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Effect of Cordyceps militaris mycelium polysaccharides on cyclomastopathy of mice

蛹虫草菌丝体多糖对小鼠乳腺增生模型的影响



全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 9 期 2011 年 9 月

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蛹虫草菌丝体多糖对小鼠乳腺增生模型的影响
姚艳飞 1,路秀丽 2,王 莘 1*
1. 吉林农业大学生命科学学院,吉林 长春 130118
2. 吉林农业大学食品科学与工程学院,吉林 长春 130118
摘 要:目的 观察蛹虫草菌丝体多糖对乳腺增生模型小鼠雌激素水平、免疫功能及病理形态改变的影响。方法 实验设对
照组、模型组、蛹虫草菌丝体多糖组和乳康丸阳性对照组。采用苯甲酸雌二醇联合黄体酮制备小鼠乳腺增生模型。以放射免
疫法检测小鼠血清雌二醇水平,计算子宫指数,观察小鼠免疫功能和病理形态。结果 与模型组比较,蛹虫草菌丝体多糖能
够显著降低乳腺增生小鼠血清雌二醇水平、子宫指数(P<0.05),明显增加单核-巨噬细胞廓清指数、吞噬指数及脾脏指数
(P<0.05),乳腺腺泡和导管的增生在一定程度上减少。结论 蛹虫草菌丝体多糖能够调节乳腺增生小鼠雌激素分泌,增强
机体免疫能力,且有效抑制小鼠乳腺腺泡和导管的扩张及增生。
关键词:蛹虫草;菌丝体多糖;乳腺增生;雌二醇;免疫功能
中图分类号:R285.5 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2011)09 - 1796 -03
Effect of Cordyceps militaris mycelium polysaccharides on cyclomastopathy of mice
YAO Yan-fei1, LU Xiu-li2, WANG Xin1
1. College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China
2. College of Food Science and Engineering, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China
Key words: Cordyceps militaris (L.) Link; mycelium polysaccharides; cyclomastopathy; estradiol; immune function

乳腺增生是以腺泡上皮、导管上皮以及纤维结
缔组织等增生为主要病理变化的乳腺疾病[1],是女
性最常见的乳腺疾病。目前现代医学多以内分泌药
物为该病主要治疗手段,效果虽好,但均存在一定
的不良反应。真菌多糖以其多种生物活性、低不良
反应等特点引起人们广泛关注,成为最具开发前景
的药品新资源之一。蛹虫草 Cordyceps militaris (L.)
Link 又名北冬虫夏草、蛹草,性味甘平,益肺肾、
补精髓、止血化痰,是一种药食兼用的名贵中药[1]。
研究表明,蛹虫草含有虫草酸、虫草素、多糖及腺
苷等有效成分,其中蛹虫草多糖具有多种生物活性
和药理作用,如调血脂、抗肿瘤、抗炎、抗衰老等[2],
且对氢化可的松致小鼠肝脏损伤和肾损伤具有明显
的保护作用[3-4]。
目前有关蛹虫草菌丝体多糖对乳腺增生影响的
研究尚未见报道。本实验通过观察乳腺增生模型小
鼠雌激素水平及免疫功能的变化等,研究蛹虫草菌
丝体多糖对小鼠乳腺增生的影响。
1 材料与方法
1.1 动物
健康雌性未孕昆明种小鼠,体质量 18~22 g,
长春市生物制品研究所提供,合格证号 2008-0005。
1.2 药品与试剂
蛹虫草菌丝体多糖,吉林农业大学生物工程实
验室提供,质量分数为 59.78%;黄体酮注射液(10
mg/mL),浙江仙琚制药股份有限公司产品,批号
091206;苯甲酸雌二醇注射液(1 mg/mL),天津金
药氨基酸有限公司产品,批号 0909281;雌二醇放
射免疫试剂盒,北京莱雅生物科技有限公司提供;
乳康丸,吉林吉春制药有限公司,批号 090304。
1.3 仪器
Sn—695 型放射免疫计数器(上海核所日环光
电仪器有限公司),TDL—5 离心机(上海安亭科学
仪器厂),DHG—9073B5—Ⅲ电热恒温鼓风干燥箱

