全 文 ：液,在 0、2、4、6、8 h 点进样分析, 测得峰面积值, 阿
魏酸、肉桂酸、桂皮醛、木香烃内酯和去氢木香内酯
质量分数的 RSD 分别为 2 91%、1 31%、1 24%、
0 91%、1 06% ,表明供试品溶液在 8 h内稳定。
2 5 6 加样回收率试验: 精密称取批号为 061003
的供试品 1 5 g 共 6 份, 分别精密加入 10 mL 混合
对照品溶液,按供试品溶液的制备 项下方法制备
供试品溶液, 按上述测定方法进行测定, 计算回收
率。结果阿魏酸、肉桂酸、桂皮醛、木香烃内酯和去
氢木香内酯的回收率分别为 98 54%、99 21%、
100 01%、99 12%、98 20% , RSD 分别为 1 08%、
1 03%、1 17%、1 24%、1 36%。
2 5 7 样品的测定: 取 3个批号的痛经宝颗粒, 制
备供试品溶液, 每批平行 3份, 每份进样 2 次, 以回
归方程计算各成分的质量分数,结果见表 1。
表 1 样品测定结果
Table 1 Determination results
批号 阿魏酸/
( mg! g - 1)
肉桂酸/
( mg! g- 1)
桂皮醛/
( mg! g- 1 )
木香烃内酯/
( mg ! g- 1 )
去氢木香内酯/
( mg! g- 1)
061003 0 181 2 0 098 8 0 895 3 0 144 8 0 169 5
060708 0 174 3 0 101 4 0 903 6 0 150 3 0 184 2
070604 0 197 2 0 112 9 0 912 7 0 167 8 0 191 5
3 讨论
3 1 本实验建立了高效液相色谱法同时测定痛经
宝颗粒中阿魏酸、肉桂酸、桂皮醛、木香烃内酯和去
氢木香内酯 5个成分的方法, 为全面控制痛经宝制
剂中与药效相关物质基础的质量提供了方法, 为解
析痛经宝药效物质基础创造了条件,丰富了组分结
构理论。
3 2 为了尽可能全面反映痛经宝颗粒的化学信息,
实验对供试品溶液的制备方法进行考察。选择甲
醇、50%甲醇、水进行提取,结果 50%甲醇提取的样
品信息量较多,峰面积较大; 选择回流、超声提取方
法进行了比较,结果超声法所得峰面积为回流法的
95%以上, 考虑到操作的方便性,确定选择超声法;
选择不同超声提取次数,结果 1次超声 30 min 即能
提取完全。
3 3 通过分别对 5 个对照品溶液的紫外波长扫描
显示,阿魏酸、肉桂酸、桂皮醛、木香烃内酯和去氢木
香内酯的最大吸收波长分别为 320、274、290、225、
225 nm, 实验过程中发现在 225 nm 处, 所需检测的
各峰分离度及峰形均佳,灵敏度也较高,所以检测波
长选择 225 nm。
3 4 试验中选用多种流动相进行分析, 如甲醇水,
甲醇0 04%磷酸水, 甲醇0 1%磷酸水,乙腈水,乙
腈0 04%磷酸水。经多次试验, 选择乙腈0 04%
磷酸水,并反复调整洗脱程序,最终以本研究中的梯
度洗脱程序来分离样品,所检测的 5 个成分的分离
效果,保留时间及理论塔板数都较为理想。
参考文献:
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尔滨:黑龙江中医药大学, 2008
鼻渊舒软胶囊的质量标准研究
解学星1, 2 ,胡雅萍3 , 刘 毅2 , 刘素香2 ,高文远1 * ∀ , 陈常青2
( 1 天津大学药物科学与技术学院,天津 300072; 2 天津药物研究院,天津 300193;
3 天津药物研究院药业有限责任公司, 天津 300193)
摘 要:目的 建立鼻渊舒软胶囊的质量标准, 控制制剂的质量。方法 采用薄层色谱法对制剂中组成药味白芷、
栀子、川芎进行鉴别, 并建立方法学考察,采用 HPLC 法测定制剂中的栀子苷。结果 白芷、栀子、川芎的薄层色谱
中阴性对照无干扰。栀子苷在 0 086 9~ 1 737 6 g与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为 99 78% , RSD 为
0 81%。结论 建立的薄层色谱和高效液相色谱定性、定量方法可以用来控制鼻渊舒软胶囊的质量,方法简便可行。
!1645!中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 10 期 2010 年 10月
