全 文 ：刺五加叶皂苷对乳鼠心肌细胞氧化应激损伤
的保护作用
梁启明，曲绍春，于晓风，徐华丽，睢大
!

（吉林大学 药学院 药理教研室，吉林 长春 １３００２１）
［摘要］　目的：探讨刺五加叶皂苷（ＡＳＳ）对乳鼠心肌细胞氧化应激损伤的保护作用。方法：采用过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）诱导
Ｗｉｓｔａｒ大鼠乳鼠心肌细胞氧化损伤，给予ＡＳＳ６００，３００ｍｇ·Ｌ－１，通过细胞形态学变化、细胞存活率、培养液乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）
活性及细胞内丙二醛（ＭＤＡ）含量来反映氧化损伤程度；同时通过检测细胞内超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）及谷
胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰｘ）的活性及还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量，探讨 ＡＳＳ对氧化应激损伤的影响。结果：５０，１００，２００
μｍｏｌ·Ｌ－１的Ｈ２Ｏ２均能够诱导心肌细胞发生氧化应激性损伤：心肌细胞存活率显著降低（Ｐ＜００１或Ｐ＜０００１），细胞培养液
中ＬＤＨ的活性及细胞内ＭＤＡ含量明显增加（Ｐ＜００５，Ｐ＜００１或Ｐ＜０００１）；同时心肌细胞的形态学发生损伤性改变。而
且，随着Ｈ２Ｏ２浓度的增加，心肌细胞的氧化损伤程度越严重。ＡＳＳ６００ｍｇ·Ｌ
－１能减轻Ｈ２Ｏ２（１００μｍｏｌ·Ｌ
－１）诱导的氧化应
激损伤：ＬＤＨ的活性（１６８７４０±９７５１）及细胞内ＭＤＡ含量（１６５０±２６６），差异有统计学意义（Ｐ＜００１和Ｐ＜００５）。还可
以增加细胞内ＧＳＨ含量（８９１±１０６）及ＧＳＨＰｘ，ＳＯＤ，ＣＡＴ活性（８４５８７±６３７６），（８９５５±６９３），（９３０７±１０４０），差异显
著（Ｐ＜００５）。结论：ＡＳＳ对１００μｍｏｌ·Ｌ－１Ｈ２Ｏ２所致的氧化应激性损伤有明显的保护作用，其机制可能与其抑制脂质过氧
化反应，增强心肌细胞抗氧化能力有关。
［关键词］　刺五加叶皂苷；抗氧化；过氧化氢；氧化应激；心肌细胞
［收稿日期］　２００９００００
［基金项目］　吉林省中医管理局科研基金重点课题（９８Ａ１７）
［通信作者］　 睢大员，Ｔｅｌ：（０４３１）８５６１９７０５，Ｆａｘ：（０４３１）
８５７７８５２０，Ｅｍａｉｌ：ｓｕｉｄａｙｕａｎ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
［作者简介］　梁启明，在读医学博士，主要从事心血管药理学研究。
　　五加科植物刺五加 Ａｃａｎｔｈｏｐａｎａｘｓｅｎｔｉｃｏｓｕｓ
（ＲｕｐｒｅｔＭａｘｉｍ）Ｈａｒｍ．为我国长白山东部山区特
产药材之一，其根及根茎已载入我国药典，叶尚未充
分利用。因此，开发刺五加的地上药用部位，对于综
合利用刺五加药用资源具有重要意义。本课题组与
原白求恩医科大学天然药物化学研究室合作，从刺
五加叶中提取分离出含 １６种活性成分的总皂苷
（Ａｃａｎｔｈｏｐａｎａｘｓｅｎｔｉｃｏｓｕｓｓａｐｏｎｉｎｓ，ＡＳＳ），除３种已知
成分 ＨｅｄｅｒａｓａｐｏｎｉｎＢ，ＥｌｅｕｔｈｅｒｏｓｉｄｅＫ和 Ｓａｐｏｎｉｎ１
外，其他１３种均为新发现的化合物，命名为 Ｃｉｗｕ
ｊｉａｎｏｓｉｄｅ（刺五加苷）Ａ１，Ａ３，Ａ４，Ｂ，Ｃ１，Ｃ２，Ｃ３，Ｃ４，
Ｄ１，Ｄ２，Ｄ３和Ｅ
［１２］。药理研究表明：ＡＳＳ对大鼠急性
心肌梗死及心肌缺血再灌注损伤均有明显保护作
用［３５］，并能减轻心肌梗死后心室重构的发生［６］，同
时对阿霉素引发的心肌损害有保护作用［７］。因此，
按治疗急性心肌缺血的中药五类新药（注射液）加
以开发。由于 ＡＳＳ的心脏保护作用均与其抗氧化
活性密切相关，本实验进一步观察其对Ｈ２Ｏ２所致的
乳鼠心肌细胞氧化应激性损伤的保护作用。
１　材料
１．１　动物
