全 文 ：马尾松花粉化学成分的研究
李 丽1 ,孙 洁2 , 孙敬勇3 * ,郑万金3 ,仲 英3 , 刘 珂1, 4
( 1 辽宁中医药大学药学院,辽宁 大连 116600; 2 山东省济南市天桥人民医院,山东 济南 250031; 3 山东省医学科
学院药物研究所 山东省现代医用药物与技术重点实验室, 山东 济南 250062; 4 烟台大学药学院, 山东 烟台 264005)
摘 要:目的 研究马尾松 P inus massoniana 花粉的化学成分。方法 采用反复柱色谱法进行分离纯化, 根据光
谱数据及理化性质鉴定化合物的结构。结果 分离鉴定了 11 个化合物, 分别是 谷甾醇( 1)、单硬脂酸甘油酯
( 2)、1正十六烷酸甘油酯( 3)、对羟基苯甲醛( 4)、3羟基4甲氧基苯甲酸( 5)、3, 3 , 5, 5 , 7五羟基二氢黄酮醇( 6)、
双氢山柰素( 7)、对羟基苯甲酸( 8)、3, 4二羟基苯甲酸( 9)、山柰酚( 10)、丁二酸( 11)。结论 化合物 2~ 11 均为首
次从马尾松花粉中分离得到。
关键词:马尾松; 花粉; 3, 3 , 5, 5 , 7五羟基二氢黄酮醇; 1正十六烷酸甘油酯
中图分类号: R284 1 文献标识码: A 文章编号: 02532670( 2010) 04053003
松花粉又名松花、松黄,是我国松科植物马尾松
Pinus massoniana Lamb、油松 P tabulaef ormis
Carr 或同属数种植物的干燥花粉 [ 1] , 始载于!新修
本草∀,为鲜黄色或淡黄色细粉,其性味甘平无毒, 是
我国传统食药兼用的花粉品种;具有提高免疫力、抗
衰老、抗疲劳、调节机体代谢、调血脂和养颜等功效,
在国内外已被广泛地应用于保健品、药品、化妆品和
饲料添加剂等领域[ 2] 。但到目前为止, 国内对松花
粉化学成分的研究较少, 国外也鲜见报道,为了深入
研究松花粉药理活性的物质基础,本实验对马尾松
花粉的化学成分进行了系统的研究,分离并鉴定了
11种化合物,分别为谷甾醇( 1)、单硬脂酸甘油酯
( 2)、1正十六烷酸甘油酯( 3)、对羟基苯甲醛( 4)、3
羟基4甲氧基苯甲酸( 5)、3, 3 , 5, 5 , 7五羟基二氢
黄酮醇( 6)、双氢山柰素( 7)、对羟基苯甲酸( 8)、3, 4
二羟基苯甲酸( 9)、山柰酚( 10)、丁二酸( 11)。其中,
化合物 2~ 11均为首次从马尾松花粉中分离得到。
1 仪器与材料
Stuart smp3 型熔点测定仪; Ag ilent T rap VL
型质谱仪; Shimadzu UV2201 型紫外可见分光光
度计; Bruker advanced 400 型核磁共振仪 (内标
TM S) ;色谱用硅胶均为青岛海洋化工厂产品; 所用
试剂均为分析纯。松花粉由烟台新时代健康产业有
限公司提供。
2 提取与分离
破壁松花粉 10 kg, 甲醇渗漉, 渗漉液回收甲
醇, 得浸膏。水混悬后依次用石油醚、氯仿、醋酸乙
酯、正丁醇萃取,得到 4个不同极性部位, 石油醚部
位 836 g、氯仿部位40 g、醋酸乙酯部位24 g、正丁醇
部位54 g。其中, 石油醚部位经硅胶柱色谱,先用石
油醚洗脱,再用丙酮洗脱, 丙酮洗脱液回收丙酮, 得
到丙酮洗脱部位 235 g。丙酮洗脱部位和氯仿部位
用石油醚丙酮系统梯度洗脱, 醋酸乙酯部位和正丁
醇部位用氯仿甲醇系统梯度洗脱,经反复硅胶柱色
谱分离,结晶及重结晶等方法, 得到化合物 1~ 3(丙
酮部位)、4(氯仿部位)、5~ 10(醋酸乙酯部位)、11
(正丁醇部位)。
3 结构鉴定
化合物 1: 白色针晶 ( 石油醚 ) , mp 135~
137 # , 10% H 2 SO 4乙醇溶液显色为紫红色;
L iebermannBurchard 反应阳性, 推测该化合物可
能为甾体类;样品与对照品经薄层展开,在 3个不同
的展开体系中样品显示单一斑点, 置于碘的蒸气中
显色及用 10%硫酸乙醇溶液显色, 样品与对照品
的 Rf值均一致,且混合熔点不下降, 故鉴定为 谷
甾醇( sitosterol)。
化合物 2: 白色粉末 (石油醚丙酮) , ESIMS
( posit ive) m/ z : 381 0[ M + N a] + , 提示化合物的相
对分子质量为 358, 1HNMR( 400 MHz, CDCl3 ) :
0 88( 3H , t ,CH 3 ) , 1 62( 2H , m) 为 17 位CH 2质
