全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 10 期 2011 年 10 月

• 2110 •
不同
冷晓红1，马 玲 王俊卿3 华2
1. 宁夏职业技术学院，宁夏 银 21
2. 回族自治区 检验所， 银川 75000
3. 宁夏回族自治区中医研究院，宁夏 75000
摘 研究苦豆草中各生物碱的量随物候期的变化规律，确定苦豆草的合理采收期。方法 采用
候期苦豆草中主要生物碱的量进行系统分析。色谱条件 -Brige C18 ×4.6 mm，5 μm）， （A）-0.05
mol/L 二氢钾（B） 动相， 脱，0～10 m 10～50 m ；50～55 min，94% 205
nm，体积流量 1.0 mL/ in，进样 25 苦豆草中不同生物碱的量随物候期呈现不同规律的变化，
其中氧化槐果碱、槐胺碱量从 5 月至 递减；槐定碱 参碱量从 5 递增；而苦参碱、槐 量
随物候期的变化不明显。 可根据苦豆草中各生物碱量随物候期的动态变化规律为工业化生产不同生物碱而确定苦豆草
的合理采收期。
关键词：苦豆草；生物碱；物候期；采收期；动态变化；高效液相色谱法
中图分类号：R282.2 文献标志码：A 文章编号： 01 10 - 04
Dynamic changes of alka content in aerial part of Sophora alopecuroides
at different phenological phases
2
1. Ningxia Vocational and Technical College, Yinchuan 750021, China
n 75
conten
ent
n (2
, 94
5 ℃
l phases, which the contents
oxym e, so
r the
s i ase
苦豆子So ora alo oi L. 科槐属植
用部位为花期的干燥地上部分，称为“苦
豆草”。
生物碱系列产品的工业化生产。
植物体内生物碱的组成和量的变
物碱的方法未见报道。
物候期苦豆草中主要生物碱量的动态变化研究
2， ，王英
川 7500
宁夏 药品 宁夏 1
银川 4
要：目的 HPLC法对不同物
为色谱柱X （250 mm 以乙腈
磷酸 为流 梯度洗 in，94% B； in，87% B B。检测波长
m 量 10 μL，柱温 ℃。结果
7 月 、氧化苦 月至 7 月 果碱、莱曼碱的
结论
0253 - 2670(2 1)10 - 21
loid
LENG Xiao-ho ing -qing , WANG Ying-huang1, MA L 2, WANG Jun 3
2. Ningxia Institute of Drug Control, Yinchuan 750001, China
3. Ningxia Acdemy of Traditional Chinese Medicine, Yinchua
Abstract: Objective To study the dynamic changes of alkaloids
phases and to define a reasonable harvest. Methods The cont
analysed by HPLC. Chromatographic column: X-Brige C
0004, China
t of Sophora alopecuroides with the variation of phenological
of main alkaloids from the different phenological phases were
50 mm × 4.6 mm, 5 μm); Mobile phase: acetonitrile (A) and 0.05
% B; 10—50 min, 87% B; 50—55 min, 94% B); Flow rate: 1.0
. Results The content of different alkaloids show different
of oxysophocarpine decreased from May to July; sophoridine,
phocarpine and lehmannine with the phenological phases did not
appropriate harvest stage for the different alkaloids in industrial
s; harvest stage; dynamic changes; HPLC
化受多种因素
的影响，如产地、物候期、土壤等。苦豆草作为重
要的中药资源，有关其不同物候期生物碱组成和量
变化的研究尚未见报道。目前关于苦豆草单体生物
碱的报道较多
18 colum
mol/L phosphoric acid solution (B), gradient elution: (0—10 min
mL/min; Wavelength: 205 nm; The column temperature: 2
variations with changes in phenologica
atrine, and sophoramine increased from May to July; matrin
change significantly. Conclusion The results provide a basis fo
production.
Key words: Sophora alopecuroide L.; alkalo ds; phenological ph

ph pecur des 为豆
物，其药
苦豆草中含有 20 余种生物碱[1]，以苦豆草
为原料提取苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱等成分，
制成了苦参素胶囊、妇炎栓等制剂，形成了苦豆子

[2-10]，但采用HPLC法同时测定 7 种生

收稿日期：2011-01-13
基金项目：宁夏“十一五”科技攻关项目（宁科计字(2006)74 号）
作者简介：冷晓红，女，宁夏职业技术学院教授，长期从事药用植物的 与科研工作，获国家科技进步二
Tel: (0951)5049263

