全 文 ：mL, 0
45
m 滤过,得到滤液, 备用。
2
2
4
测定结果的比较:结果见表 2。可见生地中
的梓醇的量相对较高,每克药材含有 2
04 mg ,熟地
每克药材含有 0
322 mg。
表 2
生地、熟地甲醇提取物中梓醇的比较( n= 3)
Table 2
Comparison of catalpol in methanol extracts
from Rehmanniae Radix and Rehmanniae
Radix Praep arata ( n= 3)
样品 梓醇/ ( mg  g- 1 )
生地 2
04
熟地 0
32
3
讨论
生地和熟地的糖类成分色谱图中, 成分基本一
致,量有所变化,二者都含有果糖、葡萄糖、半乳糖 3
种单糖,蔗糖、楝二糖两种二糖,棉子糖、甘露三糖两
种三糖,水苏糖一种四糖;生地炮制成熟地后水苏糖
主要失去一个酮基单糖果糖, 生成甘露三糖, 所以熟
地中甘露三糖和果糖的量较生地高;葡萄糖和半乳
糖都是醛基六碳糖, 保留时间分别为 4
387、4
443
min, 二者很难分开。文献报道, 地黄中的寡糖含有
少量的毛蕊四糖和毛蕊糖 (五糖) [ 6, 7] , 但是在本研
究的检测条件下没有检测到。
生地甲醇提取物及熟地甲醇提取物的 HPLC色
谱图显示,成分、量差别较大,其中生地明梓醇的量显
高于熟地。梓醇是一种环烯醚萜葡萄糖苷类化合物,
加工炮制过程中, 脱去糖基而发生了一系列化学变
化,导致梓醇大幅降低的同时出现了新的化合物。


生地和熟地的糖类成分色谱图与梓醇色谱图显
示, 糖类成分的量高, 生地中水苏糖量最高, 达到
166
3 mg / g, 楝二糖最低达到21
0 mg/ g,熟地中甘
露三糖最高达到119
7mg/ g, 棉子糖最低达到14
4
mg/ g, 梓醇的量相比较较低,生地 2
04 mg/ g ,熟地
0
32 mg/ g。
生地炮制成熟地, 无论糖类成分还是环烯醚萜
苷类成分均有不同程度地变化。其对地黄的药效变
化有何作用等问题,有待进一步深入研究。
对供试品溶液的计算,采用工作曲线回归方程
法和外标一点法两种方法[ 8]。工作曲线回归方程法
计算供试品中水苏糖的量和加样回收率的 RSD分
别为 1
04%、3
51% ; 用外标一点法计算供试品中
水苏糖的量和加样回收率的 RSD 分别为 0
93%、
2
94%。用外标一点法计算的误差比用工作曲线回
归方程法的误差小, 所以建试验中地黄寡糖的测定
采用外标一点法计算, 既可以减少对照品的浪费,又
可以降低计算带来的误差。
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薄层色谱法鉴定莪术油中倍半萜类成分的研究
崔
友1 ,孙秀燕2* ,张
慧2
( 1
浙江天瑞药业有限公司,浙江 瑞安
325200; 2
烟台大学药学院,山东 烟台
264005)
摘
要: 目的
建立莪术油中= 牛儿酮、呋喃二烯、莪术二酮和莪术烯 4种倍半萜类成分的鉴别方法。方法
采用
薄层色谱法,硅胶薄层板, 正己烷醋酸丁酯( 98! 2)为展开剂,香草醛硫酸试液显色。结果
= 牛儿酮、呋喃二烯、
莪术二酮和莪术烯的 Rf值分别为 0
11、0
31、0
50、0
60。结论
方法操作简便、准确、重现性好,可用于同时鉴别
莪术油中有效成分= 牛儿酮、呋喃二烯和莪术二酮。
1119中草药
Chinese Traditional and Herbal Drugs
第 41 卷第 7 期 2010 年 7 月
* 收稿日期: 20090612





















