全 文 :黄芩中主要黄酮类成分的含量分析
周锡钦1,张庆英1,梁鸿1,蒋亚杰1,王璇2,王1,赵玉英1
(1北京大学 药学院 天然药物及仿生药物国家重点实验室,北京 100191;
2北京大学 药学院 化学生物学系,北京 100191)
[摘要] 目的:建立黄芩中主要黄酮类成分的高效液相色谱二极管阵列检测器(HPLCDAD)含量测定方法,并研究产地、
生长年限、采收期、栽培和加工方法等对主要黄酮类成分含量的影响。方法:采用ThermoODS2Hypersil色谱柱(46mm×250
mm,5μm),以乙腈01%磷酸水四氢呋喃为流动相进行梯度洗脱,检测波长274nm,流速100mL·min-1,柱温26℃,进样量
20μL。结果:6个主要黄酮,黄芩苷(1)、千层纸素A苷(2)、汉黄芩苷(3)、黄芩素(4)、汉黄芩素(5)和千层纸素 A(6),分别在选
定范围内线性关系良好(R2≥09993),平均加样回收率介于966%~1030%,RSD均小于50%(n=9)。结果:不同产区黄芩
质量差异很大。传统道地和传统非道地黄芩药材中黄酮含量没有显著性差异,但现在道地与非道地、传统道地与现在道地黄芩
药材之间化合物1,2以及6个黄酮含量之和存在较显著差异;生长年限对药材质量影响不是特别显著,但一、二年生药材中的黄
酮含量稍高;春季采收比秋季采收的黄芩黄酮含量高;野生与栽培药材中的黄酮含量除化合物3,6外,其他没有显著性差异;与
药材比较商品饮片中黄酮苷的含量较低,而黄酮苷元的含量则较高。结论:本法简便、准确、重现性好,可作为黄芩药材质量检测
的方法。
[关键词] 黄芩;黄酮;含量测定;HPLCDAD
[收稿日期] 20090306
[基金项目] 国家基础研究发展计划(973)项目(2006CB504707)
[通信作者] 张庆英,Tel:(010)82801725,Fax:(010)82801592,
Email:qyzhang@hsc.pku.edu.cn
黄芩 ScutelariabaicalensisGeorgi.为《中国药
典》收载的常用中药,药用干燥根,春秋采集。黄芩
分布于长江以北大部分省区及西北和西南地区,现
时以山西产量大,并认为河北承德质量较好。黄芩
性味苦寒,具有清热燥湿、解毒止血、安胎之功效。
临床主要用于治疗热病:清泻肺火,用于肺热咳嗽,
发烧感冒;清肠之湿热,用于急性痢疾、胃肠炎;清热
解毒,用于痈肿疮毒、头痛、目赤肿痛;清热安胎,用
于胎热引起的胎动不安。文献报道黄芩中主要活性
成分为黄酮类化合物[14],如黄芩苷、黄芩素、汉黄芩
素具有抗菌、抗炎、抗病毒和抗肿瘤等活性,千层纸
素A具有抗菌和抗病毒活性等。因此黄酮类化合
物的含量是评价黄芩质量较理想的方法,2005年版
药典收载黄芩的含量测定方法为HPLC测定黄芩苷
的含量。但鉴于中药材所含成分复杂,其药效可能
是各成分的综合作用,因此仅用某一个成分作为指
标衡量中药材的质量是不完善的,所以建立多种有
效成分或指标性成分的含量测定方法或指纹图谱,
探讨多成分综合评价体系是非常必要的。文献多采
用HPLCUV方法对其中所含的2个[56],3个[79],4
个[1012],5个[5,13],6个[14],7个[15]等多个主要黄酮
类成分进行含量测定,所测定的化合物主要为黄芩
苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素,另外对黄芩素7
O葡萄糖苷、千层纸素 A、二氢千层纸素 A、千层纸
素A7O葡萄糖醛酸苷、粘毛黄芩素、黄芩新素、黄
芩新素、白杨素、5,7,2′,6′四羟基黄烷酮等的含量
测定也有报道。富森毅等[16]报道采用 2种 HPLC
洗脱溶剂测得其中11个黄酮化合物的含量。本研
究建立了同时测定黄芩中6个主要黄酮类化合物,
黄芩苷(1)、千层纸素A苷(千层纸素A7OβD葡
萄糖醛酸苷,2)、汉黄芩苷(3)、黄芩素(4)、汉黄芩
素(5)和千层纸素 A(6),的 HPLCUV含量测定方
法,并采用该方法测定了42批次不同地区黄芩药材
及11批次黄芩饮片中的含量,分析比较了道地和非
道地、野生和栽培、生长年限、采收季节等对黄酮含
量的影响,为黄芩合理用药、质量控制及资源选择提
供了科学依据。
1 材料
1.1 仪器 配有 ShimadzuSPDM10A二极管阵列
检测器和 ShimadzuSCL10ASystem控制器的 Shi
madzuLC10AT高效液相系统;KQ500DB型数控超
