全 文 ：曼地亚红豆杉枝条中紫杉醇的提取纯化研究
乔亮杰，满瑞林，倪网东，梁永煌
（中南大学 化学化工学院，湖南 长沙 ４１００８３）
［摘要］　目的：探索曼地亚红豆杉枝条中紫杉醇的提取纯化工艺。方法：提取阶段，对紫杉醇的溶剂提取、超声浸提和超
临界ＣＯ２萃取进行对比试验；纯化阶段，硅胶柱色谱及制备型薄层色谱处理提取物，正己烷沉淀结晶。ＨＰＬＣ检测试样中紫杉
醇的含量。结果：超声提取紫杉醇的回收率最高，超临界ＣＯ２萃取紫杉醇的提取选择性最好；硅胶柱色谱适宜的过柱次数为２
次，流动相二氯甲烷三氯甲烷甲醇（５３∶４４∶３），薄层色谱展开剂为三氯甲烷醋酸乙酯甲醇（８８∶７∶５），提取所得浸膏经过分离纯
化最终得到淡黄色晶体。结论：产物中紫杉醇质量分数为８７４３％，回收率８９５７％，紫杉醇得到有效富集。
［关键词］　曼地亚红豆杉；紫杉醇；超声浸提；超临界ＣＯ２萃取（ＳＦＥ）；柱色谱；薄层色谱
［收稿日期］　２００８０８０７
［基金项目］　中南大学研究生教育创新工程项目（１３４３７７３３０）
［通信作者］　满瑞林，Ｔｅｌ：（０７３１）８８３６２３７，Ｅｍａｉｌ：ｒｌｍａｎ＠ｍａｉｌ．
ｃｓｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
　　紫杉醇（ｔａｘｏｌ）是一种具有抗癌活性的二萜类
化合物，由于其抗癌机制独特而引起了人们的广泛
重视［１］。它的主要来源为红豆杉，在该植物体中含
量极低（３／万左右）［２］，其中共存许多分子结构和物
化性质与紫杉醇及其相近的紫杉烷类化合物，使其
提取纯化非常困难［３４］。为了寻找紫杉醇其他来源，
贾继明等［５］对榛树枝条进行提取研究，结果表明以
甲醇为溶媒采用超声提取，用氧化铝色谱纯化获得
紫杉醇是可行的，但紫杉醇在榛树枝条中的含量很
低，有关此方面的研究仅停留在实验室阶段。目前，
紫杉醇的生产主要面临两个方面的难题：一是紫杉
醇资源单一且匮乏。另外，传统的红豆杉树种资源
非常有限，且成才周期较长，成为紫杉醇生产的瓶
颈。
曼地亚红豆杉是东北红豆杉 Ｔａｘｕｓｃｕｓｐｉｄａｔａ和
欧洲红豆杉 Ｔ．ｂａｃｃａｔａ的天然杂交种，它生长速度
快，枝叶中的紫杉醇量高，可通过人工培栽规模种
植，是利用红豆杉树皮提取紫杉醇的最佳替代原
料［６７］。与传统红豆杉相比，两者的结构和性能有较
大差异。国内在１９９６年从加拿大引进该品种并进
行人工栽培，有关它的研究报道较为少见。本实验
以曼地亚红豆杉为原料，系统探讨了其中紫杉醇的
提取和纯化工艺，对比研究了溶剂浸提、超声提取和
超临界ＣＯ２流体萃取３种提取方法对紫杉醇的提取
效果，通过硅胶柱色谱、正己烷沉淀结晶等纯化手段
处理浸提物，探索以曼地亚红豆杉为原料获得紫杉
醇的分离纯化工艺，以便为其实现工业化生产提供
指导。
１　材料与方法
１．１　材料
ＨＡ１２１５００１型超临界流体萃取仪（江苏南通
华安超临界萃取有限公司）；ＺＦ６型紫外分析仪（上
海嘉鹏科技有限公司）；砂芯旋塞玻璃色谱柱（２５
ｍｍ×４００ｍｍ，申海玻璃仪器公司）；高效液相色谱
仪（ＳＨＩＭＡＤＺＵ，２０１０Ａ），检测器（ＳＰＤＭ１０ＡＶＰ）。
紫杉醇对照品（上海同田生物科技有限公司，
批号 ０７０２０１２４）；甲醇、乙醇、醋酸乙酯、丙酮等试剂
均为分析纯；曼地亚红豆杉植株（浙江常山曼地亚
红豆杉培植基地，经中南大学刘佳佳教授鉴定符合
《中国药典》２００５年版中有关规定［８］）。柱色谱用
硅胶（青岛海洋化工有限公司）；ＧＦ２５４薄层色谱硅
胶（青岛海洋化工有限公司）。
１．２　方法
１．２．１　色谱条件　ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘＣ１８（４６ｍｍ×２５０
ｍｍ，５μｍ）；流动相乙腈水（５３∶４７）；流速０８ｍＬ
·ｍｉｎ－１；柱温２８℃；进样量１０μＬ；紫外检测波长
２２８ｎｍ。外标法确定试样中紫杉醇（图１）。
１．２．２　对照品溶液的配制　准确称取紫杉醇对照
品５０ｍｇ，用甲醇定容于５０ｍＬ量瓶中，制成质量
浓度为１００ｍｇ·Ｌ－１的紫杉醇储备液。分别准确量
