全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 4 期 2012 年 4 月

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金莲花化学成分的 HPLC-MS 表征分析与鉴定
黄 睿 1，张贵君 1*，潘艳丽 2，崔湖荣 3，赵 越 4
1. 北京中医药大学中药学院，北京 100102
2. 中国中医科学院，北京 100700
3. 韩国庆熙大学，韩国 首尔 130-701
4. 广东药学院中药学院，广东 广州 510006
摘 要：目的 探讨金莲花 Trollius chinensis 成分的化学表征，为完善其质量标准和鉴定特征提供科学依据。方法 采取
HPLC-MS 分析法。Hypersil ODS2（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，流动相为乙腈-0.6%磷酸水，梯度洗脱，体积流量为
1.2 mL/min，检测波长为 345 nm，离子源为 ESI(−)。结果 中药金莲花化学组分的保留时间、分子离子峰（m/z）和碎片信
息表征明显，重要化学成分为荭草苷（m/z 446.7 [M－H]−）、牡荆苷（m/z 430.8 [M－H]−）和荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷（m/z
608.9 [M－H]−）等。结论 金莲花化学成分的 HPLC-MS 表征可以作为其鉴定特征。
关键词：金莲花；HPLC-MS；荭草苷；牡荆苷；荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷
中图分类号：R284.2 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2012)04 - 0670 - 03
Analysis and identification on characterization of chemical components
in Trollii Flos by HPLC-MS
HUANG Rui1, ZHANG Gui-jun1, PAN Yan-li2, CUI Hu-rong3, ZHAO Yue4
1. School of Chinese Materia Medica, Beijing University of Traditional Chinese Medicine, Beijing 100102, China
2. China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China
3. Kyung Hee University, Seoul 130-701, Korea
4. School of Traditional Chinese Materia Medica, Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, China
Key words: Trollii Flos; HPLC-MS; orientin; vitexin; orientin-2″-O-β-L-galactopyranosylide

金莲花 Trollius chinensis Bunge (Trollii Flos) 是
常用中药[1]，《中国药典》中有金莲花润喉片、金莲
清热颗粒等制剂。药理实验证明金莲花有抑菌和抗
病毒活性，临床上主要用于治疗呼吸道炎症。其化
学成分主要有黄酮、有机酸、生物碱和挥发油类化
合物等，药效组分主要为荭草苷、牡荆苷和荭草素-
2″-O-β-L-半乳糖苷等[2-4]。采用高效液相色谱-质谱联
用（HPLC-MS）技术，通过高效液相的高分离能力
分离样品中的化学成分，再利用质谱进行结构鉴定，
可有效地表征其鉴定特征。采用 HPLC-MS 表征鉴定
金莲花，具有实用性和专属性强等明显特征。
1 仪器与材料
Agilent 1100 高效液相色谱仪，G1315B DAD 检
测器，G1312A 二元泵，G1313A 自动进样器（美国
安捷伦公司）；Quattro Micro API 三重四极杆液相色
谱串联质谱仪（美国 Waters 公司）；荭草素-2″- O-β-L-
半乳糖苷对照品（本实验室自提，归一化法测定质
量分数大于 98.0%），荭草苷对照品（购于 Alchimica，
批号 A5310-0010，质量分数≥99.0%），牡荆苷对照
品（批号 111687-200501）、金丝桃苷对照品（批号
111521-200303）购于中国药品生物制品检定所；乙
腈（Fisher 色谱纯），屈臣氏纯净水，其余所用试剂
均为分析纯。
金莲花样品经北京中医药大学张贵君教授采集
并鉴定为金莲花 Trollius chinensis Bunge。样品来自
6 个地区，分别为 JLH-1（内蒙古阿尔山五岔沟野
生品）、JLH-2（内蒙古阿尔山 3 号沟野生品）、JLH-3
（河北承德围场野生品）、JLH-4（黑龙江加格达奇
野生品）、JLH-5（内蒙古阿尔山五岔沟一等天野生
品）、JLH-6（宁夏栽培品）。

收稿日期：2011-12-08
基金项目：广东省教育部产学研结合项目（2007B090400085）
作者简介：黄 睿（1973—），女，博士生，研究方向为中药鉴定方法学研究。E-mail: namier@sina.com
*通讯作者 张贵君 Tel：(010)84738624 E-mail：guijunzhang@163.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 4 期 2012 年 4 月

