全 文 ：粉防己专属性对照物质的研究
刘莹１，２，邓安臖１，李喜凤２，李志宏１，杜冠华１，秦海林１
（１．中国医学科学院 北京协和医学院 药物研究所 中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室，
北京 １０００５０；２．河南中医学院，河南 郑州 ４５０００８）
［摘要］ 目的：扩展中草药专属性对照物质（ＣＳＰＤ）的研究；建立粉防己的专属性对照物质并归属其核磁共振氢谱（１Ｈ
ＮＭＲ）和高效液相色谱（ＨＰＬＣ）特征信号，用于粉防己药材基源鉴定和质量控制。方法：采用规范化的程序获取粉防己专属性
对照物质并测定其１ＨＮＭＲ和ＨＰＬＣ图谱；通过硅胶柱色谱法分离粉防己专属性对照物质化学成分，鉴定各单体化合物的结
构，实现１ＨＮＭＲ和ＨＰＬＣ图谱的解析。结果：所分析的９个不同来源的粉防己样品中，８个样品的专属性对照物质的１ＨＮＭＲ
和ＨＰＬＣ图谱有很好的重现性和特征性；另有１个样品与其他样品存在主要成分相对含量的差异。从粉防己专属性对照物质
中分得粉防己碱、防己诺林碱、ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ２′Ｎβｏｘｉｄｅ，ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ２′Ｎαｏｘｉｄｅ，（＋）荷包牡丹碱、荷包牡丹酮和腺嘌呤等７个
成分，经波谱分析鉴定了结构。粉防己专属性对照物质的１ＨＮＭＲ和ＨＰＬＣ图谱主要显示粉防己碱和防己诺林碱等双苄基异
喹啉生物碱的特征信号。结论：粉防己专属性对照物质的１ＨＮＭＲ和 ＨＰＬＣ图谱反映了其主要活性成分的结构和整体组成，
适用于其基源鉴定和质量评价。
［关键词］ 粉防己；专属性对照物质；整体化学特征；１ＨＮＭＲ；ＨＰＬＣ
［收稿日期］ ２００９０１０５
［基金项目］ 国家自然科学基金项目（３０６３００７３）；科技部科技基础
性工作专项重点项目（２００７ＦＹ１３０１００）
［通信作者］ 秦海林，Ｔｅｌ：（０１０）８３１７２５０３，Ｅｍａｉｌ：ｑｉｎｈａｉｌｉｎ＠
ｉｍｍ．ａｃ．ｃｎ
粉防己 ＲａｄｉｘＳｔｅｐｈａｎｉａｅＴｅｔｒａｎｄｒａｅ是《中国药
典》收载常用中药品种，来源于防己科千金藤属
Ｓｔｅｐｈａｎｉａ植物粉防己 ＳｔｅｐｈａｎｉａｔｅｔｒａｎｄｒａＳ．Ｍｏｏｒｅ
的干燥根；其味苦辛，性寒，有祛风除湿、利尿通淋的
功用［１２］。该植物在我国主要分布于浙江、安徽、福
建、湖南、江西、广西、广东、海南和台湾等南方省区。
有关粉防己化学成分，据文献报道主要是双苄基异
喹啉生物碱，并含有原小檗碱型、吗啡烷型和菲类生
物碱，代表性成分为粉防己碱和防己诺林碱，其他成
分含量较低［３４］；其中，粉防己碱具有显著的拮抗
Ｃａ２＋通道作用，还显示出调节心血管功能紊乱、抗肿
瘤和抗炎等方面的作用［５］。在粉防己药材的质量
控制方面，《中国药典》以组织学和薄层色谱法为手
段，通过描述其显微特征以及检测粉防己碱和防己
诺林碱的ＴＬＣ斑点达到鉴别粉防己药材基源的目
的，并用ＨＰＬＣ方法测定粉防己药材中粉防己碱的
含量，限定其含量不得低于１６％，是目前控制粉防
己药材质量的量化指标。这些手段在实际应用中获
得了很好的效果。作为开展中草药专属性分析研究
的系列内容之一，为达到建立获取中草药专属性对
照物质的规范化操作程序的目标，本文在前文［６］的
研究基础上，对收集的９个市售粉防己样品按已建
立的规范化程序制备其专属性对照物质，测定并分
析其１ＨＮＭＲ和ＨＰＬＣ图谱。在研究粉防己专属性
对照物质化学成分并分离鉴定７个化合物的基础
上，通过与主要生物碱成分的图谱比较完成了１Ｈ
ＮＭＲ和ＨＰＬＣ图谱中各特征信号的解析。
１ 材料
Ｍｅｒｃｕｒｙ３００ＮＭＲ波谱仪；Ａｇｉｌｅｎｔ１２００型高效
液相色谱（ＨＰＬＣ）仪，配有 ＤＡＤ检测器，四元低压
梯度泵、在线脱气装置、自动进样器；ＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎ工
作站（Ａｇｉｌｅｎｔ科技有限公司）；Ａｇｉｌｅｎｔ１１００型 ＬＣ／