子信号, 2 13 ( 1H , br s,OH ) , 2 56 ( 1H , br s,
OH) , 2 35 ( 2H , t,CH 2C = O ) , 4 20 ( 2H , dd,
OCH 2) , 3 93( 1H , m ) 为次甲基质子信号, 3 60
( 1H , dd)和 3 69( 1H , dd)是与羟基相连的亚甲基上
∃530∃ 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
收稿日期: 20090903 作者简介:李 丽( 1981 % ) ,女,山东曹县人,在读硕士研究生,从事中药化学和药物分析研究。 Em ail : lilyhz cx@ 163 com
* 通讯作者 孙敬勇 T el: 13256182940 Email: sun jingyong@ tom com
的质子信号, 结合 13CNMR ( 400 MHz, CDCl3 ) :
174 3( C1) , 34 2( C2) , 22 7( C17) , 14 1( C18) ,
70 3( C1 ) , 65 2( C2 ) , 63 4( C3 ) , 29 1~ 29 7
( C3 ~ 16) ; 故鉴定为单硬脂酸甘油酯 ( 2, 3di
hydroxypropyl octadecanoate)。
化合物 3: 白色粉末 (石油醚丙酮 ) , ESIMS
( po sit ive ) m/ z : 330 9 [ M + H ] + , 352 9 [ M +
Na] + , 推知 化合物的 相对分 子质量为 330;
1HNMR( 400 MHz, CDCl3 ) : 0 88( 3H , t ,CH 3 ) ,
1 26( 24H , s) , 1 62( 2H , m,CH2) , 2 35( 2H , t ) ,
2 55( 1H , d,OH ) , 2 35 ( 2H , t ) , 4 19 ( 2H , m ) ,
3 60( 1H , dd)和 3 70( 1H , dd)是与羟基相连的亚甲
基上的质子信号, 3 93 ( 1H , m ) , 13CNMR ( 400
MHz, CDCl3 ) : 174 3( C1) , 70 3 ( C2 ) , 65 2( C
3 ) , 63 4( C1 ) , 34 2( C2) , 14 1( C16) ; 以上波谱
数据与文献报道基本一致[ 3] , 故鉴定为 1正十六烷
酸甘油酯( hexadecano ic acid 2, 3dihydr oxypropyl
ester)。
化合物 4: 无色结晶 (丙酮) , mp 113~ 118 # ,
1HNMR( 400 MHz, DM SOd6 ) : 10 60 ( 1H , s,
OH) , 9 79 ( 1H , s,CHO ) , 7 76 ( 2H , d, J =
8 56 Hz, H2, 6) , 6 93 ( 2H , d, J= 8 56 Hz,
H3, 5)。13 CNMR ( 400 MHz, DM SOd6 ) : 190 9
( C= O) , 163 3( C4) , 132 1( C2, 6) , 128 5( C1) ,
115 9( C3, 5)。以上理化性质及波谱数据与文献报
道基本一致[ 4] ,故鉴定为对羟基苯甲醛( phydroxy
benzaldehyde)。
化合物 5:白色粉末(醋酸乙酯) , 易溶于醋酸乙
酯、甲醇、乙醇, mp 213~ 215 # ; ESIMS ( positive)
m/ z : 169 2 [ M + H ] + , 191 2 [ M + N a] + ; ( nega
t ive) m/ z : 167 1[ M - H ] - , 提示化合物的相对分
子质量为 168; 1HNMR ( 400 MHz, DM SOd6 ) :
12 49( 1H , s,COOH) , 9 84( 1H , s, OH3) , 7 43~
7 45( 2H , m, H2, 6) , 6 84 ( 1H , d, J= 8 68 Hz,
H5)为苯环上氢质子信号, 且存在邻位取代氢,
3 81( 3H , s,OCH 3 ) ; 13CNMR( 400 MHz, DM SO
d6 ): 121 6( C1) , 115 0( C2) , 147 2( C3) , 151 1