教学 等奖 1 项、省科技进步一等奖 1 项。
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 10 期 2011 年 10 月

• 2111 •
目筛，备用。

A 自动进样器，
3 测器，G1311A
2 方
2.1
μm） 磷酸二氢钾（B）
50 m
05 n 流量 1.0 mL/min，进样量 10 μL，
25 ℃。理论塔板数按槐定碱计不低于 8 000。
色谱图见图 1。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取槐定碱对照品 9.51 mg、氧化苦参碱
对照品 10.46 mg、氧化槐果碱对照品 9.95 mg、苦
参碱对照品 13.01 mg、槐果碱对照品 11.33 mg、莱
曼碱对照品 10.19 mg、槐胺碱对照品 13.49 mg 分别
置 10 mL 量瓶中，甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，
制成对照品溶液。精密量取槐定碱、氧化苦参碱、
氧化槐果碱对照品溶液各 3 mL，苦参碱、槐果碱、
莱曼碱对照品溶液各 0.2 mL，槐胺碱对照品溶液 1
mL，置 25 mL 量瓶中，甲醇定容至刻度，得混合
对照品溶液。


1-槐
6-莱
图 1

and sample al part of S. alopecur (B)
10% h，加入甲醇 20
甲醇
即得
2.4 线性关系考察
分别精密量取“2.2”项下的混合对照品溶液
2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、10.0 mL 至 10 mL 量瓶
中，甲醇稀释至刻度，摇匀。按上述色谱条件进
行测定，以质量浓度为横坐标（X），峰面积为纵
坐标（Y），绘制标准曲线，见表 1。
2.5 精密度试验
精密吸取混合对照品溶液10 μL，重复进样6次，
测定，所得槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦
参碱、槐果碱、莱曼碱和槐胺碱峰面积的 RSD 分别
为 0.9%、0.8%、0.7%、1.2%、1.3%、0.7%、0.3%。
2.6 稳定性试验
精密吸取供试品（2006 年 6 月）溶液，按上述
本实验通过采用高效液相色谱法同时测定苦
豆草中主要的 7 种生物碱量，确定了苦豆草中主要
生物碱量在不同物候期（5～7 月）的变化规律，以
期为有效地利用苦豆子资源，降低生产成本提供科
学依据。
1 材料与仪器
1.1 材料
苦参碱（批号 110805-200306）、氧化苦参碱（批
号 0780-200004）、氧化槐果碱（批号 111652-200301）、
槐定碱（批号 110784-200303）均购于中国药品生
物制品检定所；槐果碱（质量分数为 99.5%）、莱曼
碱（质量分数为 99.5%）和槐胺碱（质量分数为
99.5%）由宁夏紫荆花药业公司提供。乙腈、磷酸
二氢钾为色谱纯，其他试剂均为分析纯。苦豆草药
材采于宁夏盐池县，经宁夏药品检验所邢世瑞主任
药师鉴定为苦豆子 Sophora aLopecuroides L. 的地
上部分，即“苦豆草”。采集阴干后，粉碎过 40
1.2 仪器
高效液相色谱仪为 Agilent 1100 系列，包括
100 色谱 作站，G1313Agilent 1 工
G1 16A 柱温箱，GB15B 二极管阵列检
四元泵，G1379A 脱气机（美国 Agilent 公司）。
法与结果
色谱条件
色谱柱X-Brige C18（250 mm×4.6 mm，5
，以乙腈（A）-0.05 mol/L
为流动相，梯度洗脱：0～10 min，94% B；10～
in，87% B；50～55 min，94% B。检测波长
m，体积2
柱温
定碱 2-氧化苦参碱 3-氧化槐果碱 4-苦参碱 5-槐果碱
曼碱 7-槐胺碱
ophoridine 2-oxyma1-s trine 3-oxysophocarpine 4-matrine
5-sophocarpine 6-lehmannine 7-sophoramine
对照品（A）与苦豆草样品（B）的 HPLC 色谱图
Fig. 1 HPLC chromatograms of reference substances (A)
s in aeri oides
2.3 供试品溶液的制备
精密称取苦豆草细粉约 0.5 g，置锥形瓶中，加
氢氧化钠溶液 0.5 mL，浸润 12
mL，称定质量，超声处理 40 min，放置至室温，
补足减失的质量，摇匀，0.45 μm 滤膜滤过，
供试品溶液。

