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Studies on chemical constituents from roots of Caragana sinica

金雀根化学成分研究



全 文 :金雀根化学成分研究
马大友1,胡昌奇2
(1.中南大学 药学院,湖南 长沙 410013;2.复旦大学 药学院,上海 200032)
[摘要] 目的:研究金雀根中的化学成分。方法:用色谱法分离金雀根的化学成分,用波谱法鉴定其结构。结
果:从金雀根中分离并鉴定了7个化合物,其结构分别为(+)stenophylolB(1),对羟基苯甲酸(2),odoratin(3),白
藜芦醇(4),cararosinolA(5),leachinolC(6),carasinaurone(7)。结论:化合物1为新化合物,是化合物stenophylolB
的对映异构体;化合物2~6为首次从该植物中分离得到。
[关键词] 金雀根;锦鸡儿;化学成分
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2008)05051705
[收稿日期] 20071101
[基金项目] 国家自然科学基金项目(39270800)
[通讯作者] 胡昌奇,Tel:(021)54237564,Email:huchangqi
@gmail.com
  锦鸡儿Caraganasinica(Buc’hoz)Rehd.为豆科
锦鸡儿属植物,落叶灌木,生于林缘、路旁灌丛中或村
庄附近,广泛分布于河北、陕西、河南等省区。金雀根
为锦鸡儿的根或根皮,具有清肺益脾、活血通脉之功
效,主治虚损劳热、咳嗽、高血压,妇女白带,血崩,关
节痛风、跌打损伤[1]。经生物活性筛选,发现金雀根
的醋酸乙酯部位具有较强的刺激成骨细胞增殖的活
性,预示金雀根中的某些成分有可能在促进骨骼生
长、调节骨代谢、预防骨质疏松方面具有潜在意义[2]。
在已有工作的基础上[35],作者对金雀根化学成分进
行了进一步的分离鉴定工作,结果分离并鉴定了7个
化合物。
化合物1 淡黄色无定形粉末状固体,在预制
硅胶板上点样展开,碘蒸气下显黄色,空气中放置后
转为浅紫红色,当展开剂为氯仿甲醇(9∶2)时Rf值
为010。1HNMR显示6对邻偶的芳香质子对应3
个4羟基苯基;6个间偶质子对应着3个3,5二羟
基苯基。由于该属植物中发现了较多二苯乙烯类化
合物,可初步推测该化合物是1个白黎芦醇的三聚
体。在高场脂肪质子区有 6个质子,HMQC中 δH
583的质子对应δC880,可以推断相互耦合的2个
质子δ583,506(1Heach,d,J=41Hz)位于1个
二氢苯并呋喃环上。HMBC谱中,H2(6)a/C7a,
H2(6)b/C7b,H2(6)c/C7c的偶合引出了分别
与3个4羟基苯基(苯环A1,B1和C1)相连的碳(C
7a,C7b和 C7c)H7a/C11c,H7a/C10c,H8a/
C10c,H8a/C9c之间的HMBC相关进一步证实了
苯并二氢呋喃环(C2A3)的存在。H8a/C9c,H8a/
C10a,H7b/C9a,H7b/C11a,H7b/C8c,H8b/C
10a,H8b/C9c,H8c/C10c之间的 HMBC相关说
明了八元环(B3)的存在。H8b/C10b,H7c/C9b,
H8b/C9c,H7c/C11b之间的 HMBC又说明五元
环(C3)的存在。NOESY谱中,NOE相关 H7a/H
14a,H8a/H2(6)a显示质子 H8a和 H7a是反式
的;H8a/H8b,H8a/H2(6)b,H7b/H8c,H8b/
H2(6)b说明八元环上的质子 H8a,H8b反式于
H7b,H8c;H7c/H14c,H8c/H2(6)c,H7b/H2
(6)c说明H7c反式于H8c。因此化合物1的结构
确定为图1所示。与文献[6]比较,发现化合物 1
核磁数据及相对构型与 stenophylolB一致,但其比
旋光,[a]25D:+15°(MeOH,c1182),却与 steno
phylolB的比旋光,[a]25D:-20°(MeOH,c01)具有
相近的绝对值和相反的方向。因此确定化合物1为
stenophylolB的对映异构体,即(+)stenophylolB。
图1 化合物1的结构及HMBC(a),NOE(b)重要相关
1 材料
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ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
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March,2008
Kofler显微熔点仪(温度计未校正),Nicolet
AVATAR360型红外光谱仪,BrukerDPX400型核
磁共振仪;JascoP-1020型旋光色散仪;Agilent
1100SeriesLC/MSDG1946D型和 Agilent5973N型
质谱仪;薄层色谱用硅胶青岛海洋化工有限公司产
品;其他实验用试剂均为分析纯。
锦鸡儿 C.sinica购自湖北省钟祥县药材公司,
采集于1999年8月。原植物由华东师范大学生物
系冯志坚教授鉴定。凭证样品存放于复旦大学药学
院天然药化教研室。
2 提取分离
将干燥的金雀根药材100kg用95%乙醇渗漉
提取,减压回收溶剂,得金雀根浸膏 78kg;将浸膏