ＭＳＤＴｒａｐＳＬ型质谱仪。甲醇（天津市永大化学试
剂开发中心）和乙腈（Ｊ＆ＫＣＨＥＭＩＣＡＬＬＴＤ）为色谱
纯；水为纯净水（杭州娃哈哈集团有限公司）；三乙
胺（国药集团化工有限公司）为分析纯；其余试剂
（北京化工厂）均为分析纯。
粉防己样品于２００７年１１月购自国内不同市场，
经中国医学科学院药物研究所马林副研究员按传统
生药学方法鉴定均为防己科千金藤属植物粉防己Ｓ
ｔｅｔｒａｎｄｒａ的干燥根。标本存放于中国医学科学院药
物研究所天然药物化学研究室。
２ 专属性对照物质的获取和１ＨＮＭＲ波谱的测定
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取干燥的各粉防己样品５０ｇ，粉碎，以９５％乙
醇水浴回流提取１ｈ，滤取提取液，药渣再用９５％乙
醇水浴回流提取０５ｈ，滤取提取液，与第１次提取
液合并，回收乙醇至溶液体积约９０ｍＬ，加水至醇浓
度约为８０％，用石油醚萃取３次（３×１００ｍＬ）；将醇
溶液回收溶剂至无醇味，加水调至约１００ｍＬ溶解，
用醋酸乙酯萃取３次（３×１００ｍＬ），合并醋酸乙酯
萃取液；水层再用正丁醇萃取２次（２×１００ｍＬ），合
并正丁醇萃取液。
将醋酸乙酯萃取液先用５％碳酸氢钠水溶液萃
取３次（３×１００ｍＬ），再用水萃取 ２次（２×１００
ｍＬ）；醋酸乙酯溶液用无水硫酸钠脱水，减压回收醋
酸乙酯并蒸发至干，得对照物质Ａ（ＣＳＰＤＡ）。将正
丁醇萃取液先用５％碳酸氢钠水溶液萃取３次（３×
１００ｍＬ），再用水萃取２次（２×１００ｍＬ），合并正丁
醇溶液，用无水硫酸钠脱水，减压回收正丁醇，并蒸
发至干，得对照物质Ｂ（ＣＳＰＤＢ）。
将各样品 ＣＳＰＤ Ｂ溶于氘代二甲基亚砜
（ＤＭＳＯｄ６，９９５％）中，在ＮＭＲ波谱仪上测定其
１Ｈ
ＮＭＲ波谱。由于粉防己 ＣＳＰＤＡ得率很小，且图谱
特征性不强，本文未做进一步分析。
３ 专属性对照物质的ＨＰＬＣ分析
色谱条件：ＣｏｓｍｏｓｉｌＣ１８柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５
μｍ）；流动相 甲醇乙腈水５５∶２０∶２５（含００７５％三
乙胺）；检测波长２４２ｎｍ；流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１；柱温
２５℃，进样量１０μＬ。
样品和纯品的测定：取约５ｍｇ粉防己ＣＳＰＤＢ，
用甲醇溶解并定容至１０ｍＬ，用０４５μｍ的滤膜过
滤得样品溶液。取此溶液１０μＬ，注入高效液相色
谱仪，记录得样品色谱图。
分别取粉防己碱和防己诺林碱纯品各约２ｍｇ，
用甲醇溶解，并定容至２ｍＬ，用０４５μｍ的滤膜过
滤得对照品溶液。取此溶液适量，注入ＨＰＬＣ仪，记
录得纯品色谱图。
４ 粉防己专属性对照物质化学成分的分离
将粉防己药材２０ｋｇ，按上述专属性对照物质的
获取程序处理，得到ＣＳＰＤＢ部分５５ｇ。此部分通过
２００～３００目硅胶进行柱色谱分离，以三氯甲烷甲醇
（１００∶０～０∶１００）进行梯度洗脱，经薄层（硅胶ＧＦ２５４）
色谱检视，合并相同洗脱部分，得到８个组分（Ｆｒ．１～
Ｆｒ．８）。从Ｆｒ．１（洗脱剂体积分数为５０∶１）部分析出
棕红色结晶为化合物１；Ｆｒ．２（洗脱剂体积分数为５０∶
１）部分经硅胶柱色谱，三氯甲烷甲醇梯度洗脱（１００∶
０～２５∶１），得到组分 Ｆｒ．２１（１００∶０～１００∶１），Ｆｒ．２２
（５０∶１）和Ｆｒ．２３（２５∶１）。Ｆｒ．２３部分析出化合物２；
Ｆｒ．２１部分再经硅胶柱色谱，三氯甲烷洗脱，再经
ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ２０凝胶柱色谱，三氯甲烷甲醇１∶１洗
脱，得到化合物３。Ｆｒ．４（洗脱剂体积分数为２５∶１）部
分经硅胶柱色谱，三氯甲烷甲醇洗脱（５０∶１），重结晶
得到化合物４；Ｆｒ．５（洗脱剂体积分数为１５∶１）部分经
硅胶柱色谱，三氯甲烷甲醇洗脱（２５∶１），得化合物５；
Ｆｒ．６（洗脱剂体积分数为１０∶１）部分经硅胶柱色谱，三