基金项目:山东省教育厅科技计划项目( J07W01)作者简介:崔
友( 1966 ∀ ) ,男,黑龙江省宝清县人,副主任药师,主要从事新药研发及其药物制剂工艺与质量标准研究。
* 通讯作者
孙秀燕
T el: ( 0535) 6706023
Fax : ( 0535) 6706036
Email: sunxy@ ytu
edu
cn
关键词:莪术油; 呋喃二烯; = 牛儿酮; 莪术烯;薄层色谱
中图分类号: R284
2


文献标识码: A


文章编号: 02532670( 2010) 06111903


莪术油为姜科姜黄属植物温莪术 Cur cuma w e
nyuj in Y
H
Chen et C
Ling 的有效部位, 是#中
国药典∃收载品种[ 1]。莪术油具有显著的行气活血、
消炎止痛、活血化瘀、祛腐生肌、增强机体免疫力、改
善微循环之功效,临床长期应用于抗炎抗病毒[ 2]、抗
癌[ 3]等,疗效确切。莪术油葡萄糖注射液、莪术油注
射液收载于#中国药典∃2000、2005 年版二部; 保妇
康栓收载于#中国药典∃2000、2005年版一部。关于
莪术油原料的定性成分, #中国药典∃规定以莪术醇
和= 牛儿酮为莪术油鉴别项下的指标成分, 笔者经
过对莪术油化学成分的分离分析及其质量研究发
现,呋喃二烯、= 牛儿酮和莪术二酮是莪术油中的主
成分,三者的量大于 50%。因此本实验以这 3种化
合物为指标,建立了莪术油的薄层色谱鉴别方法。
1
材料与仪器
= 牛儿酮(批号 111665200401)、莪术醇(批号
100185200405)对照品由中国药品生物制品检定所
提供;莪术二酮、呋喃二烯(又名蓬莪术环二烯)自
提, 质量分数> 98%。超临界 CO2 法制备莪术油
( SFE 油)、水蒸气蒸馏莪术油( SD油) , 莪术油(批
号 070501)均由浙江天瑞药业有限公司提供。硅胶
G(烟台化工所薄层色谱用) , 所用试剂均为分析纯。
2
薄层色谱鉴别
2
1
药典方法: 按照#中国药典∃2005版收载的莪
术油鉴别项下规定, 取 SD油 4 mg, 加石油醚( 30~
60 % ) 1 mL 使溶解, 作为供试品溶液。另取莪术
醇、= 牛儿酮对照品, 加石油醚( 30~ 60 % )制成 1
mg/ mL 的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法试
验,吸取上述 3种溶液各 10
L, 分别点于同一硅胶
G薄层板上, 以石油醚( 30~ 60 % )醋酸乙酯( 9 !
1)为展开剂, 展开, 取出, 晾干, 喷以香草醛硫酸试
液,在 105 % 加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,
分别在与提取物和对照品色谱相应的位置上, 显相
同颜色的斑点; 置紫外光灯( 365 nm )下检视, 显相
同颜色的荧光斑点, 结果见图 1。


结果显示, 莪术油中的莪术醇的量相对较少, 且
= 牛儿酮在该薄层色谱条件下 Rf 值偏大, 约为
0
9; 莪术油色谱还显示有 2个主斑点, Rf值分别为
0
77、0
94,经硅胶柱色谱分离,有机波谱鉴定分别
为呋喃二烯和莪术二酮[ 4] 。


研究中采用高效液相色谱法分离分析 SD油中
的化学成分。色谱条件: Kromasil KR1005 C18色
谱柱( 250 mm & 4
6 mm, 5
m) ,柱温为 25 % , 流动
相为甲醇水( 90 ! 10) , 进样体积为 20
L, 检测波
长为 215 nm,结果见表 1、图 2。结果显示 SD油中
除含有莪术醇和= 牛儿酮外, 呋喃二烯和莪术二酮
也是莪术油中的主要成分。
1莪术醇
2SD油
3= 牛儿酮
1 curcumenol
2SD oil
3germacrone
图 1
莪术油的 TLC图(药典方法)
Fig
1
TLC Chromatogram of Curcuma wenyuj in
essential ( Ch
P method)
表 1
SD油的 HPLC法测定结果
Table 1
Results of HPLC method of SD oil
成分 保留时间/ min 质量分数/ %
莪术二酮 4. 277


