全 文 :2016
y
4
z Ó
41
âÓ
8
}
Vol41,No.8 April,2016
·
k;
·
fghij¶ikl2mno·ip
Ⅱqrs56tu¯°Ä
øù
,
5úû
,
GV
,
üýþ
,
G-
(
*HºSehfñg
,
*H /01
150036)
[
wx
]
@¶â_Ë(Ø-
β(TGFβ)»+9̹Q©¾0A(SPA)´ ,ùÄ+X_µ@,¹ºfghij¶
ikl2m
(MP)
no·ipⅡqrs56Ätu¯°f±。 60G Wistaro·,\Ñx,m;80~100g,1fµé6
´
,
|´
10
G
,
µeé$0´
,
Îq´
,
p¹¶#´
,
fghijO
、
$
、
±õ´
,
° L#¡Î
;´
,
10d
o·
ipÕwP
、¨
h
、
ii´7$é
,
°¥ð´_#¨©i´7$
TGFβ SPAľ0+Xµ@;½O_¤!õ
PCR
#©!i´7$
TGFβ,SPAmRNAÄ+X;ëT¥ð#©!¨hipÕwP(BALF)$SPAÄxõ。@=¼µî
Õà
,
fghijö÷ÀËi´7$
TGFβÄ+X,cSPAÄ+X,®$TGF⪫µ@ÞiJô,SPAª«µ@Þ
AECⅡ1µip!568;UO,ö÷±¨h$SPAxõ,cBALF$SPAxõ。@çräÕà,fghi
j@±
TGFβÄ+Xy±AECⅡmËrsJôâ_,ñcSPAÄ+X,MuiÄ©}¿ÔÊö;UO,¶ MP=
ÖÄi´7)5¨*ºÜ:B[!Ätu¯°
。
[
yz{
]
ikl2m
;
fghij
;
ipⅡqrs56;â_Ë(Ø-β;+9̹Q©¾0A
[
st)(
] 20151014
[
R
]
J
“
Eh
”
f
(2010ZX09101104);
JÖ×fñd¥
(81374045)
[
uq?v
]
G-
,
V
,
ij
,
Ehi¡
,Tel:(0451)55665478,Email:342201601@qqcom
[
?v
]
øù
,
V
,
àh¨
,Tel:(0451)55665478,Email:yaoyao198003@aliyuncom
RepairefectofQinbaiQingfeiconcentratedpeletstoAECⅡ ofrats
infectedbyMycoplasmalpneumonia
YAOLin,ZHANGJunwei,WANGBo,SUIMeijiao,WANGWeiming
(HeilongjiangAcademyofChineseMedicalSciences,Harbin150036,China)
[Abstract] TodiscusstherepairmechanismofQinbaiQingfeiconcentratedpeletstoAECⅡ ofratsinfectedbymycoplasma
throughtheobservationofthechangesanddistributionofTGFβandSPAinlungs,totaly60Wistarratsthatweighing80100gwere
colected,withmaleandfemaleinhalfTheratsweredividedintosixgroupsrandomly,with10ratseachgroup,namelyblankgroup,
modelgroup,positivegroupandQinbaiQingfeiconcentratedpeletshigh,middleandlowdosegroupsRatswereinfectedthroughna
salintubationdripofMPAfter10daysofadministration,serumandbronchoalveolarlavagefluid(BALF)werecolectedtodetectthe
concentrationofsurfaceactivityrelatedproteinA(SPA)byELISA,leftpulmonarytissuesofratswerecolectedtoobservetheexpres
sionanddistributionoftransforminggrowthfactorbeta(TGFβ)andSPAbyimmunohistochemistry,andrightpulmonarytissueswere
takentodetectTGFβandSPAmRNAexpressionlevelbyrealtimequantitativePCR(RTPCR)QinbaiQingfeiconcentratedpelets
canreducetheexpressionofTGFβandincreasetheexpressionofSPAinthelungtissuesofratsinfectedbymycoplasmaSpecifical
ly,TGFβwasmainlydistributedamongthelunginterstitium,whileSPAsweremainlydistributedinAECIandpartsofalveolarmac
rophageThelevelofSPAwasreducedinserumandincreasedinBALFinratsinQinbaiQingfeiconcentratedpeletsgroupsItwas
