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Lactone constituents of Saussurea involucrata

雪莲内酯类成分的研究



全 文 :雪莲内酯类成分的研究
申毅1,2,邹建华1,马英丽2,戴均贵1
(1中国医学科学院 北京协和医学院药物研究所 卫生部天然药物生物合成重点实验室
中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室,北京 100050;
2黑龙江中医药大学 药学院,黑龙江 哈尔滨 150040)
[摘要] 目的:研究雪莲的化学成分。方法:应用各种色谱方法进行分离;应用现代波谱学分析方法鉴定化合物。结果:
从雪莲的乙醇提取物的石油醚萃取物中分离得到8个化合物,分别鉴定为:β谷甾醇(1),三十二烷酸(2),hexacosan4olide
(3),(+)11α,13二氢去氢木香内酯(4),8αacetoxydehydrocostuslactone(5),zaluzaninC(6),11,13αdihydrozaluzaninC
(7),8βhydroxy11β11,13dihydrodehydrocostuslactone(8)。结论:化合物2~7均为首次从该植物中分离得到。
[关键词] 雪莲;倍半萜;内酯
[收稿日期] 20090613
[基金项目] 教育部博士点专项基金(20050023021);教育部”新世
纪优秀人才”支持计划项目(NCET060155)
[通信作者] 戴均贵,Tel:(010)63165195,Fax:(010)63017757,
Email:jgdai@immaccn
  雪莲 SausureainvolucrataKaretKir系菊科
风毛菊属植物,又名雪莲花,荷莲。主要分布于新
疆、青海、甘肃。具有除寒、壮阳、调经、止血等功效,
用于治疗腰膝软弱、风湿性关节炎、妇女月经不调、
外伤出血等症,为我国传统的妇科良药之一[12]。以
往文献报道关于雪莲的化学研究结果表明其主要成
分有黄酮[3]、生物碱、香豆素类[4]和木质素类[56]等
化学成分。近年来由于人为的大量盲目采摘,导致
雪莲的野生植物资源和生态环境受到极度破坏。从
可持续性开发利用此传统药用植物资源出发,本研
究组开展了雪莲组织细胞培养及其活性成分生产的
研究工作,取得了一些初步的研究结果[7]。为了进
一步深入研究比较植物组织细胞培养物与野生植物
药材之间次级代谢产物的异同,并为组织细胞培养
体系的质量评价分析方法的建立提供标准品,本实
验对药材雪莲干燥地上部分的乙醇提取物进行了化
学成分分离。运用各种色谱技术,从乙醇提取物的
石油醚萃取部分中共分离得到8个化合物,并应用
理化常数的测定比较以及 IR,EI,NMR等现代波谱
学技术分析确定其化学结构分。化合物3为该属植
物中少见的具有饱和长链取代基的五元内酯化合
物,化合物4~8为愈创木烷型倍半萜内酯类成分,
其中化合物2~7均为首次从该植物中分离得到。
1 仪器与试药
XT4A型显微熔点测定仪(北京市科仪电光仪
器厂);IR为 Nicolet5700傅里叶变换红外显微镜
(美国热电公司傅里叶变换红外光谱仪);质谱为
VGZAB2F型质谱仪;1HNMR和13CNMR用 INO
VA600核磁共振波谱仪;柱色谱用硅胶 H和薄层
用硅胶 GF254均为青岛海洋化工厂生产;Sephadex
LH20凝胶为Pharmacia公司产品;半制备型高效液
相色谱仪:岛津LC6AD泵,岛津RID10A示差检测
器,威马龙数据工作站。Kromasil正相半制备柱(10
mm×250mm);Varian反相制备柱(214mm×250
mm);药材来源为2005年采自新疆天山地区,由新
疆维吾尔自治区药物研究所刘庆华研究员鉴定为菊
科风毛菊属雪莲Sinvolucrata。
2 提取与分离
取干燥的雪莲地上部分15kg粉碎成粗粉,以
10倍量95%乙醇回流提取3次,合并提取液,回收
乙醇得到乙醇浸膏。将浸膏分散于水中,依次以石
油醚、醋酸乙酯和正丁醇分别萃取,得到石油醚部
分,醋酸乙酯部分,正丁醇部分和水溶部分,回收后
得石油醚部分448g。将石油醚部分以硅胶柱进
行色谱分离,用石油醚醋酸乙酯进行梯度洗脱,得
到22个部分。其中第2份得到白色结晶,以石油醚
重结晶得到白色粉末2(1722mg);第3~4份经反
复硅胶柱色谱分离,分别使用石油醚醋酸乙酯(19∶
1,100∶3)进行洗脱,得到化合物3(411mg),化合
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物4(106mg);第5份经硅胶柱色谱分离,以石油
醚醋酸乙酯(19∶1)洗脱,得到白色结晶 1(183
mg);第6~8份用硅胶柱色谱分离,经石油醚醋酸
乙酯(10∶1)洗脱,继而经半制备型高效液相色谱
(正己烷醋酸乙酯 9∶1,流速5mL·min-1)纯化得
到化合物5(tR22min,30mg);第13~16份经Seph
adexLH20凝胶柱色谱(流动相为氯仿甲醇1∶1)分
离,再用硅胶柱色谱分离,以石油醚醋酸乙酯(5∶1)
洗脱,用半制备型高效液相色谱(甲醇水60∶40,流
速8mL·min-1)纯化得化合物 6(tR 23min,10
mg),7(保留时间为 25min,4mg);17~22份经
SephadexLH20凝胶柱、硅胶柱色谱以及半制备型
高效液相色谱(甲醇水60∶40,流速8mL·min-1)
反复纯化得化合物8(tR21min,1mg)。
3 结构鉴定
化合物 3 白色粉末。mp69~71℃;EIMS
