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AFLP Analysis on genetic diversity for germplasm resources of Fritillaria thunbergii cultivated in Zhejiang Province

柴胡栽培种的RAPD和AFLP遗传关系研究



全 文 :相互拮抗的作用[6 ] ,高水平、稳定的基因流可以防止
居群间的遗传分化 ,使居群趋向于一致[7 ] ,浙贝母的
N m 为 4. 147 0 ,表明浙贝母各居群间基因流较大 ,
从而维持种内遗传变异的多样性。在地理位置上 ,
东阳、磐安、永康、缙云几个居群相距比较近 ,象山和
鄞州与其他居群距离比较远 ,但只有象山居群与其
他居群相对独立 ,这表明浙贝母象山居群遗传基因
相对于其他居群比较原始保守 ,进一步说明浙贝母
最初在浙江象山种植 ,其他居群是后期才迁徙种
植的[8 ] 。
3. 2  A FL P 分子标记技术用于浙贝母基因图谱构
建 :运用 A FL P 分子标记技术分析了栽培浙贝母遗
传性状的变化 ,从实验结果可知该方法特异分辨率
高 ,可获得较高的位点多态性。各个体、居群间聚类
关系明确 ,层次分明。表明 A FL P 分子标记技术能
很好地检测到浙贝母种内的遗传变异 ,为浙贝母遗
传连锁图谱的构建奠定了方法学基础。
3. 3  浙贝母种质资源保护与合理开发 :以前对分布
于江苏、浙江、安徽、湖北等不同产地浙贝母的 5S
rDNA 基因间区域基序列分析表明 ,不同产区的基
因间区具有相同的碱基序列 ,均为 588 bp [9 ] 。分析
发现栽培浙贝母居群存在丰富的遗传多样性 ,约
90 %在居群内。居群间遗传分化不是很明显 ,表明
在浙江省内各种植区之间的种质差别不大 ,而且广
泛的基因交流保证了药材品质的均一性和质量的稳
定性 ,也为优良品种的选育提供了良好的基地。但
是鄞州和象山居群必须开始引起重视 ,鄞州是目前
浙贝母种植和产量较大的地区 ,象山是浙贝母最初
的种植区 ,两个居群的多样性水平都比平均水平低。
建议在采取措施有效保护种植区资源的同时 ,尽快
建立良好繁育基地 ,对广大种植户宣传优良品种的
选购 ,尽可能地减少自交、近交等影响其遗传结构的
繁育因素 ,从根本上解决当前浙贝母资源保护与利
用的矛盾。
参考文献 :
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柴胡栽培种的 RAPD 和 AFLP 遗传关系研究
赵艮贵1 ,南晓洁2 ,郝媛媛1 ,刘小刚1 ,秦雪梅1

(11 山西大学 化学生物学与分子工程教育部重点实验室 ,山西 太原  030006 ;
21 山西师范大学生命科学学院 ,山西 临汾  041004)
摘  要 :目的  应用不同的分子标记进行柴胡药材干根遗传多样性分析 ,为柴胡栽培种鉴别和药材鉴别奠定基础。
方法  以柴胡栽培种干根为材料 ,采用 RA PD 和 A FL P 两种分析方法。结果  以筛选到的 3 条随机引物对 9 个柴
胡栽培种进行 RA PD 分析 ,共扩增出 28 条 DNA 带 ,平均每条引物组合扩增 9. 33 条带 ,其中多态性带为 6. 67 条 ,
多态性比率为 71. 43 % ;而在 A FL P 分析中 ,筛选出 4 对特异性引物 ,共获得 107 条 DNA 带 ,平均每对引物扩增
26. 75 条带 ,其中多态性带为 23. 25 条 ,多态性比率为 86. 92 %。经统计分析 ,9 个柴胡栽培种 RAPD 和 A FL P 分析
的 Jaccard 遗传相似系数分别介于 0. 61~0. 93 和 0. 39~0. 86。U P GMA 聚类分析 ,两种标记方法均可将 9 个柴胡
栽培种聚为 3 大类群 ,聚类结果相似但不完全相同。结论  以柴胡药材干根为材料 ,RA PD 和 A FL P 两种分子标
记均可用于植物种间及种下遗传关系分析 ,且 A FL P 条带较多 ,多样性丰富 ,更有利于柴胡属植物多样性的分析。
关键词 :柴胡属 ;RA PD ;A FL P ;聚类分析 ;遗传多样性
中图分类号 :R28217    文献标识码 :A    文章编号 :0253 - 2670 (2010) 01 - 0113 - 05
