3.087 0 3.278 0 3.734 7 4.459 9
S30 1.000 0 1.778 8 1.882 2 2.232 9 2.496 6 2.818 0 3.092 8 3.284 9 3.746 4 4.462 1
S31 1.000 0 1.771 2 1.875 9 2.220 9 2.477 0 2.797 4 3.061 3 3.249 7 3.716 8 4.412 0
S32 1.000 0 1.782 1 1.887 4 2.232 5 2.488 5 2.804 5 3.069 9 3.258 1 3.711 7 4.393 6
S33 1.000 0 1.772 9 1.877 6 2.220 3 2.479 2 2.797 9 3.060 4 3.255 7 3.713 0 4.389 1
S34 1.000 0 1.777 8 1.886 3 2.231 1 2.484 1 2.801 8 3.064 2 3.252 5 3.701 6 4.389 1
平均值 1.000 0 1.780 2 1.886 4 2.239 8 2.515 5 2.840 6 3.132 9 3.341 6 3.840 5 4.691 1
RSD / % 0.00 1.13 0.68 0.83 1.04 1.18 1.45 1.74 2.25 4.08
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 11 期 2012 年 11 月

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表 3 34 批次凉粉草特征指纹图谱的相对峰面积
Table 3 Relative peak area of 34 batches of M. chinensis characteristic fingerprint
相对峰面积 批次
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
S1 1.000 0 0.017 1 0.314 4 0.001 5 1.257 7 0.089 8 0.752 0 0.063 8 0.120 7 0.136 3
S2 1.000 0 0.055 1 0.234 5 0.064 6 1.393 0 0.032 7 0.793 9 0.313 8 0.167 6 0.332 7
S3 1.000 0 1.059 5 0.233 3 0.250 2 1.788 7 4.833 3 17.002 0 0.739 0 0.864 3 0.628 0
S4 1.000 0 0.332 7 0.413 0 0.324 4 1.633 0 1.677 1 27.682 4 2.962 9 0.677 0 0.408 2
S5 1.000 0 0.020 1 0.087 6 0.049 5 0.247 6 0.011 8 12.820 2 1.360 4 0.145 1 0.240 8
S6 1.000 0 1.654 5 1.466 5 1.783 1 5.877 5 6.154 1 25.405 9 0.702 6 1.904 3 0.8597
S7 1.000 0 3.426 1 0.805 0 1.171 6 3.179 4 5.129 7 23.640 0 1.061 6 1.341 4 0.794 8
S8 1.000 0 2.604 3 0.884 5 1.928 9 3.618 1 3.614 6 35.523 2 0.717 7 1.193 5 0.959 2
S9 1.000 0 1.348 0 0.401 7 0.799 0 0.801 9 5.244 4 26.432 5 1.260 0 1.049 8 0.797 9
S10 1.000 0 1.141 7 1.043 2 1.421 6 4.907 0 5.954 5 25.378 5 0.484 5 1.695 9 0.867 5
S11 1.000 0 0.599 2 0.057 6 0.496 0 0.631 8 2.144 9 20.311 9 0.708 7 0.636 8 0.300 8
S12 1.000 0 1.113 8 0.252 7 0.637 5 1.372 4 3.371 9 25.414 3 0.958 8 0.767 8 0.494 5
S13 1.000 0 1.254 3 0.628 0 0.655 4 0.139 8 4.390 3 22.343 3 1.847 6 0.283 8 4.207 5
S14 1.000 0 1.434 6 0.498 0 0.365 0 0.213 8 5.385 1 22.678 1 1.758 4 0.359 2 4.109 5