氯甲烷甲醇洗脱（１５∶１），得化合物６；Ｆｒ．８（洗脱剂体
积分数为５∶１）部分采用硅胶柱色谱，三氯甲烷甲醇
洗脱（１５∶１），结合ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ２０凝胶柱色谱，采用
三氯甲烷甲醇１∶１洗脱，分离得化合物７。
５ 结果与讨论
通过分析上述各化合物的ＭＳ和 ＮＭＲ数据，并
与文献报道的各化合物的数据比较鉴定７个化合物
分别为荷包牡丹酮（１）［７］，粉防己碱（２）［８］，（＋）荷
包牡丹碱（３）［９］，防己诺林碱（４）［１０］，腺嘌呤
（５）［１１］，ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ２′Ｎαｏｘｉｄｅ（６）［１２］，ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ
２′Ｎβｏｘｉｄｅ（７）［１３］。其中，化合物１，３，５为首次从
粉防己中分离得到。化合物２，４结构式见图１。
图１ 化合物２，４结构式
对所研究的９个不同来源的粉防己样品 ＣＳＰＤ
Ｂ的１ＨＮＭＲ波谱进行比较分析，结果表明，其中８
个样品的波谱图特征非常相似，有很好的一致性
（表１）。典型样品的１ＨＮＭＲ波谱图如图２所示。
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表１ 粉防己ＣＳＰＤＢ１ＨＮＭＲ图谱的基本数据（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）
基本数据
／δ
河南
辉县
天津
福建
福州
安徽
合肥
湖南
长沙
山东
济南
江苏
南京
江西
樟树
信号类型ｃ
７７６ －ａ － － － ＋ｂ ＋ ＋ － ｂｒｓ，Ｃ４的ＯＨ７
７４３ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｂｒｄ，Ｊ＝８１Ｈｚ，Ｃ２和Ｃ４的Ｈ１４′
７０６ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｄｄ，Ｊ＝８４，２１Ｈｚ，Ｃ２和Ｃ４的Ｈ１３′
６９０ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｄ，Ｊ＝８４Ｈｚ，Ｃ２的Ｈ１３
６８９ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｄ，Ｊ＝８４Ｈｚ，Ｃ４的Ｈ１３
６７５ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｂｒｄ，Ｊ＝８１Ｈｚ，Ｃ２的Ｈ１０′
６７１ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＮＤｄ，Ｃ４的Ｈ１３二重峰高场一侧的信号
６６６ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｄｄ，Ｊ＝８１，２４Ｈｚ，Ｃ２和Ｃ４的Ｈ１１′
６６０ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｓ，Ｃ２的Ｈ５′
６５５ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｓ，Ｃ４的Ｈ５′
６３８ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｓ，Ｃ２的Ｈ５
６３４ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＮＤ
６２９ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｄｄ，Ｊ＝８４，２１Ｈｚ，Ｃ２的Ｈ１４
５９１ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｓ，Ｃ２的Ｈ８′
５８８ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｓ，Ｃ４的Ｈ８′
