全 文 ：ＨＰＬＣＥＬＳＤ法测定心脉通软胶囊中三七皂苷 Ｒ１和
人参皂苷 Ｒｇ１，Ｒｂ１的含量
刘志宝，王爱民，苏 红，何 迅，李勇军，兰燕宇，王永林
（贵阳医学院 药学院，贵州 贵阳 ５５０００４）
［收稿日期］ ２００７０６１５
［基金项目］ 国家科技部科技支撑计划课题（２００６ＢＡＩ０６Ａ０１０３）；
贵州省中药现代化科技产业资助项目［黔科合中药专字（２００３）１２号］
［通迅作者］ 王永林，Ｔｅｌ：（０８５１）６９０８８９９，Ｅｍａｉｌ：ｇｙｗｙｌ＠ｇｍｃ．
ｅｄｕ．ｃｎ
心脉通软胶囊系由三七、山楂叶和川芎组成，采
用现代大孔树脂吸附和超临界流体萃取技术富集有
效成分精制而成，具有活血化瘀，通脉止痛的功效，
临床用于冠心病心绞痛心血瘀阻所致胸痹心痛证。
方中三七Ｐａｎａｘｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ（Ｂｕｒｋ．）Ｆ．Ｈ．Ｃｈｅｎ为贵
重中药材，主要含人参皂苷（ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ）Ｒｂ１，Ｒｂ２，
Ｒｂ３，Ｒｃ，Ｒｄ，Ｆ２，七叶胆苷Ⅸ（ｇｙｐｅｎｏｓｉｄｅⅨ）、七叶
胆苷ⅩⅦ（ｇｙｐｅｎｏｓｉｄｅⅩⅦ）、人参皂苷 Ｒｅ，Ｒｇ１，
Ｒｇ２，Ｒｈ１和三七皂苷（ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ）Ｒ１，Ｒ２，Ｒ４，
Ｒ６，Ｆａ等成分
［１，２］，其中三七皂苷 Ｒ１、人参皂苷 Ｒｇ１
及Ｒｂ１具有多种药理作用，经大量药效学试验证明
该三种皂苷是三七的主要活性成分［３５］。因此，控制
本品中三种皂苷含量能更好的控制产品的质量。笔
者用 ＨＰＬＣＥＬＳＤ法对制剂中３种皂苷进行了质量
研究，建立了心脉通软胶囊中三七皂苷 Ｒ１、人参皂
苷Ｒｇ１及Ｒｂ１的含量测定方法。结果表明，该法操作
简便、快速、重复性好，可用于心脉通软胶囊的质量
控制。
１ 仪器与试药
ＬＣ－１０ＡＴｖｐ高效液相色谱泵（日本岛津）、
Ｒｈｅｏｄｙｎｅ７７２５ｉ手动进样阀（美国 Ｒｈｅｏｄｙｎｅ公司）；
ＴＣ－１００柱温箱（天津特纳科技公司）；Ａｌｔｅｃｈ５００
蒸发光散射检测器（美国奥泰科技公司）；ＷＹＢ－
５０００全自动无油空压机（北京怡丰瑞普科技有限公
司）；ＷＭＬ色谱工作站（广西威玛龙色谱科技公
司）；超声波清洗器（２５０Ｗ，２９～３４ｋＨｚ；北京医疗
设备二厂）等。三七皂苷 Ｒ１、人参皂苷 Ｒｇ１，Ｒｂ１对
照品由中国药品生物制品检定所提供（批号
１１０７４５２００３１２，１１０７０３２００３２２，１１０７０４２００３１８）；心
脉通软胶囊由贵州省中药民族药研究开发中心提供
（批号２００５０９１１，２００５０９２０，２００５０９２９）；乙腈为色谱
纯，乙醇和甲醇为分析纯，水为重蒸水。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件
２．１．１ 三七皂苷 Ｒ１和人参皂苷 Ｒｇ１色谱条件 大
连依利特科技有限公司ＨｙｐｅｒｓｉｌＣ１８色谱柱（４６ｍｍ
×１５０ｍｍ，５μｍ）；流动相乙腈水（２０∶８０），流速
１０ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱温４０℃；蒸发光散射检测器条
件：雾化气为空气，输入压力０３ＭＰａ，漂移管温度
４０℃。本实验条件下三七皂苷 Ｒ１和人参皂苷 Ｒｇ１
与其他杂质峰分离完全，分离度均大于１５，阴性对
照无干扰。见图１。
图１ 心脉通软胶囊ＨＰＬＣ图