·311·中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 41 卷第 1 期 2010 年 1 月
①  收稿日期 :2009204211
  基金项目 :国家自然科学基金资助项目 (30570174)
  作者简介 :赵艮贵 (1964 —) ,曾用名 :赵春贵 ,男 ,河北新乐县人 ,副教授 ,博士 ,从事药用植物及其有效成分的研究。
Tel : (0351) 7011499  Fax : (0351) 7011499  E2mail :chungui @sxu. edu. cn
  3 通讯作者 秦雪梅 qinxm @sxu. edu. cn
Genetic relationship of RAPD and AFLP among Bupleurum cultivars
ZHAO Gen2gui1 , NAN Xiao2jie2 , HAO Yuan2yuan1 , L IU Xiao2gang1 , Q IN Xue2mei1
(11 Key Laboratory of Chemical Biology and Molecular Engineering of Minist ry of Education , Shanxi University ,
Taiyuan 030006 , China ; 21 College of Life Science , Shanxi Normal University , Linfen 041004 , China)
Abstract : Objective  To analyze t he genetic diversity of R adi x B u pleuri using two different molecule
markers for distinguishing cultivars in B u pleurum L1 and R adi x B u pleuri1 Methods  Random amplified
polymorp hic DNA ( RA PD) and amplified f ragment lengt h polymorp hism (A FL P) molecular markers were
used for distinguishing cultivars in B u pleurum L1 and R adi x B u pleuri1 Results  It showed t hat a total of
28 lines were amplified f rom nine cultivars in B u pleurum L1 using three kinds of p rimers selected in RA PD
analysis , and the average for each primer amplified wit h 9. 33 , 6. 67 (71. 43 %) of t hem were polymorp hic1
In A FL P analysis , four p rimer pairs were chosen to characterize nine cultivars in B u pleurum L1 A total of
107 A FL P markers were amplified1 On average , each combination amplified 26. 75 markers including 23.
25 polymorp hic markers , wit h a polymorp hic f requency of 86. 92 %1 The J accard genetic similarity coeffi2
cient s were f rom 0. 61 to 0. 93 and 0. 39 to 0. 86 in RA PD and A FL P by statistical analysis , respectively1
U P GMA Cluster analysis based on A FL P and RA PD molecular markers data was used to const ruct a den2