混悬于100L水中,滤去沉淀,水溶液浓缩后经大孔
树脂柱色谱,依次用水和乙醇洗脱,乙醇洗脱液浓缩
后(360g),将其溶于400mL蒸馏水,依次用醋酸乙
酯和正丁醇萃取,浓缩正丁醇萃取液得187g浸膏,
取108g该浸膏再用丙酮提取,得丙酮可溶部分98
g。取丙酮可溶部分70g进行硅胶柱色谱,氯仿甲
醇(10∶1~2∶1)梯度洗脱;氯仿甲醇(10∶1)洗脱
部分108g再经硅胶柱色谱分离,石油醚醋酸乙酯
(2∶1)洗脱得到化合物 6(120mg);氯仿甲醇
(8∶1)洗脱部分98g再经硅胶柱色谱分离,氯仿
甲醇梯度洗脱得到化合物 5(130mg);氯仿甲醇
(4∶1)洗脱前部分310g经硅胶柱色谱分离,石油
醚醋酸乙酯梯度洗脱得到化合物 7(130mg);氯
仿甲醇(4∶1)洗脱的后部分85g经硅胶柱色谱分
离,丙酮环己烷(12∶1)洗脱,结合反相硅胶柱色谱
(30%甲醇洗脱)得化合物1(58mg),2(65mg);
氯仿甲醇(3∶1和2∶1)部分177g经多次硅胶柱
色谱分离,丙酮环己烷(2∶3),石油醚醋酸乙酯
(1∶5),氯仿甲醇(4∶1)洗脱得化合物3(27mg),4
(46mg)。
3 结构鉴定
化合物 1 淡黄色无定形粉末;mp>240℃,
[α]25D:+15°(MeOH,c1182);UV(MeOH):284
nm。IR(KBr)cm-1:3418,1615,1512,1457,
1230,1122,829。HRFABMSm/z6791951[M-
H]-(calcdforC42H32O96791968);
1H与13CNMR
(CD3COCD3)见表1。
化合物2 白色针状晶体(甲醇),mp214~216
℃;IR(KBr)cm-1:3385,3200~2300,1674,
   表1 化合物1的1H与13CNMR(CD3COCD3)
No 1H 13C
1a   1345
2(6)a 686(d,86) 1272
3(5)a 674(d,86) 1159
4a   1576
7a 583(d,41) 880
8a 506(d,41) 525
9a   1411
10a   1234
11a   1564
12a 631(d,23) 1012
13a   1580
14a 624(d,23) 1048
1b   1368
2(6)b 728(d,86) 1299
3(5)b 668(d,86) 1158
4b   1560
7b 535(d,97) 472
8b 431(dd,97,73) 536
9b   1507
10b   1234
11b   1546
12b 609(d,20) 1021
13b   1589
14b 605(d,20) 1029
1c   1395
2(6)c 719(d,85) 1300
3(5)c 666(d,85) 1157
4c   1561
7c 472(d,65) 517
8c 341(dd,65,73) 564
9c   1441
10c   1204
11c   1604
12c 622(d,15) 957
13c   1587
14c 678(brs) 1067
1610,1594,1510,1420,1242,1168,854,769;EI
MSm/z(%)138(746),121(100),93(276),65
(188);1HNMR(DMSOd6,400MHz)δ:1238(1H,
brs),1019(1H,brs),779(2H,d,J=87Hz),
682(2H,d,J=87Hz)。以上数据与文献[7]报道
对照,确定为对羟基苯甲酸。
化合物3 无色针晶(甲醇),mp213~215℃;
UV(MeOH)nm:260,290;IR(KBr)cm-1:3487,
3126,1621,1573,1514,1480,1276,1223,859;
EIMSm/z314,299,271,243,228,167,127,105;
1HNMR(DMSOd6,400MHz)δ:1057(1H,s,OH),
899(1H,s,OH),827(1H,s,H2),744(1H,s,H
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5),705(1H,s,H2′),695(1H,s,H5′),695
(1H,s,H6′),694(1H,s,H8),388(3H,s,
OCH3),379(3H,s,OCH3);
13CNMR(DMSOd6,
100MHz)δ:1742(C4),1528(C7),1527(C2),
1517(C8a),1474(C4′),1469(C6),1460(C
3′),1249(C1′),1228(C3),1197(C6),1164
(C2′),1163(C4a),1120(C5′),1048(C5),
1028(C8),558(OMe),557(OMe)。以上数据
与文献[8]对照,鉴定为odoratin。
化合物4 淡黄色针晶(丙酮),mp264℃;UV
(MeOH)nm:296,322;IR(KBr)cm-1:3299,1607,
1587,1512,1445,1326,1154,965,831;EIMS
m/z:228,211,181,157,114;1HNMR(acetoned6,
400MHz)δ:739(2H,d,J=86Hz),699(1H,d,
J=163Hz),685(1H,d,J=163Hz),682(2H,
d,J=86Hz),651(2H,d,J=22Hz),624(1H,
  
