全 文 ：荷梗中的细胞毒活性生物碱
段绪红１，裴林１，蒋建勤２
（１．河北省中医药研究院 河北省浊毒证重点实验室，河北 石家庄 ０５００００；
２．中国药科大学 天然药物化学教研室，江苏 南京 ２１１１９８）
［摘要］　研究植物莲ＮｅｌｕｍｂｏｎｕｃｉｆｅｒａＧａｅｒｔｎ干燥茎的生物碱类成分及其细胞毒活性，为进一步开发利用荷梗提供依据。
采用离子交换树脂、硅胶和ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ２０柱色谱等方法分离纯化，并运用波谱方法对所分离的化合物进行结构鉴定。采用
ＭＴＴ法对所分离得到的化合物进行ＨＬ６０癌细胞毒活性实验。从荷梗总生物碱提取物中分离鉴定了１５个生物碱类化合物，
分别为阿西米洛宾（１）、异乌药碱（２）、Ｎ乙酰基去甲杏黄罂粟碱（３）、厚壳桂素（４）、ｖｅｌｕｃｒｙｐｔｉｎｅ（５）、ｐｙｃｎａｒｈｉｎｅ（６）、鹅掌楸碱
（７）、荷叶碱（８）、降荷叶碱（９）、杏黄罂粟碱（１０）、Ｎ甲基阿西米洛宾（１１）、乌药碱（１２）、Ｎ去甲杏黄罂粟碱（１３）、Ｎ甲基乌药
碱（１４）、观音莲明（１５）。化合物１～７，１２～１５为首次从荷梗中分离得到。化合物２～６为首次从莲科植物中分离得到。在样
品溶液浓度为１×１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１的条件下，化合物７～１０，１３，１４对ＨＬ６０癌细胞体外生长的抑制率分别是５１３６％，５９０９％，
５２５１％，５３９３％，５１４３％和６４３１％，表明上述化合物对人早幼粒细胞白血病ＨＬ６０细胞具有较明显的体外细胞毒活性。
［关键词］　莲；荷梗；生物碱；细胞毒活性
［收稿日期］　２０１３０９０２
［基金项目］　河北省科学技术研究与发展计划项目（１２２７７７０４Ｄ）
［通信作者］　 裴林，Ｔｅｌ：（０３１１）８９２９３８９８，Ｅｍａｉｌ：ｐｅｉｌｉｎ１４８＠
１６３ｃｏｍ
［作者简介］　段绪红，主管中药师，从事中药新药研究，Ｅｍａｉｌ：ｄｕ
ａｎｘｕｈｏｎｇ＠１２６ｃｏｍ
　　莲属于睡莲科 Ｎｙｍｐｈａｅａｃｅａｅ莲亚科 Ｓｕｂｆａｍ
Ｎｅｌｕｍｂｏｉｄｅａｅ，为多年生水生草本植物，在我国南北
各省都有分布。其干燥叶具有清暑化湿、升发清阳、
凉血止血之功效，主要用于暑热烦渴、暑湿泄泻、脾
虚泄泻、血热吐衄、便血崩漏等［１］。国内外学者已
对荷叶的化学成分进行了系统的研究，发现其主要
含有生物碱类、黄酮类、有机酸类成分［２３］。而荷梗
的化学成分研究报道较少，作者对其生物碱类成分
进行了较深入的研究，发现了一个新的假苄基异喹
啉型生物碱［４］。在此基础上，进一步对其生物碱类
成分进行了研究，从其总生物碱提取物中分离得到
１５个化合物。经波谱方法分别鉴定为阿西米洛宾
（１）、异乌药碱（２）、Ｎ乙酰基去甲杏黄罂粟碱（３）、
厚壳桂素（４）、ｖｅｌｕｃｒｙｐｔｉｎｅ（５）、ｐｙｃｎａｒｈｉｎｅ（６）、鹅掌
楸碱（７）、荷叶碱（８）、降荷叶碱（９）、杏黄罂粟碱
（１０）、Ｎ甲基阿西米洛宾（１１）、乌药碱（１２）、Ｎ去甲
杏黄罂粟碱（１３）、Ｎ甲基乌药碱（１４）、观音莲明
（１５）。其中，化合物１～７，１２～１５为首次从荷梗中
分离得到。化合物２～６为首次从莲科植物中分离
得到。采用ＭＴＴ法对所分离得到的１５个化合物进
行细胞毒活性的初筛，结果表明：化合物７～１０，１３，
１４对ＨＬ６０癌细胞具有较明显的体外细胞毒活性。
在１×１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１的条件下，对 ＨＬ６０癌细胞体
外生 长 的 抑 制 率 分 别 是 ５１３６％，５９０９％，
５２５１％，５３９３％，５１４３％和６４３１％。
１　材料
熔点用 Ｘ４数字显示显微熔点仪（温度未校
正）；电喷雾电离质谱（ＥＳＩＭＳ）使用 ＨＰ１１００ＬＣ／
ＡＰＩ／ＭＳＤ系统；ＢｒｕｋｅｒＡＶ３００和 ＡＶ５００核磁共振
仪（ＴＭＳ内标）；循环水真空泵 ＤＬＳＢ１０Ｌ（巩义市英
峪仪器厂）；ＫＱ３００超声仪（昆山市超声仪器有限
公司）；柱色谱用硅胶（１００～２００，２００～３００目，青岛
海洋化工厂）；ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ２０（Ｐｈａｒｍａｃｉａ公司）；
ＩＲＣ５０型离子交换树脂（国药集团化学试剂有限公
司）；所用试剂均为分析纯。
实验药材于２００５年１０月采自福建省建宁市，
经建宁市科技局姜景魁工程师鉴定为莲科植物
Ｎｎｕｃｉｆｅｒａ的干燥茎。凭证样品（Ｎ２００５１０）保留在
中国药科大学天然药物化学教研室。
２　提取与分离
荷梗干燥样品３０ｋｇ经适当粉碎后，用０５％稀
盐酸溶液浸提３次，每次４８ｈ，浸出液合并，滤过，通
过ＩＲＣ５０型阳离子交换树脂，树脂水洗，阴干后用
浓氨水碱化，风干，以氯仿索氏回流至生物碱提尽，
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提取液合并，减压浓缩，得浸膏５５ｇ。浸膏用少量混
合溶剂溶解，加入６０ｇ（２００～３００目）硅胶均匀拌
样，挥干溶剂后，用６００ｇ硅胶（２００～３００目）进行
柱色谱分离，以氯仿甲醇作为洗脱剂进行梯度洗脱
