全 文 ：提供了依据 。可以看出短柄五加的一些药理作用与
挥发油的化学成分有密切的关系 ,但作用机理目前
尚不明确 ,有待深入研究。
参 考 文 献
[ 1] 何景 , 曾沧江 , 蔡淑琴 .中国植物志(第五十四卷)
[ M] .北京:科学出版社 , 1978:104-106.
[ 2] 郑万均 .中国树木志(第二卷)[ M] .北京:中国林业出
版社 , 1985:1777-1780.
[ 3] 马德兹 ,刘惠兰 , 胡福秀 .宁夏植物志(第二版)[ M] .
宁夏:宁夏人民出版社 , 1986:33-34.
[ 4] 张晋宁 , 章英才 ,任昱坤 .宁夏六盘山自然保护区短柄
五加分布及生态环境初探 [ J] .宁夏农业学院学报 ,
2000, 21(1):81-83.
[ 5] 李平 , 孙凤琴 ,赵惠敏 , 等 .香草醛的应用及制备 [ J] .
河北师范大学学报 , 1999, 23(2):29-32.
[ 6] 马建强 , 刘红星 ,黄初升 , 等.氧化芳樟醇的相转移催化
氧化合成研究 [ J] .广西师范学院学报 , 2004, 21(3):2-
5.
[ 7] 范存良 , 杨忠保 ,徐佩若 .异戊二烯线性二聚合成月桂
烯 [ J] .精细化工中间体 , 2001, 31(6):7-9.
溪黄草黄酮类成分的 HPLC-MS-MS分析
赵　洁
(南方医科大学药学院 ,广东 广州 510515)
　　摘要　目的:研究溪黄草的化学成分。方法:采用多次硅胶柱层析和 SephadexLH-20凝胶柱层析进行分离 ,并
用 HPLC-MS-MS联用技术进行鉴定。 结果:从溪黄草中鉴定了 3个黄酮类成分 , 分别为槲皮素(Ⅰ )、异槲皮素
(Ⅱ)、芦丁(Ⅲ)。结论:这 3个黄酮类成分均首次从该植物中发现。
关键词　溪黄草;化学成分;HPLC-MS-MS
中图分类号:R284.1/R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2009)01-0070-03
收稿日期:2008-06-16
　　中药溪黄草具有清热利胆 、凉血散瘀 、强肝益肝
等功效 〔1〕 ,临床上用于治疗急慢性肝炎 〔2〕。笔者采
用多次硅胶柱层析和 SephadexLH-20凝胶柱层析
进行分离 ,并用 HPLC-MS-MS联用技术进行鉴定 ,
从溪黄草中鉴定了三个黄酮类成分 ,分别为槲皮素 、
异槲皮苷 、芦丁。现将实验方法和结果报道如下。
1 　仪器与试药
四极杆液相色谱-质谱联用仪:API3000LC/MS/
MS。柱层析用 SephadexLH-20为 AmershamBIosci-
ences产品;柱层析用硅胶(100目)为青岛海洋化工
厂产品 。其它试剂均为分析纯 。
溪黄草药材购于广东省药材公司 ,经该公司罗
源生高级工程师鉴定为唇形香茶菜属植物线纹香茶
菜 Rabdosialophanthoides(Buch.-Ham.exD.Don)
Hara。
槲皮素 、异檞皮苷 、芦丁对照品 ,购自中国药品
生物制品检定所 。
2 　提取与分离
取粉碎后的溪黄草药材 1.5 kg,用 95%乙醇冷
浸提取 2次 ,每次 2 d,合并浸提液 ,浓缩得浸膏。浸
膏先用石油醚 -乙酯乙酯梯度洗脱 ,再用乙醇-乙酸
乙酯洗脱 。其中 ,石油醚 -乙酸乙酯(20∶80)洗脱部
分经两次硅胶柱层析分离 ,得化合物 Ⅰ 。乙醇 -乙酸
乙酯(20∶80)洗脱部分先经多次硅胶柱层析 ,然后
经过多次 SephadexLH-20凝胶柱分离 ,得化合物 Ⅱ
和化合物 Ⅲ。
3　方法
3.1　色谱条件　色谱柱:keystonescientific.Inc.