取０５，１０，２０，４０，６０，１００ｍＬ储备液于１０ｍＬ
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Ａ．紫杉醇标准品；Ｂ．溶剂浸提物；Ｃ．ＳＦＥ产物；Ｄ．超声提取物；１紫杉醇。
图１　紫杉醇试样ＨＰＬＣ图
量瓶，用甲醇定容至刻度。得到质量浓度为５，１０，
２０，４０，６０，１００ｍｇ·Ｌ－１的系列标准溶液。ＨＰＬＣ检
测得到紫杉醇特征峰峰面积与其浓度的标准曲线，
回归 方 程 Ｙ＝２５８２８１６２５６Ｘ＋６８６３３２３，
ｒ＝０９９９９。
１．２．３　试验步骤　①将烘干后的曼地亚红豆杉枝
条用试样粉碎机粉碎，筛分收集一定粒径的粉末样
品。②称取 １０００ｇ粉末样品于 ４５℃条件下用
９５％乙醇浸提 ３次，间歇搅拌。溶媒用量分别为
８００，５００，５００ｍＬ；浸提时间分别为１２，６，６ｈ。合并
３次浸提所得提取液，减压旋转蒸干；重复本试验２
次，得３份浸膏。③称取１０００ｇ粉末样品在一定
温度下用醋酸乙酯丙酮（１∶１）连续３次超声浸出，
溶媒用量分别为６００，４００，４００ｍＬ，超声功率为１００
Ｗ。合并３次浸提所得提取液，减压旋转蒸干；重复
上述试验２次，得浸膏３份。④称取１０００ｇ原料
粉末于１Ｌ萃取罐中，设定萃取压力为３５ＭＰａ，萃取
温度５０℃，夹带剂为９５％乙醇溶液，ＣＯ２流体体积
流量２５Ｌ·Ｈ－１，动态萃取 ４ｈ。收集分离釜萃取
液，减压旋转蒸干；重复上述实验２次，得３份浸膏。
⑤浸膏用５０ｍＬ甲醇溶解，加入等体积石油醚萃取
除去该甲醇溶解液中所含的弱极性杂质（分３次，
每次３０ｍｉｎ）；然后用５０ｍＬ三氯甲烷与５０ｍＬ蒸馏
水的混合液分３次萃取萃余液中的紫杉醇。分离下
层三氯甲烷萃取液，旋转蒸干得到膏状物。⑥称取
一定质量的硅胶湿法装柱，湿法上样。二氯甲烷三
氯甲烷甲醇（５３∶４４∶３）为洗脱剂充分洗脱。薄层色
谱（ＴＬＣ）跟踪检测，收集含有紫杉醇的部分，减压旋
转蒸干；重复上述试验２次，得３份浸膏。⑦紫杉醇
标准品点状点样，浸膏溶液线状重复点样。三氯甲
烷醋酸乙酯甲醇（８８∶７∶５）为展开剂上行展开。紫
外分析仪确定紫杉醇的比移值 Ｒｆ。刮下并收集硅
胶板上的紫杉醇带，用甲醇充分洗脱并过滤，收集滤
液。重复以上步骤，合并滤液，旋转蒸干。⑧制备型
ＴＬＣ所得浸膏用适量醋酸乙酯溶解，加入１０倍体积
的正己烷，紫杉醇充分沉淀结晶，离心分离得淡黄色
晶体。
２　结果与讨论
２．１　不同提取方法对紫杉醇提取效果的影响
实验考察了紫杉醇的溶剂浸提、超声提取和超
临界ＣＯ２流体萃取，每组试验均进行２次重复试验，
提取结果见表１。
表１　不同提取方法结果对比
提取方法
单次提取
时间／ｈ
单次溶剂
用量／ｍＬ
紫杉醇提取量／ｍｇ
第１组 第２组 第３组 平均值
溶剂浸提 ２４ １８００ １８８７１９０１１８９５ １８９４
超声提取 ２５ １４００ １９８６１９９３１９７４ １９８４
超临界ＣＯ２萃取 ４ ９００ １９４３１９３７１９５１ １９４４
　　由表１可知，超声方法用于紫杉醇的提取可明
显强化传质过程，缩短提取时间，且紫杉醇的回收率
高。超临界ＣＯ２萃取所需溶剂量最少，提取效率较
高，紫杉醇的回收率也高于常规的溶剂浸提。从成
本及节能方面考虑，溶剂浸提优于其他两法，但其操
作周期长，提取效率低。
图１中Ｂ，Ｃ，Ｄ为３种提取方法获得的浸膏的
ＨＰＬＣ图，超临界萃取过程中，夹带剂乙醇溶液改善
了ＣＯ２流体的极性，使其对物料的选择性提高，从而
减少了对低极性杂质的萃取，为提取物后续的纯化
带来方便。
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２．２　紫杉醇浸膏的硅胶柱色谱纯化
经过石油醚及三氯甲烷萃取，所得浸膏（紫杉
醇质量分数１４３％）用柱色谱纯化。硅胶用量为处
理浸膏质量的７０倍。考察硅胶柱色谱纯化紫杉醇
合适的过柱次数。见表２。
表２　硅胶柱色谱数据 ％
紫杉醇浸膏
紫杉醇质量分数
第１组 第２组 第３组
回收率
第１组 第２组 第３组
１次柱色谱 １４２８ １３５９ １３９３ ９７２４ ９５８６ ９６４７