３８７ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｄｄ，Ｊ＝１０２，５４Ｈｚ，Ｃ２和Ｃ４的Ｈ１′
３７９ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｓ，Ｃ２的１２ＯＣＨ３
３７７ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｓ，Ｃ４的１２ＯＣＨ３
３６６ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｓ，Ｃ２的６ＯＣＨ３
３６４ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｓ，Ｃ４的６ＯＣＨ３
３４９ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｄ，Ｊ＝９６Ｈｚ，Ｃ２和Ｃ４的Ｈ１
３２７ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｓ，Ｃ２的６′ＯＣＨ３
３２３ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｓ，Ｃ４的６′ＯＣＨ３
３０１ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｓ，Ｃ２的７ＯＣＨ３
２４９ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｓ，Ｃ２和Ｃ４的２′ＮＣＨ３
２１６ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｓ，Ｃ２的２ＮＣＨ３
２１４ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ｓ，Ｃ４的２ＮＣＨ３
注：ａ（－）表示未检测到相应信号；ｂ（＋）表示检测到相应信号；ｃＣ２．化合物２，Ｃ４．化合物４；ｄＮＤ表示信号分辨不清晰。
图２ 粉防己ＣＳＰＤＢ的１ＨＮＭＲ图谱
（河南辉县市售样品，３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯｄ６）
通过与分离得到的标准品的１ＨＮＭＲ波谱比
较，可见粉防己ＣＳＰＤＢ的１ＨＮＭＲ波谱的特征信号
主要是其双苄基异喹啉生物碱的特征信号的叠加，
且其中主要的脂肪族氢、烷氧基氢、烷氮基氢和芳香
族氢的信号可以被明确归属到对应的单体化合物。
粉防己碱和防己诺林碱的氢谱信号在波谱图中最
强。与粉防己碱和防己诺林碱单体化合物的１Ｈ
ＮＭＲ波谱图相对应，粉防己 ＣＳＰＤＢ的１ＨＮＭＲ波
谱图的共振信号由主要集中在高场区δ２１４～３８７
的脂肪族氢、烷氧基氢和烷氮基氢和低场区 δ
５８８～７７６的芳香族氢和酚羟基氢信号组成，其中，
粉防己碱和防己诺林碱的１ＨＮＭＲ特征信号在
ＣＳＰＤＢ的１ＨＮＭＲ波谱图中可得到明确的归属，构
成了粉防己ＣＳＰＤＢ的１ＨＮＭＲ波谱图的基本数据。
当分辨清晰时，可以指认波谱图中的特征共振信号：
在低场区，δ７７６（ｂｒｓ）的共振信号与化合物４的７
位酚羟基的信号一致，但由于测试１ＨＮＭＲ波谱图
时所用溶剂含水分的不同，该羟基信号并非在所有
样品中显示，这一点也进一步证实其为羟基氢信号；
δ７４３（ｂｒｄ，Ｊ＝８１Ｈｚ），７０６（ｄｄ，Ｊ＝８４，２１
Ｈｚ），６６６（ｄｄ，Ｊ＝８１，２４Ｈｚ）分别对应化合物
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２和４分子结构中１４′，１３′和１１′位芳香质子的信号，
因为这两个化合物结构相似，仅７位的取代基稍有
不同，因此，这３个芳香质子分别在各自分子中所处
的化学环境比较接近，信号巧合而两两重叠，这一点
与标准品在 ＤＭＳＯｄ６中的
１ＨＮＭＲ波谱图一致；δ
６９０（ｄ，Ｊ＝８４Ｈｚ），６７５（ｂｒｄ，Ｊ＝８１Ｈｚ），６６０