provedthatQinbaiQingfeiconcentratedpeletscanrestorethenormalmorphologyandfunctionofthelungbyreducingthecontentof
TGFβtoinhibitepithelialmesenchymaltransition(EMT)ofalveolartypeIepithelialcelsandincreasingtheexpressionofSPA
·3941·
2016
y
4
z Ó
41
âÓ
8
}
Vol41,No.8 April,2016
QinbaiQingfeiconcentratedpeletshavetherepairingabilitytocapilaryvesseldamagecausedbyMPinlungtissuesofrats
[Keywords] MycoplasmaPneumoniae;QinbaiQingfeiconcentratedpelets;AECⅡ;TGFβ;SPA
doi:10.4268/cjcmm20160821
ikl2m
(Mycoplasmapneumonia,MP)
æ=
ÖS¬n©lÄÁ2m
,
øùÄÅr¶Þik
l2mik
(Mycoplasmapneumoniaepneumonia,
MPP)
ĺRª«ê°oM8ýG²ËF
,
fæãG
²ËFÒ4êo
、
y¯°î
,
¦#Ël2mÄUO
¶ÂÃÄfm¡Ê[!ĺÜ
,
S2,½æyr
¯Äµ¶
[1]。
Ø_
,
~m[,nÕç#Ël2må
ÕçVºi´7tuÄ,Éøé;«
。
fghij
(
çÀú
“
fg
”)
æ¡p
e$A,&®Èª
m
,
%GKÎÄÓ[Y°
ÞÄÅ
ºR:4l2mikÄ$,ß,
,
Uñ
f
、
g1
、
F¡
、
Ïñ
、
g+
、
áL
6
ï$,´Ê
,
½.
»ÄÅ89D®BÞIJ
MP,
ú·t
uVºi´7Öʬ
[25]。
ipⅡqrs56(typeⅡ alveolarepithelial
cel,AECⅡ)æiprsÄ56,æHÊ»µ%
ip+9̹Éô®Q©¾0Ī«56
[6]。
MP
nMª
,
=ÖĪ«Áè+×éJô¹i
k
,
{%
AECⅡVº,ÁáQ;Ã4um¯Õ=
ÖrsJôâ_
(epithelialtomesenchymaltransi
tion,EMT),
Trs56ùrsǹ
。
â_Ë(Ø
-
β(transforminggrowthfactorβ,TGFβ)æ[,U
Ø,56µ%Ä:BØ;ËɬêÄØG56
Ø-
,
m×
,TGFβ¦ AECⅡmË EMT$
Ö2½©;«Ä˯°
[78]。AECⅡ ºÜ
[910],
Õz{rs@¶¹c
,
±i+9̹É
ôQ©¾0
A(surfactantassociatedproteinA,SPA)
ÄHÊ»µ%
,SPA
xõıüi´7ùé
Ó#ô{%®ºÜ[¸;
。
u
@´,ù
,
ikl2mno
·i´7$
TGFβ» SPA+XÄ_,)fg
¶
AECⅡÄtu¯°,qíé®i´7tu、
MuiÊöį°f±/èÒ×ë
。
1
XL
fghij
(
.BN!Hç±,BCD
E
,
Î<
130701),
u[éH!RÄïýA
j
,
¨/OH
2010
yÒ
《
$%,.
》
jÀÄx
Í!
。
ikl2m%p`
(ATCCFH15531,
Û%
,K$S
);PPLO
?É×
(Becton,Dickinson
andCompany,USA);TRIzol
B
(
Û%
Invitrogen,
Î
<
66211);TranscriptorfirststrandcDNASynthesis
Kit(Roche
DE
,
Î<
1485422);FastStartUniversal
SYBRGreenMaster(ROX)(Roche
DE
,
Î<
10277200);SPA,TGFβ,βactin=É(.BNOP
ËÉ()BCDE
);TGFβØI[²m(ABCAM
DE
);SPA
ØI[²m
(SANTA
DE
);SPA
¨©
B¼
(
ëT¥ðB.#
,SEA890Ra96T,
L140724594,Uscn);
q
DAB
B¼
(
$í$
Þ
);
ظ#¥ð´_B¼
(
$í$Þ
)。
Wistar
o·
,60
G
,
\Ñx
,
m;
80~100g,
(iJà½.&É()BCDE/
,SPF
/
,
dÕ
D<
SCXK(
)20110004。
SorvaⅡ ST16±ªSf(ThermoDE);KD
TS3A
È&´7f
(
op$B&³ÚÃÿìB
CDE
);KDBM
ËÉ´7ýuf
(
op$B&³Ú
ÃÿìBCDE
);RM2235
´7Õf
(
%]
Á
);BX41
ËÉø4´
(OLYMPUS
DE
);DP72
´
7ËÉv<µîÙ=
(OLYMPUS
DE
);Infi
niteM200Pro
ëÚ
(Tecan
DE
);9600
!õ
PCR
¨©Ú
(
¡¢O{
)。
2
#
21
&ɵ´
、
¡Î´,
60
G
Wistar
o·1
fµé
6´ ,
|´
10
G
,
\Ñx
,
µeé$0¶#
´
,
Îq¶#´
,
p¹¶#,´
,
fgO
、
$
、
±õ
´
。
o·ê¹ÒÉ
1
!