12. 96



莪术醇
6. 216


3. 25



= 牛儿酮 6. 975


7. 80



莪术烯
13. 899


10. 93



呋喃二烯 16. 725


23. 47



图 2
图 2 莪术醇(A)和莪术油(B)的 HPLC图
Fig
2
HPLCChromatograms of essential oil and
curcumenol (A) in C. wenyuj in ( B)
2
2
薄层鉴别法的改进:取样品 20 mg, 加醋酸乙
酯 1mL 使溶解,作为供试品溶液。另取= 牛儿酮、
1120 中草药
Chinese Traditional and Herbal Drugs
第 41 卷第 7 期 2010 年 7 月
呋喃二烯、莪术二酮对照品,加醋酸乙酯制成含呋喃
二烯、莪术二酮、= 牛儿酮 4、4、8 mg/ mL 的溶液, 作
为混合对照品溶液。照薄层色谱法试验, 吸取上述
3种溶液各 2
L, 分别点于同一硅胶 G 薄层板上,
以正己烷醋酸丁酯( 98! 2)为展开剂, 展开,取出,
晾干,喷以香草醛硫酸试液,在 105 % 加热至斑点显
色清晰。供试品色谱中, 分别在与对照品色谱相应
的位置上, 显相同颜色的斑点,结果见图 3。
1SFE 油
2精制 SFE油
3混合对照品
4SD 油
1SFE oil
2 fin ed SFE oil
3referen ce su bstan ces
4SD oil
图 3
莪术油的薄层色谱图(改进方法)
Fig
3
TLC Chromatogram of essential oil in C.
wenyuj in (modif ied method)
3
讨论
本实验选择莪术油中量较高的倍半烯萜类成分
呋喃二烯、= 牛儿酮和莪术二酮同时作为莪术油的
指标成分, 建立了薄层色谱法,该方法更能体现莪术
油的质量。已有多篇文献和本研究的药理试验表明
呋喃二烯、莪术二酮为抗病毒、抗癌活性成分 [ 5~ 8]。
另一方面从莪术油组成成分性质差异大的角度考
虑,也适宜采用呋喃二烯、= 牛儿酮和莪术二酮作为
薄层鉴别法的指标成分, 因为莪术二酮的极性较大,
呋喃二烯极性较小, = 牛儿酮的极性居中,根据 3个
不同性质的化学指标展示莪术油薄层色谱图的特征
并标示主要成分的位置, 综合评价莪术油整体的稳
定性情况, 以使鉴定的可靠性更有保证, 使评价结果
更客观真实。
莪术油薄层鉴别原标准是以 30~ 60 % 沸程的
石油醚为展开剂, 由于其沸程偏低, 层析缸不易密
封, 斑点很难圆而集中,且重现性差。依据莪术油的
溶解度和主要成分的性质,实验中筛选了多种有机
溶剂的不同配比,其中正己烷醋酸丁酯( 98 ! 2)能
将莪术油中的成分在 Rf 值 0
1~ 0
8全部展开, 其
中莪术二酮、= 牛儿酮和呋喃二烯 Rf 值分别约在
0
11、0
31、0
52; 莪术二酮呈紫色斑点, = 牛儿酮呈
蓝紫色斑点, 呋喃二烯呈红色斑点。按上述改良的
方法对 6批 SFE 油进行鉴别测定, 供试品色谱中,
分别在与对照品色谱相应的位置上, 显相同颜色的
斑点。
图 3中除了呋喃二烯为红色斑点外,在 Rf 0
60
外还显示有一个红色斑点, 经分离分析、有机波谱鉴
定为莪术烯。莪术烯是呋喃二烯的热转化产物, 是
一对热敏物质 [ 9]。由于 SD法提取温度高, 提取时
间长,使呋喃二烯大量转化为莪术烯,所以 T LC 图
上 SD油中莪术烯斑点比 SFE油大的多。大量药理
实验结果已证实莪术烯具有显著刺激性 [ 10] , 是莪术
油中的有关物质, 改良后的方法也可以作为莪术烯
的限度控制检查方法。
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李绍平
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1121中草药
Chinese Traditional and Herbal Drugs
第 41 卷第 7 期 2010 年 7 月