（ｓ），６３８（ｓ），６２９（ｄｄ，Ｊ＝８４，２１Ｈｚ）和５９１（ｓ）
分别与化合物２的１３，１０′，５′，５，１４和８′位的芳香质
子信号的化学位移一致，δ６８９（ｄ，Ｊ＝８４Ｈｚ），
６５５（ｓ）和５８８（ｓ）分别与化合物４的１３，５′和８′
位的芳香质子信号的化学位移一致，而 δ６７１的较
弱的宽信号与化合物４的分子中１３位质子的偶合
常数为Ｊ＝８４Ｈｚ的宽二重峰的高场一侧的信号对
应，其低场一侧的信号被掩埋在化合物２的较强的
１３位质子的信号中。另外，在上述芳香区，化合物４
的５，１０和１４位质子信号相互叠加，并与化合物２
的１０位质子信号也叠加在一起，不能得到分辨，这
一点与化合物４的纯品的１ＨＮＭＲ图谱的特征也一
致。
在δ２１４～３８７的脂肪族氢、烷氧基氢和烷氮
基氢区域，有多个氧甲基和氮甲基的共振信号，这些
甲基分辨清晰，峰形特征，易于辨认；其中，δ３７９
（ｓ），３６６（ｓ），３２７（ｓ），３０１（ｓ）和２１６（ｓ）分别与
化合物２的１２，６，６′和７位氧甲基以及２位氮甲基
的共振信号一致，由于化合物２在上述８个粉防己
样品ＣＳＰＤＢ中的含量显著高于化合物４，因此，上
述甲基信号在波谱图中更加突出。δ３７７（ｓ），３６４
（ｓ），３２３（ｓ）和２１４（ｓ）分别与化合物４的１２，６和
６′位氧甲基以及２位氮甲基的质子信号完全一致，
信号强度低于化合物２的甲基信号；化合物２和４
的２′位氮甲基的质子由于巧合而均在 δ２４９显示
共振峰，并与溶剂 ＤＭＳＯｄ６的信号叠加在一起。除
上述甲基的特征共振信号外，δ３８７（ｄｄ，Ｊ＝１０２，
５４Ｈｚ）与化合物２和４的１′位次甲基质子共振信
号一致，可以认定是２个化合物１′位质子的共同贡
献。δ３４９（ｄ，Ｊ＝９６Ｈｚ）也可清晰分辨，它是化合
物２和４的１位质子信号的叠加，其峰形与偶合常
数也与纯品化合物的波谱图一致。在高场区其余的
亚甲基信号基本都是化合物２和４的３位、４位、３′
位、４′位、α位和 α′位亚甲基的质子信号所贡献，由
于这些信号叠加严重，因此不能逐一指认，但从宏观
图形上可认为是其他分辨清晰信号的衬托。
采用 ＨＰＬＣ方法比较了上述 ９个粉防己样品
ＣＳＰＤＢ中主要生物碱成分的异同。在方法学中，分
别对检测波长、流动相的组成和比例、洗脱方式等进
行了优化，并考察了所确定的测定方法的精密度、重
现性和稳定性。ＨＰＬＣ分析结果表明，在本研究所
采用的色谱条件下，粉防己 ＣＳＰＤＢ中的主要生物
碱成分均在 ２０ｍｉｎ内被洗脱并获得很好的分离，典
型样品的ＨＰＬＣ图谱见图３；与１ＨＮＭＲ分析结果相
对应，９个样品中，８个具有一致的１ＨＮＭＲ波谱图
特征的样品的ＨＰＬＣ图谱在色谱信号的组成方面也
具有很好的一致性；宏观上具有明显特征的信号出
现在９～１９ｍｉｎ，这８个样品均在此范围内显示出相
同的２个主要信号，经与对照品在相同的色谱条件
下比较，确认在约１０ｍｉｎ的信号是化合物４，而在约
１６ｍｉｎ的信号是化合物２。没有检测到前述分离鉴
定的其他单体成分所对应的色谱信号，但观察到了
部分样品在１７６ｍｉｎ或１８５ｍｉｎ的２个微量成分
的微弱信号。为了进一步归属色谱信号，并确证粉
防己ＣＳＰＤＢ中其他可能的成分或其可能性质，本
文开展了粉防己ＣＳＰＤＢ的 ＨＰＬＣＭＳ分析，结果给
出了色谱信号１～４分别对应的准分子离子信号ｍ／
ｚ６０９［Ｍ＋Ｈ］＋和６３１［Ｍ＋Ｎａ］＋，６２３［Ｍ＋Ｈ］＋和
６４５［Ｍ＋Ｎａ］＋，６０７［Ｍ＋Ｈ］＋和６２９［Ｍ＋Ｎａ］＋以
及６０７［Ｍ１６＋Ｈ］＋和６２３［Ｍ＋Ｈ］＋；信号１和２与
化合物４和２的相对分子质量一致，进一步证实了
对粉防己 ＣＳＰＤＢ的１ＨＮＭＲ数据和 ＨＰＬＣ信号的
归属，而信号３和４也分别与粉防己中已报道的生
物碱Ｄｅｈａｔｒｉｎｅ及其氧化物的相对分子质量一致，由
于没有分离到该化合物，因此还不能从ＨＰＬＣＭＳ所
给出的化合物的相对分子质量准确确定所对应化合
物的结构。但是，上述分析结果表明了粉防己ＣＳＰＤ
Ｂ中所含双苄基异喹啉生物碱与１ＨＮＭＲ分析结果
的一致性。
图３ 粉防己ＣＳＰＤＢ的ＨＰＬＣ图（河南辉县市售样品）
