全 文 ：2014 第十六卷 第五期 ★Vol.16 No.5
〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica〕
收稿日期：2013-12-04
修回日期：2014-05-14
＊ 四川省食品药品监督管理局《四川省藏药材标准》（2014 年版）专项研究资金：四川省藏药材标准研究——毛果婆婆纳质量标准研究，
负责人：杨安东。
＊＊ 通讯作者：崔红梅，助理研究员，主要研究方向：中药化学和质量评价研究。
HPLC测定不同产地毛果婆婆纳中
桃叶珊瑚苷和梓醇含量＊
崔红梅＊＊，杨安东，罗 恒
（四川省中医院科学院 成都 610041）
摘 要：目的：建立 HPLC测定不同产地毛果婆婆纳中桃叶珊瑚苷和梓醇含量的方法。方法：采用外标
法，Gemini C18（110 A°，4.60 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，乙腈-水（3∶97）流动相洗脱，流速 1.0 mL·min-1，柱
温 25℃，检测波长 203 nm。结果：测得 11 个产地毛果婆婆纳中桃叶珊瑚苷和梓醇含量最高分别为 6.82、
8.18 mg·g-1，最低 1.01、1.28 mg·g-1，平均含量 4.95、4.16 mg·g-1。不同产地毛果婆婆纳中桃叶珊瑚苷和梓
醇含量由于土壤、海拔、等各种因素影响差异明显。结论：该方法简便易行，结果准确、可靠，可用于对毛果
婆婆纳药材进行质量控制。
关键词：毛果婆婆纳 桃叶珊瑚苷 梓醇 含量测定 高效液相色谱
doi: 10.11842/wst.2014.05.014 中图分类号：R284.1 文献标识码：A
毛果婆婆纳（Veronica eriogyne H. Winkl）为玄
参科（Scrophulariaceae）婆婆纳属植物，分布于我国
西北各地及四川、西藏 [1,2]，为西北高海拔及高寒植
物。全草可入药，具有清热解毒、祛风利湿等功效，
主治肝炎、胆囊炎、风湿痛、荨麻疹等 [1]。根据文献记
载，苯乙醇苷类和环烯醚萜苷类化合物是婆婆纳属
植物中含有的主要化学成分 [3]，具有广泛的药理作
用 [4]，但毛果婆婆纳药材活性成分含量测定尚未见
报道。本研究建立了 HPLC 测定毛果婆婆纳中桃
叶珊瑚苷和梓醇含量的方法，对采自四川理塘、康
定等 11 个不同产地的毛果婆婆纳药材进行了桃
叶珊瑚苷和梓醇含量的测定，为药用植物毛果婆婆
纳质量评价提供科学依据。
1 仪器与试药
Agilent 1200型高效液相色谱仪系统，由 G1311A
四元梯度泵、G1315D 型二极管阵列检测器、G1329A
型全自动进样器、ChemStation 高效液相色谱化学工
作站组成（美国安捷伦公司）；XS205DU 电子天平
（瑞士梅特勒—托利多公司）；UV-2401PC 紫外分光
光度计（日本岛津公司）。乙腈为色谱纯（Fisher 公
司），水为超纯水，其余试剂为分析纯。桃叶珊瑚苷
对照品（批号：111761-200601，含量测定用，中国药
品生物制品检定所），梓醇对照品（批号：110808-
201009，含量测定用，中国食品药品检定研究院）。
11 批样品均采自主产区，经四川省中医药科学院
资源与种植研究所方清茂副研究员鉴定为玄参科
婆婆纳属植物毛果婆婆纳（V. eriogyne H. Winkl）的
全草。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
分别精密称取梓醇和桃叶珊瑚苷对照品适量，
用流动相配制成浓度分别为 50.76 mg·L -1、46.60
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mg·L-1的对照品溶液。
2.2 供试品溶液的制备
取毛果婆婆纳药材粉末（过三号筛）约 0.5 g，
精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 10%乙醇 25
mL，称定重量，超声处理（功率 250 W，频率 40
kHz）60 min，放冷，用 10%乙醇补足减失的重量，摇
匀，滤过，取续滤液 5 mL，蒸干，以流动相溶解并定
容到 5 mL，0.45 μm 滤膜滤过，取续滤液作为供试
品溶液。
2.3 色谱条件及系统适应
性试验
色 谱 柱 ：Gemini C18
（110 A°，4.60 mm×250 mm，5
μm）；柱温：25℃；检测波长：
203 nm；流动相：乙腈-水（3∶
97）；流速：1.0 mL·min-1。
在上述色谱条件下，
精密吸取供试品溶液 10
μL 注入液相色谱仪，理论
塔板数按桃叶珊瑚苷峰
计，均不低于 14 000，梓醇