,
°
1%
÷mðŨ
©gu°ê
,
$0¶#´£
,
®x´o·Lç8
åå i
1×106CCU·mL-1MP
P
50μL,Ü°
®ÈnÃ!&¯-Piìi1
,
$0¶
#´ iÖõ
MP
?ÉP
。
nÓ
2
!~ÕÖ
´,
,
|{
1
,
$0¶#´»Îq¶#´ÕÖÖ
ËËèÜ
;
p¹¶#´ÕÖ}JÂF
(
Z´,
õé
45mg·kg-1·d-1,
Ó
2~5
!é
225mg·
kg-1·d-1),
#´,
5d;
fgO
(32g·kg-1·
d-1)、
$
(16g·kg-1·d-1)、
±
(08g·kg-1·
d-1)
õ´#´,
10d。1%
÷mðÅ°ê
,
·4941·
Ã
QÖ
:
fghij¶ikl2mno·ipⅡqrs56tu¯°Ä
¨ª&¢ ¨
,
µª¨h
-80℃
&B
,
°Þ¨.¨
h$
SPA
xõ
;
ipÕwP
-80℃
&Bì°
,
°Þ¨.ipÕwP
(BALF)
$
SPA
xõ
;
å
i´7
4%
æø!
,
°Þ¥ð´_¨©
;
å i
´7$é
,
°Þ
RNA。
22
o·i´7
TGFβ,SPA¾0¨© æø
!Äi´7
,
°¯r
,
Øæå$¶
2
,
izt8nýu
。
t
,
-sw3~ÄtRÞhö¾
r
,68℃
åZ8R
2h,
°Ø¸#¥ð´_
¨©
,
°ø4´89´7nRáÎ
。
23
o·i´7
TGFβ,SPAmRNA¨© ç½
O_¤!õ
PCR
#¨©
TGFβ»SPAmRNAÄ+
X
。
RNA,
°ëÚ¶
RNA
7rrn
©!
,
¥¼
RNA
rËÌu
RNA
ÄmË
,
üx&
[âãmÙVxÄ
RNA
õQU
,
-
RNA
âã
é
cDNA,
çâãHÊÄ
cDNA
éÎ
,
nèH
ë_4ê
。
=Éó¯
[1113]:TGFβr/5′GGCGGT
GCTCGCTTTGTA3′,
À/
5′GCCACTCAGGCGTAT
CAG3′;SPA
r/
5′TAAGTGCTGCCCTCTGACCT
3′,
À/
5′AGGAGCCATACATGCCAAAC3′;βactin
r/
5′CGTTGACATCCGTAAAGAC3′,
À/
5′TG
GAAGGTGGACAGTGAG3′。
24
o·¨h
BALF
$
SPA
Ä©!
°
ELISA
#¨©
,
¥¼Ñ½.
,¨
h»
BALF
&[µe
100
、1000
©!
,
Y¯ó#
ELISA
B¼«vn
。
25
=Dµî
°
SPSS180
pn=D
µî
,
=¼°珋x±s+H,2´ J=°þc&
u
t¨
.