S15 1.000 0 1.425 5 0.440 5 0.342 6 2.587 9 6.180 3 23.657 7 0.753 8 1.787 5 0.731 9
S16 1.000 0 1.942 4 0.532 3 0.526 3 2.931 5 8.247 0 23.541 6 1.082 1 1.983 9 0.995 5
S17 1.000 0 0.369 1 0.590 8 0.749 7 1.548 6 0.037 5 33.681 0 2.549 7 1.024 2 0.279 6
S18 1.000 0 0.743 2 0.286 3 0.238 4 1.885 6 3.445 3 17.432 0 0.465 4 0.826 0 0.557 3
S19 1.000 0 0.812 9 0.203 6 0.120 0 0.662 9 1.953 8 22.942 9 0.518 3 0.460 6 0.114 5
S20 1.000 0 1.238 9 0.356 6 0.584 4 1.896 6 5.043 1 19.846 1 0.813 5 1.034 9 0.555 9
S21 1.000 0 1.670 5 0.279 7 0.082 8 1.312 1 7.308 8 22.459 7 0.798 5 1.480 3 0.977 1
S22 1.000 0 1.609 3 0.332 8 0.260 0 2.031 6 6.710 8 17.637 0 1.028 8 1.058 5 0.696 7
S23 1.000 0 3.805 7 0.599 8 2.394 7 3.608 3 5.635 9 29.651 0 1.013 3 1.537 2 1.000 2
S24 1.000 0 2.406 3 0.249 1 0.253 9 0.999 2 3.593 8 18.729 6 0.624 5 0.887 6 0.696 8
S25 1.000 0 1.269 5 0.273 3 1.270 9 0.899 2 3.033 5 4.157 7 0.856 5 1.341 6 0.482 4
S26 1.000 0 1.333 5 0.322 3 1.283 9 0.868 3 3.094 8 4.271 5 0.862 5 1.375 1 0.491 3
S27 1.000 0 2.167 4 0.360 4 0.731 9 1.089 4 4.103 9 3.215 5 0.916 9 1.376 6 0.310 3
S28 1.000 0 2.195 6 0.455 5 0.711 6 1.103 1 4.125 7 3.179 0 0.920 5 1.373 1 0.315 6
S29 1.000 0 3.426 7 0.317 5 2.054 4 1.532 1 5.514 1 2.279 0 1.887 4 2.194 3 1.201 6
S30 1.000 0 6.989 5 1.300 5 5.653 2 1.455 0 13.341 8 10.839 9 6.260 9 3.292 8 2.727 7
S31 1.000 0 1.677 5 0.188 8 3.423 9 0.775 7 4.737 0 10.454 5 1.760 7 3.119 0 0.655 5
S32 1.000 0 1.318 8 0.675 0 1.700 6 1.962 1 2.379 2 3.048 8 1.427 8 1.776 5 0.650 5
S33 1.000 0 4.964 2 1.296 8 7.137 2 1.885 6 8.855 2 13.614 4 3.323 5 4.259 6 1.821 0
S34 1.000 0 1.385 7 0.707 0 0.533 1 2.678 0 2.545 7 3.431 9 1.105 8 1.180 9 0.590 2
平均值 1.000 0 1.729 8 0.502 6 1.176 5 1.787 5 4.350 6 16.889 7 1.291 5 1.311 1 0.911 4
RSD / % 0.00 83.03 69.33 131.36 71.82 63.47 60.23 87.65 69.01 105.21

2.8 聚类分析
以各样品共有峰的相对峰面积为变量,利用
SPSS17.0 聚类分析法,采用离差平方和法,利用
欧氏距离作为样品的测度,对这 34 批样品进行分
类,结果见图 3。第一类包括 1、2 号样品,产地
为越南;25~29、32、34 号样品,产地为广东;
第二类包括 4、6~17、19、21、23 号样品,产地
主要是广东、福建、台湾和印尼;第三类包括 3、