与相邻色谱峰的分离度为
3.52，对称因子为 0.98；桃
叶珊瑚苷与相邻色谱峰的
分离度 1.46，对称因子
0.97。对照品和毛果婆婆纳
样品 HPLC 色谱图见图 1。
2.4 方法专属性（峰纯度
检查）
为检查样品 HPLC 色
谱峰是单个还是多个成
分，采用二极管阵列检测
器对主峰梓醇和桃叶珊瑚
苷的峰纯度进行检查。结
果纯度因子均大于 995.00
（阈值）。
2.5 线性关系考察
分别精密吸取对照品
溶 液 2、5、10、20、50、100
μL 注入液相色谱仪，记录
峰面积。以峰面积（A）为纵
坐标，以进样量（M）为横
坐标，进行线性回归，得梓醇、桃叶珊瑚苷线性回归
方程分别为：A = 770.0M + 8.785（r=1），A = 861.2
M + 7.858（r=1），梓醇、桃叶珊瑚苷分别在 0.1015~
5.076 μg、0.0932~4.66 μg 范围内与峰面积呈良好
线性关系。
2.6 精密度试验
精密吸取对照品溶液 10 μL，连续进样 6 次，记
录峰面积，计算梓醇峰面积 RSD 为 0.02%，桃叶珊
瑚苷峰面积 RSD 为 0.03%，表明仪器精密度良好。
图 1 对照品及毛果婆婆纳样品 HPLC 色谱图
注：A.梓醇对照品色谱图，B.桃叶珊瑚苷对照品色谱图，C.样品色谱图；1.梓醇，2.桃叶珊瑚苷。
A
B
C
1
2
21
2 4 6 8 10 12 14 min
2 4 6 8 10 12 14 min
2 4 6 8 10 12 14 min
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2.7 重复性试验
取同批样品粉末约 0.5 g，共 6 份，精密称定，
按“2.2”项下方法制备供试品溶液，在“2.3”色谱条
件下进行分析，计算梓醇、桃叶珊瑚苷含量，结果梓
醇含量 RSD 为 1.4%，桃叶珊瑚苷含量 RSD 为
0.74%，表明该方法重复性良好。
2.8 稳定性试验
取同一份供试品溶液，在室温下放置，分别于
0、2、4、8、12 h 进样分析，记录色谱峰，结果梓醇和
桃叶珊瑚苷峰面积 RSD 分别为 1.9%、0.35%，表明
供试品溶液室温放置 12 h 内稳定。
2.9 加样回收率试验
取已知含量的同批样品粉末 6 份，精密称定，
分别精密加入一定量的桃叶珊瑚苷和梓醇对照品
溶液，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，按上述色
谱条件测定，计算回收率，结果见表 1。
2.10 样品含量测定
取 11 批样品各 2 份，按“2.2”项下方法制备供
试品溶液，在“2.3”色谱条件下进行分析，计算梓
醇、桃叶珊瑚苷含量，结果见表 2。
3 讨论
3.1 提取方法的选择
分别考察了甲醇、50%乙醇、10%乙醇、乙腈-水
（3 ∶97）、水等不同提取溶剂；超声、回流等不同提取
方式；15、30、60 min 不同提取时间；提取次数为 1
次、2 次；提取溶剂用量为 20、50、100 倍药材量的考
察。结果表明，以 50 倍药材量的 10%乙醇超声 60
min，1 次即可提取完全，回流提取结果相差很小。
3.2 检测波长的选择
毛果婆婆纳供试品溶液进样后经二极管阵列
检测器检测并储存全部光谱（190~400 nm），3D 光
谱图显示在 190 nm 波长处对照品桃叶珊瑚苷有最
大吸收，经光谱等高线分析优化检测条件，选择 203
表 1 梓醇和桃叶珊瑚苷的加样回收率（n=6）
样品中量/mg 加入量/mg 测得量/mg 回收率/%
桃叶珊瑚苷 梓醇 桃叶珊瑚苷 梓醇 桃叶珊瑚苷 梓醇 桃叶珊瑚苷 梓醇 桃叶珊瑚苷
0.242 0.153 0.233 0.167 0.484 6 0.315 4 104.0 97.5
0.220 0.139 0.233 0.167 0.460 0 0.309 8 102.8 102.3
0.247 0.156 0.233 0.167 0.490 3 0.322 8 104.4 100.1 103.8
0.280 0.176 0.233 0.167 0.519 6 0.340 8 102.9 98.5
0.254 0.160 0.233 0.167 0.498 5 0.320 0 105.0 95.8
0.238 0.150 0.233 0.167 0.480 2 0.315 4 103.9 99.0
平均值/%
梓醇
98.9
RSD/%
桃叶珊瑚苷 梓醇
0.7 2.1
表 2 不同来源毛果婆婆纳药材中桃叶珊瑚苷和梓醇的
含量（n=2）
No. 样品来源 桃叶珊瑚苷/mg·g-1 梓醇/mg·g-1
1 红原刷经寺 4.11 2.54