声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);1/1万电
·0192·
第34卷第22期
2009年11月
Vol.34,Issue 22
November,2009
子分析天平(美国 Sartorius);1/10万电子分析天平
(美国Denvor)。
1.2 试剂 色谱纯乙腈为 FisherChemAlert
(FisherScientific)公司产品;色谱纯四氢呋喃为 JT
Baker公司产品;色谱纯甲醇为天津市西华特种试
剂厂产品;高效液相用水为北京大学医学部实验中
心制备的超纯水;其他溶剂为北京北化精细化学品
有限责任公司分析纯产品。
1.3 药材 黄芩药材及商品饮片为2001~2007年
在全国各地采集或购买。其中建立含量测定方法用
黄芩药材为2006年11月购买于河北承德。所有黄
芩药材均由北京大学蔡少青教授鉴定为唇形科 La
biatae黄芩属 Scutelaria植物黄芩 S.baicalensis的
干燥根。
1.4 对照品 定量用6个黄酮对照品,黄芩苷(1)、
千层纸素A苷(2)、汉黄芩苷(3)、黄芩素(4)、汉黄芩
素(5)和千层纸素 A(6),均由作者从黄芩中用色谱
方法分离制备,并经波谱方法鉴定结构[5],其纯度经
HPLC测定,面积归一化法计算大于98%。
2 方法
2.1 色谱条件 ThermoODS2Hypersil色谱柱
(46mm×250mm,5μm),检测波长274nm,流动
相见表1,柱温26℃,流速10mL·min-1,进样量
20μL。理论塔板数不低于 1万,分离度均大于
15。
表1 流动相的洗脱梯度
t/min 乙腈/% 01%磷酸水/% 四氢呋喃/%
0 22 77 1
10 22 77 1
16 25 73 2
26 25 73 2
34 25 71 4
40 27 65 7
54 30 62 8
65 30 62 8
2.2 对照品溶液的制备 分别精密称定对照品1~6
各1310,167,361,451,246和126mg,用色谱甲
醇溶解,转移至5mL量瓶中,甲醇稀释至刻度,摇匀,
即得对照品1~6的储备液,密封4℃保存备用。
2.3 供试品溶液的制备 精密称取200mg黄芩药材
粉末(过40目筛),置于100mL量瓶中,加70%乙醇稀
释至刻度,摇匀。超声提取40min后,静置至室温,取
上清液,用022μm滤膜滤过,作为供试品溶液。
2.4 系统适应性试验 分别吸取对照品溶液和供
试品溶液各20μL,注入高效液相色谱仪,记录色谱
图,见图1。
1.黄芩苷;2.千层纸素A苷;3.汉黄芩苷;4.黄芩素;
5.汉黄芩素;6.千层纸素 A。
图1 河北承德黄芩药材(A)和对照品(B)的HPLC图
2.5 线性关系考察 分别量取对照品1~6的上述
浓度储备液 05,05,05,025,0125,0125mL,
混合于5mL量瓶中,加色谱甲醇稀释至刻度,摇匀,
作为混标储备液。然后分别取 40,20,15,10和 5
μL进样,按照 21项下色谱条件测定,以峰面积
(A)为纵坐标,进样量(C,μg)为横坐标,得到各个
对照品的标准曲线与回归方程,见表2。
表2 对照品1~6的回归方程及
最低检测限(LOD)和最低定量限(LOQ)
No 回归方程 R2 LOD/mgLOQ/mg
1 A=2766×105C+7654×104 09996 410 1640
2 A=3731×106C+1135×105 09993 520 1040
3 A=3113×106C+3271×105 09999 451 1130
4 A=4728×106C+7645×105 09997 1409 2114
5 A=6264×106C+4597×104 09997 578 1538
6 A=5714×106C+4758×104 09993 295 788
2.6 精密度试验 按供试品溶液制备方法制备供
试品溶液,日内精密度连续进样5次,日间精密度每
天进样一次,连续进样3d。测定对照品1~6的含
量,计算 RSD。对照品1~6的日内精密度 RSD分
别为 08%,05%,17%,24%,18%,24%,日
间精密度 RSD分别为02%,17%,17%,03%,
11%,26%。6个化合物的日内及日间精密度
RSD<30%,表明该方法日内和日间精密度良好,
符合含量测定要求。
