全 文 ：ＲＲＬＣＵＶ法同时测定丹参中酚酸类成分的含量
王莉１，２，赵明波２，何文顺２，昝柯２，毕开顺１，屠鹏飞１，２
（１．沈阳药科大学 药学院，辽宁 沈阳 １１００１６；
２．北京大学 药学院 天然药物与仿生药物国家重点实验室，北京 １００１９１）
［摘要］　目的：建立ＲＲＬＣＵＶ法同时测定丹参药材中９种酚酸的含量。方法：以３，４二羟基苯乙酸为内标，采用Ａｇｉｌｅｎｔ
ＺｏｒｂａｘＥｃｌｉｐｓｅＰｌｕｓＣ１８（２１ｍｍ×５０ｍｍ，１８μｍ）色谱柱，以乙腈０１％甲酸溶液为流动相梯度洗脱，流速为０３ｍＬ·ｍｉｎ
－１，
检测波长为２８６ｎｍ。结果：这９种成分在测定浓度范围内与色谱峰面积线性关系良好，相关系数均大于０９９９５。仪器精密度
和方法精密度ＲＳＤ均小于２４％，９种成分平均回收率在９６７％～１０２６％，ＲＳＤ均小于３１％（ｎ＝９）。结论：该方法简便、快
速，结果准确，重复性好，适用于丹参药材的质量控制。
［关键词］　丹参；ＲＲＬＣＵＶ；酚酸；含量测定；质量控制
［收稿日期］　２００９０５０１
［基金项目］　国家自然科学基金杰出青年基金（３０５２５０４３）
［通信作者］　屠鹏飞，Ｔｅｌ：（０１０）８２８０２７５０，Ｅｍａｉｌ：ｐｅｎｇｆｅｉｔｕ＠ｖｉｐ．
１６３．ｃｏｍ
　　丹参，为唇形科植物丹参 Ｓａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｈｉｚａ
Ｂｕｎｇｅ的干燥根及根茎。性味苦，微寒。归心，肝
经。是常用的活血化瘀中药之一，首载于《神农本
草经》，具有祛瘀止痛，活血通经，清心除烦的功
用［１］。用于月经不调，经闭痛经，症瘕积聚，胸腹刺
痛，热痹疼痛，疮疡肿痛，心烦不眠，肝脾肿大，心绞
痛［２］。化学研究表明，丹参中主要有两类成分，一
是脂溶性成分，即二萜醌类化合物，另一类是水溶性
成分，即酚酸类化合物［３］。药理研究表明丹参酚酸
类成分具有抗血小板聚集，抗血栓形成，改善微循
环，抗氧化损伤和心肌保护作用［４］。有关丹参及其
制剂的含量测定已有很多报道，目前多采用常规
ＨＰＬＣＵＶ法［５６］，但这种方法具有耗时长，浪费试
剂，增加污染的缺点。高分离度快速液相色谱
（ＲＲＬＣ）是近几年推出的一种新的液相色谱技术，
峰容量、分析效率、灵敏度和分辨率较常规ＨＰＬＣ有
了很大的提高。主要用于中药成分分析、中药指纹
图谱、中药及其复方定量测定［７］。本研究采用
ＲＲＬＣＵＶ色谱法对丹参中９种酚酸成分进行含量
测定，方法快速，简便，重复性好，为丹参的质量评价
提供依据。
１　仪器与试药
Ａｇｉｌｅｎｔ１２００高效液相色谱仪（安捷伦公司，美
国）。ＳａｒｔｏｒｉｕｓＢＰ２１１Ｄ型 １／１０万电子分析天平。
乙腈、甲酸为色谱纯；甲醇为分析纯。水为双蒸水。
丹参素（批号１１０８５５２００５０７），原儿茶醛（批号
１１０８１０２００５０６），原儿茶酸（批号 １１０８０９２００５０３），
香草酸 （批号 １１０７７６２００４０２），咖啡酸 （批号
１１０８８５２００１０２），阿魏酸（批号１１０７７３２００６１１）和丹
酚酸Ｂ（批号１１１５６２２００６０５）对照品购自中国药品
生物制品检定所，迷迭香酸，紫草酸对照品购自上海
融禾对照品公司。内标物 ３，４二羟基苯乙酸（纯
度＞９８０％）购自Ｓｉｇｍａ公司。
丹参药材从河北、四川、山东、河南和甘肃等地
收集，均由北京大学医学部药学院屠鹏飞教授鉴定
为Ｓ．ｍｉｌｔｉｏｒｈｉｚａ。
２　方法与结果
２．１　色谱条件
ＡｇｉｌｅｎｔＺｏｒｂａｘＥｃｌｉｐｓｅＰｌｕｓＣ１８色谱柱（２１ｍｍ×
５０ｍｍ，１８μｍ），流动相０１％甲酸水溶液（Ａ）乙腈
（Ｂ）梯度洗脱，梯度程序如下：０～５ｍｉｎ，１０％～２５％
Ｂ；５～９ｍｉｎ，２５％～４５％ Ｂ。检测波长２８６ｎｍ，流速
０３ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱温２５℃，进样量２μＬ。在此色
谱条件下，丹参素，原儿茶醛，原儿茶酸，香草酸，咖
啡酸，阿魏酸，迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸 Ｂ等９种
酚酸的理论塔板数均高于１万，分离度均大于１５，
符合要求。色谱图见图１。
２．２　溶液的制备
２．２．１　对照品溶液的制备　精密称取经五氧化二
磷减压干燥２４ｈ的各个对照品适量，加５０％甲醇溶
５２
第３４卷第１９期