,
ç
P<005
éÚÛB=Dd<
。
3
ä
31
o·i´7
TGFβ,SPA¾0+XÄ¥ð´
_¨©
ø4´À89
,
o
200
,
|´|!-
3
YÙg
,
µe©|Y!RùÄ
MOD,
vȖ
Í^
,
°
IPP
pµî
,
;Rvó
,
+Xvî
。
@¶
TGFβ¾0+X¨©Õà,$0¶#´
o·i´7$¦iJôip6!9ÕlkõÄ
TGFβ¾0+X,¦ip¦8Õl(ÄñR²³,S
2R¦
;
Ô$0´
,
Îq´o·iJôip
6!9Ä
TGFβ¾0+Xø,ÕloõHñR²
³
,
Áx8¨*
、
lÃ*!9µåÄ1µkÀ56
、
ipJ$ÄJô56BóñR²³
,
6¦8H
ñR²³2Ró
,
µ@+
,
YeÕlé<¾µ
@
,
:Bøù¹ÚÛ
(P<001);
ÔÎq´
,
f
gxõ´
TGFβ¾0+XøÀ(P<005),
SOõ´Àø
(
+
1,
q
1)。
+
1
fg¶
MPP
o·i´7$
TGFβ,SPA¾0+XÄ
ÂÃ
(珋x±s,n=10)
Table1 TheefectofQinbaionTGFβandSPAexpression
levelinlungtissueofMPPrats(珋x±s,n=10)
µ´
õ
/g·kg-1·d-1
TGFβ
/βactin
SPA
/βactin
$0
- 0173±0063 0384±0063
Îq
- 0430±01101) 0172±00151)
}JÂF Z
0045 0292±00223) 0281±00593)
Ó
2~5
!
00225
fgO
32 0236±00133) 0234±00163)
fg$
16 0304±00262) 0201±00202)
fg±
08 0312±00282) 0171±0008
g
:
Ô$0´
1)P<001;
ÔÎq¶#´
2)P<005,
3)P<001(
+
2
U
)。
q
1
x´o·i´7
TGFβ¾0+X(×20)
Fig1 TheproteinexpressionlevelofTGFβinlungtissueof
rats(×20)
@¶
SPA
¾0+X¨©Õà
,
$0¶#´
Õl
SPA
+X§¯
,
+íó
,
µ@Þ
AECⅡ1
µip!568
,
½HñH!R²³
,
ip5
lÃ*©8Õl[8óHRÉô
;
Ô$0¶#´
,
Îq¶#´
SPA
+XôµÅ
,
2R¦
,
½
H!R²³
,
:Bøù¹ÚÛ
(P<001);
ÔÎq´
,
fgO
、
$õ´
SPA
+XO
(P<005),
Õø89T
AECⅡ8HñR²³=õ»;Rc
Ø
、
ó
(
+
1,
q
2)。
·5941·
2016
y
4
z Ó
41
âÓ
8
}
Vol41,No.8 April,2016
q
2
x´o·i´7
SPA
¾0+X
(×20)
Fig2 TheproteinexpressionlevelofSPAinlungtissueof
rats(×20)
32
o·i´7
TGFβ,SPAmRNA+X ÔÎ
q´
,
fgxõ´
TGFβ×Ø+XøÀ
(P<005),
SOõ´Àø
;
í
SPA
×Ø+
Xøc
(P<005),
U&Oõ´+Xj
ø
(
+
2)。
+
2
fg¶
MPP
o·i´7$
TGFβ,SPAmRNA+XÄ
ÂÃ
(珋x±s,n=10)
Table2 TheefectofQinbaionTGFβandSPAmRNAex
pressionlevelinlungtissueofMPPrats(珋x±s,n=10)
µ´
õ
/g·kg-1·d-1
TGFβ
/βactin
SPA
/βactin
$0
- 0978±0023 0980±0029
Îq
- 4753±06411) 0263±00051)
}JÂF Z
0045 2503±04083) 0560±00772)
Ó
2~5
!
00225
fgO
32 2493±04313) 0748±00473)
fg$
16 2637±04593) 0490±00512)
fg±
08 3708±08052) 0327±0043
33
o·¨h
BALF
$
SPA
Äxõ©!