２次柱色谱 １９７５ １９１５ １９３８ ９６４９ ９７０４ ９５５３
３次柱色谱 ２０４２ １９７８ １９８３ ９６８７ ９６２８ ９６１４
　　洗脱剂组成对纯化效果影响很大，笔者曾选用
三氯甲烷乙酸乙酯甲醇（５０∶４８∶２）为洗脱剂，１次
柱色谱所得洗脱液中紫杉醇的质量分数高达
１７６９％，但回收率偏低（８９５２％）。结合薄层色谱
色带分布和多次色谱试验，最终确定二氯甲烷三氯
甲烷甲醇（５３∶４４∶３）为最佳洗脱剂。由表２，进行
的３组试验中，经过１次硅胶柱色谱，浸膏中紫杉醇
的平均质量分数为１３９３％，平均回收率９６５２％，
提纯效果显著。２次柱色谱之后，紫杉醇的纯度进
一步提高。再次过柱，其纯度提高不明显，紫杉醇亦
有损失，综合考虑提纯效果和回收率两方面因素，确
定２次硅胶柱色谱较为合理。图２为经过硅胶柱色
谱的紫杉醇浸膏的色谱图。
２．３　紫杉醇的制备薄层色谱纯化
紫杉醇浸膏经过２次硅胶柱色谱之后，纯度得
到很大提高，但浸膏中低极性杂质的含量仍然比较
高。本实验用制备型ＴＬＣ的方法处理该浸膏，除去
图中保留时间较短的低极性杂质。制备型薄层色谱
的点样方式为带状点样，以提高试样的处理量。
１紫杉醇（图３，４同）。
图２　柱色谱纯化ＨＰＬＣ图
由图３，经过制备ＴＬＣ纯化的浸膏试样中，低极
性杂质明显减少，紫杉醇的质量分数为４６７３％，回
收率９８７５％。ＴＬＣ展开剂的选择至关重要，合适
的展开剂组成和比例可使硅胶板上呈现分离度很好
的色带，对试样的纯化也更为有效。
１紫杉醇。
图３　薄层色谱纯化ＨＰＬＣ图
２．４　正己烷重结晶纯化
经过制备型 ＴＬＣ纯化所得浸膏中紫杉醇的质
量分数接近５０％，试验利用紫杉醇在正己烷中可以
沉淀析出这一特性对该浸膏进行正己烷沉淀结晶纯
化［９］，离心分离得到淡黄色晶体，见图４。
图４　正己烷沉淀结晶物ＨＰＬＣ图
经分析计算得该结晶产物中紫杉醇质量分数为
８７４３％，过程回收率９７４８％。由图４，产物中的杂
质为一小部分低极性物质和一部分与紫杉醇极性相
差不大的物质。正己烷沉淀所得产物再经过半制备
型高效液相色谱即可获得质量分数高于９５％的紫
杉醇［１０］，基于仪器设备所限，笔者未对进一步研究。
２．５　加样回收率试验
为了考察本实验分析方法的可靠性，进行了加
样回收试验。精确量取质量浓度为１０，２０，４０，６０，
１００ｍｇ·Ｌ－１的紫杉醇标准溶液各１ｍＬ加入到５份
等量的被测试样中。结果见表３。
表３　紫杉醇加样回收率（ｎ＝５）
加入量／μｇ 测得量／μｇ 回收率／％ 平均值／％ ＲＳＤ／％
１０ ５７６２２ ９７７５
２０ ６７１５９ ９６５６
４０ ８６１５１ ９５７６ ９８０４ ２０
６０ １０６９７１ ９８５４
１００ １４９４３７ １０１５９
　　注：样品中量为１９４３μｇ。
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试验所得的平均加样回收率为 ９８０４％，ＲＳＤ
２０％，由此可知该试验的分析检测方法可靠。
３　结论
本实验系统研究了曼地亚红豆杉枝条中紫杉醇
的提取和纯化，探索了一条有效的紫杉醇提纯路线。
研究表明利用超临界ＣＯ２流体萃取技术提取曼地亚
红豆杉枝条粉末中的紫杉醇，提取效率高。提取物
经过液液萃取、硅胶柱色谱、薄层色谱以及正己烷沉
淀结晶等纯化手段，最终可得到纯度８７４３％的紫
杉醇产品，过程回收率８９５７％。本实验除了制备
型薄层色谱外，其他提取纯化手段均可通过过程放
大实现工业化，因此可为紫杉醇的工业生产提供参
考。
［参考文献］
［１］　 ＳｃｈｉｆＰＢ，ＦａｎｔＪ，ＨｏｒｗｉｔｚＳＢ．Ｐｒｏｍｏｔｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅａｓ
ｓｅｍｂｌｙｉｎｖｉｔｒｏｂｙｔａｘｏｌ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，１９７９，２７７：６６５．