∀收稿日期: 20091212
* 通讯作者 高文远 Email: pharmgao@ t ju edu cn
关键词:鼻渊舒软胶囊; 白芷;栀子; 川芎;薄层色谱; 栀子苷;高效液相色谱
中图分类号: R286 02 文献标识码: A 文章编号: 02532670( 2010) 10164504
鼻渊舒软胶囊处方源于#中华人民共和国卫生
部药品标准∃中药成方制剂标准册,由辛夷、苍耳子、
栀子、黄芩、黄芪、川芎、柴胡、细辛、薄荷、川木通、茯
苓、白芷、桔梗 13 味中药组成, 具有疏风清热、祛湿
通窍的功效,用于急性鼻炎肺经风热证、急性鼻窦炎
胆腑郁热证[ 1]。原标准中有黄芪、栀子、黄芩、栀子
的薄层色谱鉴别,本实验选用了多种展开剂进行展
开,将能排除干扰、重复性好的白芷薄层鉴别方法筛
选出来,增加到质量标准中。栀子为本品中主药之
一,栀子苷为栀子主要活性成分之一,故本实验选择
栀子苷作为控制本品质量的指标成分。因此本实验
建立了鼻渊舒软胶囊中白芷、栀子和川芎的薄层色
谱鉴别方法,对本品中栀子苷进行 H PLC法定量分
析,建立了该产品的质量标准定量控制方法, 结果该
方法简便、重复性好。
1 仪器和试药
惠普 HP1100 高效液 相色谱仪, Sartorius
BP211D电子天平(感量 0 1 mg、0 01 mg ) , USC %
502超声波清洗器, T U % 11901 紫外分光光度计,
RE % 52型旋转蒸发仪(天津第一玻璃厂)。
白芷对照药材、栀子苷对照品(批号 110749
200410) 、川芎对照药材由中国药品生物制品检定
所提供, YDW09型大孔树脂由沧州远威化工有限
公司提供,氯仿、甲醇、乙醇等试剂均为分析纯,去离
子水。
2 方法与结果
2 1 鼻渊舒软胶囊中白芷的 T LC鉴别 [ 2]
2 1 1 供试品溶液的制备:取鼻渊舒软胶囊 15粒,
剪开, 倾出内容物,加水 20 mL,加热提取, 放冷, 通
过 YDW09型大孔树脂柱(树脂高 15 cm ,内径 1 5
cm) ,用 50 mL 水洗脱,弃去水液, 再用 40%乙醇 50
mL 洗脱, 弃去 40%乙醇洗脱液, 继用 95%乙醇 80
mL 进行洗脱, 收集洗脱液, 浓缩至干,回收乙醇, 残
渣加醋酸乙酯微热提取 2次( 20、15 mL) ,醋酸乙酯
液低温蒸干,残渣加甲醇 1 mL 使溶解,即得。
2 1 2 对照药材溶液的制备:取白芷对照药材1 g,
加氯仿 30 mL,超声处理 20 m in, 滤过, 滤液低温挥
干,残渣加甲醇 1 mL 使溶解, 即得。
2 1 3 阴性对照溶液的制备:按处方取缺白芷的各
味药材,按制备方法制成浸膏粉, 取浸膏粉适量, 加
氯仿 30 mL 超声处理提取,滤过, 氯仿液低温蒸干,
残渣加甲醇 1 mL 使溶解,即得。
2 1 4 TLC 鉴别与结果: 照薄层色谱法( #中国药
典∃2005年版一部附录 & B)试验,吸取供试品溶液
10 L、对照药材溶液和阴性对照溶液各 5 L, 分别
点于同一硅胶 GF254薄层板上, 以醋酸乙酯氯仿
乙醚( 2 ∋1∋ 1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外
光灯( 365 nm)下检视。供试品色谱中, 在与对照药
材色谱相应的位置上, 显相同颜色的荧光斑点, 阴性
对照色谱中无此斑点。见图 1。
图 1 鼻渊舒软胶囊中白芷的 TLC鉴别
Fig 1 TLC Chromatograms of Angelicae Dahuricae
Radix in Biyuanshu Soft Capsula
2 2 鼻渊舒软胶囊中栀子的 TLC鉴别[ 3]
2 2 1 供试品溶液的制备: 取鼻渊舒软胶囊 5粒,
剪开,倾出内容物,加入硅藻土 2 g, 研匀, 加氯仿超
声处理 2次,每次 20 mL, 10 m in, 滤过, 滤液弃去,
残渣挥干加水 20 mL, 加热溶解,放冷,离心,取上清
液移入分液漏斗中, 用水饱和正丁醇振摇提取 2次
( 15、10 mL) ,合并正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇1 mL
使溶解,取上清液,即得。
2 2 2 对照品溶液的制备: 取栀子苷对照品适量,
加甲醇制成 1 mg / mL 的溶液,即得。
2 2 3 阴性对照溶液的制备:按处方取缺栀子的各