BetaBasic-18柱 ,颗粒大小:5 μm,孔径:150 ;流动
相:乙腈-水(60∶40);流速:0.2 mL/min;进样量:5
μL。
3.2　质谱条件
3.2.1 　一级质谱条件:采用负离子全扫描一级质
谱检测 , ESI源。扫描范围:50 ～ 600 m/z;鞘气 、辅
助气均为氮气:6 L/min;NEB(Nebulizergas):2;
CUR(Colisiongas):8;IS(ionsprayvoltage):-4500;
TEM(Temperature):370;DP(DeclusteringPoten-
tial):-40;FP(FocusingPotential):-400;EP(Entrance
·70· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 32卷第 1期 2009年 1月
Potential):-10。
3.2.2　二级质谱条件:二级扫描 MS2:ESI源 。扫
描范围:50 ～ 600 m/z;鞘气 、辅助气均为氮气:6 L/
min;NEB(Nebulizergas):2;CUR(Colisiongas):8;
IS(ionsprayvoltage):-4500;TEM(Temperature):
370;DP(DeclusteringPotential):-40;FP(Focusing
Potential):-400;EP(EntrancePotential):-10。 CAD:
4;CE:-20。
4 　鉴定
4.1 　化合物 Ⅰ　取适量干燥至恒重的化合物 Ⅰ ,
精密称定 ,加甲醇制成浓度为 100 μg/mL的供试品
溶液;另取减压干燥至恒重的槲皮素对照品适量 ,精
密称定 ,加甲醇制成浓度为 100 μg/mL的对照品溶
液;按 “3.1”项下所述色谱条件与 “3.2”项下所述质
谱条件进行分析。结果表明:化合物 Ⅰ的 Q1负离
子一级扫描中存在与对照品相同分子量的准分子离
子峰 ,而且其 MS2负离子二级扫描的碎片峰与对照
品的碎片峰在相同条件下一致。见图 1,图 2。故鉴
定化合物 Ⅰ为槲皮素(Quercetin)。
4.2　化合物Ⅱ　取适量干燥至恒重的化合物 Ⅱ ,
精密称定 , 加甲醇浓度为 100 μg/mL的供试品溶
液;另取减压干燥至恒重的异槲皮苷对照品适量 ,精
密称定 ,加甲醇制成浓度为 100 μg/mL的对照品溶
液;按 “3.1”项下所述色谱条件与 “ 3.2”项下所述质
图 1　化合物Ⅰ MS2负离子扫描图
图 2　槲皮素 MS2负离子扫描图
·71·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 32卷第 1期 2009年 1月
谱条件进行分析 。结果表明:化合物 Ⅱ的 Q1正离
子一级扫描中存在与对照品相同分子量的准分子离
子峰 ,而且其 MS2正离子二级扫描的碎片峰与对照
品的碎片峰在相同条件下一致 。见图 3,图 4。故鉴
定化合物Ⅱ为异槲皮苷(Isoquercitrin)。
图 3　化合物Ⅱ MS2正离子扫描图
图 4　异槲皮素 MS2正离子扫描图
4.3 　化合物 Ⅲ　取适量干燥至恒重的化合物 Ⅲ ,
精密称定 ,加甲醇浓度为 100 μg/mL的供试品溶
液;另取减压干燥至恒重的芦丁对照品适量 ,精密称
定 ,加甲醇制成浓度为 100 μg/mL的对照品溶液;
按 “ 3.1”项下所述色谱条件与 “ 3.2”项下所述质谱
条件进行分析。结果表明:化合物 Ⅲ的 Q1正离子
一级扫描中存在与对照品相同分子量的准分子离子
峰 ,而且其 MS2正离子二级扫描的碎片峰与对照品
的碎片峰在相同条件下一致 。见图 5,图 6。故鉴定
化合物Ⅱ为芦丁(Rutin)。
图 5　化合物Ⅲ MS2正离子扫描图
图 6　芦丁 MS2正离子扫描图
参 考 文 献
[ 1] 广东中药志编委会 .广东中药志 [ M] .广州:广东科技
出版社 , 1994:100.
[ 2] 吴剑峰 .溪黄草的研究综述 [ J] .时珍国医国药 , 2003,
14(8):498-499.
　　2007年 《中药材 》杂志在 “中国知网 ”发行情况:《中药材 》期刊机构用户总计 2749
个 ,国际个人读者分布在 38个国家和地区。
·72· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 32卷第 1期 2009年 1月