（１∶０～０∶１），合并ＴＬＣ行为大致相同的组分，得到８
个不同极性段组分：Ａ（１００∶０），Ｂ（５０∶１），Ｃ（２０∶１），
Ｄ（１０∶１），Ｅ（５∶１），Ｆ（３∶１），Ｇ（１∶１），Ｈ（０∶１）。对
组分Ａ（２６ｇ）进一步硅胶柱色谱分离，以石油醚
丙酮（３∶１～１∶１）进行梯度洗脱，得到 ５个流分
ＦｒＡ１～ＦｒＡ５，ＦｒＡ１硅胶柱色谱以石油醚乙酸乙酯
（３０∶１）洗脱，得化合物１（１８ｍｇ），ＦｒＡ２硅胶柱色谱
以二氯甲烷丙酮（５０∶１）洗脱，得化合物 １１（２０５
ｍｇ），ＦｒＡ４经ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ２０柱色谱（甲醇洗脱）分
离纯化，得到化合物３（１１ｍｇ），９（３５ｍｇ）。对组分
Ｂ（３１ｇ）进一步硅胶柱色谱分离，以石油醚乙酸乙
酯（３∶１）作为洗脱溶剂反复进行柱色谱分离，得到
化合物７（１３０ｍｇ），１３（２８ｍｇ），１４（１３ｍｇ）。对组分
Ｃ（１５ｇ）进一步硅胶柱色谱分离，以石油醚丙酮
（５∶１）和氯仿甲醇（１５∶１）作为洗脱溶剂反复进行
柱色谱分离，再经 ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ２０柱色谱（甲醇洗
脱）分离纯化，得到化合物２（２０ｍｇ），１２（９ｍｇ）。对
组分Ｄ（８７ｇ）进一步硅胶柱色谱分离，以氯仿丙
酮（４∶１～１∶１）梯度洗脱得到４个流分ＦｒＤ１～ＦｒＤ４，
ＦｒＤ１首先经ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ２０柱色谱初步分离，以氯
仿甲醇（１∶１）为洗脱溶剂，然后以石油醚丙酮
（２∶１）作为洗脱溶剂反复进行硅胶柱色谱分离，得
到化合物８（１５００ｍｇ），ＦｒＤ２以氯仿甲醇（８∶１）作
为洗脱溶剂反复进行硅胶柱色谱分离，得到化合物
１０（６６ｍｇ），１５（９２ｍｇ）。对组分Ｅ（２３ｇ）进一步
硅胶柱色谱分离，以氯仿甲醇（５∶１～１∶１）梯度洗脱
得到３个流分 ＦｒＥ１～ＦｒＥ３，ＦｒＥ１首先以氯仿丙酮
（３∶１）为洗脱溶剂反复进行硅胶柱色谱分离，再经
ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ２０柱色谱（甲醇洗脱）分离纯化，得到
化合物４（１６ｍｇ），ＦｒＥ３以二氯甲烷甲醇（２∶１）为
洗脱溶剂反复进行硅胶柱色谱分离，得到化合物５
（１０ｍｇ）。组分Ｆ（０８ｇ）经ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ２０柱色谱
（甲醇洗脱）分离纯化，反复重结晶后，得到化合物６
（８ｍｇ）。
３　结构鉴定
化合物１　无色块晶（ＣＨＣｌ３）；改良碘化铋钾试
剂显橘红色；１ＨＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３，３００ＭＨｚ）δ：８３２
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７９Ｈｚ，Ｈ１１），７１８～７３１（３Ｈ，ｍ，
Ｈ８～１０），６６３（１Ｈ，ｓ，Ｈ３），３６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４６，
９１Ｈｚ，Ｈ６ａ），３５７（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），２５４～３３１
（６Ｈ，ｍ，Ｈ４，５，７）；１３ＣＮＭＲ（ＣＤ３ＣＯＣＤ３，７５ＭＨｚ）
δ：１４４５（Ｃ１），１２６５（Ｃ１ａ），１２９６（Ｃ１ｂ），１５００
（Ｃ２），１１６４（Ｃ３），１３１１（Ｃ３ａ），３０４（Ｃ４），４４１
（Ｃ５），５４８（Ｃ６ａ），３８４（Ｃ７），１３７８（Ｃ７ａ），
１２８８（Ｃ８），１２８４（Ｃ９），１２８１（Ｃ１０），１２７７（Ｃ
１１），１３３５（Ｃ１１ａ），６０４（１ＯＭｅ）。以上数据与文
献［５］报道基本一致，鉴定为阿西米洛宾。
化合物２　白色颗粒状结晶（ＭｅＯＨ）；改良碘化
铋钾试剂显橘红色；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６，３００ＭＨｚ）
δ：７０５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８５Ｈｚ，Ｈ２′，６′），６６８（２Ｈ，ｄ，
Ｊ＝８５Ｈｚ，Ｈ３′，５′），６４４（１Ｈ，ｓ，Ｈ５），６６５（１Ｈ，
ｓ，Ｈ８），３８８（１Ｈ，ｄｄ，Ｈ１），３６７（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），
２４９～３０５（６Ｈ，ｍ，Ｈ３，４，９），１８０（１Ｈ，ｓ，ＮＨ）；
１３ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６，７５ＭＨｚ）δ：５６５（Ｃ１），４１４
（Ｃ３），２８８（Ｃ４），１２７３（Ｃ４ａ），１１５４（Ｃ５），
１４５５（Ｃ６），１４４５（Ｃ７），１１０６（Ｃ８），１２９７（Ｃ
８ａ），３９９（Ｃ９），１２９８（Ｃ１′），１３０２（Ｃ２′），１１４９
（Ｃ３′），１５５５（Ｃ４′），１１４９（Ｃ５′），１３０２（Ｃ６′），