Ｗｉｓｔａｒ大鼠乳鼠，清洁级，２ｄ龄，雌雄不拘，动
物合格证号ＳＣＸＫ（吉）２００３０００１，由吉林大学实验
动物中心供给。
１．２　药物
刺五加叶皂苷（ＡＳＳ），吉林大学化学院天然药
物化学研究室提供，纯度８５％，黄色粉末，试验时以
蒸馏水配制所需浓度，经过０２２μｍ孔径滤膜过滤
除菌后使用。
１．３　试剂
３０％Ｈ２Ｏ２，优级纯，北京化工厂生产，批号
２００８０７１８。Ｄｕｌｂｅｃｏ＇ｓｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ＇ｓｍｅｄｉｕｍ
（ＤＭＥＭ）培养基，ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎＧＩＢＣＯ，批号
７２４８１０。新生牛血清（ｎｅｗｂｏｒｎｃａｌｆｓｅｒｕｍ，ＮＢＣＳ），
ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎＧＩＢＣＯ，批号８０９１０５０。胰蛋白
酶（Ｔｒｙｐｓｉｎ），ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎＧＩＢＣＯ，批号
２０Ｐ４２３２。四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）购自Ｓｉｇｍａ公司，
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批号Ｍ２１２８。ＬＤＨ，ＭＤＡ及ＳＯＤ测定试剂盒购自南
京建成生物工程研究所，批号 ２００８１１０６，２００８１１０２
和２００８１１０２。ＧＳＨＰｘ，ＣＡＴ及 ＧＳＨ测定试剂盒购
自碧云天生物技术研究所，批号 Ｓ００５８，Ｓ００８２和
Ｓ００５３。其余所用试剂均为国产分析纯。
１．４　仪器
ＴＥ２０００Ｕ型倒置荧光显微镜（日本，Ｎｉｋｏｎ），
ＭＣＯ１７ＡＩＣ型二氧化碳培养箱（日本，ＳＡＮＹＯ），
ＳＷＣＪＩＦ型超净工作台（苏州安泰空气技术有限公
司），３４０ＰＣ３８４酶标仪（美国，ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓ），
ＹＪ９６Ⅱ型超声细胞破碎仪（上海比郎仪器有限公
司），７２０２Ｂ型可见分光光度计（上海尤尼柯仪器有
限公司），台式低温高速离心机（德国，ＢｉｏｆｕｇｅＳｔｒａ
ｔｏｓ）。
２　方法
２．１　原代乳鼠心肌细胞的培养
乳鼠心肌细胞的培养方法参照文献［８９］并进
行一定的改进，具体方法如下：取 ２ｄ龄乳鼠，７５％
乙醇常规消毒；固定四肢，用无菌眼科剪于剑突处入
剪，使心脏自然跳出，剪下，迅速置于预冷的 ＰＢＳ
中，剪去心房及结缔组织，洗去残留血液。然后将心
脏剪碎为约１ｍｍ３大小，加入约心脏 １０倍体积的
０１２５％胰酶，于３７℃水浴、磁力搅拌器６０～８０ｒ·
ｍｉｎ－１条件下进行消化，每次５～７ｍｉｎ，直至心脏组
织基本消化完为止。弃去第１次的消化液，向所得
的消化液中加入等量的含 ２０％新生牛血清的
ＤＭＥＭ培养液以终止胰酶作用。收集细胞悬液，１
２００ｒ·ｍｉｎ－１离心５ｍｉｎ，弃去上清，细胞沉淀用含
２０％血清的 ＤＭＥＭ培养液重悬，接种于培养瓶中，
在ＣＯ２孵箱中（３７℃，９５％空气～５％ＣＯ２条件）培养
９０ｍｉｎ，用差速贴壁法去除成纤维细胞等非心肌细
胞。然后将得到的心肌细胞悬液计数，用含２０％新
生牛血清的ＤＭＥＭ培养液稀释至所需的细胞浓度，
同时加入０１ｍｍｏｌ·Ｌ－１５溴脱氧尿苷以抑制成纤
维细胞的生长，接种到９６孔培养板（细胞密度５×
１０４个／ｍＬ，每孔１００μＬ）或６孔培养板（细胞密度３
×１０５个／ｍＬ，每孔１ｍＬ）中，于 ＣＯ２孵箱中（３７℃，
９５％空气５％ＣＯ２条件）培养。培养４８ｈ后更换新
鲜的含２０％新生牛血清的 ＤＭＥＭ培养液。培养７２
ｈ时，培养的心肌细胞均伸出伪足，且大部分已经汇
合成片，自主搏动良好，此时心肌细胞处于最好状
态，即可用于实验。
２．２　分组
２．２．１　不同浓度Ｈ２Ｏ２对乳鼠心肌细胞的氧化损伤