味药材,按制备方法制成浸膏粉, 取浸膏粉适量, 依
照供试品溶液的制备项下方法操作, 即得。
2 2 4 TLC 鉴别与结果: 照薄层色谱法( #中国药
典∃2005年版一部附录& B)试验, 吸取供试品溶液、
对照品溶液和阴性对照溶液各 5 L, 分别点于同一
以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G 薄层板上,以
氯仿甲醇( 5∋ 1)为展开剂,展开, 取出, 晾干, 喷以
10%硫酸乙醇溶液,在 105 ( 加热至斑点显色清晰。
结果供试品色谱中, 在与栀子苷对照品色谱相应的
位置上,显相同颜色(紫红色)的斑点,阴性对照色谱
中无此斑点。见图 2。
!1646! 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 10 期 2010 年 10月
图 2 鼻渊舒软胶囊中栀子的 TLC鉴别
Fig 2 TLC Chromatograms of Gardeniae Fructus
in Biyuanshu Sof t Capsula
2 3 鼻渊舒软胶囊中川芎的 T LC鉴别 [ 4]
2 3 1 供试品溶液的制备:取鼻渊舒软胶囊 15粒,
剪开,倾出内容物, 加水 20 mL,加热溶解, 放冷, 通
过 YDW09型大孔树脂柱(树脂高 15 cm ,内径 1 5
cm) ,用水 50 mL 洗脱,弃去水液, 再用 40%乙醇 50
mL 洗脱, 弃去 40%乙醇洗脱液, 继用 95%乙醇 80
mL 进行洗脱, 收集洗脱液, 浓缩至干,回收乙醇, 残
渣加醋酸乙酯微热提取 2次( 20、15 mL) ,醋酸乙酯
液低温蒸干,残渣加甲醇 1 mL 使溶解,即得。
2 3 2 对照药材溶液的制备: 取川芎对照药材
0 5 g,加氯仿 30 mL,超声处理 20 min, 滤过, 滤液
低温挥干,残渣加甲醇 1 mL 使溶解,即得。
2 3 3 阴性对照溶液的制备:按处方取缺川芎的各
味药材,按制备方法制成浸膏粉, 取浸膏粉适量, 加
氯仿 30 mL 超声处理提取,滤过, 氯仿液低温蒸干,
残渣加甲醇 1 mL 使溶解,即得。
2 3 4 T LC鉴别与结果: 照薄层色谱法(#中国药
典∃2005年版一部附录 & B)试验, 吸取供试品溶液
10 L, 对照药材溶液和阴性对照溶液各 5 L, 分别
点于同一硅胶 GF254薄层板上, 以苯醋酸乙酯冰醋
酸( 6 ∋4∋ 1)为展开剂, 展开, 取出, 晾干, 置紫外光
灯( 365 nm)下检视。供试品色谱中, 在与对照色谱
相应的位置上, 显相同颜色的斑点,阴性对照色谱中
无此斑点。见图 3。
2 4 栀子苷的 HPLC法测定
2 4 1 色谱条件: Irregular 不锈钢柱 ( 250 mm )
4 6 mm, 10 m) (天和色谱实验室) ; 流动相:甲醇
水( 28 ∋ 72 ) ; 检测波长 239 nm; 体积流量 1 0
mL/ min;柱温 30 ( ; 进样体积 20 L; 灵敏度: 0 1
AUFS。
2 4 2 对照品溶液的制备:精密称取栀子苷对照品
5 43 mg ,置 25 mL 量瓶中, 加甲醇溶解并稀释至刻
度,摇匀, 作为对照品贮备液。精密吸取对照品贮备
图 3 鼻渊舒软胶囊中川芎的 TLC鉴别
Fig 3 TLC Chromatograms of Chuanxiong Rhizoma
in Biyuanshu Soft Capsula
液 1 mL, 置 10 mL 量瓶中, 加 50%甲醇稀释至刻
度,摇匀,作为对照品溶液。
2 4 3 供试品溶液的制备: 取装量差异项下的本
品,研匀, 取约 0 2 g, 精密称定, 置 100 mL 锥形瓶
中,精密加入 50%甲醇 50 mL, 称定质量, 加热使溶
解,放冷,称定质量, 用 50%甲醇补足减失的质量,
摇匀;过 0 5 m 有机膜, 弃去初滤液, 取续滤液,作
为供试品溶液。
2 4 4 阴性对照溶液的制备:按本品处方及工艺制
备缺栀子的样品, 照供试品溶液的制备项下方法处
理,即得阴性供试品溶液。
2 4 5 线性范围的考察: 分别精密量取 0 217 2
mg/ mL 栀子苷对照品贮备液 0 2、1 0、2 0、3 0、
4 0 mL, 置 10 mL 量瓶中, 用 50%甲醇稀释至刻