2.7 重复性试验 按供试品溶液制备方法制备5
份供试品溶液,测定对照品1~6的含量,计算化合
物1~6的RSD分别为11%,16%,09%,18%,
·1192·
第34卷第22期
2009年11月
Vol.34,Issue 22
November,2009
17%和20%,RSD<30%,表明方法重复性良好,
符合含量测定要求。
2.8 稳定性试验 按供试品溶液制备方法制备供
试品溶液,分别在 0,3,6,12,24,48h测定对照品
1~6的含量,计算化合物1~6的RSD分别为06%,
21%,26%,29%,13%和 22%,RSD<30%,
表明供试品溶液中6个化合物48h内稳定的。
2.9 加样回收率试验 取黄芩药材粉末9份,每份
100mg,精密称定,分别加入一定数量的化合物1~6
的对照品,按供试品溶液制备项下的方法制备成高
(n=3)、中(n=3)、低(n=3)3种浓度的供试液,分
别进行 HPLC检测,计算加样回收率。化合物1~6
的平均加样回收率分别为 1006%,1020%,
1002%,966%,1030%,1015%,RSD分别为
50%,36%,44%,32%,31%,40%,RSD<
50%,表明该方法符合含量测定要求。
2.10 样品测定 分别精密称取53批次黄芩样品
200mg各2份,按供试品溶液制备方法制备供试品
溶液。022μm微孔滤膜过滤后,取20μL进样,按
照21项下色谱条件检测,根据标准曲线计算各成
分含量(表3~5)。
3 结果与讨论
本文用建立的方法,测定了采集和购买的42批
次黄芩药材(其中包括传统道地和非道地产区、现
在道地和非道地产区、野生和栽培品种、不同生长年
限药材)和11批次黄芩商品饮片中化合物1~6的
含量,见表3~5。结果表明不同产区黄芩药材和商
品中6个黄酮类化合物1~6的含量差别较大,6个
黄酮的质量分数范围分别为:7931% ~29541%,
0385% ~2516%,1558% ~6020%,0271% ~
6235%,0058% ~1517%和 0000% ~0483%,
化合物含量高低顺序依次为1?3?4?2?5?6。
表3 黄芩药材中黄酮1~6的质量分数 %
产区 采集或购买日期 产地 1 2 3 4 5 6 总和 备注
传统道地产区 200707 山东莱芜 19846 0570 4396 0770 0097 0002 25681 栽培2年
200707 山东莱芜 12202 0385 2665 0271 0112 n.d 15635 栽培3年
200707 山东莱芜 29541 1758 6020 2260 0336 0097 40012 野生
200609 甘肃庆阳 24300 2516 5988 1176 0320 0167 34467 栽培2年
200709 甘肃庆阳 24190 1781 4122 0367 0060 0038 30558 栽培3年
200609 甘肃庆阳 19126 1279 3223 0886 0146 0074 24734 野生
200709 甘肃庆阳 18988 2090 2945 0464 0104 0091 24682 野生
200610 陕西延安 15256 0909 4002 2606 0405 0153 23331 栽培2年
200709 陕西延安 19457 0813 4082 0704 0136 0014 25206 栽培6年
200709 陕西延安 22215 1416 4102 0362 0058 0012 28165 野生
传统非道地产区 200709 山西长治 19422 1160 3845 0831 0113 0039 25410 栽培2年
200610 山西陵川 19552 2057 4184 0877 0211 0131 27012 栽培3年
200709 山西长治 21029 1524 5413 0944 0152 0049 29111 栽培4年
200709 山西长治 8222 0726 2112 0306 0105 0051 11522 栽培6年
现在道地产区 199808 河北隆化 14631 0285 3671 0468 0120 n.d. 19175 栽培2年
200709 河北隆化 13103 0640 3030 0960 0230 0059 18022 栽培3年
199808 河北隆化 13671 0564 3382 1168 0314 0083 19182 栽培4年