［２］　 Ｋａｓｉｔｕ，ＧｅｒｔｒｕｄｅＣ，Ｎｏａｈ，ｅｔａｌ．ＰｒｏｃｅｓｓｆｏｒｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＧＭＰ
ｐａｃｌｉｔａｘｅｌａｎｄｒｅｌａｔｅｄｔａｘａｎｅｓ：ＵＳ，６４６９１８６［Ｐ］．２００２０５１６．
［３］　 回　晶，辛　如，李　辉，等．人工种植红豆杉各部位紫杉醇
的提取过程分析［Ｊ］．辽宁大学学报，２００７，３４（２）：１７８．
［４］　 李春斌，佟憬憬，范圣第．东北红豆杉紫杉醇的提取纯化与
ＨＰＬＣ检测［Ｊ］．大连民族学院学报，２００５，７（５）：２１．
［５］　 贾继明，吴立军，任瑞涛，等．黑龙江帽儿山榛树枝条中的紫
杉醇提取方法初探［Ｊ］．中医药信息，２００６，２３（１）：２５．
［６］　 王志刚，周春山，颜家良，等．ＨＰＬＣ测定曼地亚红豆杉枝叶中
紫杉醇含量［Ｊ］．应用化工，２００７，３６（１）：８４．
［７］　 祝顺琴，胡　凯，谈　锋．曼地亚红豆杉枝叶制备紫杉醇浸膏
的优化工艺及中试条件选择［Ｊ］．西南师范大学学报：自然科
学版，２００５，３０（２）：３２１．
［８］　 中国药典．一部［Ｓ］．２００５：１４５．
［９］　 Ｊｅｎｎｅｗｅｉｎ，ＬｏｎｇＳ，ＣｒｏｔｅａｕＲ．ＣｙｔｏｃｈｒｏｍｅＰ４５０ｔａｘａｄｉｅｎｅ５ａ
ｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅ，ａｍｅｃｈａｎｉｓｔｉｃａｌｙｕｎｕｓｕａｌｍｏｎｏｏｘｙｇｅｎａｓｅｃａｔａｌｙｚｉｎｇ
ｔｈｅｆｉｒｓｔｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎｓｔｅｐｏｆｔａｘｏｌｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ［Ｊ］．ＣｈｅｍＢｉｏｌ，
２００４，１１（６）：３７９．
［１０］　ＰａｒｋＹＫ，ＲｏｗＫＨ，ＣｈｕｎｇＳＴ．Ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｅａｎｄ
ｓｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｔａｘｏｌｆｒｏｍｙｅｗｔｒｅｅｂｙＮＰＨＰＬＣ［Ｊ］．ＳｅｐＰｕｒｉｆ
Ｔｅｃｈｎｏｌ，２０００，１９（２）：２７．
ＲｅｓｅａｒｃｈｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｎｇａｎｄｐｕｒｉｆｙｉｎｇｔａｘｏｌｆｒｏｍｔｈｅｂｒａｎｃｈｅｓｏｆＴａｘｕｓｍｅｄｉａ
ＱＩＡＯＬｉａｎｇｊｉｅ，ＭＡＮＲｕｉｌｉｎ，ＮＩＷａｎｇｄｏｎｇ，ＬＩＡＮＧＹｏｎｇｈｕａｎｇ
（ＳｃｈｏｏｌｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＣｅｎｔｒａｌＳｏｕｔｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１００８３，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｈｅｓｔｕｄｙｗａｓｔｏｅｘｐｌｏｒｅｅｘｔｒａｃｔｉｎｇａｎｄｐｕｒｉｆｙｉｎｇｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆｔａｘｏｌｆｒｏｍｔｈｅｂｒａｎｃｈｅｓｏｆＴａｘｕｓｍｅｄｉａ．
Ｍｅｔｈｏｄ：Ｉｎｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｐｈａｓｅ，ｔｈｅｓｏｌｖｅｎｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌＣＯ２ｆｌｕｉｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ；