度,摇匀, 分别进样 20 L, 记录色谱图, 读取峰面
积,以进样质量为横坐标, 峰面积为纵坐标作图, 得
回归方程 Y = 1 586 3 X - 5 082 4( r = 1 000 0)。
结果表明进样量在 0 086 9~ 1 737 6 g 与峰面积
呈良好的线性关系。
2 4 6 专属性试验:在选定的条件下, 分别取供试
品溶液、对照品溶液和阴性对照溶液各 20 L,注入
液相色谱仪, 记录色谱图。结果表明阴性对照在栀
子苷色谱峰位置处无相应峰出现, 对测定结果无影
响。见图 4。
2 4 7 精密度试验: 取鼻渊舒软胶囊样品 (批号
050128) 1份,制备供试品溶液, 连续进样 6次,在以
上色谱条件下记录栀子苷的峰面积, 计算 RSD 值,
结果 RSD值为 0 08%。
2 4 8 稳定性试验: 取鼻渊舒软胶囊样品 (批号
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* 栀子苷
* jasmin oidin
图 4 栀子苷对照品( A)、鼻渊舒软胶囊供试品( B)和阴性对照(C)的 HPLC图谱
Fig 4 HPLCChromatograms of jasminoidin reference substance ( A) , Biyuanshu Soft Capsula (B) , and negative sample (C)
050128) 1份,制备供试品溶液, 同时取一定质量浓
度的栀子苷对照品溶液, 分别在 0、1、2、4、8、12、24
h进样测定,计算 RSD,结果对照品中栀子苷峰面积
RSD值为 0 22%; 样品中栀子苷峰面积 RSD 值为
0 13%, 表明对照品溶液和供试品溶液在室温放置
24 h内稳定。
2 4 9 重现性试验: 取批号 050128 鼻渊舒软胶囊
样品,研匀,精密称取 6份,制备供试品溶液, 进行测
定栀子苷峰面积,并计算栀子苷的质量分数, 结果栀
子苷的 平均 质 量分 数 为 6 22mg / g, RSD 值
为 0 36%。
2 4 10 回收率试验:取批号 050128鼻渊舒软胶囊
样品内容物约 0 1 g, 置 100 mL 具塞锥形瓶中, 加
入 0 230 4 mg / mL 栀子苷对照品溶液 2 0 mL, 精
密加入 50%甲醇 50 mL, 制备供试品溶液, 进样, 测
定,计算回收率, 结果平均回收率为 99 78% , RSD
值为 0 81% ( n= 6)。
2 4 11 样品的测定结果: 取批号 050128、050129、
050130鼻渊舒软胶囊样品, 制备供试品溶液。取供
试品溶液和栀子苷对照品溶液各 20 L,进样测定,
采用外标法计算栀子苷的质量分数,结果见表 1。
表 1 鼻渊舒软胶囊中栀子苷的测定结果( n= 2)
Table 1 Determination of jasminoidin in Biyuanshu
Sof t Capsula (n= 2)
批号 栀子苷/ ( mg ! g- 1 )
050128 619
050129 614
050130 625
鼻渊舒软胶囊为依照已有国家标准的品种鼻渊
舒胶囊的改剂型品种, 提取工艺与原工艺一致, 工艺
为无质的改变。#中国药典∃2005 年版一部规定栀
子药材中含栀子苷不得低于 1 8%。鼻渊舒胶囊质
量标准中规定含有栀子苷不得少于 3 5 mg /粒, 故
暂定本品中含有栀子苷也不得少于 3 5 mg/粒。
3 讨论
3 1 最大吸收波长的选择[ 5] :取栀子苷对照品溶液
适量,加流动相制成的质量浓度为 0 04 mg / mL 对
照品溶液, 在 200~ 400 nm 波长测定紫外吸收光
谱。结果在 239 5 nm 处有最大吸收峰, 因此选择
239 nm 作为测定波长。
3 2 供试品溶液的制备条件的考察:取样品分别加
入 50%甲醇、70%甲醇, 采用振摇、超声和温水浴上
溶解的不同提取方法进行处理, 放置室温, 称定质
量,用原溶剂补足质量, 摇匀。取上清液滤过,取续
滤液进行测定,结果振摇、超声、加热溶解 3种方法
无显著性差异,但是供试品溶液的加热溶解较超声
处理容易滤过,故选定快速、方便的加热溶解作为样
品的提取方法,同时采用 50%甲醇作为提取溶剂。
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