５５６（７ＯＭｅ）。以上数据与文献［６］报道基本一致，
鉴定为异乌药碱。
化合物３　无色针状结晶（ＣＨＣｌ３）；改良碘化铋
钾试剂显橘红色；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６，３００ＭＨｚ）δ：
７０６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８５Ｈｚ，Ｈ２′，６′），６７０（１Ｈ，ｓ，Ｈ
８），６６８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８５Ｈｚ，Ｈ３′，５′），６６１（１Ｈ，ｓ，
Ｈ５），３９４（１Ｈ，ｄｄ，Ｈ１），３７０（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），３６５
（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），２５８～３０７（６Ｈ，ｍ，Ｈ３，４，９），１８９
（３Ｈ，ｓ，Ｍｅ）；１３ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６，７５ＭＨｚ）δ：５６１
（Ｃ１），４０４（Ｃ３），２７３（Ｃ４），１２５５（Ｃ４ａ），１１１７
（Ｃ５），１４７７（Ｃ６），１４８２（Ｃ７），１０９４（Ｃ８），
１２６８（Ｃ８ａ），３９４（Ｃ９），１２６９（Ｃ１′），１３０３（Ｃ
２′），１１６１（Ｃ３′），１５６１（Ｃ４′），１１６１（Ｃ５′），
１３０３（Ｃ６′），５６０（６ＯＭｅ），５５９（７ＯＭｅ），２２６
（Ｍｅ），１７７３（Ｃ Ｏ）。以上数据与文献［７］报道基
本一致，鉴定为Ｎ乙酰基去甲杏黄罂粟碱。
化合物４　无色针刺状结晶（ＣＨＣｌ３）；改良碘化
铋钾试剂显橘红色；１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ：
８３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５７Ｈｚ，Ｈ３），７４３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５７
Ｈｚ，Ｈ４），７３２（１Ｈ，ｓ，Ｈ８），７０８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８５
Ｈｚ，Ｈ２′，６′），７０５（１Ｈ，ｓ，Ｈ５），６６７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８５
Ｈｚ，Ｈ３′，５′），４００（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），３８９（３Ｈ，ｓ，
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ＯＭｅ）；１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ：１５８３（Ｃ１），
１４０７（Ｃ３），１１８４（Ｃ４），１３３０（Ｃ４ａ），１０５７（Ｃ
５），１５２３（Ｃ６），１４９７（Ｃ７），１０４５（Ｃ８），１２２２
（Ｃ８ａ），４０６（Ｃ９），１３０１（Ｃ１′），１２９７（Ｃ２′），
１１５３（Ｃ３′），１５５７（Ｃ４′），１１５２（Ｃ５′），１２９６（Ｃ
６′），５５８（６ＯＭｅ），５５７（７ＯＭｅ）。以上数据与文
献［８］报道基本一致，鉴定为厚壳桂素。
化合物５　桔红色细状结晶（ＣＨＣｌ３）；改良碘化
铋钾试剂显橘红色；ＥＳＩＭＳｍ／ｚ３１０［Ｍ－Ｈ］－；
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ：７９６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９０
Ｈｚ，Ｈ２′，６′），６９１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９０Ｈｚ，Ｈ３′，５′），
６８８（１Ｈ，ｓ，Ｈ８），６７０（１Ｈ，ｓ，Ｈ５），３９１（３Ｈ，ｓ，
ＯＭｅ），３８９（２Ｈ，ｔ，Ｈ３），３８４（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），２７９
（２Ｈ，ｔ，Ｈ４）；１３ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６，７５ＭＨｚ）δ：１７５４
（Ｃ１），４１１（Ｃ３），２６７（Ｃ４），１３７２（Ｃ４ａ），１０３６
（Ｃ５），１５８１（Ｃ６），１６４７（Ｃ７），１０９９（Ｃ８），
１２０３（Ｃ８ａ），１８９０（Ｃα），１２５８（Ｃ１′），１３２５（Ｃ
２′），１１６５（Ｃ３′），１５１８（Ｃ４′），１１６５（Ｃ５′），
１３２５（Ｃ６′），５５０（ＯＭｅ），５２５（ＯＭｅ）。以上数
据与文献［９］报道基本一致，鉴定为ｖｅｌｕｃｒｙｐｔｉｎｅ。
化合物 ６　黄色结晶（ＭｅＯＨ）；紫外呈强蓝色
荧光；改良碘化铋钾试剂显橘红色；ＥＳＩＭＳｍ／ｚ１９２