200709 河北隆化 13548 0490 3148 1304 0303 0066 18859 野生
199808 河北隆化 9322 0501 1987 1464 0393 0091 13758 野生
200710 河北承德 13070 0571 2904 0684 0102 0012 17343 栽培2年
200710 河北承德 13265 0645 3215 0879 0169 0023 18196 栽培3年
现在非道地产区 200709 内蒙古喀喇沁旗 16539 0633 4571 2126 0399 0093 24361 栽培1年
200709 内蒙古喀喇沁旗 18179 1207 4689 1490 0397 0112 26074 栽培2年
200709 内蒙古喀喇沁旗 16528 0771 4322 1658 0386 0111 23776 栽培4年
200709 内蒙古喀喇沁旗 13828 0530 2881 1346 0312 0110 19007 野生
200709 内蒙古喀喇沁旗 9885 0710 2239 1495 0611 0278 15218 野生
200709 甘肃岷县 12096 0630 2845 0716 0197 0038 16522 栽培2年
200710 甘肃岷县 16809 0588 4230 0552 0145 - 22324 栽培2年
200709 陕西商洛 18990 1046 4139 1651 0236 0084 26146 栽培2年
200709 陕西商洛 19658 0833 3921 1078 0105 0017 25612 栽培3年
199807 山东莱阳 17931 0540 4179 0505 0119 0012 23286 栽培1年
199808 陕西榆社 17420 0946 4545 1616 0243 0078 24848 栽培1年
199808 陕西榆社 20329 0753 4145 0883 0191 0023 26324 栽培2年
199907 黑龙江杜蒙县 14047 0649 3008 1318 0333 0097 19452 野生
·2192·
第34卷第22期
2009年11月
Vol.34,Issue 22
November,2009
表4 不同季节采收黄芩药材黄酮1~6的质量分数 %
季节 采集日期 1 2 3 4 5 6 总和
春季 200004 23724 1757 4535 1282 0187 0083 31568
200104 24337 1619 4780 1266 0194 0071 32267
200105 27562 2171 4928 0810 0131 0064 35666
200505 25741 2235 5452 1298 0225 0089 35040
秋季 199809 19149 1227 3098 1207 0185 0061 24927
199809 19345 1358 3674 1085 0082 0067 25611
199810 19318 1436 4544 1232 0201 0090 26821
200010 20568 1007 4617 1126 0190 0060 27568
注:样品均为山西榆社县栽培、不同采集的黄芩药材。
表5 黄芩商品饮片中黄酮1~6的质量分数 %
购买日期 购买地 1 2 3 4 5 6 总和
200706 北京 11068 0669 1998 2073 0440 0211 16459
200802 河南郑州 13459 0907 2670 1749 0450 0200 19435
200709 山西长治 20231 2127 5222 0464 0168 0086 28298
200608 安徽凤阳 10291 0777 2039 1406 0321 0176 15010
200707 云南德钦 9882 0506 2909 4091 0718 0235 18341
200802 黑龙江齐齐哈尔 14109 0794 3498 2300 0357 0135 21193
200707 吉林通化 7931 1277 2730 2160 0488 0351 14937
200608 湖南道县 8585 0414 1558 6235 1517 0483 18792