2 金川勒乌乡 4.41 2.42
3 理县米亚罗 5.32 1.28
4 马尔康梭磨乡 4.33 3.08
5 理塘禾尼 6.62 5.95
6 康定雅家埂 1.01 2.15
7 理塘村戈 5.94 5.34
8 理塘喇嘛垭亚 3.80 4.13
9 康定机场 6.49 8.18
10 道孚松林口 5.54 4.47
11 德格玛尼干戈 6.82 6.23
均值 4.95 4.16
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nm 为检测波长，杂质干扰更少。
3.3 流动相的选择
考察不同比例的乙腈-水为流动相，结果乙腈-
水（3∶97）时达到较好的分离效果。
3.4 含量测定结果的分析
不同产地毛果婆婆纳含量差异较大，说明药材产
地的不同环境和土壤条件对植物内在活性成分影响
显著。本文所建立的毛果婆婆纳中桃叶珊瑚苷和梓醇
含量测定方法简便易行，结果准确、可靠，为探索制订
完善的毛果婆婆纳药材质量标准提供了依据。
参考文献
1 国家中医药管理局《中华本草》编委会 .中华本草 (7 册 ).上海 :科
学技术出版社 ,1999 ∶404~405.
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海 :科学技术出版社 ,1996 ∶242~246.
3 田亮,周金云.婆婆纳属植物的研究进展.中药材,2004,27(1)∶68～70.
4 康桢 ,吴卫华 ,王俊杰 ,等 .桃叶珊瑚苷及其甙元的药理研究进展 .
中国中药杂志 ,2007,32(24) ∶2585~2587.
Determination of Aucubin and Catalpol in Veronica Eriogyne H. Winkl from Different Habitats by HPLC
Cui Hongmei, Yang Andong, Luo Heng
(Sichuan Academy of Chinese Medicine Sciences, Chengdu 610041, China)
Abstract: An HPLC method was developed for quantization of aucubin and catalpol in herbs of Veronica eriogyne
H. Winkl from different habitats. Samples were analyzed on an Gemini C18 column (110 A° , 4.60 mm × 250 mm, 5
μm) with acetonitrile-water (3∶97) as mobile phases. The flow rate was 1.0 mL·min-1 and the column temperature
was set at 25℃. The DAD detector wavelength was set at 203 nm. The results showed that the maximum content of
aucubin and catalpol in V. eriogyne H. Winkl from 11 habitats were 6.82, 8.18 mg·g-1, and the minimum content
were 1.01, 1.28 mg·g-1. The average contents were 4.95, 4.16 mg·g-1 respectively. Great differences of aucubin and
catalpol contents were shown in V. eriogyne H. Winkl from different habitats due to various factors, such as oil, alti-
tude and so on. It was concluded that this method was convenient to use with accurate and reliable results, which
can be used for quality control of V. eriogyne H. Winkl.
Keywords: Veronica eriogyne H. Winkl, aucubin, catalpol, content determination, HPLC
（责任编辑：李沙沙 张志华，责任译审：王 晶）
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