全 文 ：生、炒决明子水提物抗氧化及对一氧化氮、内皮素
影响的比较研究
李文，殷小杰，张村，李丽，王岚，肖永庆
（中国中医科学院 中药研究所，北京 １００７００）
［摘要］ 目的：对生、炒决明子水提物抗氧化及舒张血管的作用进行比较，探讨决明子明目的作用机制。方法：小鼠按体
重随机分成３组。即正常组，生决明子组，炒决明子组。每组２０只，雌、雄各半 。给药组每日灌胃给药１次，生药含量１０ｇ·
ｋｇ－１；２０ｍＬ·ｋｇ－１。正常组给相同体积的蒸馏水。连续给药１个月，摘除眼球组织匀浆，取上清液测定超氧化物岐化酶
（ＳＯＤ）、丙二醛（ＭＤＡ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）及一氧化氮（ＮＯ），同时眼眶后静脉丛采血测定内皮素（ＥＴ）含量。结果：生、炒决
明子水提物有提高小鼠眼组织中ＳＯＤ和 ＬＤＨ活性、降低 ＭＤＡ含量的作用，以生决明子作用为强。二者均能提高眼组织中
ＮＯ含量及ＮＯ／ＥＴ比值，炒决明子作用强于生决明子。结论：生、炒决明子均有一定抗氧化及调节舒张血管作用，决明子明目
作用可能是通过此方面来实现。
［关键词］ 决明子；抗氧化；舒张血管
［收稿日期］ ２００９０４０３
［基金项目］ 国家“十一五”科技支撑计划（２００６ＢＡＩ０９Ｂ０６０１１）
［通信作者］ 肖永庆，研究员。Ｔｅｌ：（０１０）８４０４０２２１，Ｅｍａｉｌ：ｘ．
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决明子始载于《神农本草经》，以明目之功而
名。它具有清肝明目、利水通便之功效，是临床用于
治疗眼疾的常用中药。有文献报道决明子具有抗氧
化方面作用［１２］，但对于眼组织方面的作用研究甚
少。本实验通过测定眼组织中的氧自由基，对生、炒
决明子水提物在抗氧化及对一氧化氮、内皮素方面
的作用进行比较，观察决明子炮制前后药理作用的
变化，对决明子明目作用机制进行初步探讨。
１ 材料
１．１ 动物 昆明种小鼠１９～２１ｇ，雌雄各半，共６０
只。购于北京大学医学院动物饲养中心，合格证号
ＣＣＹＫ（京）２００６０００８；０１２５１０２。
１．２ 药物 决明子ＣａｓｉａｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａＬ．由本所胡世
林研究员鉴定。实验用样品的制备：取生、炒决明子
（炒决明子的制备按照《中国药典》２００５年版一部相
关方法炮制）各２０ｋｇ，分别加水煎煮３次，第１，２
次各１５ｈ，第３次１ｈ，滤过，合并滤液，分别常压浓
缩至浸膏。生决明子每１ｇ浸膏相当于原药材２．３８
ｇ；炒决明子每１ｇ浸膏相当于原药材２．４２ｇ。由本
所化学室张村博士提供。使用前用蒸馏水配成０５
ｇ·ｍＬ溶液备用。
１．３ 试剂与仪器 试剂盒：超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）
批号２００８１０２７；丙二醛（ＭＤＡ）批号２００８１０２７；乳酸
脱氢酶（ＬＤＨ）批号２００８１０２７；一氧化氮（ＮＯ）批号
２００８１０２９；以上试剂由南京建成生物研究所第一分
所提供。内皮素（ＥＴ）批号 ２００８０９；由解放军总医
院科技开发中心放免所提供并测定。仪器 ＬＸＪⅡ
离心沉淀机，上海医用仪器厂；ＺＳ３半自动生化仪，
北京中生生物工程高技术公司；ＪＤ１００３电子天平，
沈阳龙腾电子称量仪器有限公司；Ｓｎ６９５Ｂ型免疫
计数器，上海核所日环光电仪器有限公司。
２ 方法［３］
２．１ 动物分组与给药 小鼠按体重随机分成３组，
即正常组、生决明子组和炒决明子组。每组２０只，
雌雄各半。给药组每日灌胃给药１次，生药含量１０
ｇ·ｋｇ－１；２０ｍＬ·ｋｇ－１，相当于临床成人用量的２倍
（３０ｇ·ｄ－１）正常组给相同体积的蒸馏水。连续给
药１个月后，摘取小鼠双侧眼球为１份标本，保留视
神经和球结膜，用生理盐水洗去表面残血，滤纸吸去
水分，电子分析天平称重后置于匀浆器中，加入４℃
生理盐水，低温匀浆成２５％的匀浆液。将匀浆液
以３０００ｒ·ｍｉｎ－１低温离心 １５ｍｉｎ，取上清液测定
ＳＯＤ，ＭＤＡ，ＬＤＨ，ＮＯ在组织中的含量。
在取眼球前，眼眶采血１ｍＬ，置于含１０％依地
酸二钠１５μＬ和抑肽酶２０μＬ的试管中混匀，低温
３０００ｒ·ｍｉｎ－１离心１５ｍｉｎ，分离血浆，测定血浆中
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的ＥＴ含量。
２．２ 统计学处理 实验结果以 珋ｘ±ｓ表示，采用单
因素方差分析，用ＳＰＳＳ１３０统计软件包处理。Ｐ＜
００５为有统计学差异。