t,J=22Hz)。以上数据与文献[9]报道比较,确定
为白黎芦醇。
化合物 5 淡黄色粉末,mp>240℃,[α]25D:
-920°(MeOH,c1295);UV(MeOH)2834nm;
IR(KBr)cm-1:3328,1695,1600,1512,1440,
1332,1214,1169,1006,834;HRFABMSm/z
9212583[M-H]-(calcdforC56H42O13921254
7);1H与13CNMR见表2。以上数据与文献[10]报
道比较,确定为cararosinolA。
化合物6 棕黄色粉末状固体,[α]25D:-158°
(MeOH,c2222);UV(MeOH)270nm;IR(KBr)
cm-1:3383,1727,1666,1611,1513,1456,1338,
1258,1159,1000,837;ESI+MSm/z909[M+
1]+,931[M+Na]+;1H与13CNMR见表2。以上数
据与文献[11]报道比较,鉴定为leachianolC。
化合物7 棕黄色粉末,mp>240℃;IR(KBr)
表2 化合物5和6的1H与13CNMR(CD3COCD3)
No

1H 13C
No

1H 13C
1a   1306 1a   1342
2(6)a 705(d,88) 1299 2(6)a 695(d,85) 1294
3(5)a 673(d,88) 1158 3(5)a 665(d,85) 1163
4a   1585 4a   1571a
7a 576(d,112) 883 7a 397(s) 528
8a 416(d,112) 494 8a 369(d,51) 584
9a   1423 9a   1501
10a   1198 10a   1235
11a   1581 11a   1552
12a 632(d,21) 1016 12a 654(brd,17) 1036
13a   1577 13a   1602
14a 624(d,21) 1055 14a 661(brs) 1042
1b   1341 1b   1364
2(6)b 653(d,86) 1280 2(6)b 691(d,85) 1296
3(5)b 636(d,86) 1154 3(5)b 665(d,85) 1163
4b   1558 4b   1570
7b 530(d,29) 417 7b 470(s) 488
8b 467(brs) 441 8b 375(brd,48) 645
9b   1397 9b   1638
10b   1186 10b   1443
11b   1606 11b   1940
12b 610(d,20) 968 12b 307(d,30) 686
13b   1597 13b   2061
14b 651(d,20) 1099 14b 346(s) 511
1c   1298 1c   479
2(6)c 768(d,88) 1318 3c 481(d,103) 1267
3(5)c 673(d,88) 1161 4c   1945
4c   1631 5c 249(d,184) 380
7c   2011   293(d,184,61)  
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March,2008
续表1
No