drogram of t hese cultivars1 It revealed segregations of all nine cultivars into three main clusters1 The den2
drograms of RA PD and A FL P were similar but not identical1 Conclusion  So t he genetic diversity of culti2
vars in B u pleurum L1 could be analyzed and distinguished f rom int ra2 and inter2species by means of bot h
A FL P and RA PD1 Beacuse of a large number of loci and polymorp hisms , t he A FL P is better t han RA PD
for analysis on t he genetic diversity of plant s in B u pleurum L1
Key words : B u pleurum L1 ; RA PD ; A FL P ; culster analysis ; genetic diversity
  柴胡首载于《神农本草经》,已有两千多年的药用
历史[1 ] ,具解表和里、退热、疏肝解郁等功效[2 ] ,主治
寒热往来、胸胁苦满等症[3 ] 。《中国药典》2005 年版收
载柴胡药材仅有柴胡 B upleurum chinense DC1 和狭
叶柴胡 B upleurum scorzoneri f olium Willd12 种 ,而我
国已报道柴胡 42 种 17 变种 7 变型[4 ] ,其中有 25 种 6
变种 1 变型在不同地区、不同程度地被药用 ,药材质
量和药效不稳定 ,也造成药用柴胡市场混乱[5~7 ] 。柴
胡的质量控制主要包括形态学及柴胡皂苷的定性检
验 ,由于柴胡皂苷量的差异也很难鉴别不同种或不同
居群间柴胡。分子标记技术的快速发展及广泛应用
使从 DNA 分子水平鉴别中药成为可能。目前 ,柴胡
在 ITS 序列[8 ] 及 RAPD 分子标记[9~11 ] 方面已有报
道 ,但多以鲜叶或干叶[12 ] 作为供试材料。本研究结
合柴胡以干根入药的特点 ,以干根为材料 ,应用
RAPD 和 AFL P 两种方法进行遗传多样性分析 ,为中
药柴胡干根药材的鉴别提供方法和数据。
1  材料和试剂
9 个柴胡属植物栽培种均为两年生干燥根 ,晾
干或晒干 ,采集自山西农业大学试验田 ,见表 1。聚
乙烯吡咯烷酮 ( PV P K30) 、琼脂糖 ,上海生工有限
公司 ;限制性内切酶 EcoR Ⅰ、Mes Ⅰ,MBI公司 ;尿
表 1  用于 RAPD 和 AFLP分析的柴胡属栽培种
Table 1  Cultivars in Bupleurum L1 used
in RAPD and AFLP analyses
编号  种名 原产地 缩写 栽培地
1 柴胡     山西灵丘 (外地引种) LQW Y 山西太谷
2 柴胡     山西灵丘 LQ 山西太谷
3 阿尔泰柴胡 日本三岛 (三岛柴胡) SD 山西太谷
4 柴胡     山西陵川 L CH 山西太谷
5 狭叶柴胡   山西太谷 (红柴胡) HC 山西太谷
6 柴胡     山西方山 (陵川引种) FSH 山西太谷
7 柴胡     甘肃陇西 L X 山西太谷
8 柴胡     陕西商洛 SHL 山西太谷
9 柴胡     山西左权 ZQ 山西太谷
素、丙烯酰胺、甲叉丙烯酰胺 , Sigma ;过硫酸铵 ,北
京化学试剂三厂 ; TEM ED ,天津化学试剂三厂 ;硝
酸银 ,北京化工厂 ; T aq 酶、T4 DNA 连接酶、剥离硅
烷、亲和硅烷 ,北京鼎国生物公司。
2  方法
2. 1  DNA 提取 :以柴胡干根为材料 ,经过预处理 ,
然后按 CTAB 法[13 ] 提取 DNA。样品研磨时加入
3 %PV P ,以 TN E 缓冲液 (即 100 mmol/ L Tris、
0. 15 mol/ L NaCl 和 20 mmol/ L ED TA) 于 0 ℃浸