３ 结果
３．１ 对自由基相关指标及乳酸脱氢酶的影响 结
果显示，生、炒决明子组可提高 ＳＯＤ，ＬＤＨ活性，降
低 ＭＤＡ含量，与正常组比较有明显差异（Ｐ＜
００５）。与炒决明子相比，生决明子作用稍强，但两
组之间未见显著性差异（表１）。
表１ 生、炒决明子对小鼠眼球中ＳＯＤ，ＬＤＨ活性及ＭＤＡ水平的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝２０）
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１ ＳＯＤ／Ｕ·ｍｇ－１ ＭＤＡ／ｎｍｏｌ·ｍｇ－１ ＬＤＨ／Ｕ·ｇ－１
正常 － ２２３±０３１ １３８±０９１ １６６９２±１２０６５
生决明子 １０ ２４７±０３７１） ０８８±０７２１） １７８４０±１９３３６１）
炒决明子 １０ ２３５±０３９ １０５±０８２ １７１０４±１６８３３
注：与正常组比较１）Ｐ＜００５（表２同）。
３．２ 对 ＮＯ及 ＥＴ的影响 结果显示，炒决明子组
ＮＯ含量、ＮＯ／ＥＴ比值增高，与正常组比较有显著性
差异（Ｐ＜００５）。生决明子组作用强于正常组，但无
统计学意义，生、炒决明子之间差异不显著（表２）。
表２ 生、炒决明子对小鼠眼球中ＮＯ及血浆中ＥＴ水平的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝２０）
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１ ＮＯ／μｍｏｌ·ｇ－１ ＥＴ／ｎｇ·Ｌ－１ ＮＯ／ＥＴ
正常 － ０８１３±０４３６ ６５６３±１０３７ １２９０±８０３
生决明子 １０ １１９７±０７３７ ５９９０±９４６ ２０２９±１２７３
炒决明子 １０ １２９７±０８０８１） ５９３０±１０４２ ２４０９±２２０６１）
４ 讨论
近年的研究结果证实［４］，各种眼疾也是氧自由
基长期破坏的结果。随着年龄的增长，人体抗氧化
物与自由基的代谢日趋不平衡，过量堆积的氧自由
基抑制抗氧化物质的产生和功能的发挥。由于眼睛
周围分布着丰富的毛细血管、神经等组织，老化堆积
过量的自由基袭击眼部神经、晶状体、睫状体、视网
膜、血管壁等部位，从而导致白内障、黄斑退化等严
重老化性眼疾，这是老年人容易患有各种眼睛疾病
的主要原因。本实验结果显示，生、炒决明子水提物
能增强眼球组织中ＳＯＤ的活性，同时使过氧化脂质
ＭＤＡ的水平降低。表明生、炒决明子具有一定的抗
氧化作用，能清除氧自由基，使眼组织在代谢障碍等
方面减少自由基的攻击。
有关报道介绍，老年性白内障未成熟期与外伤
性白内障比较，其 ＬＤＨ活性明显降低，说明老年性
白内障在形成过程中 ＬＤＨ活性下降［５］。而老年性
白内障患者房水和血清中 ＬＤＨ活性较正常人偏
低［６］。ＬＤＨ是人体中的重要酶之一，它通过参与糖
的无氧酵解，产生三磷酸腺苷（ＡＴＰ）。ＡＴＰ具有扩
张末梢血管的作用，能改善视网膜及视神经血液循
环［７］。本实验结果显示，生、炒决明子水提物能使
小鼠眼球组织中ＬＤＨ活性提高，这有可能会弥补白
内障在形成过程中造成的ＬＤＨ低下，起到对老年性
白内障的预防和治疗作用。
现代医学研究发现，眼底退行性病变常伴有
眼底微循环的障碍，ＮＯ和 ＥＴ是血管内皮细胞产
生的血管活性物质，ＮＯ能松弛平滑肌、舒张血
管。有研究发现 ＮＯ能扩张脉络膜血管及眼外动
脉［８］，而 ＥＴ具有血管收缩作用。正常情况下，二
者属于动态平衡，如果平衡失调，将导致眼底微
循环障碍。本实验结果显示，生、炒决明子水提
物能提高眼组织中 ＮＯ的含量和 ＮＯ／ＥＴ比值，这
对于扩张血管、改善眼底微循环可能会有一定的
促进作用。
本实验从抗氧化和舒张血管调节因素等方面对
生、炒决明子水提物进行比较研究，实验结果表明
生、炒决明子水提物都具有一定抗氧化及调节舒张
血管因素作用。生决明子水提物抗氧化方面的作用
略强，而炒决明子水提物调节舒张血管因素的作用
更明显，但二者差异不显著。
决明子用于临床治疗眼疾已有悠久的历史，以
上研究分析表明：决明子的明目作用机制可能是通
过增加眼组织抗氧化物，提高局部一氧化氮含量，调
节舒张血管因素，间接改善视网膜和眼底微循环来
实现的。
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ＬＩＷｅｎ，ＹＩＮＸｉａｏｊｉｅ，ＺＨＡＮＧＣｕｎ，ＬＩＬｉ，ＷＡＮＧＬａｎ，ＸＩＡＯＹｏｎｇｑｉｎｇ
