全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 7 期 2011 年 7 月

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HPLC 法测定鲜地黄中梓醇和桃叶珊瑚苷
马运明 1，郭建华 2, 3，田成旺 3，张铁军 3
1. 天津市疾病预防控制中心，天津 300011
2. 天津医科大学，天津 300070
3. 天津药物研究院，天津 300193
摘 要：目的 建立 HPLC 法测定鲜地黄中梓醇及桃叶珊瑚苷的方法，对鲜地黄进行质量控制。方法 采用 HPLC 法对鲜
地黄中梓醇及桃叶珊瑚苷进行定量测定。结果 线性回归方程分别为梓醇 Y＝43 800 X＋2 849.2，r＝0.999 9；桃叶珊瑚苷 Y＝76 163
X＋1 676.1，r＝0.999 9；梓醇和桃叶珊瑚苷线性范围分别为 0.19～2.375 μg、0.152～1.90 μg，回收率分别为 99.00%和 99.38%。
结论 该方法准确、重现性好，可以作为鲜地黄的质量控制方法。
关键词：鲜地黄；梓醇；桃叶珊瑚苷；高效液相色谱；质量控制
中图分类号：R286.02 文献标志码：B 文章编号：0253 - 2670(2011)07 - 1348 - 03
Determination of catalpol and aucubin in fresh Rehmannia glutinosa by HPLC
MA Yun-ming1，GUO Jian-hua2, 3，TIAN Cheng-wang3，ZHANG Tie-jun3
1. Center for Disease Control and Prevention of Tianjin, Tianjin 300011, China
2. Tianjin Medical University, Tianjin 300070, China
3. Tianjin Institute of Pharmaceutical Research, Tianjin 300193, China
Key words: fresh Rehmannia glutinosa Libosch.; catalpol; aucubin; HPLC; quality control

追溯人类医药的起源，人类最早应用于防治疾
病、保障健康的药物是自然界生长的鲜活植物，就
是所说的“鲜药”。鲜药一般指的是未经任何改变或
损失，在采收后即行使用的中药原料，在国内外均
有悠久的药用历史。鲜药具有活性成分丰富、质量
好、疗效快等特点。但由于不易保存，限制了其在
临床上广泛应用。鲜药材具有不同于其炮制品的独
特药性与疗效，所以对于鲜药材的开发利用将成为
中药开发的热点之一。
地黄为玄参科植物地黄 Rehmannia glutinosa
Libosch. 的块根，根据炮制方法的不同，分鲜地
黄、生地黄和熟地黄[1-3]。地黄中主要降糖活性成
分为环烯醚萜类成分，梓醇及桃叶珊瑚苷为其代
表性成分 [4]。此类化合物结构类似，极性较大，
易溶于水，热稳定性较差。研究发现地黄从鲜品
加工成生地及熟地，梓醇量下降 1/10，甚至更低[5]。
桃叶珊瑚苷热敏性更强，极易分解而发生变化[6]。
目前，对于地黄的研究主要集中在其炮制品上，
而对于鲜地黄中主要活性成分的控制尚无报道。
本实验采用 HPLC 法测定鲜地黄中梓醇及桃叶珊
瑚苷的量，结果可靠准确，可作为鲜地黄药材质
量控制的定量方法。
1 仪器与材料
Lab Alliance 高效液相色谱仪，SeriesⅡ二元泵
系统，Lab Alliance色谱工作站；Diamonol C18柱（200
mm×4.6 mm，5 μm）。
Sartovius 电子天平（十万分之一天平）；Mettler
Toledo 电子天平（万分之一天平）（Mettler Toledo
公司）。Autoscience（AS3120）超声仪（奥特宝恩
斯仪器有限公司）。
鲜地黄药材购自河南怀庆、山东菏泽、河北安
国，经天津药物研究院张铁军研究员鉴定为
Rehmannia glutinosa Libosch.的新鲜块根。
梓醇及桃叶珊瑚苷对照品购自中国药品生物制
品检定所，质量分数为 99%。甲醇、乙腈均为色谱
纯，乙醇、磷酸均为分析纯，去离子水。

收稿日期：2011-01-15
作者简介：马运明（1955—），男，主任技师，天津市疾病预防控制中心，从事保健食品卫生检验。
Tel: 13323360261 E-mail: mayunming68@163.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 7 期 2011 年 7 月

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2 方法与结果
2.1 色谱条件
2.1.1 梓醇测定的色谱条件 Diomonsil C18 柱（200
mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈–0.1%磷酸水
（1∶99），检测波长为 210 nm，体积流量 1 mL/min，
柱温 35 ℃。理论塔板数按梓醇峰计不少于 4 000。
色谱图见图 1。
2.1.2 桃叶珊瑚苷测定的色谱条件 Diomonsil C18
柱（200 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇–水
（5∶95），检测波长为 205 nm，体积流量 1 mL/min，
柱温 25 ℃。理论塔板数按桃叶珊瑚苷计不少于
5 000。色谱图见图 2。

﹡梓醇
﹡catalpol
图 1 梓醇对照品（A）及样品（B）HPLC 色谱图
Fig. 1 HPLC chromatograms of catalpol refernce
substance (A) and sample (B)