收稿日期:2010-12-31
基金项目:长春市科技局项目(2008214)
作者简介:姚艳飞(1985—),女,硕士研究生,研究方向为生物大分子的营养与代谢。Tel: 13699266279 E-mail: yanfei851001@126.com
*通讯作者 王 莘 E-mail: wangxin5853@126.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 9 期 2011 年 9 月

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(上海新苗医疗器械制造有限公司),AUY220 电子
分析天平(上海天普仪器分析有限公司),DSY—
2—4 孔水浴锅,722E 型分光光度计(上海光谱仪
器制造有限公司)。
1.4 乳腺增生模型的制备
小鼠 ip 给予苯甲酸雌二醇 0.8 mg/kg,隔天注
射,共注射 10 次,继而注射黄体酮 4 mg/kg,隔天
注射,共注射 4 次。造模小鼠末次注射黄体酮 24 h
后,随机选取小鼠,取乳腺组织进行病理切片,与
正常小鼠乳腺切片比较,确定造模是否成功[5]。
1.5 分组与给药
从蛹虫草菌丝体多糖 100、150、250 mg/kg 剂
量中筛选有效剂量,结果表明 250 mg/kg 为有效剂
量,因此将该剂量作为本实验的给药剂量。
将 80 只小鼠随机分为对照组、模型组、乳康
丸阳性对照组、蛹虫草菌丝体多糖组,每组 20 只。
除模型组外,蛹虫草菌丝体多糖组每天 ig 蛹虫草菌
体多糖 250 mg/kg,乳康丸组每天 ig 乳康丸 210
mg/kg,给药组均于小鼠造模完成后第 2 天起开始
给药,连续 25 d;对照组每天 ig 生理盐水 0.5 mL。
1.6 检测指标
末次给药后 24 h,每组 10 只小鼠眼眶取血,4
℃静置 30 min,而后 3 000 r/min 离心 15 min,用放
免法测定血清雌二醇水平。取小鼠子宫,称湿质量,
计算子宫指数。
子宫指数=子宫质量/体质量
末次给药后 2 h,每组取另 10 只小鼠,尾 iv 印
度墨汁稀释液 10 mg/kg,按文献方法操作[6],计算
碳粒廓清指数及吞噬指数。
每组动物处死后取胸腺、脾脏,称湿质量,计
算免疫器官指数。
免疫器官指数=免疫器官质量/体质量
1.7 病理学检查
各组小鼠给药完毕后,随机选取小鼠,取乳腺
组织制作病理切片,镜检(×100)。根据乳腺导管
增生程度分级计算小鼠乳腺导管上皮增生率[7]。
1.8 统计学方法
采用 SPSS 17.0 进行数据统计,数据均采用
sx ± 表示,各组数据间的比较采用方差分析。
2 结果
2.1 病理学观察验证模型成功有否
模型组小鼠乳腺导管均出现明显扩张、增生及
腔内出现黏液、结缔组织增生的症状,见图 1。

A-正常小鼠乳腺切片 B-模型组小鼠乳腺切片
箭头所指为乳腺主要病理变化
A-biopsy of normal mice B-biopsy of model mice
Arrow sign marks main change of pathology
图 1 正常小鼠与乳腺增生模型小鼠乳腺切片病理学观察
Fig. 1 Pathology biopsy of normal and
cyclomastopathy mice
2.2 对乳腺增生小鼠雌二醇水平与子宫指数的影响
由表 1 可见,与对照组比较,模型组小鼠血清
雌二醇水平和子宫指数显著增加(P<0.05)。与模
型组比较,蛹虫草菌丝体多糖组小鼠血清雌二醇水
平及子宫指数明显降低(P<0.05)。
表 1 蛹虫草菌丝体多糖对乳腺增生小鼠血清雌二醇
水平及子宫指数的影响 ( 01=± n , sx )
Table 1 Effect of C. militaris mycelium polysaccharides
on content of serum estradiol and uterus index
in cyclomastopathy mice ( 01=± n , sx )
组 别
剂量/
(mg·kg−1)
雌二醇/
(pg·mL−1)
子宫指数/%
对照 - 35.38± 4.52 0.208±0.016
模型 - 75.50±17.83# 0.319±0.078#
蛹虫草菌丝体多糖 250 53.54± 5.43* 0.252±0.031*
乳康丸 210 55.25± 7.31 0.238±0.025
与对照组比较:#P<0.05;与模型组比较:*P<0.05,下表同
#P<0.05 vs control group; *P<0.05 vs model group, same as below
2.3 对乳腺增生小鼠免疫功能的影响
由表 2 可见,与对照组比较,模型组小鼠单核-
巨噬细胞廓清指数和吞噬指数显著降低(P<0.05)。
与模型组比较,蛹虫草菌丝体多糖组小鼠廓清指数、
吞噬指数明显增加,差异显著(P<0.05)。与模型
组比较,蛹虫草菌丝体多糖组小鼠的脾脏指数显著
增加(P<0.05),而胸腺指数无显著差异(P>0.05)。
2.4 对乳腺增生小鼠乳腺病理学变化的影响
由表 3 可知,与对照组比较,模型组小鼠乳腺腺
泡直径和数量明显增加(P<0.05),表明造模成功。
与模型组比较,蛹虫草菌丝体多糖组小鼠乳腺组织
腺泡直径及数量显著降低(P<0.05),导管上皮增
生率明显降低,表明小鼠乳腺增生得到显著改善。