200802 河北丰宁 14109 0794 3498 2300 0357 0135 21193
200709 甘肃合水 15902 1039 4180 1019 0320 0076 22536
200710 甘肃宕昌 11239 1729 3333 1053 0354 0184 17892
对实验数据进一步进行统计,分析了道地和非
道地、野生和栽培、生长年限、采收季节和药材加工
等因素对黄酮类化合物含量的影响,并以6个黄酮
化合物的含量及其活性为指标探讨了黄芩药材的质
量优劣,见表6~10。
3.1 道地产区与非道地产区黄芩药材的黄酮含量
表6 不同产区黄芩药材中黄酮1~6含量对比分析 %
化合物
道地产区
传统中位值
(n=10)
现在中位值
(n=7)
非道地产区
传统现中位值
(n=4)
现在中位值
(n=13)
秩和检验(p)
传统道地与
传统非道地
现在道地与
现在非道地
传统道地与
现在道地
1 19652 13265 19487 16809 0480 0013 0005
2 1348 0564 1342 0710 1000 0013 0011
3 4092 3148 4015 4145 0777 0075 0032
4 0737 0960 0854 1346 1000 0122 0380
5 0124 0230 0133 0243 0671 0405 0329
6 0056 0059 0050 0084 0671 0177 0591
总和 25444 18196 26211 22617 0777 0013 0005
对比分析 表3的统计学分析结果表明,传统道地
和非道地产区黄芩药材中所测6个黄酮化合物的含
量均没有显著性差异;但现在道地与非道地产区、传
统道地与现在道地产区黄芩药材之间化合物1,2以
及6个黄酮含量之和存在较显著差异,而化合物
4~6无显著差异;化合物3的含量在现在道地与非
道地产区黄芩药材之间无显著性差别,但在传统道
地与现在道地产区黄芩药材之间存在较显著差别。
总的看来传统道地、传统非道地和现在非道地产区
药材中黄酮含量较高,而现在道地产区黄芩药材中
黄酮含量较低。
3.2 不同生长年限黄芩药材的黄酮含量对比分析
·3192·
第34卷第22期
2009年11月
Vol.34,Issue 22
November,2009
表7 不同生长年限黄芩药材中黄酮1~6中位值
对比分析 %
化合物
1年
(n=3)
2年
(n=11)
3年
(n=6)
4年
(n=3)
5年
(n=2)
秩和
检验
(P值)
1 17420 18179 16409 16528 13840 0966
2 0633 0753 0739 1771 0770 0950
3 4545 4139 3568 4322 3097 0148
4 1616 0831 0878 1168 0505 0223
5 0243 0191 0141 0314 0121 0305
6 0078 0038 0305 0083 0033 0794
总和 24361 25419 21904 23776 18364 0874
表8 栽培与野生黄芩药材中黄酮1~6中位值对比分析
%
化合物
栽培药材
(n=33)
野生药材
(n=9)
秩和检验
(P值)
1 19149 14047 0277
2 0909 0710 0635
3 4145 3008 0019
4 0960 1318 0226
5 0187 0312 0185
6 0060 0091 0038
总和 25410 19450 0203
表9 不同采收季节黄芩药材中黄酮1~6含量对比分析
%
化合物
春季药材
(n=4)
秋季药材
(n=4)
秩和检验
(P值)
1 25039 19332 0021
2 1964 1293 0021
3 4854 4109 0083
4 1274 1167 0248
5 0191 0188 0564
6 0077 0064 0386
总和 33653 26216 0021
表10 黄芩药材与商品饮片中黄酮1~6中位值对比分析
%
化合物
药材
(n=42)
商品饮片
(n=11)
秩和检验
(P值)
1 18989 11239 0002
2 0871 0794 0878
3 4092 2909 0020
4 1082 2073 0004
5 0191 0357 0000
6 0665 0184 0000
总和 24888 18792 0012
由表7可以看出,不同生长年限的黄芩药材中