２００９年１０月
　　　　　 　 　 　 　 　　　　　 　 　 　 　
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　１９
　Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００９
Ａ．对照品；Ｂ．样品（四川）；１．丹参素；２．原儿茶酸；３．原儿茶醛；４．咖啡酸；５．香草酸；６．阿魏酸；７．迷迭香酸；８．紫草酸；９．丹酚酸Ｂ；
ＩＳ．３，４二羟基苯乙酸。
图１　丹参中９种酚酸的含量测定色谱图
液制成质量浓度分别为丹参素０２２８ｇ·Ｌ－１，原儿
茶酸０３０６ｇ·Ｌ－１，原儿茶醛０２５０ｇ·Ｌ－１，咖啡酸
０２２０ｇ·Ｌ－１，香草酸０２０８ｇ·Ｌ－１，阿魏酸０２２６
ｇ·Ｌ－１，迷迭香酸０３１６ｇ·Ｌ－１，紫草酸０３１２ｇ·
Ｌ－１，丹酚酸Ｂ０５５８ｇ·Ｌ－１的对照品贮备液，摇匀，
备用。
２．２．２　供试品溶液的制备　取丹参药材粉末（６０
目）约０５ｇ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入
５０％甲醇溶液２５ｍＬ，称重，超声处理３０ｍｉｎ，取出，
放冷，再称重，用５０％甲醇补足失重，摇匀，静置，精
密量取上清液 ０５ｍＬ，加入内标溶液 １００μＬ，用
５０％甲醇稀释至１ｍＬ，摇匀，过０２２μｍ微孔滤膜，
取续滤液，即得。供试品溶液中内标的最终质量浓
度为００５ｇ·Ｌ－１。
２．３　线性关系的考察
分别将对照品贮备液稀释以得到八个适宜浓度
的对照品溶液。各线性对照品溶液中内标的最终浓
度为００５ｇ·Ｌ－１。内标法用于测定回归方程。在上
述色谱条件下进样分析，以被分析物与内标的峰面积
比值为纵坐标（Ｙ），对照品的浓度（ｍｇ·Ｌ－１）为横坐
标（Ｘ），绘制回归方程。结果见表１。结果表明，所有
成分在测定范围内线性关系良好（ｒ＞０９９９５）。
２．４　精密度试验
精密吸取同一对照品溶液，在上述色谱条件下，
连续进样６次，记录峰面积，计算９种成分的峰面
积，丹参素，原儿茶醛，原儿茶酸，香草酸，咖啡酸，阿
魏酸，迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸Ｂ的峰面积ＲＳＤ
表１　９种酚酸标准曲线的回归方程
化合物 回归方程 ｒ
线性范围
／ｍｇ·Ｌ－１
丹参素 Ｙ＝００４０９Ｘ－００３５３ ０９９９７ ０４５６～１１４
原儿茶醛 Ｙ＝０１０１８Ｘ－０２２３３ ０９９９５ ０６１２～１５３
原儿茶酸 Ｙ＝０２８２７Ｘ－０３８１８ ０９９９７ ０１２５～２５０
香草酸 Ｙ＝０１１６９Ｘ－０１４０６ ０９９９６ ０４４０～１１０
咖啡酸 Ｙ＝０２６５４Ｘ－０２９８７ ０９９９７ ０４１６～１０４
阿魏酸 Ｙ＝０２２３５Ｘ－０２７１８ ０９９９７ ０４５２～１１３
迷迭香酸 Ｙ＝０１０７７Ｘ－０１７９１ ０９９９７ ０６３２～１５８
紫草酸 Ｙ＝００７４３Ｘ－０００６９ ０９９９５ ０４６４～１１６
丹酚酸Ｂ Ｙ＝００５７８Ｘ－０１８９８ ０９９９７ １１１６～２７９
分别是 １５％，１７％，１０％，２１％，１２％，１４％，
０７％，１０％，１９％，仪器精密度良好。
２．５　稳定性试验
取同一对照品溶液，室温下放置，分别于０，２，
４，８，１２和２４ｈ进样，测定９种成分的色谱峰面积，
丹参素，原儿茶醛，原儿茶酸，香草酸，咖啡酸，阿魏
酸，迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸 Ｂ的峰面积 ＲＳＤ分
别是 ２０％，２２％，１４％，１９％，１５％，２０％，
０９％，１１％，１３％，内标峰面积的 ＲＳＤ１４％，表
明样品在２４ｈ内稳定性良好。
２．６　重复性试验
取同一批丹参药材，按“供试品溶液制备方法”
平行制备６份供试品溶液，在上述色谱条件下分析
测定，分别计算待测９种成分的含量，并计算含量的
ＲＳＤ分别是 １９％，１３％，２０％，２３％，１５％，
１８％，１９％，２２％，２４％，表明本法重复性良好。
６２
第３４卷第１９期
２００９年１０月
　　　　　 　 　 　 　 　　　　　 　 　 　 　
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　１９
　Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００９