( C4) , 112 7( C5) , 121 6( C6) , 167 2( C7) , 55 5
(OCH 3 ) ; 以上理化性质及波谱数据与文献报道基
本一致[ 5] ,故鉴定为 3羟基4甲氧基苯甲酸 ( 3hy
droxy4methoxybenzoic acid)。
化合物 6: 浅黄色针晶 (醋酸乙酯) , H ClMg、
FeCl3和 KBH 4 反应均呈阳性, M olish 反应阴性, 推
测为二氢黄酮或二氢黄酮醇类化合物。ESIMS
( posit ive ) m/ z : 304 7 [ M + H ] + , 326 7 [ M +
Na] + ; ( negat ive) m/ z : 302 6[ M - H ] - , 提示化合
物的相对分子质量为 304。 1HNMR ( 400 MHz,
DM SOd6 ) : 11 90( 1H , s) , 10 81( 1H , s)分别为 A
环 6 位和 8 位的氢质子信号; 4 98 ( 1H , d, J=
11 1 Hz)和 4 49( 1H , dd, J= 11 1 Hz)分别是 3位
和 2位氢质子的信号, 说明是二氢黄酮醇类化合物;
: 10 80( 2H , b)为 B环具有对称结构的两酚羟基质
子信号, : 6 74( 2H , s)和 6 87( 1H , s)分别是 2 , 6
位和 4 位的氢质子信号。13 CNMR ( 400 MHz,
DM SOd6 ) : 197 7( C= O) , 163 3( C5) , 166 8( C
7) , 162 5( C9) , 145 8 ( C4 ) , 128 0( C1 ) , 119 4
( C6 ) , 144 9 ( C3 ) , 115 3 ( C5 ) , 115 1 ( C2 ) ,
100 5( C10) , 96 0( C6) , 95 0( C8) , 83 1( C2) ,
71 6( C3)。1HNMR和13CNMR谱数据均与文献
报道一致[ 6] , 故鉴定为 3, 3 , 5, 5 , 7五羟基二氢黄
酮醇( 3, 3 , 5, 5 , 7pentahydrof lavanone)。
化合物 7: 浅黄色粉末 (醋酸乙酯) , HClMg、
FeCl3 和 KBH4 反应均呈阳性, M olish反应阴性,推
测为二氢黄酮或二氢黄酮醇类化合物。ESIMS
( posit ive ) m/ z : 288 6 [ M + H ] + , 310 6 [ M +
Na] + ; ( negat ive) m/ z : 258 6[ M- CO] - ,提示化合
物的相对分子质量为 288。 1HNMR ( 400 MHz,
DM SOd6 ) : 11 90 ( 1H , s, OH5) , 4 58 ( 1H , dd,
J= 11 4, 6 0 Hz, H3) , 5 05( 1H , d, J= 11 4 Hz,
H2) , 5 91( 1H , d, J= 2 0 Hz)和 5 86( 1H , d, J=
2 0 Hz)分别是 6位和 8位氢质子信号, 6 78( 2H ,
d, J= 8 52 Hz, H3 , 5 ) , 7 31 ( 2H , d, J=
8 52 Hz, H2 , 6 ) ; 13CNMR ( 400 MHz, DM SO
d6 ) : 197 8 ( C = O ) , 166 8 ( C7 ) , 163 3 ( C5) ,
162 6( C9) , 157 7( C4 ) , 129 4( C2 , 6 ) , 127 5
( C1 ) , 114 9( C3 , 5 ) , 100 4( C10) , 96 0( C6) ,
95 0( C8) , 82 9 ( C2) , 71 5 ( C3)。1HNMR和
13CNMR谱数据均与文献报道一致 [ 7] ,故鉴定为双
氢山柰素( dihydrokaempferol)。
化合物 8: 土黄色粉末(醋酸乙酯) ,易溶于醋酸
乙酯、甲醇、乙醇、水, mp 210~ 213 # ; 与 FeCl3 反
应阳性, 故结构中可能存在酚羟基; ESIMS ( nega
t ive) m/ z : 136 6[ M - H ] - , 提示化合物的相对分
子质量为 138; 1HNMR ( 400 MHz, DM SOd6 ) :
12 40( 1H , br s,COOH) , 10 21( 1H , br s,OH) ,