作用　将乳鼠心肌细胞随机分为：正常对照组不加
Ｈ２Ｏ２处理；Ｈ２Ｏ２损伤组加入不同浓度的 Ｈ２Ｏ２（２５，
５０，１００，２００μｍｏｌ·Ｌ－１），作用６０ｍｉｎ。然后测定细
胞存活率、培养液 ＬＤＨ活性、细胞内 ＭＤＡ含量，并
观察细胞形态学变化。
２．２．２　ＡＳＳ对Ｈ２Ｏ２引起的氧化损伤的作用　将心
肌细胞随机分为：正常对照组不加Ｈ２Ｏ２处理；Ｈ２Ｏ２
损伤组根据２２１中的结果，加入一定浓度的 Ｈ２
Ｏ２，作用 ６０ｍｉｎ；刺五加叶皂苷组加入不同剂量
ＡＳＳ（６００，３００ｍｇ·Ｌ－１）预先处理２４ｈ，更换培养液
后再加入与Ｈ２Ｏ２损伤组中浓度相同的 Ｈ２Ｏ２，培养
６０ｍｉｎ。然后测定细胞存活率、培养液 ＬＤＨ活性、
细胞内 ＭＤＡ含量，同时测定细胞内 ＧＳＨ含量及
ＧＳＨＰｘ，ＣＡＴ，ＳＯＤ活性。
２．３　检测指标
２．３．１　心肌细胞形态学变化　接种于６孔培养板
中的各组心肌细胞经过相应的处理后，于倒置相差
显微镜下观察心肌细胞的形态学改变并拍摄显微照
片。
２．３．２　心肌细胞存活率　接种于９６孔培养板中的
细胞经过相应处理后，向各孔细胞中加入 １０μＬ
ＭＴＴ（５ｇ·Ｌ－１），继续培养４ｈ，弃去培养液，加入
１５０μＬＤＭＳＯ溶液，并于微量振荡器上振荡 １０
ｍｉｎ，然后用酶标仪测定５７０ｎｍ的吸光度（Ａ），按下
式求得心肌细胞的存活率：
存活率＝（各组细胞Ａ／正常组细胞Ａ）×１００％
２．３．３　ＬＤＨ活性测定　接种于６孔培养板中的心
肌细胞经过相应的处理后，取培养液适量，按照试剂
盒说明书检测ＬＤＨ活性。
２．３．４　细胞内ＭＤＡ含量测定　接种于６孔培养板
中的心肌细胞经过相应的处理后，用０１％胰蛋白
酶将细胞消化下来，离心收集细胞，然后加入 ＰＢＳ，
用超声细胞破碎仪将细胞裂解为匀浆，离心，取上清
液按照试剂盒说明书测定ＭＤＡ含量。
２．３．５　细胞内ＧＳＨ含量测定　接种于６孔培养板
中的心肌细胞经过相应的处理后，用０１％胰蛋白酶
将细胞消化下来，离心收集细胞，按照ＧＳＨ检测试剂
盒说明书中的要求进行细胞样品的准备并检测。
２．３．６　细胞ＳＯＤ活性测定　接种于６孔培养板中
的心肌细胞经过相应的处理后，用０１％胰蛋白酶
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将细胞消化下来，离心收集细胞，加入 ＰＢＳ，用超声
细胞破碎仪裂解细胞，取上清液按照测定试剂盒说
明书进行ＳＯＤ活性的测定。
２．３．７　细胞ＣＡＴ活性测定　接种于６孔培养板中
的心肌细胞经过相应的处理后，加入 Ｗｅｓｔｅｒｎ及 ＩＰ
细胞裂解液裂解细胞，取上清液按照试剂盒说明书
测定ＣＡＴ活性。
２．３．８　细胞 ＧＳＨＰｘ活性测定　接种于６孔培养
板中的心肌细胞经过相应的处理后，加入 Ｗｅｓｔｅｒｎ
及ＩＰ细胞裂解液裂解细胞，取上清液按照试剂盒说
明书测定ＧＳＨＰｘ活性。
２．４　统计学处理
实验数据以珋ｘ±ｓ表示，应用ＳＰＳＳ１００软件进行
数据统计和ｔ检验分析。Ｐ＜００５为有显著性意义。
３　结果
３．１　心肌细胞的形态学变化
３．１．１　Ｈ２Ｏ２诱导的心肌细胞形态学损伤　心肌细
胞中加入 Ｈ２Ｏ２（５０，１００μｍｏｌ·Ｌ
－１）作用 ６０ｍｉｎ
后，与正常心肌细胞比较，可见受 Ｈ２Ｏ２氧化损伤的
心肌细胞伪足回缩，体积变小，自律搏动缓慢，Ｈ２Ｏ２
１００μｍｏｌ·Ｌ－１组的心肌细胞中出现空泡，细胞皱缩
较明显，某些细胞悬浮在培养液中（图１）。
３．１．２　刺五加叶皂苷对心肌细胞形态学改变的影
响　心肌细胞经过ＡＳＳ（６００ｍｇ·Ｌ－１）预先孵育２４
ｈ，再加入１００μｍｏｌ·Ｌ－１Ｈ２Ｏ２作用６０ｍｉｎ后，可见
与Ｈ２Ｏ２损伤模型组比较，ＡＳＳ可使心肌细胞的伪足
回缩减轻，空泡数量减少，自律搏动性增强，悬浮细
胞明显减少（图１）。
图１　ＡＳＳ对心肌细胞形态学的影响（×４００）
３．２　不同浓度Ｈ２Ｏ２诱导心肌细胞的氧化损伤
不同浓度的Ｈ２Ｏ２（２５，５０，１００，２００μｍｏｌ·Ｌ
－１）
作用６０ｍｉｎ后，可见心肌细胞存活率显著降低（Ｐ＜