２．７　回收率试验
采用加样回收率方法。取已知含量的丹参药材
粉末（四川）０２５ｇ，精密称定，共９份，平均分成３
份，分别加入低、中、高３个浓度的混合对照品溶液，
按“供试品溶液制备方法”制备，在上述色谱条件下
测定，各成分方法回收率在９６６％ ～１０２６％范围
内，ＲＳＤ＜３１％，结果见表２。
表２　９个成分分样回收率试验（ｎ＝３）
化合物
样品中量
／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
ＲＳＤ
／％
丹参素 ００９３ ００４５ ０１３９ １０２２ ２４
　 ００９３ ００９ ０１８１ ９７８ ２６
　 ００９３ ０１３５ ０２２９ １００７ １９
原儿茶醛 ０１２８ ００６７４ ０１９５ ９９４ ２２
　 ０１２８ ０１３４８ ０２６１ ９８７ ２４
　 ０１２８ ０２０２２ ０３３０ ９９９ ２５
原儿茶酸 ０３１５ ０１６２５ ０４７６ ９９１ １９
　 ０３１５ ０３２５ ０６３８ ９９４ ２４
　 ０３１５ ０４８７５ ０７９６ ９８７ ３１
香草酸 ００８８ ００４４２ ０１３１ ９７２ ２５
　 ００８８ ００８８４ ０１７７ １００７ １９
　 ００８８ ０１３２６ ０２２０ ９９５ ２２
咖啡酸 ０１１０ ００５６ ０１６４ ９６４ １９
　 ０１１０ ０１１２ ０２２３ １００９ ２９
　 ０１１０ ０１６８ ０２７８ １０００ ２７
阿魏酸 ００７０ ００３８ ０１０７ ９７４ ２９
　 ００７０ ００７６ ０１４５ ９８７ ３１
　 ００７０ ０１１４ ０１８６ １０１８ ２３
迷迭香酸 ０３３５ ０１７２５ ０５０７ ９９７ ２４
　 ０３３５ ０３４５ ０６７３ ９８０ ３７
　 ０３３５ ０５１７５ ０８６６ １０２６ １８
紫草酸 ０１３５ ００７０４ ０２０３ ９６６ ２４
　 ０１３５ ０１４０８ ０２７２ ９７３ ２１
　 ０１３５ ０２１１２ ０３４７ １００４ ２３
丹酚酸Ｂ ２３６１ １１７０ ３５３２ １００１ ２３
　 ２３６１ ２３４０ ４６６８ ９８６ ２４
　 ２３６１ ３５１０ ５８１７ ９８５ ２４
２．８　含量测定
取各产地丹参药材，按照“供试品溶液制备方
法”制备供试品溶液，在上述色谱条件测定，记录色
谱峰面积，按照内标工作曲线法计算样品中各成分
的含量，结果见表３。
３　讨论
３．１　色谱条件的优化
为达到各成分最佳的分离效果，优化了固定相，
流动相，柱温和流速等色谱条件。考察结果表明，
ＺｏｒｂａｘＥｃｌｉｐｓｅＰｌｕｓＣ１８柱对酚酸的分离效果优于
ＺｏｒｂａｘＥｘｔｅｎｄＣ１８和 ＺｏｒｂａｘＳＢＣ１８柱。参考有关文
献［８］，采用酸水做流动相可以优化峰形并取得较好
的分离效果，通过多次试验，发现以乙腈０１％甲酸
溶液梯度洗脱，可以使样品在９ｍｉｎ内达到良好的
分离效果，与常规 ＨＰＬＣ相比，节省了近 ６倍的时
间。我们还考察了不同的柱温和流速对分离效果的
影响，结果表明在２５℃下０３ｍＬ·ｍｉｎ－１流速效果
最佳。
３．２　提取溶剂的选择
为达到最佳的提取效果，以不同浓度的甲醇和
水为提取溶剂考察各酚酸的提取效果，结果表明
５０％甲醇提取时，峰面积比（待测物／内标）达到最
大值，因此选择５０％甲醇作为提取溶剂。
３．３　提取方法的考察
比较了浸泡，加热回流和超声提取３种提取方
法，结果表明超声提取操作简便，提取完全，因此选
择超声提取法。考察了不同超声时间（１５，３０，６０
ｍｉｎ）的影响，结果表明３０ｍｉｎ已经提取完全。
表３　不同产地丹参中９种酚酸成分的含量（ｎ＝２）
产地
成分含量／ｍｇ·ｇ－１
丹参素 原儿茶醛 原儿茶酸 香草酸 咖啡酸 阿魏酸 迷迭香酸 紫草酸 丹酚酸Ｂ
河北 ０２７ ０２１ １１６ ０１４ ０１４ ０１３ １２４ ０３４ ８５７
四川 ０３７ ０５１ １２６ ０３５ ０４４ ０２８ １３４ ０５４ ９４６
山东 ０３１ ０９７ ０８６ ０６７ ０５３ ０６２ １０６ ０３６ ５１８
河南 ０２８ ０９０ ０８０ ０６０ ０４９ ０５６ ０９９ ０１３ ４９８
甘肃 ０２２ ０６７ ０６４ ０４６ ０３７ ０４３ ０７９ ０２６ ５３２
［参考文献］
［１］　赵娜，郭治昕，赵雪，等．丹参的化学成分与药理作用［Ｊ］．国外
医药·植物药分册，２００７，２２（４）：１５５．