提 2 次 ,每次 30 min 进行预处理。
2. 2  RAPD 分析 :引物、扩增体系和反应程度按照秦
民坚、付杨等[9 ,11 ]的方法进行 ,引物由北京奥科生物技
术公司合成 ,扩增产物用2. 0 %琼脂糖凝胶电泳检测。
·411· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 41 卷第 1 期 2010 年 1 月
2. 3  A FL P 分析 : A FL P 分析参考 Vo s 等[14 ] 的方
法 ,引物和接头由北京奥科生物技术公司合成。采
用 EcoR Ⅰ和 Mse Ⅰ双酶切 ,预扩增采用 E + A/ M +
C 引物组合 ,选择性扩增采用 64 对 E + 3/ M + 3 引
物组合。从 64 对选择性引物中筛选出条带清晰、反
应稳定的引物组合进行 A FL P 分析。
2. 3. 1  限制性消化与接头连接 :酶切反应体系为基
因组 DNA (50 ng/μL ) 4μL , Mse Ⅰ(10 U/μL ) 0. 4
μL , EcoR Ⅰ(10 U/μL) 0. 4μL ,Buffer 4μL ,dd H2 O
11. 2μL ;酶切反应条件为 37 ℃温育 3 h ,65 ℃温育
3 h , 80 ℃处理 20 min。连接体系为酶切完成的
DNA 样品 10μL ,再加 M2adapter (50 p mol/μL) 1. 0
μL ,E2adapter (5 p mol/μL) 1. 0μL ,A TP (10 mmol/
L) 2. 5μL , T4 DNA 连接酶 (3 U/μL ) 1μL ,Buffer
2. 0μL ,dd H2 O 7. 5μL ,16 ℃过夜连接 ,65 ℃加热
10 min ,灭活 T4 DNA 连接酶。
2. 3. 2  预扩增 :以连接产物稀释 10 倍作为预扩增
的模板。预扩增反应体系为模板 DNA 2. 0 μL ,
M + C引物 (30 ng/μL ) 1. 0μL , E + A 引物 (30 ng/
μL) 1. 0μL ,10 ×PCR Buffer 2. 5μL , T aq 酶 (2 U/
μL) 0. 5 μL , dN TP ( 10 mmol/ L ) 0. 5 μL , dd H2 O
18. 5μL ;反应条件为 :94 ℃、2 min ;94 ℃、30 s ,56
℃、30 s ,72 ℃、80 s ;29 个循环 ;72 ℃、5 min ,4 ℃保
存 ,扩增产物在 1. 4 %琼脂糖检测。
2. 3. 3  选择性扩增 :以预扩增产物稀释 80 倍作为
选择性扩增的模板。扩增反应体系为模板 2. 0μL ,
Mse Ⅰ引物 (30 ng/μL) 1. 0μL , EcoR Ⅰ引物 (5 ng/
μL) 1. 0μL ,10 ×PCR Buffer 2. 5μL , T aq 酶 (2 U/
μL) 0. 5 μL , dN TP ( 10 mmol/ L ) 0. 5 μL , dd H2 O
17. 5μL ,混合后进行选择性扩增 ;反应条件为 : 94
℃、2 min ;94 ℃、30 s ,65 ℃、30 s (每个循环降低 1
℃) ,72 ℃、80 s ,9 个循环 ;94 ℃、30 s ,55 ℃、30 s ,
72 ℃、80 s , 22 个循环 ; 72 ℃、5 min , 4 ℃保存 ,
1. 4 %琼脂糖凝胶电泳检测。
2. 3. 4  扩增产物的电泳及银染检测 :扩增产物在 6 %
变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳分离 ,银染检测[15 ,16 ] 。
2. 4  数据分析 :统计扩增条带 ,在相同迁移位置有带
记为“1”,无带记为“0”,建立数据库。按公式 P = ( K/
N) ×100 %计算多态性条带百分比 ,其中 K为多态位
点数目 , N 为所测位点总数。用 N TSYS2pc 软件计算
Jaccard 遗传相似系数 ,按非加权配对算术平均法
(UPGMA)建立 9 个柴胡栽培种的聚类图。
3  结果与分析
3. 1  遗传多样性分析 :利用北柴胡 (LCH) 、日本三岛
柴胡 (SD)和红柴胡 ( HC) 3 个种混合提取 DNA 进行
RAPD 和 AFL P 分析 ,从 10 条 RAPD 随机引物中选