００１或Ｐ＜０００１），培养液中 ＬＤＨ活性明显升高，
细胞 ＭＤＡ含量也有显著地增加（Ｐ＜００５，Ｐ＜
００１或 Ｐ＜０００１），且呈现 Ｈ２Ｏ２浓度依赖性（图
２，表１）。
３．３　刺五加叶皂苷对Ｈ２Ｏ２诱导的心肌细胞的氧化
损伤作用
　　
与正常细胞比较＃＃Ｐ＜００１，＃＃＃Ｐ＜０００１。
图２　Ｈ２Ｏ２对心肌细胞存活率的影响
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表１　Ｈ２Ｏ２对细胞培养液中ＬＤＨ活性和细胞内
ＭＤＡ含量的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝８）
组别
剂量
／μｍｏｌ·Ｌ－１
ＬＤＨ
／Ｕ·ｍＬ－１
ＭＤＡ
／ｎｍｏｌ·ｍｇ－１
正常细胞 － １４４２９７±２８０９１ １５２０±２５６
Ｈ２Ｏ２损伤 ２５ １６６９８９±３３６１３ １６２３±１７０
　 ５０ １７９４９５±１９８５０１） １８９９±１５５１）
　 １００ １９８６３６±２５２４７２） ２００１±３２７２）
　 ２００ ２１８１２０±２１７９２３） ２２４３±３０９３）
　　注：与正常细胞比较１）Ｐ＜００５，２）Ｐ＜００１，３）Ｐ＜０００１。
　　心肌细胞经过不同浓度的 ＡＳＳ（６００，３００ｍｇ·
Ｌ－１）预先孵育２４ｈ，再加入１００μｍｏｌ·Ｌ－１Ｈ２Ｏ２作
用６０ｍｉｎ，与Ｈ２Ｏ２损伤模型组比较，ＡＳＳ（６００ｍｇ·
Ｌ－１）可使心肌细胞存活率明显增加（Ｐ＜００５），可
明显降低培养液中ＬＤＨ活性及心肌细胞内的 ＭＤＡ
含量（Ｐ＜００１，Ｐ＜００５）（图３，表２）。
与Ｈ２Ｏ２损伤组比较Ｐ＜００５，Ｐ＜０００１。
图３　刺五加叶皂苷对心肌细胞存活率的影响
表２　刺五加叶皂苷对培养液ＬＤＨ活性和细胞内
ＭＤＡ含量的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝８）
组别
ＡＳＳ
／ｍｇ·Ｌ－１
ＬＤＨ
／Ｕ·ｍＬ－１
ＭＤＡ
／ｎｍｏｌ·ｍｇ－１
正常细胞 － １４４２９７±２８０９１２） １５２０±２５６２）
Ｈ２Ｏ２损伤 － １９８６３６±２５２４７ ２００１±３２７
ＡＳＳ ６００ １６８７４０±９７５１２） １６５０±２６６１）
　 ３００ １７４１５４±９８３３１） １７３４±２０８
　　注：与Ｈ２Ｏ２１００μｍｏｌ·Ｌ－１损伤组比较１）Ｐ＜００５，２）Ｐ＜００１。
３．４　刺五加叶皂苷对氧化损伤心肌细胞 ＧＳＨ，
ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ活性的影响
心肌细胞经过１００μｍｏｌ·Ｌ－１Ｈ２Ｏ２作用６０ｍｉｎ
后，可见细胞 ＧＳＨ含量显著降低（Ｐ＜００１），ＧＳＨ
Ｐｘ，ＳＯＤ及ＣＡＴ活性也明显降低（Ｐ＜０００１或 Ｐ＜
００５）；心肌细胞经过不同浓度 ＡＳＳ（６００，３００ｍｇ·
Ｌ－１）预先孵育２４ｈ，再加入１００μｍｏｌ·Ｌ－１Ｈ２Ｏ２作
用６０ｍｉｎ，可见ＡＳＳ（６００ｍｇ·Ｌ－１）处理能够使心肌
细胞ＧＳＨ含量明显升高（Ｐ＜００５），并能显著增加
ＧＳＨＰｘ，ＳＯＤ及ＣＡＴ活性（Ｐ＜００５）（表３，４）。
表３　刺五加叶皂苷对心肌细胞ＧＳＨ含量和
ＧＳＨＰｘ活性的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝８）
组别
ＡＳＳ
／ｍｇ·Ｌ－１
ＬＤＨ
／Ｕ·ｍＬ－１
ＭＤＡ
／ｎｍｏｌ·ｍｇ－１
正常细胞 － １００１±１２５２） ９１５０７±７６７１３）
Ｈ２Ｏ２损伤 － ７６０±１２８ ７３５８７±９０７５
ＡＳＳ ６００ ８９１±１０６１） ８４５８７±６３７６１）
　 ３００ ８０７±０８８ ８１１３３±３８７４１）
　　注：与Ｈ２Ｏ２损伤组比较１）Ｐ＜００５，２）Ｐ＜００１，３）Ｐ＜０００１（表４
同）。
表４　刺五加叶皂苷对心肌细胞ＳＯＤ和ＣＡＴ
活性的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝８）