［Ｍ＋Ｈ］＋；１ＨＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，３００ＭＨｚ）δ：８３８
（１Ｈ，ｓ，Ｈ１），７０７（１Ｈ，ｓ，Ｈ８），６９５（１Ｈ，ｓ，Ｈ５），
３８３（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），３５６（３Ｈ，ｓ，ＮＣＨ３）；
１３ＣＮＭＲ
（ＣＤ３ＯＤ，７５ＭＨｚ）δ：１６７２（Ｃ１），５０１（Ｃ３），２６６
（Ｃ４），１３５５（Ｃ４ａ），１１３６（Ｃ５），１６２５（Ｃ６），
１５０７（Ｃ７），１１８１（Ｃ８），１１５６（Ｃ８ａ），５６４（６
ＯＭｅ），４６１（ＮＭｅ）。以上数据与文献［１０］报道基
本一致，鉴定为ｐｙｃｎａｒｈｉｎｅ。
化合物７　淡绿色针状结晶（ＣＨＣｌ３）；改良碘化
铋钾试剂显橘红色；ＥＳＩＭＳｍ／ｚ２７６［Ｍ＋Ｈ］＋。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ：８８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３
Ｈｚ，Ｈ５），８６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８９Ｈｚ，Ｈ１１），７７２～
８５７（３Ｈ，ｍ，Ｈ８～１０），７７３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３Ｈｚ，Ｈ
４），６３６（２Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２Ｏ）；
１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５
ＭＨｚ）δ：１４４．８（Ｃ１），１４８．３（Ｃ２），１０８．５（Ｃ３），
１０２．５（Ｃ３ａ），１３１．６（Ｃ３ｂ），１２３．９（Ｃ４），１４５．８（Ｃ
５），１３４．０（Ｃ６ａ），１８２．６（Ｃ７），１１９．８（Ｃ７ａ），１２７．９
（Ｃ８），１２８．８（Ｃ９），１３５．７（Ｃ１０），１２７．５（Ｃ１１），
１２８．９（Ｃ１１ａ），１２６．３（Ｃ１１ｂ），３０．５（ＯＣＨ２Ｏ）。以
上数据与文献［１１］报道基本一致，鉴定为鹅掌
楸碱。
化合物 ８　无色块晶（ＣＨＣｌ３）；改良碘化铋钾
试剂显橘红色；ＥＳＩＭＳｍ／ｚ２９６［Ｍ＋Ｈ］＋；１ＨＮＭＲ
（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）δ：８３６（１Ｈ，ｄ，Ｈ１１），７２０～
７３２（３Ｈ，ｍ，Ｈ８～１０），６６３（１Ｈ，ｓ，Ｈ３），３８８
（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），３６６（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），２４７～３１９
（７Ｈ，ｍ，Ｈ４，５，６ａ，７），２５４（３Ｈ，ｓ，ＮＭｅ）；１３ＣＮＭＲ
（ＣＤ３ＯＤ，１２５ＭＨｚ）δ：１４４８（Ｃ１），１２６４（Ｃ１ａ），
１５１６（Ｃ２），１１１４（Ｃ３），２９３（Ｃ４），１２８５（Ｃ
４ａ），５３４（Ｃ５），６２５（Ｃ６ａ），３５０（Ｃ７），１３６１（Ｃ
７ａ），１２７６（Ｃ８），１２７１（Ｃ９），１２６６（Ｃ１０），１２７５
（Ｃ１１），１３２３（Ｃ１ｌａ），５５９（ＯＭｅ），６０３（ＯＭｅ），
４４１（ＮＭｅ）。以上数据与文献［１１］报道基本一
致，鉴定为荷叶碱。
化合物９　无色针晶（ＣＨＣｌ３）；改良碘化铋钾试
剂显橘红色；ＥＳＩＭＳｍ／ｚ２８２［Ｍ＋Ｈ］＋。１ＨＮＭＲ
（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ：８３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７８Ｈｚ，Ｈ
１１），７２１～７３３（３Ｈ，ｍ，Ｈ８～１０），６６５（１Ｈ，ｓ，Ｈ
３），３８７（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），３８２（１Ｈ，ｄｄ，Ｈ６ａ），３６７
（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），２６７～３３９（６Ｈ，ｍ，Ｈ４，５，７）；
１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ：１４４．９（Ｃ１），１２６．５（Ｃ
１ａ），１２７．２（Ｃ１ｂ），１５１．７（Ｃ２），１１１．６（Ｃ３），１２８．６
（Ｃ３ａ），２８．５（Ｃ４），５３．９（Ｃ５），６２．９（Ｃ６ａ），３５．１
（Ｃ７），１３６．２（Ｃ７ａ），１２７．８（Ｃ８），１２７．２（Ｃ９），
１２６．７（Ｃ１０），１２７．５（Ｃ１１），１３２．３（Ｃ１ｌａ），５６．４
（ＯＭｅ），６０．５（ＯＭｅ）。以上数据与文献［１２］报道
基本一致，鉴定为降荷叶碱。
化合物１０　无色细棱柱状结晶（ＣＨＣｌ３）；改良
碘化铋钾试剂显橘红色；１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）