Ａ．对照品；Ｂ．制剂供试品；Ｃ．阴性对照；
１．三七皂苷Ｒ１；２．人参皂苷Ｒｇ１
２．１．２ 人参皂苷 Ｒｂ１色谱条件 流动相乙腈水
（３２∶６８），其他色谱条件同三七皂苷Ｒ１和人参皂苷Ｒｇ１
测定，该实验条件下人参皂苷Ｒｂ１与其他杂质峰分离完
全，分离度大于１５，阴性对照无干扰。见图２。
２．２ 对照品溶液制备
分别精密称取三七皂苷Ｒ１和人参皂苷Ｒｇ１对照
品，加甲醇制得含三七皂苷Ｒ１０５０２０ｍｇ·ｍＬ
－１和
人参皂苷 Ｒｇ１１９５６ｍｇ·ｍＬ
－１的混合对照品贮备
液。另精密称取人参皂苷 Ｒｂ１对照品，加甲醇制得
１０１０ｍｇ·ｍＬ－１的对照品贮备液。
２．３ 供试品溶液制备
取本品１０粒内容物混匀，取约 ０３ｇ，精密称
定，置离心试管中，加乙醚３ｍＬ，于漩涡混合器上混
·８９１·
第３３卷第２期
２００８年１月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ２
Ｊａｎｕａｒｙ，２００８
图２ 心脉通软胶囊ＨＰＬＣ图
Ａ．对照品；Ｂ．制剂供试品；Ｃ．阴性对照；１．人参皂苷Ｒｂ１
匀。置离心机中４０００ｒ·ｍｉｎ－１离心５ｍｉｎ，弃上层
乙醚液，沉淀再加乙醚 ３ｍＬ，同法操作。沉淀加
５０％乙醇适量超声溶解后转移至５０ｍＬ量瓶中，用
５０％乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
２．４ 线性关系考察
分别精密吸取上述三七皂苷 Ｒ１、人参皂苷 Ｒｇ１
对照品贮备液０５，１，２，４，８ｍＬ置１０ｍＬ量瓶中，用
甲醇稀释至刻度，摇匀，分别取上述对照品工作液各
１０μＬ注入液相色谱仪，记录色谱图。以峰面积的
对数和进样浓度的对数进行线性回归计算，得三七
皂苷Ｒ１为ｌｇＡ＝１３３９２ｌｇＣ＋７０９８１，ｒ＝０９９９７；
人参皂苷 Ｒｇ１回归方程为 ｌｇＡ＝１３９００ｌｇＣ＋
７１４４６，ｒ＝０９９９９。三七皂苷 Ｒ１在００２５～０４０
ｍｇ·ｍＬ－１，人参皂苷Ｒｇ１在００９８～１５６ｍｇ·ｍＬ
－１
有良好的线性关系。
另精密吸取人参皂苷Ｒｂ１对照品贮备液０５，１，
２，３，５ｍＬ于５ｍＬ量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，
分别精密吸取上述对照品工作液各１０μＬ注入液相
色谱仪，测定峰面积。以峰面积的常用对数为纵坐标
（Ｙ），浓度的常用对数（Ｘ）为横坐标计算线性回归方
程为Ｙ＝１８２８９Ｘ＋７１６６７，ｒ＝０９９９６。人参皂苷
Ｒｂ１在０１０～１０ｍｇ·ｍＬ
－１线性关系良好。
２．５ 精密度试验
精密吸取同一供试品溶液１０μＬ，分别连续进
样５次，测定峰面积，三七皂苷 Ｒ１、人参皂苷 Ｒｇ１和
人参皂苷 Ｒｂ１峰面积的 ＲＳＤ分别为１３％，１５％，
０４％（ｎ＝５）。
２．６ 重复性试验
取同一批号样品５份，按供试品溶液制备方法制
备供试液，分别进样测定，结果三七皂苷Ｒ１的平均质
量分数为０８７２１％，ＲＳＤ１５％ （ｎ＝５）；人参皂苷
Ｒｇ１的平均质量分数为４３３６％，ＲＳＤ１７％（ｎ＝５）；
人参皂苷Ｒｂ１的平均质量分数为３６１７％，ＲＳＤ１４％
（ｎ＝５）。
２．７ 稳定性试验
取样品按供试品溶液制备方法制备供试液，分
别于０，２，４，６，８ｈ进样１０μＬ，结果三七皂苷Ｒ１、人
参皂苷 Ｒｇ１和人参皂苷 Ｒｂ１峰面积的 ＲＳＤ分别为
１２％（ｎ＝５），１４％（ｎ＝５），０８％（ｎ＝５），结果表
明供试品溶液在８ｈ内稳定。
２．８ 回收率试验
精密称取已测定含量的制剂（批号２００５０５２５，