组别
ＡＳＳ
／ｍｇ·Ｌ－１
ＬＤＨ
／Ｕ·ｍＬ－１
ＭＤＡ
／ｎｍｏｌ·ｍｇ－１
正常细胞 － ９７１９±１４４５１） １０３４５±７４２３）
Ｈ２Ｏ２损伤 － ７８０５±１１９６ ８０２９±１０７２
ＡＳＳ ６００ ８９５５±６９３１） ９３０７±１０４０１）
　 ３００ ８３３９±７５５ ９１６４±７８７１）
４　讨论
氧化应激损伤在心肌缺血、心肌再灌注损伤及
心力衰竭等病变中都起着重要的作用［１０１１］。本实
验采用外源性给予 Ｈ２Ｏ２诱导乳鼠心肌细胞的氧化
应激性损伤，通过测定心肌细胞形态学变化、细胞存
活率、培养液中 ＬＤＨ活性及细胞内 ＭＤＡ含量来评
价氧化损伤状态。ＬＤＨ在细胞胞浆内含量丰富，正
常时不能通过细胞膜；当细胞受损伤或死亡时，ＬＤＨ
被释放到细胞外［１２１３］。当心肌细胞受到 Ｈ２Ｏ２损伤
时，培养液中ＬＤＨ活性与细胞损伤成正比，可反映
细胞损伤程度。Ｈ２Ｏ２能攻击生物膜中的多不饱和
脂肪酸，引发脂质过氧化作用，并因此形成脂质过氧
化物ＭＤＡ，其含量可反映机体内脂质过氧化的程
度，间接地反映出细胞损伤程度。
本实验结果表明，正常的心肌细胞经过Ｈ２Ｏ２处
理后，细胞形态学出现明显损伤改变，如心肌细胞伪
足回缩、体积变小、出现空泡等；同时，心肌细胞存活
率明显降低，培养液 ＬＤＨ活性显著增高，细胞内
ＭＤＡ含量增多，且随着 Ｈ２Ｏ２浓度增加而加重。提
示１００μｍｏｌ·Ｌ－１Ｈ２Ｏ２能使心肌细胞 ＬＤＨ漏出增
多、膜脂质过氧化，造成心肌细胞损伤和死亡。
心肌细胞先经过刺五加叶皂苷（６００，３００ｍｇ·
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Ｌ－１）预处理２４ｈ，再加入 Ｈ２Ｏ２处理，可见细胞形态
学改变减轻、心肌细胞存活率增加，培养液 ＬＤＨ活
性降低、心肌细胞ＭＤＡ含量减少，表明刺五加叶皂
苷对 Ｈ２Ｏ２引发的心肌细胞氧化损伤有保护作用。
同时，刺五加叶皂苷能够使细胞内ＧＳＨ含量显著增
加，抗氧酶 ＧＳＨＰｘ，ＳＯＤ，ＣＡＴ活性明显升高，提示
ＡＳＳ能增加细胞抗氧化防御能力。
刺五加叶皂苷具有广泛的药理活性，文献报
道显示刺五加叶皂苷对心肌缺血、缺血再灌注损
伤及心肌损害等有保护作用［３７］，且可能与其较强
的抗氧化作用有关。本研究结果表明，刺五加叶
皂苷可以减轻 Ｈ２Ｏ２诱发的心肌细胞氧化损伤，增
加细胞的抗氧化防御能力，在心肌细胞的氧化应
激性损伤中起到保护作用。此研究也为刺五加叶
皂苷在临床用于防治与氧化应激性损伤有关的心
脏疾病打下理论基础。
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ｉｔｙａｓｓａｙｆｏｒａｓｓｅｓｓｍｅｎｔｏｆｍｅｍｂｒａｎｅｉｎｔｅｇｒｉｔｙｕｓｉｎｇａｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ
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ｐｌｅｄｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔａｓｓａｙｆｏｒｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙａｎｄｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔｍｅｄｉａｔｅｄ
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Ａｃａｎｔｈｏｐａｎａｘｓｅｎｔｉｃｏｓｕｓｓａｐｏｎｉｎｓａｍｅｌｉｏｒａｔｅｓｏｘｉｄａｔｉｖｅｄａｍａｇｅｉｎｄｕｃｅｄｂｙ
ｈｙｄｒｏｇｅｎｐｅｒｏｘｉｄｅｉｎｎｅｏｎａｔａｌｒａｔｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｓ
ＬＩＡＮＧＱｉｍｉｎｇ，ＱＵＳｈａｏｃｈｕｎ，ＹＵＸｉａｏｆｅｎｇ，ＸＵＨｕａｌｉ，ＳＵＩＤａｙｕｎ