1H 13C
No

1H 13C
8c 520(d,36) 612 6c 327(m)a 514
9c   1454 7c 320(m)b 620
10c   1181 8c 324(m)c 556
11c   1576 9c   1433
12c 593(s) 1045 10(14)c 661(brs) 1082
13c   1535 11(13)c   1601
14c   1250 12c 638(t,20) 1029
1d   1376 1d   1333
2(6)d 706(d,86) 1296 2(6)d 694(d,85) 1296
3(5)d 668(d,86) 1155 3(5)d 665(d,85) 1163
4d   1564 4d   1572b
7d 433(d,33) 594 7d 333(d,99) 657
8d 318(dd,33,36) 616 8d 356(t,112) 621
9d   1504 9d   1449
10(14)d 628(d,22) 1060 10(14)d 605(brs) 1073
11(13)d   1597 11(13)d   1594
12d 623(t,22) 1019d 12d 606(brs) 1021
      OHs 816(x2),830,836,846,
        851(x2),863,902(eachbrs)
cm-1:3373,3500~2500,1680,1598,1516,
1430,1357,1206,1120,991,834,790,627;EIMS
m/z(%)302(228),284(487),195(1000),167
(1000),152(322),124(233),107(1000),77
(360),69(288);1HNMR(acetoned6,400MHz)
δ:701(2H,d,J=83Hz,H2a,6a),662(2H,d,
J=83Hz,H3a,5a),593(1H,d,J=13Hz,H
7),591(1H,d,J=13Hz,H5),375(3H,s,
OCH3),306(2H,s,H10)。以上数据与文献[5]报
道比较,鉴定为carasinaurone。
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StudiesonchemicalconstituentsfromrootsofCaraganasinica
MADayou1,HUChangqi2
(1.SchoolofPharmacy,CentralSouthUniversity,Changsha410013,China;
2.SchoolofPharmacy,FudanUniversity,Shanghai200032,China)
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第33卷第5期
2008年3月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol33,Issue 5
March,2008
[Abstract] Objective:TostudythechemicalconstituentsinrootsofCaraganasinica.Method:Theconstituentswereisolated
bysilicagelcolumnchromatography,andtheirstructureswereidentifiedbyspectroscopicmethods.Result:Sevencompoundswerei
dentifiedas(+)stenophylolB(1),4hydroxybenzoicacid(2),odoratin(3),resveratrol(4),cararosinolA(5),leachinolC
(6),carasinaurone(7)respectively.Conclusion:Compound1wasanewcompoundwhichwastheenantiomerofstenophylolB.
Compounds26wereobtainedfromtheplantforthefirsttime.
[Keywords] JinQueGen;Caraganasinica;constituents
[责任编辑 王亚君]
[收稿日期] 20070509
[基金项目] 国家自然科学基金重点项目(30530860)
[通讯作者] 肖培根,Tel:(010)62894462,Fax:(010)63038753,
Email:xiaopg@public.bta.net.cn
铁箍散藤茎的化学成分研究
许利嘉1,2,刘海涛1,彭 勇1,肖 伟1,陈士林1,2,陈四保1,2,肖培根1,2
(1.中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所,北京 100094;
2.深圳市中药药学及分子药理学研究重点实验室,广东 深圳 518057)
[摘要] 目的:研究铁箍散Schisandrapropinqua藤茎的化学成分及药理活性。方法:利用多种色谱技术进行
分离纯化,根据化合物理化性质和光谱分析鉴定化合物的结构。用四唑盐(MTT)比色试验测定浸膏及化合物对
15% FBS诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响。结果:从铁箍散的石油醚部分分离得到5个化合物,分别鉴定为:
galgravin(1),veraguensin(2),2,3二羟基丙基十八酸酯(3),2,3二羟基丙基十六酸酯(4),2,3二羟基丙基二十四
酸酯(5)。结论:化合物1~5均为首次从该植物中分离得到,化合物1,2,5对体外血清诱导的平滑肌细胞增殖表
现出了一定的抑制作用。
[关键词] 五味子属;铁箍散;化学成分;四唑盐
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2008)05052103
  铁箍散 Schisandrapropinqua(Wal.)Bail.,又
称小血藤、香巴戟,为五味子科 Schisandraceae五味
子属植物,主要分布于中国西北和西南部,在民间用
于治疗神经衰弱、跌打损伤、风湿骨痛、胃痛等疾病。
据文献报道,该植物藤茎中主要含有的化学成分为
木脂素和三萜,并有报道该植物的水提物在动物体
内具有抗肺癌活性[13]。作者对湖北神农架地区采
集的铁箍散藤茎进行了化学成分的研究,从石油醚
部分分离鉴定了5个化合物,均为首次从该植物中
分离得到。采用组织贴块法培养大鼠胸主动脉平滑
肌细胞,用MTT方法测定了铁箍散提取物和化合物
1~5对15% FBS诱导的血管平滑肌细胞增殖的影
响,结果表明化合物1,2,5对体外血清诱导的平滑
肌细胞增殖表现出了较好的抑制作用。
1 仪器和试剂
Fisher-Johns熔点仪(未校正);Perkin-Elmer
紫外-可见光谱仪;BrukerAM400型核磁共振仪,
TMS为内标;AEIMS-50DS90质谱仪;柱色谱用硅
胶为青岛海洋化工厂产品;SephadexLH-20为
Pharmacia产品。
样品于2002年9月采自湖北神农架地区,由九
江森林植物研究所谭策铭研究员提供并鉴定为铁箍
散S.propinqua的藤茎。植物标本存放于中国医学
科学院药用植物研究所标本馆,编号为W02。
2 提取分离
铁箍散的干燥藤茎(10kg)经过粉粹后,95%
EtOH回流提取3次,提取液合并减压浓缩得到浸膏
15kg(S.P)。浸膏用水悬浮,依次用石油醚(S.
PP),氯仿(S.PC),醋酸乙酯(S.PE)萃取,剩余水溶
液部分(S.PA)。石油醚部分(121g)通过硅胶柱,
用石油醚醋酸乙酯,环己烷丙酮为溶剂系统反复
柱色谱分离,并用SephadexLH-20纯化,分别得到
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第33卷第5期
2008年3月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol33,Issue 5
March,2008