Ｉｎｐｕｒｉｆｙｉｎｇｐｈａｓｅ，ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｓｗｅｒｅｄｉｓｐｏｓｅｄｂｙｓｉｌｉｃａｇｅｌｃｏｌｕｍｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｎｄｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｌａｍｅｌａｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ｔｈｅｎｃｒｙｓｔａｌｅｄｂｙ
ＮＨｅｘａｎｅ．ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔａｘｏｌｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＨＰＬＣ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｙｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｔｏｘａｌｗｉｔｈｔｈｅｍｅｔｈｏｄｏｆ
ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｗａｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔａｎｄｔｈｅｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙｏｆｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌＣＯ２ｆｌｕｉｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｗａｓｔｈｅｂｅｓｔ；Ｔｈｅｓａｍｐｌｅａｆｔｅｒｂｅｉｎｇｅｘｔｒａｃｔｅｄｓｈｏｕｌｄｂｅｐｕ
ｒｉｆｉｅｄｔｗｏｓｔａｇｅｓｂｙｓｉｌｉｃａｇｅｌｃｏｌｕｍｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｗｉｔｈｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍｍｅｔｈａｎｅ（５３∶４４∶３）ａｓｅｌｕｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｌａｍｅｌａｃｈｒｏｍａ
ｔｏｇｒａｐｈｙｗａｓｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅｍｅｔｈａｎｅ（８８∶７∶５）ａｓｅｌｕｔｉｏｎ，ｆｉｎａｌｙｗｅｒｅａｃｈｅｄｔｈｅｆａｗｎｃｒｙｓｔａｌ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｉｎｔｈａｔｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，ｔｈｅ
ｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔａｘｏｌｒｅａｃｈｅｄ８７４３％ ａｎｄｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｙ８９５７％，ｗｈｉｃｈｉｎｄｉｃａｔｔｈａｔｔｈｅｔａｘｏｌｉｓｗｅｌｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ｔａｘｕｓｍｅｄｉａ；ｔａｘｏｌ；ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌＣＯ２ｆｌｕｉｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ（ＳＦＥ）；ｃｏｌｕｍｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；ｌａ
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