［２］　中国药典．一部［Ｓ］．２００５：５２．
［３］　刘艾琳，李铭源，王一涛，等．丹参药理学活性物质基础研究现
状［Ｊ］．中国药学杂志，２００７，４２（９）：６４１．
［４］　李霁，王阶，王诗菡，等．丹酚酸在冠心病中的研究概况与进展
［Ｊ］．辽宁中医杂志，２００８，３５（１１）：１７８８．
［５］　ＬｉｕＡｉｈｕａ，ＬｉＬｉｅ，ＸｕＭａｎ，ｅｔａｌ．Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｑｕａｔｉａｔｉｏｎｏｆｓｉｘ
ｍａｊｏｒｐｈｅｎｏｌｉｃａｃｉｄｓｉｎｔｈｅｒｏｏｔｓｏｆＳａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｈｉｚａａｎｄｆｏｕｒｒｅ
ｌａｔｅｄｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎａｌｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓｂｙＨＰＬＣＤＡＤ
ｍｅｔｈｏｄ［Ｊ］．ＪＰｈａｒｍＢｉｏｍｅｄＡｎａｌ，２００６，４１：４８．
［６］　ＺｈｏｕＬｉｍｉｎ，ＣｈｏｗＭｏｓｅｓ，ＺｕｏＺｈｏｎｇ．Ｉｍｐｒｏｖｅｄｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌ
ｍｅｔｈｏｄｆｏｒＤａｎｓｈｅｎｐｒｏｄｕｃｔｓＣｏｎｓｉｄｅｒａｔｉｏｎｏｆｂｏｔｈｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃａｎｄ
７２
第３４卷第１９期
２００９年１０月
　　　　　 　 　 　 　 　　　　　 　 　 　 　
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　１９
　Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００９
ｌｉｐｏｐｈｉｌｉｃａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ［Ｊ］．ＪＰｈａｒｍＢｉｏｍｅｄＡｎａｌ，２００６，
４１：７４４．
［７］　杨义芳．超高效／高分离度快速／超快速液相色谱在中药及其
制剂研究中的应用［Ｊ］．中草药，２００８，３９（８）：１２５９．
［８］　ＬｉｕＡｉｈｕａ，ＬｉｎＹａｎｈｕａ，ＹａｎｇＭｉｎ，ｅｔａｌ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｔｈｅｆｉｎ
ｇｅｒｐｒｉｎｔｓｆｏｒｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆｔｈｅｒｏｏｔｓｏｆＳａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｈｉｚａａｎｄｉｔｓｒｅ
ｌａｔｅｄｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓｂｙＨＰＬＣＤＡＤａｎｄＬＣＭＳｎ［Ｊ］．ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒ
Ｂ，２００７，８４６（１）：３２．
ＳｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｎｉｎｅｐｈｅｎｏｌｉｃａｃｉｄｓｉｎＳａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ
ｂｙＲＲＬＣＵＶ
ＷＡＮＧＬｉ１，２，ＺＨＡＯＭｉｎｇｂｏ２，ＨＥＷｅｎｓｈｕｎ２，ＺＡＮＫｅ２，ＢＩＫａｉｓｈｕｎ１，ＴＵＰｅｎｇｆｅｉ１，２
（１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＳｈｅｎｙａｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１００１６，Ｃｈｉｎａ；
２．ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＮａｔｕｒａｌａｎｄＢｉｏｍｉｍｅｔｉｃＤｒｕｇｓ，ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＨｅａｌｔｈ
ＳｃｉｅｎｃｅＣｅｎｔｅｒ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００１９１，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａＲＲＬＣＵＶｍｅｔｈｏｄｆｏｒｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｎｉｎｅｐｈｅｎｏｌｉｃａｃｉｄｓｉｎＳａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒ
ｒｈｉｚａ．Ｍｅｔｈｏｄ：３，４Ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌａｃｅｔｉｃａｃｉｄｗａｓｕｓｅｄａｓｉｎｔｅｒｎａｌｓｔａｎｄａｒｄ，ａｎｄａｎａｌｙｓｉｓｗａｓｃａｒｉｅｄｏｕｔｏｎａＡｇｉｌｅｎｔＺｏｒｂａｘＥ
ｃｌｉｐｓｅＰｌｕｓＣ１８（２１ｍｍ×５０ｍｍ，１８μｍ）ｃｏｌｕｍｎｅｌｕｔｅｄｗｉｔｈａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ０１％ ｆｏｒｍｉｃａｃｉｄａｑｕｅｏｕｓｓｏｌｕｔｉｏｎａｓｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｓｉｎ
ｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎ．ｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ０３ｍＬ·ｍｉｎ－１，ａｎｄｔｈｅＵＶｄｅｔｅｃｔｏｒｗａｓｍｏｎｉｔｏｒｅｄａｔ２８６ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ａｌｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎｃｕｒｖｅｓ
ｓｈｏｗｅｄｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎｗｉｔｈｉｎｔｅｓｔｒａｎｇｅｓ（ｒ＞０９９９５）；ａｎｄｔｈｅｏｖｅｒａｌｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｗｅｒｅｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ９８２％１０２６％，ｗｉｔｈ
ＲＳＤｌｅｓｓｔｈａｎ３１％ （ｎ＝９）．ＴｈｅｏｖｅｒａｌＲＳＤｏｆｐｒｅｃｉｓｉｏｎｔｅｓｔｗｅｒｅｌｅｓｓｔｈａｎ２４％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｅｄｍｅｔｈｏｄｗａｓｓｉｍ
ｐｌｅ，ｒａｐｉｄ，ａｃｃｕｒａｔｅａｎｄｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ，ａｎｄｃａｎｂｅｕｓｅｄｆｏｒｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆＳａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｈｉｚａ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ｓａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｈｉｚａ；ＲＲＬＣＵＶ；ｐｈｅｎｏｌｉｃａｃｉｄｓ；ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；ｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌ
［责任编辑　王亚君］
８２
第３４卷第１９期
２００９年１０月
　　　　　 　 　 　 　 　　　　　 　 　 　 　
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　１９
　Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００９