A B
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 9 期 2011 年 9 月

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表 2 蛹虫草菌丝体多糖对乳腺增生小鼠免疫器官及免疫功能的影响 ( 01=± n , sx )
Table 2 Effect of C. militaris mycelium polysaccharides on immune organ and immune function
in cyclomastopathy mice ( 01=± n , sx )
组 别 剂量/(mg·kg−1) 廓清指数 吞噬指数 脾脏指数/% 胸腺指数/%
对照 - 0.03±0.02 5.07±0.35 0.531±0.072 0.298±0.621
模型 - 0.02±0.05# 4.78±1.93# 0.451±0.093# 0.278±0.023#
蛹虫草菌丝体多糖 250 0.05±0.07* 6.03±0.74* 0.661±0.061* 0.334±0.029
乳康丸 210 0.04±0.01 5.57±0.28 0.632±0.053 0.367±0.351

表 3 蛹虫草菌丝体多糖对乳腺增生小鼠乳腺病理变化的影响 ( 01=± n , sx )
Table 3 Effect of C. militaris mycelium polysaccharides on pathological change of mammary gland
in cyclomastopathy mice ( 01=± n , sx )
组 别 剂量/(mg·kg−1) 乳腺腺泡直径/μm 乳腺腺泡数/个 导管上皮增生率/%
对照 - 20.80±3.46 5.07±1.09 0
模型 - 39.61±9.87# 20.18±5.46# 70.83
蛹虫草菌丝体多糖 250 34.40±2.91* 13.09±6.00* 2.75
乳康丸 210 33.62±8.90 11.36±2.01 1.25

3 讨论
乳腺增生与卵巢功能失调、内分泌紊乱有关,
其中雌激素水平增高、孕激素水平相对较低是主要
原因[8]。本实验结果表明,在雌二醇诱发小鼠乳腺
增生的同时,伴有子宫肿大、胸腺萎缩等脏器的变
化。蛹虫草菌丝体多糖能够降低乳腺增生小鼠血清
雌二醇水平以及子宫指数。有研究表明,蛹虫草能
够明显提高生殖系统受损及正常大鼠的睾酮水平,
且有明显促进雄激素分泌的作用[9],这可能是在本
实验中蛹虫草菌体多糖抑制雌二醇分泌及子宫肿大
的机制。雌二醇还可以降低免疫器官淋巴细胞数量,
降低天然杀伤细胞的活性,使机体出现免疫调节紊
乱的情况。而多糖作为一种非特异免疫调节剂对网
状内皮系统和巨噬细胞有显著的激活作用,还能促
进淋巴细胞转化,这可能是在本实验中蛹虫草菌丝
体多糖提高乳腺增生小鼠巨噬细胞吞噬功能和脾脏
指数的作用机制。因此通过调整机体内分泌,提高
机体免疫功能可能是蛹虫草菌体多糖对乳腺增生的
作用机制之一。
综上所述,蛹虫草菌丝体多糖能够调节乳腺增
生模型小鼠的雌激素水平及免疫功能,且能有效抑
制小鼠乳腺腺泡和导管的扩张及增生。
参考文献
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