（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＪｉｌｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ１３００２１，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ａｃａｎｔｈｏｐａｎａｘｓｅｎｔｉｃｏｓｕｓｓａｐｏｎｉｎｓ（ＡＳＳ）ｉｓｅｘｔｒａｃｔｆｒｏｍＡｃａｎｔｈｏｐａｎａｘｓｅｎｔｉｃｏｓｕｓ．Ｐｒｅｖｉｏｕｓｒｅｐｏｒｔｓ
ｓｈｏｗｅｄｔｈａｔＡｃａｎｔｈｏｐａｎａｘｓｅｎｔｉｃｏｓｕｓｓａｐｏｎｉｎｓｅｘｈｉｂｉｔｓａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｏｎａｎｄｃａｒｄｉａｃｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ．Ｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ，ｗｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｔｈｅ
ｅｆｅｃｔｏｆＡＳＳｏｎｏｘｉｄａｔｉｖｅｄａｍａｇｅｉｎｄｕｃｅｄｂｙｈｙｄｒｏｇｅｎｐｅｒｏｘｉｄｅ（Ｈ２Ｏ２）ｉｎｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｓｗｅｒｅｉｎ
ｄｕｃｅｄｔｏｏｘｉｄａｔｉｖｅｄａｍａｇｅｄｂｙｅｘｐｏｓｅｄｔｏＨ２Ｏ２．Ｗｅｅｖａｌｕａｔｅｄｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆｏｘｉｄａｔｉｖｅｉｎｊｕｒｙｔｈｒｏｕｇｈｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｃｈａｎｇｅ，ｔｈｅｓｕｒｖｉｖａｌ
ｒａｔｅ，ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆａｃｔａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ（ＬＤＨ）ａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｃｅｌｕｌａｒｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ（ＭＤＡ）．Ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ
ｄｉｓｍｕｔａｓｅ（ＳＯＤ），ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（ＧＳＨＰｘ），Ｃａｔａｌａｓｅ（ＣＡＴ）ａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｒｅｄｕｃｔｉｖｅｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ（ＧＳＨ）ｏｆｃａｒｄｉｏｍｙｏ
ｃｙｔｅｓｗｅｒｅａｌｓｏｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＷｈｅｎｔｈｅｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｓｗｅｒｅｅｘｐｏｓｅｄｔｏＨ２Ｏ２（５０，１００，２００μｍｏｌ·Ｌ
－１）ｆｏｒｄｅｇｉｇｎｅｄｔｉｍｅ，
ｔｈｅｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆｓｕｒｖｉｖａｌｃｅｌｓｗａｓｄｏｗｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜０．０１ｏｒＰ＜０００１），ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＬＤＨａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＭＤＡｗｅｒｅｉｎ
ｃｒｅａｓｅｄｍａｒｋｅｄｌｙ（Ｐ＜００５，Ｐ＜００１ｏｒＰ＜０００１）．Ｔｈｅｓｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｎｔｈａｔｔｈｅｃｅｌｓｗｅｒｅｓｕｂｊｅｃｔｅｄｔｏｏｘｉｄａｔｉｖｅｄａｍａｇｅ．Ｔｒｅａｔ
ｍｅｎｔｗｉｔｈＡＳＳ（６００ｍｇ·Ｌ－１）ｐｒｉｏｒｔｏＨ２Ｏ２ｅｘｐｏｓｕｒｅｃｏｕｌｄｉｎｃｒｅａｓｅｃｅｌｖｉａｂｉｌｉｔｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ，ｌｅｓｓｅｎｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ
ｄａｍａｇｅｄｃｈａｎｇｅ，ｄｅｃｒｅａｓｅＬＤＨａｃｔｉｖｉｔｙ（１６８７４０±９７５１）ｉｎｍｅｄｉａａｎｄｃｅｌｕｌａｒＭＤＡｃｏｎｔｅｎｔ（１６５０±２６６）ｍａｒｋｅｄｌｙ（Ｐ＜
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第３４卷第１９期
２００９年１０月
　　　　　 　 　 　 　 　　　　　 　 　 　 　
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　Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００９
００１ａｎｄＰ＜００５）．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＳＯＤ（８９５５±６９３），ＧＳＨＰｘ（８４５８７±６３７６），ＣＡＴ（９３０７±１０４０）ａｎｄ
ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＧＳＨ（８９１±１０６）ｏｆｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｓｗｅｒｅａｌｓｏｒａｉｓｅｄｂｙ６００ｍｇ·Ｌ－１ＡＳＳ（Ｐ＜００５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔａｋｅｎｔｏｇｅｔｈ
ｅｒ，ｔｈｅｓｔｕｄｙｉｍｐｌｉｃａｔｅｄｔｈａｔＡＳＳｐｒｏｔｅｃｔｓｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｓａｇａｉｎｓｔｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｉｎｊｕｒｙｉｎｄｕｃｅｄｂｙＨ２Ｏ２ｔｈｒｏｕｇｈｒｅｄｕｃｔｉｏｎｏｆｌｉｐｉｄｐｅｒ
ｏｘｉｄａｔｉｏｎａｎｄｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔｏｆｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｄｅｆｅｎｓｅ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ａｃａｎｔｈｏｐａｎａｘｓｅｎｔｉｃｏｓｕｓｓａｐｏｎｉｎｓ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ；ｈｙｄｒｏｇｅｎｐｅｒｏｘｉｄｅ；ｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓ；ｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｓ
［责任编辑　古云侠］
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