7 80( 2H , d, J = 9 3 Hz, H2, 6) , 6 82( 2H , d, J=
9 3 Hz, H3, 5) ; 以上理化性质及波谱数据与文献
报道基本一致 [ 8] , 故鉴定为对羟基苯甲酸 ( p
∃531∃中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
hydro xybenzoic acid)。
化合物 9: 黄色针晶 (醋酸乙酯) , mp 205~
208 # ; FeCl3 反应阳性,故结构中可能存在酚羟基;
ESIMS ( posit ive) m/ z : 176 7[ M + Na] + ; ( nega
t ive) m/ z : 152 6[ M - H ] - , 提示化合物的相对分
子质量为 154; 1HNMR ( 400 MHz, DM SOd6 ) :
12 35( 1H , br s,COOH) , 9 58( 1H , br s)和 9 35
( 1H , br s) 分别为 3、4 位的羟基氢信号。7 34
( 1H , d, J= 2 0 Hz, H2) , 7 29 ( 1H , dd, J= 8 2,
2 0 Hz, H6) , 6 78 ( 1H , d, J= 8 2 Hz, H5)为苯
环上的氢信号, 由偶合常数提示,其取代位置为邻间
位的三取代。以上理化性质及波谱数据与文献报道
基本一致[ 9] ,故鉴定为 3, 4二羟基苯甲酸( 3, 4di
hydroxybenzoic acid)。
化合物 10: 黄色粉末 (醋酸乙酯) , mp 274~
276 # ; 与 HClMg 反应阳性,可推测为黄酮类化合
物; ESIMS ( posit ive) m/ z : 286 9[ M + H ] + , 308 9
[ M+ Na]
+
, 提示化合物的相对分子质量为 286;
1
HNMR( 400 MHz, DM SOd6 ) : 12 48 ( 1H , s,
OH5) , 10 77 ( 1H , s, OH7) , 10 10 ( 1H , s, OH
4 ) , 9 38( 1H , s, OH3) , 6 20 ( 1H , d, J= 1 8 Hz,
H6) , 6 44( 1H , d, J= 1 8 Hz, H8)构成 AB 偶合
系统,为化合物 A 环上的信号, 由偶合情况可推知
A环为间位取代,因此进一步确定化合物 5、7 位存
在羟基; 8 05 ( 2H , d, J= 8 8 Hz, H2 , 6 ) , 6 93
( 2H , d, J= 8 8 Hz, H3 , 5 )构成 AA BB 偶合系
统,为 B 环质子信号, 由偶合情况可知 B 环为对位
取代, 由此可进一步确定化合物 4 位存在羟基;
1 3
CNMR ( 400 MH z, DMSOd6 ) : 146 8 ( C2 ) ,
135 6( C3) , 175 8( C4) , 156 1( C5) , 98 2( C6) ,
163 8( C7) , 93 4( C8) , 160 7( C9) , 103 0( C10) ,
121 6( C1 ) , 129 4( C2 ) , 115 4( C3 ) , 159 1( C
4 ) , 115 4( C5 ) , 129 4( C6 ) ; 以上理化性质及波
谱数据与文献报道基本一致[ 10] , 故鉴定为山柰酚
( kaempferol)。
化合物 11: 无色片状结晶 (丙酮 ) , mp 182~
184 # ;遇溴甲酚绿显黄色, 提示为羧酸类化合物;
1HNMR( 400 MHz, DMSOd6 ) : 12 13( 1H , s)为
羧基质子信号, 2 42( 2H , s)为亚甲基氢质子信号,
分子中只有羧基一个末端基团, 提示该化合物为一
对称结构,与文献报道基本一致 [ 11] , 故鉴定为丁二
酸( succinic acid)。
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[ J] 中草药, 1980, 11( 11) : 523
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(本刊讯)
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