A
0 10 20 30 40 50
1
2 3
4 5
6 7
1
2
3
4 5 6 7
0 1
B
0 20 30 40 50
t / min
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 10 期 2011 年 10 月

• 2112 •
表 1 线性关系考察
对照品 回归方程 r
Table 1 Results of linear
线性范围
槐定碱 X ～1.141 μg Y＝41.778 －93.592 0.999 7 0.228
氧化苦参碱 g
氧化槐果碱 g
苦参碱 Y＝47.813 X－73.371 0.999 3 0.021～0.100 μg
Y＝40.354 X－265.525 0.999 1 0.251～1.225 μ
Y＝43.251 X－119.271 0.999 2 0.259～1.194 μ
槐果碱 Y＝53.540 X－97.413 0.999 5 0.018～0.091 μg
莱曼碱 Y＝27.203 X－110.721 0.999 1 0.016～0.081 μg
槐胺碱 Y＝39.802 X－123.167 0.999 7 0.108～0.539 μg
色谱条件进样测定，分别于 0、4、8、12、16、20 h
进样，槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱、
槐果碱、莱曼
2.9 样品测定
精密称取不同物候期的苦豆草样品，按上述方
法测定，得到宁夏产不同物候期的苦豆草中 7 种生
物碱量的动态变化情况，结果见表 2。
测定结果显示，苦豆草主要生物碱氧化槐果碱
碱和槐胺碱峰面积的 RSD 分别为
2.7 重现性试验
，结
果槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果
碱
0.6
2.8
醇补足减失的质量，摇匀，过 0.45 μm 滤膜，即得
计算回收
率，槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱、
槐果碱、莱曼碱和槐胺碱的平均回收率分别为
96.8%、97.4%、93.6%、100.1%、99.8%、96.2%、
101.1%；RSD 分别为 2.2%、1.8%、2.7%、3.2%、
2.9%、1.4%、2.2%。
（0.22%～0.51%）、氧化苦参碱（0.27%～0.51%）、
0.18%～0.40%）的量较高，而苦参碱
（0.01%～0.03%）、莱曼
碱（0.02%～0.04%）、槐胺碱（0.04%～0.10%）的
递减；槐定碱、氧化苦参碱量从 5 月至 7 月递增；
而苦参碱、槐果碱、莱曼碱的量随物候期的变化不

205～207 nm均有最大吸收波长，

1.4%、1.0%、0.9%、0.5%、0.4%、0.6%、0.3%， 槐定碱（
结果表明供试品溶液在 24 h 内稳定。 （0.02%～0.06%）、槐果碱
分别取同一批供试品（2006 年 6 月）6 份各约 0.5 量较低。其中氧化槐果碱、槐胺碱量从 5 月至 7 月
g，按“2.3”项下的方法制备供试品溶液，测定
、莱曼碱和槐胺碱质量分数的 RSD 值分别为 1.4%、 明显。
%、1.6%、1.3%、1.9%、1.6%、2.0%。 3 讨论
加样回收率试验
精密称取苦豆草（2006 年 6 月）细粉 0.25 g 共
7种生物碱在
故选择其为测定波长。
9 份，置具塞锥形瓶中，加 10%氢氧化钠溶液 0.5 mL
浸润 12 h 后，3 份为 1 组，每组分别精密加入混合
对照品溶液 0.2、0.5、0.8 mL 及甲醇至 20 mL，密
塞，称定质量，超声处理 40 min，放置至室温，甲
在试验中比较了不同流动相体系和不同梯度
比例的流动相，结果确定了本实验的流动相体系，
7 种成分与其他成分可以得到较好的分离。
从苦豆草中提取的苦参碱、氧化苦参碱、槐果
表 2 不同物候期苦豆草样品测定结果 (n＝3)
Table 2 Determination of alkaloids in aerial part of S. alopecuroides at different phenological phases (n＝3)
不同物候期 槐定碱/% 氧化苦参碱/% 氧化槐果碱/% 苦参碱/% 槐果碱/% 莱曼碱/% 槐胺碱/%
加样回收样品液。按上述色谱条件测定，
2006-05 0.18 0.35 0.51 0.02 0.02 0.02 0.10
2006-06 0.25 0.42 0.33 0.02 0.02 0.02 0.08