m/z(%)394[M]+(5),376(30),358(12),332
(12),149,111(33),85(92),57(100)。1HNMR
(CDCl3,600MHz)δ:088(3H,t,J=72Hz,H
26),120~150(42H,m,H7~H25),156(2H,
m,H6),160(1H,m,H5a),173(1H,m,H5b),
185(1H,m,H3a),232(1H,m,H3b),253
(2H,m,H2),448(1H,q,H4)。13CNMR(CDCl3,
150MHz)δ:141(C26),227(C25),319(C
24),294~297(C7~C23),252(C6),356
(C5),811(C4),280(C3),289(C2),1772
(C1)。以上数据与文献[8]对照基本一致,故鉴定
该化合物为hexacosan4olide。
化合物4 黄色粉末。EIMSm/z232[M]+,
203。1HNMR(CDCl3,600MHz)δ:520(1H,d,J=
2Hz,H15a),505(1H,d,J=20Hz,H15b),489
(1H,s,H14a),478(1H,s,H14b),404(1H,t,
J=96Hz,H6),289(1H,m,H1),281(1H,t,
J=10Hz,H5),268(1H,dq,J=84,78Hz,H
11),116(3H,d,J=84Hz,H13)。13CNMR
(CDCl3,150MHz)δ:470(d,C1),297(t,C2),
301(t,C3),1517(s,C4),449(d,C5),852
(d,C6),521(d,C7),375(t,C8),325(t,C
9),1501(s,C10),394(d,C11),1800(s,C
12),113(q,C13),1117(t,C14),1094(t,C
15)。结合核磁共振氢谱、碳谱和 DEPT谱数据与文
献[9]比较,数据基本一致,确定化合物4为(+)
11α,13二氢去氢木香内酯 ((+)11α,13dihydro
dehydrocostuslactone)。
化合物5 黄色粉末。EIMSm/z288[M]+,
245[MAc],228[MHAc](100),213,200,148,
91。1HNMR(CDCl3,600MHz)δ:623(1H,d,J=
36Hz,H13a),564(1H,d,J=3Hz,H13b),528
(1H,brs,H15a),509(1H,brs,H15b),504
(1H,s,H14a),493(1H,s,H14b),297(1H,q,
J=84Hz,H1),185(1H,m,H2a),179(1H,
m,H2b),253(1H,m,H3a),244(1H,m,H
3b),281(1H,t,J=10Hz,H5),400(1H,t,J=
10Hz,H6),313(1H,t,J=90Hz,H7),496
(1H,dt,J=102,50Hz,H8),270(1H,dd,J=
50,144Hz,H9a),230(1H,dd,J=48,144
Hz,H9b),213(3H,s,H17)。13CNMR(CDCl3,
150MHz)δ:474(C1),303(C2),319(C3),
1427(C4),529(C5),785(C6),490(C
7),741(C8),388(C9),1497(C10),1373
(C11),1692(C12),1226(C13),1113(C
14),1170(C15),1700(C16),212(C17)。
以上数据与文献[10]对照一致,故鉴定该化合物为
8αacetoxydehydrocostuslactone。
化合物 6  无色油状物。EIMSm/z246
[M]+,228[MH2O],200[MCOH2O],149,91。
1HNMR(CD3OD,600MHz)δ:607(1H,d,J=36
Hz,H13a),553(1H,d,J=30Hz,H13b),527
(1H,s,H15a),522(1H,s,H15b),492(1H,s,
H14a),488(1H,s,H14b),445(1H,dt,J=20,
80Hz,H3α),407(1H,t,J=96Hz,H6),289
(1H,m,H1),287(1H,m,overlapped,H7),280
(1H,t,J=10Hz,H5),244(1H,dt,J=60,13
Hz,H9a),213(1H,m,H9b),226(1H,m,H
2a),165(1H,dt,J=84,132Hz,H2b),217
(1H,m,H8a)138(1H,m,H8b)。13CNMR(CD3
OD,150MHz)δ:448(C1),397(C2)739(C
3),1546(C4),505(C5),859(C6),465
(C7),319(C8),354(C9),1501(C10),
1417(C11),1722(C12),1206(C13),1143
(C14),1099(C15)。以上数据经与文献[11]比
较,数据基本一致,确定该化合物为zaluzaninC。
化合物 7  无色油状物。EIMSm/z248
[M]+,230[MH2O],215[MH2OMe],174,156,
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91。1HNMR(CD3OD,600MHz)δ:521(1H,s,H
15a),519(1H,s,H15b),489(1H,s,H14a),
486(2H,s,H14b),443(1H,dt,J=2,8Hz,H