5、18、20、22、24 号样品,产地主要是广西和
福建,30、31、33 号样品,即产地为广东的样品
由于加工方法不同被混入此类。
3 讨论
本实验考察不同高效液相柱 Agela Bonchrom C18
柱、Phenomenex Luna 柱、Phenomenex Synersi 柱、
Dikma PlatisiTM ODS 柱、Dikma Diamonsil C18(2)
柱、Kromasil 100-5 C18 柱的分离效果,最终确定采
用 Dikma Diamonsil C18(2)柱进行试验。
文献报道凉粉草的提取溶剂为水和不同体积分
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 11 期 2012 年 11 月

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表 4 不同批次凉粉草特征指纹图谱的相似度
Table 4 Similarity of 34 batches of M. chinensis
characteristic fingerprint
编号 相似度 编号 相似度 编号 相似度 编号 相似度
S1 0.464 S10 0.990 S19 0.992 S28 0.702
S2 0.485 S11 0.994 S20 0.998 S29 0.490
S3 0.995 S12 0.997 S21 0.992 S30 0.710
S4 0.986 S13 0.986 S22 0.984 S31 0.918
S5 0.975 S14 0.987 S23 0.995 S32 0.709
S6 0.984 S15 0.996 S24 0.998 S33 0.828
S7 0.994 S16 0.988 S25 0.859 S34 0.756
S8 0.994 S17 0.979 S26 0.851
S9 0.999 S18 0.998 S27 0.705

图 3 34 批凉粉草指纹图谱聚类分析
Fig. 3 Cluster analysis of 34 batches of M. chinensis fingerprint
数的醇,提取方法有回流提取或超声处理等。本实
验考察了甲醇和 50%乙醇的提取效果,结果表明回
流提取的效率明显高于超声提取,而且 50%乙醇提
取液较甲醇提取液的色素量低,所得到的色谱图出
峰数较多,色谱峰分离度好,各峰峰面积值较大。
最终确定样品供试液为 50%乙醇回流提取液,该供
试液色素干扰低,出峰完全,分离度良好。
考察不同流动相,不同酸包括磷酸、甲酸、醋
酸以及不同浓度对色谱峰分离度的影响。流动相若
选用乙腈-醋酸系统,凉粉草各化学成分无法得到分
离,因此加入醋酸的流动相系统是不可行的;流动
相若选用乙腈-甲酸系统,随着甲酸浓度的增加,2~
7 号峰之间各峰的分离度及出峰时间都有了较好的
改善,特别是 2 和 3 号峰由原来的肩峰基本达到了
基线分离,6 和 7 号峰的分离度也明显改善,而这
是乙腈-磷酸系统无法做到的,而且用磷酸作为流动
相,在冲洗液相柱时必须用高浓度水长时间冲洗,
以防磷酸在液相柱中析晶而阻塞液相柱,但是甲酸
就可以避免这种情况出现,综合各方面考虑,流动
相用甲醇-2.0%甲酸系统。
考察不同体积流量(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、
1.2 mL/min)对色谱峰分离度的影响。随着体积流
量的增大,柱压不断上升,同时出峰时间提前,当
体积流量上升至 0.8 mL/min,所有峰都已基本达到
基线分离,可是随着体积流量的增加,柱压也随之
增大,考虑到柱压的问题,故选择体积流量为 0.8
mL/min。
考察不同柱温(15、20、25、30、35、40 ℃)
对色谱峰分离度的影响。随着柱温的增加,凉粉草
样品各峰的分离度也越来越好,同时各峰的出峰时
间也提前,当柱温达到 25 ℃以上,各色谱峰的分离
度与 25 ℃时相差无几,故选择柱温条件为 25 ℃。
目前,针对凉粉草的质量控制研究尚未见报道,
而在化学成分还不清楚的情况下,建立凉粉草的特
征指纹图谱,指导凉粉草的药材质量控制具有重要
的意义。本实验通过各因素的考察,建立了凉粉草
特征指纹图谱,并运用聚类分析将 34 批次的样品划
分成 3 类,其中 10 个特征峰稳定出现。此外,由共
有峰的紫外光谱可以看出,凉粉草中主要含有酚酸
类和黄酮类两大类成分。该法准确可靠,重复性好,
为凉粉草质量控制提供了依据。
参考文献
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社, 1977.
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