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以各样品粉防己碱的色谱峰面积作为参考，在
具有相似直观图形的８个样品中，化合物４相对于
化合物２的峰面积比在０２１０～０３３８，分别为：河
南辉县０３３８，合肥０３０５，南京０２７３，济南０２５０，
福州 ０２８９，长沙 ０２３３，天津 ０２７７，樟树 ０２１０。
虽然８个样品ＣＳＰＤＢ中化合物２和４的相对含量
存在上述差异，但是，２个化合物对应的色谱信号是
粉防己样品共有的显著特征，因此，其与粉防己药材
的ＣＳＰＤＢ的１ＨＮＭＲ图谱一样，也可作为粉防己药
材的原植物基源鉴定的基本数据。在实际工作中可
以根据具体条件选择应用１ＨＮＭＲ或 ＨＰＬＣ方法达
到表达粉防己ＣＳＰＤＢ的整体化学特征的目的。
本研究还采集到浙江金华的粉防己药材，从
形态和组织学鉴别上，其与别的样品没有区别，
但是，宏观上，其 ＣＳＰＤＢ的１ＨＮＭＲ（图 ４）和
ＨＰＬＣ（图５）图谱的整体特征与前述其他样品的
图谱存在着差异，表明其在特征成分及其相对组
成方面有别于前述样品。对其进行仔细的分析，
结果表明，其 ＣＳＰＤＢ的１ＨＮＭＲ和 ＨＰＬＣ图谱实
际上也显示出双苄基异喹啉生物碱的特征信号，
且主要的成分也分别是化合物 ２和 ４。与其他 ８
个样品的区别是其１ＨＮＭＲ和 ＨＰＬＣ图谱上化合
物２的相对含量低于化合物 ４，１ＨＮＭＲ图谱上，
上述对应于化合物 ２的信号强度低于对应化合
物４的信号，ＨＰＬＣ图谱中化合物 ４相对于化合
物２的峰面积比为 １２１５∶１，并且除化合物 ２和
４的信号外，可观测到 ＨＰＬＣ的 ６２４ｍｉｎ以前的
其他成分的明显的信号。该样品与其他样品的
差异的原因目前并不明确，是否与生长环境有
关或与炮制加工、贮藏有关还有待于进一步研
究；但是，应用本文方法直观而方便地检测到
这种差异的存在，并结合已经开展的系列研究
中，观测到有些中药材的 ＣＳＰＤ的化学成分在相
对组成方面与产地有密切关系，并通过１ＨＮＭＲ
和 ＨＰＬＣ图谱得到直观反映（笔者的研究工作已
经证实，一些同基源中药材，由于生长环境不同，
其主要成分的相对含量可以显示出明显的差异，
这种差异可以通过该方法达到清晰表达，如安徽
亳州产白芍与四川中江产白芍的区别），就更进
一步说明了该方法在鉴定中药材基源和评价中
药材质量方面的实际应用价值。
图４ 金华市售粉防己ＣＳＰＤＢ的１ＨＮＭＲ波谱图
（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯｄ６）
图５ 金华市售粉防己ＣＳＰＤＢ的ＨＰＬＣ图
本文没能从粉防己 ＣＳＰＤＢ的 ＨＰＬＣ色谱图中
检测到所分离鉴定的其他５个化学成分，分析其原
因，应主要与各化合物在样品中的含量相差悬殊、有
些成分含量极低、以及所采用的色谱分离条件有关；
在本文色谱条件下，含量较低的化合物又因检测灵
敏度受到限制而响应值更低，给出了极小的信号，有
些微量成分的信号甚至被完全掩盖，对样品的宏观
图形没有显著性影响，因此不作为粉防己药材原植
物基源鉴定的基本数据。
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Ｔｅｔｒａｎｄｒａｅｂｙｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．Ｊ
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第３４卷第１５期
２００９年８月
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ １５
Ａｕｇｕｓｔ，２００９
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Ⅴ：ＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎｏｆｆｕｒｔｈｅｒＢｉｓｂｅｎｚｙｌｉｓｏ