6个黄酮的含量无显著性差异,即生长年限对药材
质量影响不显著。但总的看来,一、二年生药材中的
6个黄酮化合物含量稍高,所以采收栽培一年和二
年生的黄芩药材即可。
3.3 栽培与野生黄芩药材的黄酮含量对比分析
对测定的栽培与野生药材中的6个化合物总含量结
果进行统计学对比分析(表8),可以看出除化合物
3和6含量差别较明显外,其他化合物及6个黄酮
含量之和均无显著性差异。但总的看来栽培药材中
黄酮类化合物含量较高。
3.4 不同采收期黄芩药材的黄酮含量对比分析
以山西榆社县春秋两季采集的样品(表9)进行比较
分析不同采收期药材中主要黄酮类化合物含量,结
果显示春季采收药材中的黄酮1~6以及6个黄酮
之和均要高于秋季采收药材,统计学分析数据表明
化合物1,2和6个黄酮类化合物含量之和具有显著
性差异。
3.5 黄芩药材与饮片中的黄酮含量对比分析 表10
的实验结果表明黄芩药材中黄酮苷类化合物(1~
3)的含量明显高于商品饮片,而苷元(4~6)的含量
则明显低于商品饮片。统计学分析表明除化合物2
外,其他化合物及6个化合物含量之和均有显著性
差异。分析其原因可能是由于在饮片加工炮制过程
中苷类成分被水解或酶解生成苷元所致。
3.6 药材主要成分含量与其药性和药效的关系
黄芩为寒性药,具有清热燥湿、泻火解毒的功效,即
具有解热、抗炎、抗菌等作用。作者采用体外方法对
主要黄酮类成分的抗菌和抗炎活性进行了测定[17],
实验结果表明黄芩素抗菌活性最强,且具有良好的
量效关系;黄芩苷、千层纸素 A苷和黄芩素具有抑
制与炎症相关的 IL1β转换酶(IL1βcovertingen
zyme,ICE)的作用。文献报道黄芩苷转运进入肠壁
上皮细胞后,可被存在于其中的广谱 β葡萄糖苷酶
(broadspecificβglucosideenzyme,BSβG)水解为苷
元黄芩素[18],在人口服黄芩苷后代谢的相关研究
中,表明黄芩苷在肠道细菌酶的作用下水解为其苷
元黄芩素[19]。所以根据药理活性和含量测定结果,
可以初步认为总黄酮含量高且黄芩苷与黄芩素含量
高的药材质量较好。
[参考文献]
[1] 杨得坡,胡海燕,黄世亮,等.黄芩苷元和黄芩苷对皮肤真菌
与细菌抑制作用的研究[J].中药材,2000,23(5):272.
·4192·
第34卷第22期
2009年11月
Vol.34,Issue 22
November,2009
[2] MaSC,DuJ,ButPPH,etal.AntiviralChinesemedicinal
herbsagainstrespiratorysyncytialvirus[J].JEthnopharm,
2002,79:205.
[3] ChungCP,ParkJB,BaeKH.Pharmacologicalefectsofmeth
anolicextractfromtherootofScutelariabaicalensisanditsfla
vonoidsonhumangingivalfibroblast[J].PlantaMed,1995,61
(2):150.
[4] ChangWH,ChenCH,LuFJ.DiferentefectsofBaicalein,
baicalinandwogoninonmitochondrialfunction,glutathionecon
tentandcelcycleprogressioninhumanhepatomacellines[J].
PlantaMed,2002,68:128.
[5] 杨立新,刘岱,冯学峰,等.高效液相色谱法测定不同产地黄
芩中黄酮化合物的含量[J].中国中药杂志,2002,27(3):
166.
[6] 宋双红,张媛,王?之,等.HPLC测定不同产地黄芩中黄酮化
合物的含量[J].中国中药杂志,2006,31(7):598.
[7] 刘源,邓少伟,原文鹏,等.RPHPLC法测定黄芩中3种黄酮
[J].中草药,2005,36(8):1247.
[8] 周晓宁,杨滨,等.高效液相色谱电化学检测器测定黄芩中3
种有效成分的含量[J].中国中药杂志,2006,31(1):47.
[9] 田建红.不同产地黄芩中的有效成份含量分析[J].海峡药
学,2009,21(3):57.
[10] 马翠英,戴宝成,林瑞超.黄芩中四种黄酮的 HPLC定量分析
及其黄酮类成分指纹图谱研究[J].药物分析杂志,2003,23
(2):83.