择出 3 条引物 ,从 64 对 E + 3/ M + 3 AFL P 引物组合
中 ,筛选出 4 对引物 ,进行凝胶电泳 ,所得结果见图 1 ,
仅显示了一条 RAPD 引物和一对 AFL P 引物的扩增
结果 ,所用引物见表 2 ,其序列见文献数据[9 ,11 ,14 ] 。对
9 个柴胡栽培种的 RAPD 分析 ,结果见表 2 ,筛选出的
3 条引物共扩增出 28 条谱带 ,多态性条带为 20 条 ,多
态性比率为 71. 43 %。平均每条引物扩增出 9. 3 条 ,
多态性条带为 6. 7 条。不同引物扩增的多态率分布
于 63. 64 %~83. 33 %。AFL P 分析 ,筛选的 4 对引物
共可获得 107 条清晰谱带 ,其中 93 条具有多态性
(86. 97 %) ,平均每对引物组合产生 26. 75 条带 ,多态
性条带为 23. 25 条 (表 2) 。结果表明 , RAPD 和
AFL P 两种分子标记均能呈现各自有效的多态性条
带 ,但多态性水平及检测水平各不相同 ,从每条 (对)
引物扩增出的总条带数、多态性条带以及多态性比率
来看 ,AFL P 标记比 RAPD 标记的检测效率明显要
高 ,要适合于多态性检测。
  1~92柴胡栽培种编号
  M121 kb DNA 标准
  M22Msp Ⅰ酶切质粒 pBR 322 质粒 DNA
  A2以 OPC27 为扩增引物的 RAPD 图谱
  B2以 E2AA G/ M2CT G为扩增引物的 AFL P 图谱
  1 —92samples of 1 to 9 f rom cultivars in B upleurum L1
  M121 kb plus DNA Ladder
  M22pBR322 DNA ( Ms pI) markers
  A2RAPD Fingerprinting amplified by OPC27
  B2AFL P Fingerprinting amplified by E2AA G/ M2CT G
图 1  9 个柴胡栽培种的 RAPD 和 AFLP图谱
Fig. 1  RAPD and AFLP f ingerprint
of cultivars in Bupleurum L1
3. 2  柴胡属栽培种的遗传关系 :统计结果表明 ,9
个柴胡属栽培种 RA PD 分析的 J accard 遗传相似系
数为 0. 606 1~0. 933 3 ,栽培种 L QW Y与 L X 之间
的遗传相似性系数最大为 0. 933 3 ,栽培种 HC与 SHL
·511·中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 41 卷第 1 期 2010 年 1 月
表 2  筛选的 RAPD 引物和 AFLP引物组合及其扩增
Table 2  Primers used and amplif ication results by RAPD and AFLP analysis of cultivars in Bupleurum L1
RAPD 引物
引物 扩增条带数 多态性条带数 多态性比率/ %
AFL P 引物
引物 扩增条带数 多态性条带数 多态性比率/ %
OPC22 11 7 63. 64 E2A GC/ M2CAC 22 19 86. 36
OPC27 11 8 72. 73 E2ACT/ M2CTC 29 26 89. 66
OPC28 6 5 83. 33 E2AA G/ M2CT G 30 27 90. 00
E2AA G/ M2CTA 26 21 80. 77
总计 28 20 — 107 93 —
平均 9. 33 6. 67 71. 43 26. 75 23. 25 86. 92
之间的遗传相似性系数最小为 0. 606 1 (表 3) 。
A FL P 分析 ,它们之间的遗传相似系数在 0. 391 3~
0. 857 1 ,栽培种 L CH 与 FSH 之间的遗传相似性系
数最大为 0. 857 1 ,栽培种 HC 与 SD 间最小为
0. 391 3 (表 4) 。从两种分子标记的遗传相似性系
数可看出 , HC 与其他 8 个栽培种间的遗传相似性
系数均较小 ,而这 8 个栽培种两两间存在着不同程
度的遗传相似性 ,表明 9 个柴胡属栽培种间存在着