三七皂苷Ｒ１、人参皂苷 Ｒｇ１和人参皂苷 Ｒｂ１分别为
０８７２１％，４３３６％，３６１７％）９份，分别精密加入三
七皂苷Ｒ１、人参皂苷 Ｒｇ１和人参皂苷 Ｒｂ１对照品适
量，按供试品溶液的制备方法制得供试品溶液，进样
测定，计算加样回收率，结果见表１～３。
表１ 三七皂苷Ｒ１回收率（ｎ＝９）
样品称
样量／ｍｇ
样品中
含量／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
１４９９ １３０７ ０６６４ １９７１ １０００
１５５０ １３５２ ０６６４ ２０１４ ９９７
１５３２ １３３６ ０６６４ １９８０ ９７０
１５１５ １３２１ １３２８ ２６６９ １０１５
１５２６ １３３１ １３２８ ２６４７ ９９１ ９９３ １８
１４９２ １３０１ １３２８ ２６０３ ９８０
１５０１ １３０９ １９９２ ３２５１ ９７５
１５１８ １３２４ １９９２ ３２８９ ９８６
１５３７ １３４０ １９９２ ３３７６ １０２２
表２ 人参皂苷Ｒｇ１回收率（ｎ＝９）
样品称
样量／ｍｇ
样品中
含量／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
１４９９ ６５００ ３２４２ ９８０２ １０１９
１５５０ ６７２１ ３２４２ ９８１２ ９５３
１５３２ ６６４３ ３２４２ ９８７９ ９９８
１５１５ ６５６９ ６４８４ １２９９０ ９９０
１５２６ ６６１７ ６４８４ １３１８８ １０１３ ９８９ ２０
１４９２ ６４６９ ６４８４ １２８１３ ９７８
１５０１ ６５０８ ９７２６ １６１６７ ９９３
１５１８ ６５８２ ９７２６ １６０５１ ９７４
１５３７ ６６６４ ９７２６ １６２１１ ９８２
表３ 人参皂苷Ｒｂ１回收率（ｎ＝９）
样品称
样量／ｍｇ
样品中
含量／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
１４９９ ５４２２ ２７８２ ８３０５ １０３６
１５５０ ５６０６ ２７８２ ８４２３ １０１３
１５３２ ５５４１ ２７８２ ８２９４ ９９０
１５１５ ５４８０ ５５６４ １１１８４ １０２５
１５２６ ５５２０ ５５６４ １１０２７ ９９０ １００３ １７
１４９２ ５３９７ ５５６４ １０９７５ １００３
１５０１ ５４２９ ８３４６ １３７１４ ９９３
１５１８ ５４９１ ８３４６ １３７９９ ９９５
１５３７ ５５５９ ８３４６ １３７９２ ９８６
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第３３卷第２期
２００８年１月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ２
Ｊａｎｕａｒｙ，２００８
２．９ 样品测定
取批号为 ２００５０９１１，２００５０９２０，２００５０９２９的心
脉通软胶囊样品，按含量测定方法进行测定，分别得
三七皂苷Ｒ１、人参皂苷 Ｒｇ１和人参皂苷 Ｒｂ１含量，
将所得含量分别乘以３批样品的每粒平均装量，结
果见表４。
表４ 心脉通软胶囊样品测定结果 ｍｇ／粒
批号 三七皂苷Ｒ１ 人参皂苷Ｒｇ１ 人参皂苷Ｒｂ１
２００５０９１１ ３８６ １８７ １６２
２００５０９２０ ３７８ １９２ １５３
２００５０９２９ ３９０ １９１ １５６
３ 讨论
在供试品溶液制备中，由于本品内容物含川芎
超临界提取的精油和植物油，直接以乙醇等有机溶