δ：６９４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８４Ｈｚ，Ｈ２′，６′），６６６（２Ｈ，ｄ，
Ｊ＝８４Ｈｚ，Ｈ３′，５′），３８３（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），３５７（３Ｈ，
ｓ，ＯＭｅ），３２７（１Ｈ，ｄｄ，Ｈ１），２５８～３１４（６Ｈ，ｍ，
Ｈ３，４，９），２５３（３Ｈ，ｓ，ＮＭｅ）；１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５
ＭＨｚ）δ：６５１（Ｃ１），４６２（Ｃ３），２４８（Ｃ４），１２５３
（Ｃ４ａ），１１１３（Ｃ５），１４７４（Ｃ６），１４６４（Ｃ７），
１１１３（Ｃ８），１２８８（Ｃ８ａ），４０７（ＡｒＣＨ２），１３１１
（Ｃ１′），１３０９（Ｃ２′），１１５５（Ｃ３′），１５４９（Ｃ４′），
１１５５（Ｃ５′），１３０９（Ｃ６′），５５９（ＯＭｅ），５５７
（ＯＭｅ），４２３（ＮＭｅ）。以上数据与文献［１３］报道
基本一致，鉴定为杏黄罂粟碱。
化合物１１　无色块晶（ＣＨＣｌ３）；改良碘化铋钾
试剂显橘红色；１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ：８２６
·６０１４·
第３８卷第２３期
２０１３年１２月
　　　　　　 　 　 　 　 　 　　　　 　 　 　 　
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Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２０１３
（１Ｈ，ｄｄ，Ｈ１１），７２２～７３２（３Ｈ，ｍ，Ｈ８～１０），６６６
（１Ｈ，ｓ，Ｈ３），３５６（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），２４６～３１３（７Ｈ，
ｍ，Ｈ４，５，６ａ，７），２５４（３Ｈ，ｓ，ＮＭｅ）；１３ＣＮＭＲ
（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ：１４４．４（Ｃ１），１２６．４（Ｃ１ａ），
１２９．３（Ｃ１ｂ），１４９．９（Ｃ２），１１６．３（Ｃ３），１３１．０（Ｃ
３ａ），２９．８（Ｃ４），４４．９（Ｃ５），５４．７（Ｃ６ａ），３８．２（Ｃ
７），１３７．７（Ｃ７ａ），１２８．７（Ｃ８），１２８．３（Ｃ９），１２８．０
（Ｃ１０），１２７．６（Ｃ１１），１３３．４（Ｃ１１ａ），６０．３
（１ＯＭｅ），４４．９（ＮＭｅ）。以上数据与文献［１４］报道
基本一致，鉴定为Ｎ甲基阿西米洛宾。
化合物１２　白色颗粒状结晶（ＣＨＣｌ３）；改良碘
化铋钾试剂显橘红色；ＩＲ图谱和薄层色谱 Ｒｆ与显
色行为与乌药碱对照品一致，且两者混合熔点不下
降。鉴定为乌药碱。
化合物１３　无色针状结晶（ＭｅＯＨ）；改良碘化
铋钾试剂显橘红色；ＥＳＩＭＳｍ／ｚ３００［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ：７０６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８１Ｈｚ，
Ｈ２′，６′），６６９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８１Ｈｚ，Ｈ３′，５′），６６３
（１Ｈ，ｓ，Ｈ８），６５９（１Ｈ，ｓ，Ｈ５），４１８（１Ｈ，ｄｄ，Ｈ
１），３８６（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），３８２（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），２７７～
３２６（６Ｈ，ｍ，Ｈ３，４，９）；１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）
δ：５６．３（Ｃ１），４１．６（Ｃ３），２９．１（Ｃ４），１２５．４（Ｃ
４ａ），１１１．５（Ｃ５），１４７．２（Ｃ６），１４５．９（Ｃ７），１１１．８
（Ｃ８），１２８．９（Ｃ８ａ），３９．９（ＡｒＣＨ２），１２９．８（Ｃ１′），
１３０．２（Ｃ２′），１１４．９（Ｃ３′），１５４．９（Ｃ４′），１１４．９（Ｃ
５′），１３０．２（Ｃ６′），５５．８（ＯＭｅ），５６．１（ＯＭｅ）。以
上数据与文献［１５］报道基本一致，鉴定为Ｎ去甲杏
黄罂粟碱。
化合物１４　无色针状结晶（ＣＨＣｌ３）；改良碘化
铋钾试剂显橘红色；ＥＳＩＭＳｍ／ｚ３００［Ｍ＋Ｈ］＋。
１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６，３００ＭＨｚ）δ：６９２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝
８１Ｈｚ，Ｈ２′，６′），６６３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８１Ｈｚ，Ｈ３′，