一定程度的遗传差异 ,但是 RA PD 和 A FL P 这两种
分子标记揭示的结果有一定的差异。
表 3  根据 RAPD 标记计算的遗传相似系数
Table 3  Genetic similarity of cultivars on basis
of RAPD markers
栽培种 LQWY LQ SD LCH HC FSH L X SHL ZQ
LQWY 1. 000 0
LQ 0. 866 7 1. 000 0
SD 0. 848 5 0. 800 0 1. 000 0
LCH 0. 812 5 0. 823 5 0. 810 8 1. 000 0
HC 0. 666 7 0. 628 6 0. 631 6 0. 648 6 1. 000 0
FSH 0. 896 6 0. 903 2 0. 764 7 0. 848 5 0. 705 9 1. 000 0
L X 0. 933 3 0. 875 0 0. 914 3 0. 882 4 0. 628 6 0. 838 7 1. 000 0
SHL 0. 785 7 0. 800 0 0. 848 5 0. 821 5 0. 606 1 0. 758 6 0. 866 7 1. 000 0
ZQ 0. 814 8 0. 827 6 0. 687 5 0. 838 7 0. 625 0 0. 928 6 0. 758 6 0. 814 8 1. 000 0
表 4  根据 AFLP标记计算的遗传相似系数
Table 4  Genetic similarity of cultivars on basis
of AFLP markers
栽培种 LQWY LQ SD LCH HC FSH L X SHL ZQ
LQWY 1. 000 0
LQ 0. 707 3 1. 000 0
SD 0. 790 1 0. 651 7 1. 000 0
LCH 0. 439 6 0. 646 5 0. 469 4 1. 000 0
HC 0. 447 1 0. 451 6 0. 391 3 0. 451 0 1. 000 0
FSH 0. 469 1 0. 674 2 0. 500 0 0. 857 1 0. 434 8 1. 000 0
L X 0. 769 2 0. 627 9 0. 800 0 0. 505 3 0. 427 0 0. 564 7 1. 000 0
SHL 0. 657 9 0. 642 9 0. 650 6 0. 537 6 0. 436 8 0. 602 4 0. 700 0 1. 000 0
ZQ 0. 538 5 0. 697 7 0. 588 2 0. 757 9 0. 427 0 0. 800 0 0. 585 4 0. 625 0 1. 000 0
  用 UPGMA 法对测定的柴胡栽培种进行聚类分
析 ,RAPD 和 AFL P 两种标记分别得到了相似但不完
全相同的聚类图 (图 2) 。RAPD 和 AFL P 聚类结果均
明显将 9 个柴胡属栽培种划分为 3 个类群 : 即
LQWY、LX、SD、SHL 聚为Ⅰ类 ,FSH、ZQ、LQ、LCH 聚
为Ⅱ类 , HC 单独聚为Ⅲ类。在 RAPD 分析中 (图 22
A) ,表明 LQWY和 LX的亲缘关系较近 ,ZQ 和 FSH
的亲缘关系较近 ,而在 AFL P 分析中 (图 22B) ,SD 和
LX、LCH 和 FSH 的亲缘关系分别较近。对该 9 个栽
培种而言 , RAPD 和 AFL P 分析均可将其区分或鉴
别 ,可用于种及种下的鉴别 ,但 AFL P 遗传相似性范
围更宽 (0. 43~1. 00) ,约在0. 862时可将 9 个栽培种
区分开 ,而 RAPD 不能完全分开。
图 2  柴胡属栽培种 RAPD( A)和 AFLP( B)分析
Fig. 2  Dendrogram of cluster analysis based on
RAPD ( A) and AFLP ( B) data for nine
cultivars in Bupleurum L1
4  讨论
目前 ,应用分子标记对柴胡属植物种质资源遗
传多样性研究的报道已有 ITS[ 8 ]序列和 RA PD[9~11 ]
标记分析。而本实验以柴胡属 9 个栽培种干根为材
料 ,比较研究了 RA PD 和 A FL P 标记的遗传多样