2008-05 0.23 0.32 0.48 0.03 0.02 0.10
2008-06 0.34 0.44 0.35 0.05 0.02 0.07
0.22 0.02 0.05
3 年 0.20 0.31 0.50 0.02 0.02 0.03 0.09
3 年 0.03 0.02 0.03 0.07
3 年平均（
2006-07 0.40 0.51 0.29
2007-05 0.18 0.27 0.51
2007-06 0.25 0.31 0.32
2007-07 0.28 0.39 0.29
0.05 0.03 0.02 0.06
0.02 0.01 0.03 0.06
0.02 0.02 0.04 0.05
0.04 0.02 0.03 0.04
0.03
0.02
0.06 0.03 2008-07 0.38 0.48
平均（5 月）
平均（6 月） 0.28 0.39 0.33
7 月） 0.35 0.46 0.27 0.05 0.03 0.02 0.05
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 10 期 2011 年 10 月

• 2113 •
碱、
的生产目的决定植物原料采收季节。本
苦豆子系列生物碱提供了合理依
化种植、合理采收有重要意义。
参考

[6] 宋玉琴, 魏玉辉, 武新安. RP-HPLC 法测定苦豆子总碱
注射液中槐定碱、苦参碱和槐果碱的含量 [J]. 兰州大
学学报: 医学版, 2007, 33(4): 24-26.
[7] 王淑君, 陈 丰, 姚崇舜. 苦豆子中生物碱的药物动力
学研究 [J]. 中草药, 2000, 31(5): 附 1-附 2.
[8] 乔 华, 王 婷, 梁 莉, 等. 苦豆子总碱注射液中苦
参碱和槐果碱的含量测定 [J]. 兰州大学学报: 医学版,
2007, 33(3): 59-61.
[9] 李 莉, 张文学, 张顺利. 苦豆子生物碱的免疫调节作
用及其作用机制研究进展 [J]. 中草药, 2007, 38(4):
7-附 8.
[10] 宋玉琴, 魏玉辉, 刘文静, 等. HPLC 法同时测定苦豆
子乳膏中槐定碱、苦参碱和槐果碱的含量 [J]. 中国药
房, 2008, 19(24): 1878-1879.
[11] 李艳艳, 冯俊涛, 张 兴, 等. 苦豆子化学成份及其生物
活性研究进展 [J]. 西北农业学报, 2005, 14(2): 133-136.
[12] 张清云, 张国荣, 尹长安, 等. 宁夏苦豆子药用植物资
源保护与开发 [J]. 世界科学技术—中医药现代化 ,
2006, 8(1): 104.
社 售
于
《 物与临
《 （2009 年由《中文科技资料目录•中草药》改刊
志合订本：1974—1975 年、1976 年、 （80 元/年），1996、1997
年（ 元/年），
06
元
9 年
临床》合订本：2009 年（100 元/年）。
：1996—2008 年（

药
天津市南开区鞍山西道 308 号 网 址：
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传 真： 账 号： 0081504
：zcy@tiprpress.com 户 名：
槐定碱等国内已形成产业化，其相应的制剂已
应用于临床[11-12]。但有关其不同物候期生物碱组成
和量变化的研究尚未见报道。本研究结果表明，不
同生物碱的量在不同的物候期变化规律不同，因此
可根据不同
研究结果为开发
据，对规范
文献
[1] 邢世瑞. 宁夏中药志 [M]. 第 2 版. 银川: 宁夏人民出
版社, 2005.
[2] 高剑峰. 苦豆子生物碱的成份分析及提取工艺的研究
[J]. 石河子大学学报: 自然科学版, 1997, 1(2): 109-111.
[3] 秦学功, 元英进. 高效薄层色谱分离苦豆子生物碱的体
系优化 [J]. 中草药, 2002, 33(6): 513.
[4] 张建华, 乌 云, 侯建华, 等. 苦豆子中生物碱含量测
定方法新探 [J]. 中草药, 1997, 28(8): 465-467.
[5] 杨文远, 杨宁莲, 王天勇. HPLE 法同时测定苦豆子中苦
参碱与氧化苦参碱 [J]. 宁夏大学学报, 1996, 17(4): 13-15.

附

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