５′），６４２（１Ｈ，ｓ，Ｈ８），６２８（１Ｈ，ｓ，Ｈ５），３５５（３Ｈ，
ｓ，ＯＭｅ），３５３（１Ｈ，ｄｄ，Ｈ１），２３７～３０５（６Ｈ，ｍ，
Ｈ３，４，９），２３４（３Ｈ，ｓ，ＮＭｅ）；１３ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６，
７５ＭＨｚ）δ：６３．５（Ｃ１），４７．１（Ｃ３），２３．９（Ｃ４），
１２５．８（Ｃ４ａ），１１１．１（Ｃ５），１５４．５（Ｃ６），１４７．８（Ｃ
７），１１１．７（Ｃ８），１２８．６（Ｃ８ａ），４０．５（ＡｒＣＨ２），１３１．
５（Ｃ１′），１３０．５（Ｃ２′），１１６．３（Ｃ３′），１５５．２（Ｃ４′），
１１６．３（Ｃ５′），１３０．５（Ｃ６′），５５．５（ＯＭｅ），４２．０（Ｎ
Ｍｅ）。以上数据与文献［１６］报道基本一致，鉴定为
Ｎ甲基乌药碱。
化合物１５　淡黄色晶体（ＣＨＣｌ３）；改良碘化铋
钾试剂显橘红色；ＥＳＩＭＳｍ／ｚ２９２［Ｍ ＋Ｈ］＋。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ：９２０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８４
Ｈｚ，Ｈ１１），８９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３Ｈｚ，Ｈ５），８６０（１Ｈ，
ｄｄ，Ｊ＝１６，６２Ｈｚ，Ｈ８），７８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３Ｈｚ，
Ｈ４），７７８（１Ｈ，ｍ，Ｈ９），７２４（１Ｈ，ｓ，Ｈ３），４１１
（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），４０３（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ）；１３ ＣＮＭＲ
（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ：１５１．８（Ｃ１），１５６．６（Ｃ２），１０６．
４（Ｃ３），１４５．３（Ｃ３ａ），１２２．０（Ｃ３ｂ），１２３．９（Ｃ４），
１４５．１（Ｃ５），１３５．５（Ｃ６ａ），１８２．８（Ｃ７），１３２．１（Ｃ
７ａ，１２８．９（Ｃ８），１２８．８（Ｃ９），１３４．３（Ｃ１０），１２８．５
（Ｃ１１），１３４．４（Ｃ１１ａ），１２０．０（Ｃ１１ｂ），６０．５
（ＯＭｅ），５６．３（ＯＭｅ）。以上数据与文献［１２］报道
基本一致，鉴定为观音莲明。
４　生物碱的细胞毒活性
采用ＭＴＴ法［１７］对分离得到的１５个生物碱单
体化合物进行人早幼粒细胞白血病 ＨＬ６０细胞毒
活性测试。于９６孔培养板的孔内加入１８０μＬ密度
为２×１０４个／ｍＬ的 ＨＬ６０细胞悬液，然后向相应孔
中加入不同浓度的样品，继续培养４８ｈ，小心吸去药
液，然后在每一孔内分别加入９０μＬ新鲜培养基和
１０μＬＭＴＴ（５ｇ·Ｌ－１），于３７℃温育４ｈ，吸去上清
液，加入 ＤＭＳＯ１００μＬ后，于平板摇床上，振摇 ５
ｍｉｎ。最后在酶标仪上测出５７０ｎｍ处吸光度（Ａ）。
样品的终浓度分别为１×１０－５，１×１０６，１×１０－７ｍｏｌ
·Ｌ－１，每个浓度设３个复孔，另设阳性对照药（阿
霉素）和空白对照各一组。以溶剂对照处理肿瘤细
胞为对照组。由Ａ计算抑制率：细胞生长抑制率 ＝
（１－Ａ样品组／Ａ对照组）×１００％。结果表明，在１×１０
－５
ｍｏｌ·Ｌ－１的条件下，化合物７～１０，１３和１４对 ＨＬ
６０癌细胞体外生长的抑制率分别是 ５１３６％，
５９０９％，５２５１％，５３９３％，５１４３％和 ６４３１％，显
示出较强的体外细胞毒活性。其他化合物在同等摩
尔浓度的条件下对 ＨＬ６０癌细胞几乎无体外细胞
毒活性。
５　讨论
目前，莲属植物被归属于睡莲科，但部分学
者［１８］从莲属植物的形态学、解剖学、细胞学、孢粉
学、胚胎学、植物化学、分子生物学及花器官发生等
多方面与睡莲科植物进行了对比研究，支持莲属植
物单独成科。从已报道的文献看，睡莲科其他属植
物不含生物碱类成分，本文从荷梗中分离得到一系
·７０１４·
第３８卷第２３期
２０１３年１２月
　　　　　　 　 　 　 　 　 　　　　 　 　 　 　
Ｖｏｌ３８，Ｉｓｓｕｅ　２３
Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２０１３
列生物碱类成分，从化学成分的角度支持莲属植物
单独成科。
［参考文献］
［１］　中国药典一部［Ｓ］２０１０：２５８
［２］　赵小亮，王智民，马小军，等荷叶化学成分研究［Ｊ］中国
中药杂志，２０１３，３８（５）：７０３
［３］　ＡｈｎＪＨ，ＫｉｍＥＳ，ＬｅｅＣ，ｅｔａｌＣｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｆｒｏｍＮｅ
ｌｕｍｂｏｎｕｃｉｆｅｒａｌｅａｖｅｓａｎｄｔｈｅｉｒａｎｔｉｏｂｅｓｉｔｙｅｆｅｃｔｓ［Ｊ］Ｂｉｏｏｒｇ
ＭｅｄＣｈｅｍＬｅｔ，２０１３，２３（１２）：３６０４
［４］　ＤｎａｎＸＨ，ＪｉａｎｇＪＱＡｎｅｗｂｅｎｚｙｌｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅａｌｋａｌｏｉｄｆｒｏｍ