性 ,为柴胡生药的快速鉴别提供参考。
从聚类结果来看 ,AFL P 与 RAPD 两种方法均可
将 9 个柴胡栽培种聚为 3 类 ,其中红柴胡 HC单独聚
·611· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 41 卷第 1 期 2010 年 1 月
为一类 ,表明应用 AFL P 或 RAPD 均可清晰地将北柴
胡与红柴胡区分开 ,该结果与分类学相一致 ,且 HC
与其他 8 个栽培种间的遗传相似性系数最小 ,两者结
果相吻合 ,表明种内差异较小 ,而种间差异较大。但
是三岛柴胡 (SD) 与北柴胡 LQWY和 LX 聚为一类。
资料表明 :三岛柴胡与北柴胡的外观性状及粉末特征
都较为接近 ,三岛柴胡总皂苷和柴胡皂苷 a、d 的量与
南北柴胡相近[17 ] ,这 3 种柴胡栽培种游离氨基酸组
成分析 ,南柴胡与北柴胡和三岛柴胡关系较远 ,而北
柴胡和三岛柴胡关系则较近[18 ] ,与本实验结果相一
致。但是 ,两种分子标记聚类结果也不完全一致 ,表
明不同的标记方法在遗传多样性研究中存在差异 ,这
是由于分子标记所反映的不是全部遗传信息而是部
分信息 ,况且不同方法所分析的位点数目也不尽相
同 ,因而聚类结果会有差别。
综上所述 ,RA PD 和 A FL P 两种分子标记均适
合于柴胡种及种下遗传关系分析 ,尤其在柴胡药材
制成饮片或粉碎后 ,进行品种的快速鉴别显示出明
显优势 ,为优良柴胡栽培种鉴别、目的基因定位以及
遗传育种奠定基础。
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五种化感物质对人参根系酶活性的影响
黄小芳 ,李  勇 ,易茜茜 ,丁万隆

(中国医学科学院 北京协和医学院药用植物研究所 ,北京  100193)
摘 要 :目的 研究 5 种化感物质对人参根系酶活性的影响 ,探讨化感物质对根系保护性酶活性的作用规律。方法
采用营养液培养方法 ,研究了苯甲酸、邻苯二甲酸二异丁酯、丁二酸二异丁酯、棕榈酸和 2 ,22二 (42羟基苯基)丙烷对苗
期人参根系过氧化物酶 (POD) 、过氧化氢酶 (CAT)和苯丙氨酸解氨酶 ( PAL)酶活性的影响。结果  苯甲酸在 3 种浓
度下均抑制人参幼苗根系 POD 酶活性 ,邻苯二甲酸二异丁酯和丁二酸二异丁酯仅在低浓度时抑制 POD 酶活性 ,棕榈
酸和 2 ,22二 (42羟基苯基)丙烷 3 种浓度下均促进 POD 酶活性 ,且与化感物质浓度呈正相关。除丁二酸二异丁酯和棕
榈酸外 ,其余 3 种化感物质均表现为处理浓度与 CAT 酶活性正相关 ,且与对照相比 ,化感物质对 CAT 酶活性的影响
均表现促进作用。苯甲酸和丁二酸二异丁酯在低浓度时抑制 PAL 酶活性 ,中浓度处理对 PAL 酶活性的促进作用大
于高浓度处理 ;棕榈酸在低浓度时对 PAL 酶活性的促进作用最强 ,2 ,22二 (42羟基苯基)丙烷在高浓度时对 PAL 酶活
性的促进作用最强 ,邻苯二甲酸二异丁酯对 PAL 酶活性的促进作用与浓度呈正相关。研究还发现 ,对照及 5 种化感
物质处理中的 POD、CAT 、PAL 酶活性均随处理时间延长而变化 ,但酶活性与处理时间无明显相关性。结论 人参根
系分泌物中 5 种化感物质对人参根系 POD、CAT 和 PAL 酶活性有显著影响。
关键词 :人参 ;化感物质 ;酶活性 ; POD ;CA T ; PAL
中图分类号 :R28212    文献标识码 :A    文章编号 :0253 - 2670 (2010) 01 - 0117 - 05
·711·中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 41 卷第 1 期 2010 年 1 月
①  收稿日期 :2009203210
  基金项目 :国家自然科学基金项目 (30672619) ;国家“十一五”科技支撑计划项目 (2006BAI09B04201)
  作者简介 :黄小芳 (1985 —) ,女 ,山东省滕州市人 ,硕士研究生 ,主要从事土壤生理生态学研究。 E2mail :sophia325 @163. com
  3 通讯作者 丁万隆 Tel : (010) 62899745  E2mail :wlding @implad. ac. cn