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ＥｘｃｌｕｓｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌｓｕｂｓｔａｎｃｅｏｆＲａｄｉｘＳｔｅｐｈａｎｉａｅＴｅｔｒａｎｄｒａｅ
ＬＩＵＹｉｎｇ１，２，ＤＥＮＧＡｎｊｕｎ１，ＬＩＸｉｆｅｎｇ２，ＬＩＺｈｉｈｏｎｇ１，ＺＨＡＮＧＪｉｎｌａｎ１，ＤＵＧｕａｎｈｕａ１，ＱＩＮＨａｉｌｉｎ１
（１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓａｎｄＰｅｋｉｎｇＵｎｉｏｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆ
ＢｉｏａｃｔｉｖｅＳｕｂｓｔａｎｃｅｓａｎｄＲｅｓｏｕｒｃｅｓｏｆＣｈｉｎｅｓｅＨｅｒｂａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００５０，Ｃｈｉｎａ；
２．ＨｅｎａｎＣｏｌｅｇｅｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５０００８，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｄｅｖｅｌｏｐｔｈｅｓｙｓｔｅｍｆｏｒｔｈｅｅｘｃｌｕｓｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌｓｕｂｓｔａｎｃｅｏｆｐｌａｎｔｄｒｕｇ（ＣＳＰＤ）ｉｎｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅ
ｈｅｒｂａｌｍｅｄｉｃｉｎｅｓ（ＴＣＨＭ），ｔｈｉｓｐａｐｅｒｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｔｈｅ（ＣＳＰＤ）ｏｆＲａｄｉｘＳｔｅｐｈａｎｉａｅＴｅｔｒａｎｄｒａｅａｓｗｅｌａｓｉｔｓｐｒｏｔｏｎｎｕｃｌｅａｒｍａｇｎｅｔｉｃ
ｒｅｓｏｎａｎｃｅ（１ＨＮＭＲ）ａｎｄｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）ａｎａｌｙｔｉｃａｌｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒｔｈｅｐｕｒｐｏｓｅｏｆｏｒｉｇｉｎａｌｉｄｅｎｔｉｆｉｃａ
ｔｉｏｎａｎｄｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆｔｈｅｃｒｕｄｅｄｒｕｇ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＴｈｅＣＳＰＤｓａｎｄｔｈｅｉｒ１ＨＮＭＲａｎｄＨＰＬＣｐｒｏｆｉｌｅｓｏｆＲａｄｉｘＳｔｅｐｈａｎｉａｅＴｅｔｒａｎｄｒａｅ
ｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｂｙｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅｄｐｒｏｃｅｄｕｒｅ．ＣｈｅｍｉｃａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅＣＳＰＤｂｙｓｉｌｉｃａｇｅｌｃｏｌｕｍｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．Ｔｈｅ
ａｓｓｉｇｎｍｅｎｔｓｏｆｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｉｇｎａｌｓｉｎ１ＨＮＭＲａｎｄＨＰＬＣｐｒｏｆｉｌｅｓｗｅｒｅａｃｈｉｅｖｅｄｏｎｔｈｅｂａｓｉｓｏｆｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｉｓｏｌａｔｅｓｓｔｒｕｃ