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2 方法与结果
2.1 色谱条件
液相色谱柱 Hypersil ODS2（250 mm×4.6 mm，
5 μm，英国 Hypersil），柱温为 25 ℃，以乙腈-0.6%
磷酸水（12∶88→30∶70）为流动相，梯度洗脱时
间为 70 min，体积流量为 1.2 mL/min，检测波长为
345 nm，进样量 20 μL。
2.2 质谱条件
电喷雾离子化源（ESI），以负离子模式检测
（ESI−），毛细管电压 2.5 kV，锥孔电压 30 V，萃取
锥孔电压 3 V，离子源温度 80 ℃，脱溶剂温度 200
℃，雾化气体积流量 93 L/h，脱溶剂气体积流量 526
L/h，离子扫描范围 m/z 100～600。
2.3 溶液的制备
2.3.1 对照品溶液的制备 精密称取各对照品适
量，用甲醇分别制成含荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷
40 μg/mL、荭草苷 74 μg/mL、牡荆苷 40 μg/mL 和
金丝桃苷 80 μg/mL 的溶液，作为对照品溶液。
2.3.2 供试品溶液的制备 金莲花样品粉碎，分别
精密称取 50 mg 置锥形瓶中，精密加入 60%甲醇 5
mL，称定质量，超声提取（功率 200 W，频率 30 kHz）
60 min，取出，放冷，再称定质量，加甲醇补足减
失的质量，摇匀，滤过，取续滤液即得。
2.4 样品测定
记录供试品溶液和对照品溶液的高效液相色谱
图、质谱总离子流色谱图及各离子的质量色谱图。
2.5 结果
根据 ESI-MS 所测定的[M－H]−值和碎片信
息，结合文献，鉴定出了金莲花药材中的 14 个化学
成分。本研究同时做了荭草苷、牡荆苷和荭草素-
2″-O-β-L-半乳糖苷和金丝桃苷对照品的 HPLC-MS
研究，6 个产地的药材 HPLC 图谱中与该 4 种对照
品保留时间相同的色谱峰在 MS 谱图中显示相似
的离子碎片，因此可以断定药材中含有上述 4 种
黄酮类化合物。本实验选取图谱有代表性的内蒙
古阿尔山 3 号沟野生品样品进行分析。对照品与
金莲花药材的 HPLC 图谱见图 1，质谱总离子流图
（TIC）见图 2。
化合物 1：TIC 图 5.947 min，质量色谱图中分
子离子峰 m/z: 254.7 [M－H]−，510.7 [2M]−，结合文
献推断可能为棕榈酸[5]，分子式为 C16H32O2，相对
分子质量 256.4。
化合物 2：TIC 图 12.777 min，质量色谱图中分

14-荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷 3-荭草苷 5-牡荆苷 6-金丝桃苷
14-orientin-2″-O-β-L-galactoside 3-orientin 5-vitexin 6-hyperoside
图 1 对照品 (A) 与金莲花药材 (B) 的 HPLC 图谱
Fig. 1 HPLC chromatograms of reference substance (A)
and crude Trollii Flos (B)

图 2 金莲花药材质谱总离子流图
Fig. 2 TIC of Trollii Flos
子离子峰 m/z: 578.6 [M－H]−，559.2 [M－H2O]−，结
合文献推断可能为荭草苷-2″-O-β-D-吡喃木糖苷[6]，分
子式为 C26H28O15，相对分子质量 580。
化合物 3：TIC 图 13.791 min，质量色谱图中分
子离子峰 m/z: 446.7 [M－H]−，结合文献和荭草苷对照
品推断为荭草苷[7]，分子式为 C21H20O11，相对分子质
量 448.38。
化合物 4：TIC 图 14.405 min，质量色谱图中分
子离子峰 m/z: 594.6 [M－H]−，结合文献推断可能为
0 10 20 30 40 50 60 70
t / min