剂溶解制备供试品溶液，注入色谱仪后对进样阀、色
谱柱污染较大。因此，在供试品溶液制备中需除去
植物油等脂溶性成分。试验分别以石油醚、乙醚和
氯仿对供试品进行除脂处理，结果以乙醚除脂效果
较好，样品处理过程中不产生乳化现象，对测定成分
无影响，故选择乙醚对样品进行前处理。
《中国药典》２００５年版一部三七药材含量测定
采用 ＨＰＬＣＵＶ梯度洗脱的方法［６］，在同一色谱条
件下对３种皂苷进行测定。作者采用该法对本品进
行试验，结果表明，三七皂苷 Ｒ１、人参皂苷 Ｒｇ１及
Ｒｂ１均在紫外末端吸收，复方制剂中其他成分干扰
较大，色谱峰复杂，很难达到基线分离；由于三七皂
苷Ｒ１、人参皂苷Ｒｇ１及人参皂苷 Ｒｂ１的极性差异，在
同一色谱条件下保留时间相差较大，耗时较长；加之
梯度洗脱色谱柱的品牌对分离影响较大。故本品采
用２种色谱条件对三种皂苷进行测定，可简化色谱
条件，节约分析时间。
［参考文献］
［１］ 鲍建才，刘 刚，丛登立，等．三七的化学成分研究进展［Ｊ］．中
成药，２００６，２８（２）：２４６．
［２］ 李海舟，张颖君，杨崇仁．三七叶化学成分的进一步研究［Ｊ］．
天然产物研究与开发，２００６，１８：５４９．
［３］ 魏均娴，杜元冲．三七———现代科学研究与应用［Ｍ］．昆明：云
南科技出版社，１９９６：１５２．
［４］ 王 琛．三七的药效与作用机制［Ｊ］．中国实用医药，２００６，１
（５）：１２５．
［５］ 杨志刚，陈阿琴，俞颂东，等．三七皂苷药理作用研究进展［Ｊ］．
中国兽药杂志，２００５，３９（１）：３３．
［６］ 中国药典［Ｓ］．一部．２００５：１０．
［责任编辑 鲍 雷］
［收稿日期］ ２００７０５０４
［通迅作者］ 虞和永，Ｔｅｌ：（０５７１）８７０６１５０１，Ｆａｘ：（０５７１）８７０８
７３７０，Ｅｍａｉｌ：ｙｕｈｙ＠ｚｊｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
ＨＰＬＣ测定升血膏中芍药苷的含量
张叶萍１，黄琴伟２，龚 青３，虞和永１
（１．浙江大学 医学院 附属妇产科医院，浙江 杭州 ３１０００６；
２．浙江中医药大学 药学院，浙江 杭州 ３１００５３；３．浙江省药品检验所，浙江 杭州 ３１０００４）
升血膏收载于部颁标准［１］，处方由熟地黄、川
芎、黄芪（蜜炙）、白扁豆、大枣、茯苓、当归、白芍等
１２味中药组成，具有益气养血的功效。用于小儿贫
血，面色萎黄，头晕乏力等症。原标准中未收载含量
测定，为了控制制剂的质量，本试验采用ＨＰＬＣ测定
其中所含芍药苷的含量。
１ 仪器与试药
ＨＰ１１００系列高效液相色谱仪（Ｇ１３２２Ａ脱气
机，Ｇ１３１１Ａ四元泵，Ｇ１３１３Ａ自动进样仪，Ｇ１３１６Ａ
柱温箱，Ｇ１３１４Ａ紫外检测器，Ｃｈｅｍｓｔａｔｉｏｎ色谱工作
站）；ＴＵ１９０１型紫外可见分光光度计（北京普析通
用公司）。
芍药苷对照品由中国药品生物制品检定所提供
（批号０７３６２００２１９，含量测定用），乙腈为色谱纯，
水为重蒸水，其他试剂均为分析纯。升血膏（批号
０６０５０１，０６０５０２，０６０５０３）和缺白芍样品由胡庆余堂
药业有限公司生产。
２ 方法
·００２·
第３３卷第２期
２００８年１月
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ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
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Ｊａｎｕａｒｙ，２００８