Ô$
0¶#´
,
Îq´¨h$
SPA
xõørË
(P<001),
í
BALF
$
SPA
xõÀË
(P<005);
ÔÎq´Q
,
p¹¶#´¨h$
SPA
xõ_
Òøù
,BALF
$
SPA
xõBrË
,
ff=D
d<
,
fgO
、
$
、
±x´¨h$
SPA
xõÀË
(P<005),BALF
$
SPA
xõc
(P<005)
(
+
3)。
4
ºÒ
TGFβé6¦q+XÄ56Ø-,®p¹+X
+3 fg¶ MPPo·¨h BALF$ SPAxõÄÂÃ
(珋x±s,n=10)
Table3 TheefectofQinbaionconcentrationofSPAinserum
andBALFofMPPrats(珋x±s,n=10)
µ´
õ
/g·kg-1·d-1
¨h
/μg·L-1
BALF
/μg·L-1
$0
- 9635±0929 58058±6688
Îq
- 12446±07682) 45829±58281)
}JÂF Z
0045 12515±1234 50156±6374
Ó
2~5
!
00225
fgO
32 8819±160394) 63681±124973)
fg$
16 9427±29343) 59571±60153)
fg±
08 10390±2158 57542±59744)
g
:
Ô$0´
1)P<005,2)P<001;
ÔÎq¶#´
3)P<005,4)P<001。
ZɽHñR²³¾µ@Þ6¦$
,
x´o·i´
7$
TGFβ+Xª«µ@ÞiJô,AlÞip
6
,
p¹+X²³ª«øÞ6ô8
,
;Rvó+Xv
î
。
@Îq´Ô$0¶#´¶ÕçSå
,MP
no·
,
UÞ£¿Ä{%
TGFβĵ%õ
cØ
,
ürs56îJô56Äâ
,
íx´,´
TGFβľ0+X±,e,Éö÷@±
TGFβľ0+XÝkÀ4ê,y±rs56î
Jô56Äâ
。
SPA
ª«µ@Þ
AECⅡ1µip!56
8
,
¥ð´_nR½H!R²³
,
$0¶#´
SPA
µ@+
,
S2Ró
;
íÔ$0¶#´
,
Îq¶#´
SPA
+XôµÅ
,
2R¦
,
e
MP
no·
,SPA
ľ0+X±
,
H
AEC
ⅡVº,i´7ùéÓ#,®©ËèÊöVT
ÂÃ
。
ÔÎq¶#´
,
x´,´ö÷O
SPA
ľ0+Xõ
,
e,ɶVºÄ
AECⅡ:Btu
į°
,
®µ%»HÊ
SPA,
MuiÄ©Ë
èÊö
,
ü®i¹ÄË辿
。
MPP
o·i´7$
TGFβ SPAmRNAĨ
©ä+
,
o·n
MP
i´7$
TGFβmR
NA
øùrË
,
í
SPAmRNA
+XÀ
,
H
MP
n¦=ÖJô¹ikÄ$Õci´7$
TGFβĵ%,O TGFβmRNA+X, AEC
ⅡÄrsJôâ_;AECⅡmËrsJôâ_,
SPA
µ%k
,SPAmRNA
+XÀ
,
;ói´
7ÄkÀ4êr
。
ÔÎq¶#´
,
x´,´
i´7
TGFβmRNA+XøùÀË,UOSPAmR
·6941·
Ã
QÖ
:
fghij¶ikl2mno·ipⅡqrs56tu¯°Ä
NA
+XøùO
,
ñø×øÄõ¬©Ù
,
Hf
gö÷ki´7$
TGFβĵ%,± TGFβ
mRNA
+X
,
y±
AECⅡÄrsJôâ_,M
u
AECⅡÄ©}¿»Êö;AECⅡÊöçM
uÄUO
,
SPA
ÄHÊ»µ%
,SPAmRNA
+
XrË
,
ô[¸¼éi´7Ä©}¿»Ëè
Êö
。
SPA
Õ°(öÏièÓ#Äs̹
,
AÕ¯
é
MP
ni´7
AECⅡÊöÄ^}`。SP
A
ÄHÊ»µ%:B[!ÄiÆÛ¹
,
ª«U
AEC
Ⅱ+X。©áÎÀ,SPA¦¨P$æÒ+X+
Xw4õÄ
,
fMªZnO
,
iprs56»!