[11] ZhangYY,GuoYZ,AgetaH,etal.Quantitativeanalysisof
flavonoidsinscutelariaeradixofdiferentsourcesandseasonal
variationbyHPLC[J].JChinPharmSci,1998,7(3):138.
[12] 符洪,肖新月,张南平,等.药用黄芩中主要化学成分分析
[J].药物分析杂志,2003,23:33.
[13] 张箭,肖丽和,李发美.RPHPLC法测定黄芩属四种药材中五
个活性成分的含量[J].中药材,2005,28(5):389.
[14] 中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所,日本大正制
药株式会社著.常用中草药高效液相色谱分析[M].北京:科
学出版社,1999:9.
[15] TakinoY,TaketsuneM,EikoA,etal.Determinationofsome
flavonoidsinscutelariaeradixbyhighperformanceliquidchro
matography[J].ChemPharmBul,1987,35(8):3494.
[16] TomimoriT,JinH,MiyaichiY,etal.Studiesontheconstitu
entsofscutelariaspecies.Ⅴ.Ontheflavonoidconstituentsfrom
therootsofScutelariabaicalensisGeorgi.5.Quantitativeanaly
sisofflavonoidsinscutelariarootsbyhighperformanceliquid
chromatography[J].YakugakuZasshi,1985,105(2):148.
[17] 周锡钦,梁鸿,路新华,等.中药黄芩主要黄酮类成分及其生
物活性研究[J].北京大学学报:医学版,2009,41(5):578.
[18] DayAJ,DupontMS,RidleyS,etal.Deglycosylationoffla
vonoidandisoflavonoidglycosidesbyhumansmalintestineand
liverβglucosidaseactivity[J].FEBSLet,1998,436(1):71.
[19] ChenX,CuiL,DuanX.Pharmacokineticsandmetabolismof
theflavonoidscutelarininhumansafterasingleoraladministra
tion[J].JDrugMetabDispos,2006,34(8):1345.
AnalysisofmainflavonoidscontentsofScutelariabaicalensis
ZHOUXiqin1,ZHANGQingying1,LIANGHong1,JIANGYajie1,WANGXuan2,WANGBin1,ZHAOYuying1
(1StateKeyLaboratoryofNaturalandBiomimeticDrugs,SchoolofPharmaceuticalSciences,
PekingUniversityHealthScienceCenter,Beijing100191,China;
2SchoolofPharmaceuticalSciences,PekingUniversityHealthScienceCenter,Beijing100191,China)
[Abstract] Objective:TodevelopaHPLCDADmethodforsimultaneousdeterminationofsixflavonoidsinScutelariaba
icalensis,andstudytheefectofgeographicsources,culturation,harvestingtimeandprocessingonthecontentsofflavonoids.Meth
od:TheanalysiswasperformedonaThermoODS2Hypersilcolumn(46mm×250mm,5μm)at26℃ withagradientprogramof
acetonitrile01% H3PO4aqueoussolutiontetrahydrofuranasthemobilephaseandaDiodeArayDetectorasthedetectorwiththede
tectionwavelengthat274nm.Theflowratewas10mL·min-1,andtheinjectionvaluewas20μL.Result:Sixflavonoids,baicalin
(1),oroxylinA7Oglucuronide(2),wogonoside(3),baicalein(4),wogonin(5)andoroxylinA(6),werelinearoverthese
lectedrangewithR2≥09993.Theaveragerecoverieswerebetween966%1030%,andRSDwerelessthen50% (n=9)forfla
vonoids16.Byanalyzingthedataobtained,theefectofgeographicsources,culturation,harvestingtimeandprocessingonthecon
tentsofflavonoidswerediscussed.Conclusion:Thismethodissimple,sensitive,reliableandreproducible.Itcanbeusedforthe
qualitycontrolofS.baicalensis.
[Keywords] Scutelariabaicalensis;flavonoids;qualitycontrol;HPLCDAD [责任编辑 王亚君]
·5192·
第34卷第22期
2009年11月
Vol.34,Issue 22
November,2009