﹡桃叶珊瑚苷
﹡aucubin
图 2 桃叶珊瑚苷对照品（A）及样品（B）HPLC 色谱图
Fig. 2 HPLC chromatograms of aucubin reference
substance (A) and sample (B)
2.2 对照品溶液的制备
分别精密称取梓醇及桃叶珊瑚苷对照品适量，
置于 10 mL 量瓶中，加流动相定容，摇匀，得对照
品溶液，梓醇为 0.19 mg/mL，桃叶珊瑚苷为 0.152
mg/mL。
2.3 供试品溶液的制备
取鲜地黄药材洗净擦干表面水分，去除须根后
切成 2～4 mm 细丝。精密称定上述鲜地黄细丝 2.0 g
置于具塞锥形瓶中，精密加入 20%乙醇 25 mL，称
质量，超声提取 30 min，用 20%乙醇补足减失质量，
取提取液经 0.45 μm 滤膜滤过，即为供试品溶液。
2.4 线性关系的考察
取梓醇及桃叶珊瑚苷对照品溶液，分别精密吸
取 1、2.5、5、7.5、10、12.5 μL 按上述色谱条件
进样，以梓醇及桃叶珊瑚苷的峰面积值为纵坐标
（Y），质量浓度为横坐标（X）绘制标准曲线，得
梓醇回归方程 Y＝43 800 X＋2 849.2，r＝0.999 9，
线性范围为 0.19～2.375 μg；桃叶珊瑚苷回归方程
为 Y＝76 163 X＋1 676.1，r＝0.999 9，线性范围为
0.152～1.90 μg。
2.5 精密度试验
精密吸取梓醇及桃叶珊瑚苷对照品溶液，重复
进样 6 次，梓醇 10 μL、桃叶珊瑚苷 2.5 μL，分别
测定峰面积积分值，结果梓醇峰面积的 RSD 为
1.28%，桃叶珊瑚苷峰面积的 RSD 为 1.77%。
2.6 稳定性试验
取同一份供试品溶液分别在配制后 0、2、4、8、
12、24 h 进样，记录峰面积积分值，结果梓醇峰面
积的 RSD 为 2.91%，桃叶珊瑚苷峰面积的 RSD 为
1.55%，结果表明样品溶液在 24 h 内稳定。
2.7 重现性试验
取同一鲜地黄药材，按供试品溶液制备方法平
行制备 6 份，分别进样测定，计算其质量分数，求
得梓醇和桃叶珊瑚苷的 RSD 分别为 1.28%和
2.23%。
2.8 加样回收率试验
2.8.1 梓醇加样回收率试验 平行取含梓醇 4.0%（按
干质量计）的鲜地黄药材 1.00 g 6 份，精密加入梓醇
对照品 10.00 mg，按供试品溶液制备方法制备，对照
品进样 10 μL，样品进样 5 μL，计算其平均回收率为
99.00%，RSD 为 1.55%。
2.8.2 桃叶珊瑚苷加样回收率试验 平行取含桃叶
珊瑚苷量为 0.15%（按干质量计）的鲜地黄药材 1.00
g 6 份，精密加入桃叶珊瑚苷对照品 0.325 mg，按
供试品溶液制备方法制备，对照品进样 2.5 μL，样
品进样 20 μL，计算其平均回收率为 99.38%，RSD
为 1.70%。
2.9 样品测定
取 3 个产地，6 批药材制备供试品溶液，分别
进样 5 μL 和 20 μL，测得梓醇及桃叶珊瑚苷的峰面

2 4 6 8 10 12 14 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
﹡ ﹡
A B
4 6 8 10 12 14 16 18 4 8 12 16 20 24
t / min
﹡ ﹡
A B
t / min
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积，计算梓醇及桃叶珊瑚苷的质量分数（按干质量
计）。见表 1。
表 1 样品测定结果
Table 1 Determination of samples
批号 产地 梓醇/% 桃叶珊瑚苷/%
101115 河南怀庆 4.01 0.15
101116 山东菏泽 4.24 0.18
101117 河北安国 4.18 0.16
110409 河南怀庆 3.58 0.13
110410 山东菏泽 3.86 0.16
110411 河北安国 3.67 0.17
3 讨论
梓醇及桃叶珊瑚苷均为环烯醚萜苷类化合物，
极易溶于水，但易受酶和温度的影响。在供试品制
备过程中，考察了水和 20%、50%、70%乙醇 4 种溶
剂进行超声提取，提取液滤过，作为供试品溶液，
进样测定梓醇及桃叶珊瑚苷的峰面积，结果 20%乙
醇提取效果最佳，故采用本法制备供试品溶液。
由于 2010 版《中国药典》仅有关于鲜地黄药材
的性状标准，并没有其活性成分的定量测定方法，
无法控制鲜地黄药材的内在质量。本实验对鲜地黄
中环烯醚萜苷类主要活性成分梓醇及桃叶珊瑚苷进
行了定量测定，所建立的方法简单、准确，可作为
鲜地黄药材质量控制的定量测定方法，为进一步开
发鲜地黄的成药性奠定了一定的基础。
参考文献
[1] 叶定江, 张世臣. 中药炮制学 [M]. 北京: 人民卫生出
版社, 1999.
[2] 邱建国, 张汝学, 贾正平, 等. HPLC 法测定地黄及含
地黄成药中寡糖 [J]. 中草药, 2010, 41(12): 1997-2000.
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化研究 [J]. 中草药, 2008, 39(8): 1167-1171.
[4] 李更生, 于 震, 王慧森, 等. 地黄化学成分与药理研
究进展 [J]. 国外医学中医中药分册 , 2004, 26(2):
74-78.
[5] 张慧芳. 不同炮制方法对地黄中糖类及梓醇含量影响
研究概况 [J]. 实用中医药杂志, 2009, 25(7): 1-2.
[6] 赵 晔, 杨腊虎, 孙文基, 等. 桃叶珊瑚苷的热稳定性
研究 [J]. 药物分析杂志, 2006, 26(6): 734-736.



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