3α),402(1H,t,J=96Hz,H6),285(1H,q,
J=84Hz,H1α),275(1H,t,J=96Hz,H5α),
247(1H,dt,J=48,132Hz,H9β),201(1H,
ddq,J=108,13,48Hz,H9α),229(1H,dq,J=
7,6Hz,H11β),221(1H,dt,J=80,132Hz,H
2α),162(1H,dt,J=84,132Hz,H2β),207
(1H,dq,J=40,120Hz,H8α),130(1H,dq,J=
120,50Hz,H8β),193(1H,ddt,J=40,96,
120Hz,H7),113(3H,d,J=66Hz,H13)。13C
NMR(CD3OD,150MHz)δ:441(C1),394(C
2),739(C3),1547(C4),502(C5),857
(C6),516(C7),335(C8),372(C9),1509
(C10),430(C11),1813(C12),133(C13),
1134(C14),1095(C15)。通过氢谱、碳谱和
NOESY谱分析确定该化合物结构,并对氢谱、碳谱
数据进行了详细归属,与文献[12]对照基本一致,
故鉴定化合物7为11,13αdihydrozaluzaninC。
化合物 8  无色油状物。EIMSm/z248
[M]+,230[MH2O],202,185,168,156,132,121,
107,91。1HNMR(CD3OD,600MHz)δ:513(1H,
s,H15a),500(1H,s,H15b),494(2H,s,H
14),395(1H,t,J=96Hz,H6β),362(1H,dt,
J=54,90Hz,H8α),297(1H,dt,J=48,84
Hz,H1β),283(1H,t,J=90Hz,H5α),269
(1H,dd,J=50,120Hz,H9a),215(1H,dd,J=
90,120Hz,H9b),252(1H,m,H3a),246
(1H,m,H3b),262(1H,dq,J=70,110Hz,H
11β),213(1H,q,J=102Hz,H7),195(1H,m,
H2a),186(1H,m,H2b),134(3H,d,J=66
Hz,H13)。13CNMR(CD3OD,150MHz)δ:484
(C1),334(C2),310(C3),1535(C4),538
(C5),823(C6),564(C7),761(C8),483
(C9),1468(C10),427(C11),1817(C12),
165(C13),1142(C14),1095(C15)。以上
数据与文献[13]对照一致,鉴定该化合物为8αhy
droxy11β11,13dihydrodehydrocostuslactone。
[致谢] 以上化合物的波谱数据由中国医学科学院药
物研究所分析测试中心代为测试。
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LactoneconstituentsofSaussureainvolucrata
SHENYi1,2,ZOUJianhua1,MAYingli2,DAIJungui1
(1KeyLaboratoryofBiosynthesisofNaturalProducts,MinistryofPublicHealth,KeyLaboratoryofBioactive
SubstancesandResourcesUtilizationofChineseHerbalMedicine,MinistryofEducation,InstituteofMateriaMedica,
ChineseAcademyofMedicalSciencesandPekingUnionMedicalColege,Beijing100050,China;
2ColegeofPharmacy,HeilongjiangUniversityofTraditionalChineseMedicine,Haerbin150040,China)
[Abstract] Objective:TostudythechemicalconstituentsofSausureainvolucrataMethod:Compoundswereisolatedandpu
rifiedbycolumnchromatography,andtheirstructureswereelucidatedbychemicalandspectroscopicmethodsResult:Eightcom
poundswereyieldedandidentifiedasβsitosterol(1),dotriacontanoicacid(2),hexacosan4olide(3),(+)11α,13dihydrode
hydrocostuslactone(4),8αacetoxydehydrocostuslactone(5),zaluzaninC(6),11,13βdihydrozaluzaninC(7),8αhydroxy11β
11,13dihydrodehydrocostuslactone(8)Conclusion:Compounds27werefirstisolatedfromSinvolucrate
[Keywords] Sausureainvolucrata;sesquiterpene;lactone
[责任编辑 王亚君]
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