9)5¨*VTk¹56Ä&dí¡ÊÒUrÄ
ºÜ
,
ip)5¨*@¶¹c
,SPA
qip©µ
T@¶¹cîÄip)5¨*$ñ1¨õi
¨
[14],
{%¦m¸M¨P$
SPA
Ír¯
,
Ø_Õ
¥¼¨h$
SPA
ÄÍ(4êiºÜÄQ;
r
。
MPP
o·ipÕwP»¨h$
SPA
Äxõ¨
©ä+
,
o·n
MP
®
BALF
$
SPA
xõ
øÀí¨h$
SPA
xõøcO
,
H
MP
n
AECⅡ)5¨*Vº。ÔÎq´,x´
,´öc
BALF
$
SPA
xõ
,
UO±¨h$
SPA
xõ
。
Hfgö÷é
AECⅡHÊ»µ%
SPA
ÄÊö
,
ñÝ
MP
n=ÖÄkÀ4ê)
5¨*ºÜ
,
¼ki´7Ä©}¿»Êö
。
íp
¹¶#´ÔÎq´
,BALF
Ȭh$
SPA
xõ
føùÚÛ
,
e}JÂFmn:BÞIJ
MP¯
°
,
f¶
MP
n»k¹56&d=ÖÄ)5
¨*ºÜÄtu¯°Òø
。
u
ä+
,
fghij@±
TGFβ+X,y±AECⅡmËEMT,AECⅡH
Ê»µ%
SPA,
ñ¶k¹56&d=ÖÄ)5¨*
ºÜ:BÞÄtu¯°
,
Sú
SPA
im¸M
,
ci´7$
SPA
Äxõ
,
qí¶i´7ÖT
é»tuį°
,
Mu®©}¿»ËèÊö
。
[
~=
]
[1]
Çlf
,
ÙT;
ikl2m¶oM8ýG,É2,
[J]
ÄÅ4&-.
,2013,31(6):596
[2]
,
!I
,
d<¬
,
Ö
fghijm8£²ik
l2m¯°Ä½.
[J]
$Æ,
,2008,39(5):742
[3]
,
ߤ
,
!:
SUhij¶ikl2m
n·i´7BVµ-+XÄ
[J]
$%$,-.
,
2005,30(21):1682
[4] MengY,HuoJ,LuW,etalModulationofP1andEGFexpres
sionbybaicalin[J]IntJMolSci,2012,14(1):146
[5]
¨f
,
§p
,
9
,
Ö
fghij¶ikl2mn
Îq:·»56i+sË(Ø-+XÄÂÃ
[J]
$B$A
,-.
,2014,29(4):1089
[6]
§Ö
,
,
ipⅡqrs56ÊöÄ
3[J]uû
k
:
AÒ
,2012,39(6):658
[7] ValcourtU,KowanetzM,NimiH,etalTGFbetaandtheSmad
signalingpathwaysupporttranscriptomicreprogrammingduring
epithelialmesenchymalceltransition[J]MolBiolCel,2005,
16(4):1987
[8] ZhouB,BuckleyST,PatelV,etalTroglitazoneatenuatesTGF
β1inducedEMTinalveolarepithelialcelsviaaPPARγinde
pendentmechanism[J]PLoSONE,2012,7(6):e38827
[9] AhmadIM,BritiganBE,AbdailaMY.Oxidationofthiolsand
modificationofredoxsensitivesignalinginhumanlungepithelial
celsexposedtoPseudomonaspyocyanin[J].JToxicolEnviron
HealthA,2011,74(1):43.
[10]
}Ï
.GSK3
¦W%ìrs»ipⅡqrs56ºÜt
u$į°
[D].
/
:
B$&(o
,2006
[11] MartinRJ,ChuHW,HonourJMAirwayinflammationand
bronchinalhyperesponsivenessafterMycoplasmapneumoniaein
fectioninamurinemodel[J]AmJRespirCelMolBiol,2001,
24(5):577
[12]
K6
OiºÜßËo·i´7$i+9̹ÉôQ©
¾0
A(SPA)
Ä
mRNA
»¾0+X@FXÄѯ°
[D]
ð¢
:
ð¢o
,2013
[13] HuQJ,ZhangHL,XiongSD,etalThealterationandsignifi
canceofsurfactantproteinAinratschronicalyexposedtociga
retesmoke[J]JHuazhongUnivSciTechnol,2008,28(2):
128
[14] ToddDA,MarshMJ,GeorgeA,etalSurfactantphospholipids,
surfactantproteins,andinflammatorymarkersduringacutelung
injuryinchildren[J]PediatrCritCareMed,2010,11(1):82
[
-0
]
·7941·