ｔｕｒｅｓ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｆｏｒｎｉｎｅｓａｍｐｌｅｓｆｒｏｍｔｈｅｄｉｆｅｒｅｎｔｓｏｕｒｃｅｓｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒ，ｔｈｅ１ＨＮＭＲａｎｄＨＰＬＣｐｒｏｆｉｌｅｓｆｒｏｍｅｉｇｈｔｓｏｕｒｃｅｓｈａｄｗｏｎ
ｄｅｒｆｕｌｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，ａｎｄｔｈｅｏｔｈｅｒｇａｖｅｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｅｉｇｈｔｓａｍｐｌｅｓｉｎｔｈｅｓｉｇｎａｌｓｔｒｅｎｇｔｈｏｆｔｈｅ
ｍａｉｎｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｓｅｖｅｎｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＣＳＰＤａｎｄｔｈｅｉｒｃｈｅｍｉｃａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｗｅｒｅａｕｔｈｅｎｔｉｃａｔｅｄｂｙｓｐｅｃｔｒａｌ
ａｎａｌｙｓｉｓａｓｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ，ｆａｎｇｃｈｉｎｏｌｉｎｅ，ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ２′Ｎβｏｘｉｄｅ，ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ２′Ｎαｏｘｉｄｅ，ｄｉｃｅｎｔｒｉｎｅ，ｄｉｃｅｎｔｒｉｎｏｎｅ，ａｎｄａｄｅｎｉｎｅ，ｒｅ
ｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ１ＨＮＭＲａｎｄＨＰＬＣｐｒｏｆｉｌｅｓｏｆｔｈｅＣＳＰＤｏｆＲａｄｉｘＳｔｅｐｈａｎｉａｅＴｅｔｒａｎｄｒａｅｓｈｏｗｅｄｍａｉｎｌｙｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｉｇｎａｌｓｏｆｔｈｅ
ｂｉｓｂｅｎｚｙｌｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅａｌｋａｌｏｉｄｓｉｓｏｌａｔｅｄｉｎｔｈｉｓｗｏｒｋ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ１ＨＮＭＲａｎｄＨＰＬＣｐｒｏｆｉｌｅｓｏｆｔｈｅＣＳＰＤｏｆＲａｄｉｘＳｔｅｐｈａｎｉａｅ
Ｔｅｔｒａｎｄｒａｅｅｘｈｉｂｉｔｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓａｎｄｔｏｔａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｔｈｅｍａｉｎａｃｔｉｖｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｉｎｉｔ，ａｎｄｃａｎｂｅｕｓｅｄｆｏｒｉｔｓｏｒｉｇｉｎａｌｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ
ａｎｄｑｕａｌｉｔｙｅｖａｌｕａｔｉｏｎ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ＲａｄｉｘＳｔｅｐｈａｎｉａｅＴｅｔｒａｎｄｒａｅ；ｃｏｎｔｒｏｌｓｕｂｓｔａｎｃｅｆｏｒｐｌａｎｔｄｒｕｇ；ｔｏｔａｌｃｈｅｍｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ；１ＨＮＭＲａｎａｌｙｓｉｓ；
ＨＰＬＣａｎａｌｙｓｉｓ
［责任编辑 王亚君］
·８４９１·
第３４卷第１５期
２００９年８月
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ １５
Ａｕｇｕｓｔ，２００９