ｓｔｅｍｓｏｆＮｅｌｕｍｂｏｎｕｃｉｆｅｒａ［Ｊ］ＣｈｉｎＣｈｅｍＬｅｔ，２００８，１９（３）：
３０８
［５］　ＣｈａｎｇＦＲ，ＣｈｅｎＣＹ，ＨｓｉｅｈＴＪ，ｅｔａｌＣｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ
ｆｒｏｍＡｎｎｏｎａｇｌａｂｒａＩＩ［Ｊ］．ＪＣｈｉｎＣｈｅｍＳｏｃ，２０００，４７，９１３
［６］　韩长日，朱国元，陈光英，等狭瓣鹰爪花的生物碱成分研究
［Ｊ］中国中药杂志，２００５，３０（２１）：１６６０
［７］　ＣａｖａＭＰ，ＮｏｍｕｒａＫ，ＳｃｈｌｅｓｓｉｎｇｅｒＲＨ，ｅｔａｌＣｈｅｍｉｃａｌｄｅｔｅｒ
ｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅａｂｓｏｌｕｔｅｃｏｎｆｉｇｕｒａｔｉｏｎｏｆａｐｏｒｐｈｉｎｅｓｒｅｄｕｃｔｉｖｅ
ｃｌｅａｖａｇｅｏｆｐｒｏａｐｏｒｐｈｉｎｅｓ［Ｊ］ＣｈｅｍＩｎｄ，１９６４，７：２８２
［８］　ＬｕＳＴＳｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅａｌｋａｌｏｉｄｓｏｆＦｏｒｍｏｓａｎｌａｕｒａｃｅｏｕｓｐｌａｎｔｓ
［Ｊ］ＹａｋｕｇａｋｕＺａｓｓｈｉ，１９６７，８７（１０）：１２７８
［９］　ＬｅｂｃｅｕｆＭ，ＲａｎａｉｖｏＡ，ＣａｖｅＡ，ｅｔａｌＶｅｌｕｃｒｙｐｔｉｎｅａｎｅｗｉｓｏ
ｑｕｉｎｏｌｉｎｅａｌｋａｌｏｉｄｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＣｒｙｐｔｏｃａｒｙａｖｅｌｕｔｉｎｏｓａ［Ｊ］ＪＮａｔ
Ｐｒｏｄ，１９８９，５２（３）：５１６
［１０］　ＳｉｗｏｎＪ，ＶｅｒｐｏｏｒｔｅＲ，ＢｅｅｋＴ，ｅｔａｌ．ＡｌｋａｌｏｉｄｓｆｒｏｍＰｙｃｎａｒｈｅｎａ
ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ［Ｊ］Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍ，１９８１，２０（２）：３２３
［１１］　王嘉陵，胡学民，尹武华，等．莲子心中生物碱成分的研究
［Ｊ］中国中药杂志，１９９１，１６（１１）：４７３
［１２］　ＧｕｉｎａｕｄｅａｕＨ，ＬｅｂｏｅｕｆＭ，ＣａｖｅＡＡｐｏｒｐｈｉｎｏｉｄａｌｋａｌｏｉｄｓ，ＩＩ
［Ｊ］ＪＮａｔＰｒｏｄ，１９８３，４６（６）：７６１
［１３］　ＯｒｅｊａｒｅｎａＰａｃｈｅｃｏＪＣ，ＬａｈｍＧ，ＯｐａｔｚＴＳｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆａｌｋａｌｏｉｄｓ
ｂｙＳｔｅｖｅｎｓｒｅａｒａｎｇｅｍｅｎｔｏｆｎｉｔｒｉｌｅｓｔａｂｉｌｉｚｅｄａｍｍｏｎｉｕｍｙｌｉｄｅｓ：
（±）ｌａｕｄａｎｏｓｉｎｅ，（±）ｌａｕｄａｎｉｄｉｎｅ，（±）ａｒｍｅｐａｖｉｎｅ，（±）
７ｍｅｔｈｏｘｙｃｒｙｐｔｏｐｌｅｕｒｉｎｅ，ａｎｄ（±）ｘｙｌｏｐｉｎｉｎｅ［Ｊ］ＪＯｒｇＣｈｅｍ，
２０１３，７８（１０）：４９８５
［１４］　ＧｕｉｎａｕｄｅａｕＨ，ＬｅｂｏｅｕｆＭ，ＤｅｂｒａｙＭ，ｅｔａｌＡｌｋａｌｏｉｄｓｏｆＣｏｌｕｂ
ｒｉｎａｆａｒａｌａｏｔｒａｓｓｐｆａｒａｌａｏｔｒａ［Ｊ］ＰｌａｎｔａＭｅｄ，１９７５，２７：３０４
［１５］　ＹａｎｇＴＨ，ＬｕＳＴＳｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅａｌｋａｌｏｉｄｓｏｆＭａｇｎｏｌｉａｃｅｏｕｓ
ｐｌａｎｔｓＸＸＸＶＡｌｋａｌｏｉｄｓｏｆＭａｇｎｏｌｉａｋａｃｈｉｒａｃｈｉｒａｉＤａｎｄｙ（２）
ＴｈｅｉｓｏｌａｔｉｏｎｏｆＤ（＋）Ｎｎｏｒａｒｍｅｐａｖｉｎｅ［Ｊ］Ｙａｋｕｇａｋｕ
Ｚａｓｓｈｉ，１９６３，８３（１）：２２
［１６］　ＫｕｎｉｔｏｍｏＪ，ＮａｇａｉＹ，ＯｋａｍｏｔｏＹ，ｅｔａｌＳｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅａｌｋａ
ｌｏｉｄｓｏｆＮｅｌｕｍｂｏｎｕｃｉｆｅｒａＧａｅｒｔｎＸＩＶＯｎｔｈｅＴｅｒｔｉａｒｙＢａｓｅ
［Ｊ］．ＹａｋｕｇａｋｕＺａｓｓｈｉ，１９７０，９０（９）：１１６５
［１７］　李杰，刘玉琴 ＭＴＴ法在肿瘤研究中的改良及应用进展
［Ｊ］．中国肿瘤临床，１９９８，２５（４）：３１２
［１８］　胡光万，刘克明，雷立公莲属（ＮｅｌｕｍｂｏＡｄａｎｓ）的系统学研究
进展和莲科的确立［Ｊ］激光生物学报，２００３，１２（６）：４１５
ＣｙｔｏｔｏｘｉｃａｌｋａｌｏｉｄｓｆｒｏｍｓｔｅｍｓｏｆＮｅｌｕｍｂｏｎｕｃｉｆｅｒａ
ＤＵＡＮＸｕｈｏｎｇ１，ＰＥＩＬｉｎ１，ＪＩＡＮＧＪｉａｎｑｉｎ２
（１ＨｅｂｅｉＰｒｏｖｉｎｃｅＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙＴｕｒｂｉｄｉｔｙ
ＴｏｘｉｃＳｙｎｄｒｏｍｅｏｆＨｅｂｅｉＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ０５００００，Ｃｈｉｎａ；
２ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮａｔｕｒａｌＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１１１９８，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　ＣｈｅｍｉｃａｌｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｗａｓｃａｒｉｅｄｏｕｔｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅａｌｋａｌｏｉｄｓｆｒｏｍｓｔｅｍｓｏｆＮｅｌｕｍｂｏｎｕｃｉｆｅｒａａｎｄｔｈｅｉｒｃｙｔｏｔｏｘｉｃａｃ
ｔｉｖｉｔｉｅｓＴｈｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｗｅｒｅｓｅｐａｒａｔｅｄｂｙｃｏｌｕｍｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ａｎｄｔｈｅｉｒｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｗｅｒｅｅｌｕｃｉｄａｔｅｄｂｙｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｉｃｄａｔａａｎａｌｙ
ｓｅｓＴｈｅｉｓｏｌａｔｅｄｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｅｒｅｅｖａｌｕａｔｅｄｆｏｒｔｈｅｉｒｃｙｔｏｔｏｘｉｃａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｂｙＭＴＴｍｅｔｈｏｄＦｉｆｔｅｅｎｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｔｏ
ｔａｌａｌｋａｌｏｉｄｓｅｘｔｒａｃｔａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓａｓｉｍｉｌｏｂｉｎｅ（１），ｉｓｏｃｏｃｌａｕｒｉｎｅ（２），Ｎａｃｅｔｙｌｎｏｒａｒｍｅｐａｖｉｎｅ（３），ｃｒｙｋｏｎｉｓｉｎｅ（４），ｖｅｌｕｃｒｙｐｔｉｎｅ
（５），ｐｙｃｎａｒｈｉｎｅ（６），ｌｉｒｉｏｄｅｎｉｎｅ（７），ｎｕｃｉｆｅｒｉｎｅ（８），ｎｏｒｎｕｃｉｆｅｒｉｎｅ（９），ａｒｍｅｐａｖｉｎｅ（１０），Ｎｍｅｔｈｙｌａｓｉｍｉｌｏｂｉｎｅ（１１），ｃｏｃｌａｕｒｉｎｅ
（１２），Ｎｎｏｒａｒｍｅｐａｖｉｎｅ（１３），Ｎｍｅｔｈｙｌｃｏｃｌａｕｒｉｎｅ（１４）ａｎｄｌｙｓｉｃａｍｉｎｅ（１５）Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ１７ａｎｄ１２１５ｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｓｔｅｍｓｏｆ
ｔｈｉｓｐｌａｎｔｆｏｒｔｈｅｆｉｒｓｔｔｉｍｅ，ａｎｄｃｏｍｐｏｕｎｄｓ２６ｗｅｒｅｆｉｒｓｔｌｙｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｆａｍｉｌｙＮｅｌｕｍｂｏｎａｃｅａｅ．Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ７１０，１３ａｎｄ１４
ｓｈｏｗｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｃｙｔｏｔｏｘｉｃａｃｔｉｖｉｔｉｅｓａｇａｉｎｓｔＨＬ６０ｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｉｎｅｗｉｔｈｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｒａｔｉｏｓｏｆ５１３６％，５９０９％，５２５１％，
５３９３％，５１４３％，ａｎｄ６４３１％ ａｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ１×１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ｎｅｌｕｍｂｏｎｕｃｉｆｅｒａ；ｓｔｅｍｓｏｆＮｅｌｕｍｂｏｎｕｃｉｆｅｒａ；ａｌｋａｌｏｉｄｓ；ｃｙｔｏｔｏｘｉｃａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ
ｄｏｉ：１０．４２６８／ｃｊｃｍｍ２０１３２３２３
［责任编辑　孔晶晶］
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第３８卷第２３期
２０１３年１２月
　　　　　　 　 　 　 　 　 　　　　 　 　 　 　
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Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２０１３