0 10 20 30 40 50 60
0 10 20 30 40 50 60
14
3
5
6
14
2
3
45
t / min
A
B
67 8
9
10
11 12 13 1
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2″-O-(3′′′, 4′′′-二甲氧基苯甲酰) 牡荆苷[8]，分子式为
C30H28O13，相对分子质量 596。
化合物 5：TIC 图 16.299 min，质量色谱图中分
子离子峰 m/z: 430.8 [M－H]−，结合文献和牡荆苷对
照品推断为牡荆苷[5]，分子式为 C21H20O10，相对分
子质量 432.38。
化合物 6：TIC 图 18.086 min，质量色谱图中分
子离子峰 m/z: 462.8 [M－H]−，结合文献和金丝桃苷
对照品推断为金丝桃苷[9]，分子式为 C21H20O12，相
对分子质量 464.38。
化合物 7：TIC 图 18.941 min，质量色谱图中分
子离子峰 m/z: 445.0 [M－H]−，结合文献推断可能为异
当药苷[8,10]，分子式为 C22H22O10，相对分子质量 446。
化合物 8：TIC 图 30.729 min，质量色谱图中分
子离子峰 m/z: 531.3 [M－H]−，498.6 [M－H2O－
CH3]−，473.7 [M－C4H9]−，结合文献推断可能为
2″-O-(2′′′- 甲基丁酰基 ) 荭草苷 [8] ，分子式为
C26H28O12，相对分子质量 532。
化合物 9：TIC 图 32.409 min，质量色谱图中分
子离子峰 m/z: 590.5 [M－H]−，结合文献推断可能为
刺槐素-7-O-新橙皮糖苷[11]，分子式为 C28H32O14，
相对分子质量 592。
化合物 10：TIC 图 33.292 min，质量色谱图中
分子离子峰 m/z: 595.1 [M－H]−，577.5 [M－H2O]−，
564.6 [M－CH2OH]−，结合文献推断可能为槲皮素-
3-O-桑布双糖苷或是槲皮素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖
(1′′′-2″)-β-D-葡萄糖苷，二者为同分异构体[12]，分子
式为 C26H28O16，相对分子质量 596。
化合物 11：TIC 图 34.970 min，质量色谱图中
分子离子峰 m/z: 514.9 [M－H]−，结合文献推断可能
为 2″-O-(2′′′-甲基丁酰基 ) 牡荆苷 [8]，分子式为
C26H28O11，相对分子质量 516。
化合物 12：TIC 图 39.291 min，质量色谱图中
分子离子峰 m/z: 545.0 [M－H]−，结合文献推断可能
为 7-甲氧基-2″-O-(2′′′-甲基丁酰基) 荭草苷[13]，分子
式为 C27H30O12，相对分子质量 546。
化合物 13：TIC 图 43.132 min，质量色谱图中
分子离子峰 m/z: 529.0 [M－H]−，结合文献推断可能
为 2″-O-(2′′′-甲基丁酰基) 异当药黄素或 3″-O-(2′′′-
甲基丁酰基) 异当药黄素[8]，分子式为 C27H30O11，
相对分子质量 530。
化合物 14：TIC 图 11.927 min，质量色谱图中分
子离子峰 m/z: 608.9 [M－H]−，结合文献和荭草素-
2″-O-β-L-半乳糖苷对照品推断为荭草素-2″-O-β-L-半
乳糖苷[8]，分子式为 C27H30O16，相对分子质量 610。
3 讨论
本研究检测了 6 批不同产地的金莲花药材，
HPLC 图谱和 MS 图谱显示各批药材在峰的数目和
保留时间上基本相同，只是峰强度有所差异，这可能
与药材产地不同地理环境或药材的贮藏年限有关，随
着贮藏期的延长，有些成分的质量分数会发生变化。
本研究建立了金莲花药材的 HPLC-MS 表征分
析方法，可有效反映其化学成分特征，为金莲花药
材的鉴别分析和质量标准的建立提供依据。
参考文献
[1] 卫生部药品标准: 蒙药分册 [S]. 1998.
[2] 杨晶凡, 张贵君, 张春晖, 等. 金莲花不同煎煮方法水
提取液中 4 种药效组分含量和比例的测定 [J]. 中国现
代中药, 2009, 4(11): 32-34, 42.
[3] 杨晶凡, 张春晖, 韩 茹, 等. 不同储存期金莲花中 4 种
药效组分的测定 [J]. 中国现代中药, 2009, 11(1): 16-18.
[4] 杨晶凡. 中药金莲花药效组分及质量评价研究 [D].
北京: 北京中医药大学, 2009.
[5] 康少文, 于永芳, 王 沛. 金莲花化学成分的研究 [J].
承德医学院学报, 1984, 1: 1-4.
[6] 刘丽娟, 王秀坤, 匡海学. 长瓣金莲花茎叶化学成分的
研究 [J]. 药学学报, 1992, 27(11): 837-840.
[7] Sanchez-Rabaneda F, Jauregui O, Casals I, et al. Liquid
chromatographic/electrospray ionization tandem mass
spectrometric study of the phenolic composition of cocoa
(Theobroma cacao) [J]. J Mass Spectram, 2003, 38(1): 35-42.
[8] 邹建华. 天葵及短瓣金莲花的化学成分研究 [D]. 北
京: 中国协和医科大学, 中国医学科学院, 2004.
[9] Sun J P, Liang F, Bin Y, et al. Screening non-colored
phenolics in red wines using liquid chromatography/
ultraviolet and mass spectrometry/mass spectrometry
libraries [J]. Molecules, 2007, 12(3): 679-693.
[10] Greca M D, Ferrara M, Fiorentino A, et al. Antialgal
compounds from Zantedeschia aethiopica [J]. Phyto-
chemistry, 1998, 49(5): 1299-1304.
[11] Khafagy S M, Sabri N N, El-Salam N A, et al. Isolation
of sesamin-like compound and acacetin 7-O-neohe-
speridoside from Otanthus maritimus [J]. Planta Med,
1979, 35(2): 186-187.
[12] Mabry T J, Markham K P, Thomas M B. The Systematic
Identification of Flavonoids [M]. New York: Springer-
Verlag, 1970.
[13] Wu X A, Zhao Y M, Yu N J. Flavone c-glycosides from
Trollius ledebouri reichb [J]. J Asian Nat Prod Res, 2006,
8(6): 541-544.