（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ，ＣｈｉｎａＡｃａｄｅｍｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００７００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｄｉｆｅｒｅｎｔｅｆｅｃｔｓｏｆｗａｔｅｒｓｏｌｕｂｌｅｅｘｔｒａｃｔｓｆｒｏｍＣａｓｉａｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａａｎｄｐｒｏｃｅｓｓｅｄＣｏｂｔｕｓｉ
ｆｏｌｉａｏｎａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｏｎａｎｄｖａｓｏｄｉｌａｔａｔｉｏｎ，ａｎｄｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｅｙｅｃｌｅａｒｉｎｇｅｆｅｃｔ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｍｉｃｅｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄ
ｉｎｔｏｔｈｒｅｅｇｒｏｕｐｓ：ｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ＣｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａｇｒｏｕｐａｎｄｐｒｏｃｅｓｓｅｄＣｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａｇｒｏｕｐ．Ｔｅｎｍａｌｅａｎｄ１０ｆｅｍａｌｅｍｉｃｅｗｅｒｅｉｎ
ｅａｃｈｇｒｏｕｐ．ｍｉｃｅｗｅｒｅｇｉｖｅｎｅｘｔｒａｃｔｓｏｒａｌｙ１０ｇ（２０ｍＬ）ｃｒｕｄｅｄｒｕｇ／ｋｇｆｏｒｏｎｅｍｏｎｔｈ，ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗｅｒｅｇｉｖｅｎｓａｍｅｖｏｌｕｍｅｗａｔｅｒ．
ＴｈｅｎｔｈｅｅｙｅｂａｌｔｉｓｓｕｅｗａｓｈａｒｖｅｓｔｅｄｔｏｐｒｅｐａｒｅｈｏｍｏｇｅｎａｔｅｔｏｔｅｓｔＳＯＤ，ＭＤＡ，ＬＤＨａｎｄＮＯ．Ｂｌｏｏｄｗａｓｃｏｌｅｃｔｅｄｆｒｏｍｐｏｓｔｅｒｉｏｒｏｒ
ｂｉｔａｌｖｅｎｏｕｓｐｌｅｘｕｓｔｏｔｅｓｔＥＴ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＢｏｔｈｔｗｏｋｉｎｄｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｓｃｏｕｌｄｒａｉｓｅｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＳＯＤａｎｄＬＤＨ，ｄｅｃｒｅａｓｅｔｈｅＭＤＡｌｅｖｅｌ．
ＥｘｔｒａｃｔｓｆｒｏｍＣｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａｓｈｏｗｅｄｈｉｇｈｅｒｅｆｅｃｔｓｏｎａｂｏｖｅｍｅｎｔｉｏｎｅｄａｃｔｉｏｎ．ＢｏｔｈｔｗｏｋｉｎｄｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｒａｔｉｏｖａｌｕｅｏｆＮＯ／
ＥＴｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ，ａｎｄｅｘｔｒａｃｔｓｆｒｏｍｐｒｏｃｅｓｓｅｄＣｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａｓｈｏｗｅｄｈｉｇｈｅｒａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＢｏｔｈＣｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａａｎｄｐｒｏｃｅｓｓｅｄＣ
ｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａｅｘｔｒａｃｔｓｓｈｏｗｏｂｖｉｏｕｓａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｏｎａｎｄｖａｓｏｄｉｌａｔａｔｉｏｎｅｆｅｃｔｓ．ＴｈｅｓｅｒｅｓｕｌｔｓｍａｙｓｕｐｐｏｒｔｔｈｅｅｙｅｃｌｅａｒｉｎｇａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＣｏｂ
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