全 文 ：决明子炒制前后２类成分的含量比较研究
李桂柳，肖永庆，张村，李丽，逄镇
（中国中医科学院 中药研究所，北京 １００７００）
［摘要］　目的：建立ＨＰＬＣ测定生、炒决明子中２类成分的方法，以期了解生、炒决明子中成分的含量差异。方法：使用
ＡｌｔｉｍａＣ１８（４６ｍｍ×１５０ｍｍ，５μｍ），柱温３０℃；流速１０ｍＬ·ｍｉｎ
－１。色谱条件Ⅰ乙腈四氢呋喃０１％磷酸水溶液（１７∶３∶
８０），检测波长２７８ｎｍ；色谱条件Ⅱ甲醇０１％磷酸水溶液（７９∶２１），检测波长２５４ｎｍ，分别测定２类成分的含量。通过结果分
析比较２类成分在生、炒决明子中的差别。结果：２类成分５个化合物在一定范围内均呈现良好的线性关系（ｒ＞０９９９７）；精
密度可靠ＲＳＤ＜１６％；重复性好ＲＳＤ＜１８％；样品在２４ｈ内基本稳定。２类成分５个化合物在生、炒决明子中的含量均有差
异。结论：本研究为决明子饮片的质量评价提供了较为全面的参考。
［关键词］　决明子；ＨＰＬＣ；含量比较
［收稿日期］　２００８０９０４
［基金项目］　国家“十一五”科技支撑计划项目（２００６ＢＡＩ０９Ｂ０６０１
１）
［通信作者］　肖永庆，Ｔｅｌ：（０１０）８４０４０２２１，Ｅｍａｉｌ：ｘ．ｈｅｑｉ＠１６３．ｃｏｍ
　　决明子为豆科植物决明 ＣａｓｉａｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａＬ．或
小决明 Ｃ．ｔｏｒａＬ．的干燥成熟种子。生决明子长于
清肝热，润肠燥。炒后能缓和寒泻之性。有平肝养
肾的功效。可用于头痛、头晕、青盲内障。文献记载
决明子主要含有蒽醌类化合物如大黄素、大黄酚、大
黄素甲醚等，为泻下作用的主要成分［１２］；尚含有萘
并吡喃酮类化合物，为其抗肝毒的主要有效成
分［３］。决明子含量测定方法目前多为进行水解后
游离蒽醌含量测定的报道。本研究采用高效液相色
谱法测定生、炒决明子中的５种化合物的含量，为决
明子饮片的质量控制和饮片炮制提供了新的参考。
１　材料
Ｗａｔｅｒｓ２６９５２９９６液相色谱仪，乙腈、四氢呋喃、
甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。
对照品红镰霉素６Ｏβ龙胆二糖苷（ｒｕｂｒｏｆｕｓａｒｉｎ６Ｏ
βｇｅｎｔｉｏｂｉｏｓｉｄｅ，ａ）、红镰霉素６ＯβＤ芹糖（１→６）
ＯβＤ葡萄糖苷（ｒｕｂｒｏｆｕｓａｒｉｎ６ＯβＤａｐｉｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ
（１→６）ＯβＤｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｓｉｄｅ，ｂ）、大黄素（ｃ）、大黄酚
（ｄ）和大黄素甲醚（ｅ）为本研究组从决明子中分离鉴
定得到，经ＨＰＬＣ分析，纯度９８％以上。药材：分别购
自安徽、河南、广西。经中国中医科学院中药研究所
胡世林教授鉴定为Ｃ．ｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａ的干燥成熟种子，并
由安徽亳州沪谯中药饮片厂依法炮制为生、炒品各
１０批。分别粉碎过４０目筛，备用。
２　方法与结果
２．１　色谱条件　色谱柱 ＡｌｔｉｍａＣ１８（４６ｍｍ×１５０
ｍｍ，５μｍ），柱温３０℃；流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１。色谱
条件Ⅰ：流动相乙腈四氢呋喃０１％磷酸水溶液
（１７∶３∶８０），检测波长２７８ｎｍ；色谱条件Ⅱ：流动相
甲醇０１％磷酸水溶液（７９∶２１），检测波长２５４ｎｍ。
在此２种色谱条件下，决明子样品中各对照品分别
与其他组分均能达到较好的分离，见图１。
２．２　供试品溶液的制备　分别称取不同样品粉末
各１ｇ，精密称定，置具塞三角瓶中，精密加入甲醇
（测定ａ，ｂ），称重，加热回流提取３ｈ；精密加入乙醇
（测定ｃ，ｄ，ｅ）２５ｍＬ，称重，加热回流提取２ｈ，放冷，
以相应溶剂补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，
用０４５μｍ微孔滤膜滤过，取续滤液，备用，分别记
为供试品溶液Ⅰ，Ⅱ。
２．３　对照品溶液的制备　精密称取对照品 ａ，ｂ各
适量，分别加甲醇制成０２２０１，００４０４ｇ·Ｌ－１的溶
液。精密称取对照品 ｃ，ｄ，ｅ各适量，分别加乙醇制
成００１０２，００２５４，００２００ｇ·Ｌ－１的溶液。
２．４　线性关系考察　分别精密吸取对照品 ａ，ｂ溶
液 １，３，６，９，１２，１５μＬ，对照品ｃ，ｄ，ｅ溶液１，２，４，６，
８，１０μＬ，１，５，１０，１５，２０，２５μＬ，２，３，４，６，８，１０μＬ，
注入液相色谱仪，分别按上述色谱条件测定峰面积。
以进样量（μｇ）为横坐标，峰面积积分值为纵坐标绘
制标准曲线，并绘制回归方程如下ａ：Ｙ＝５×１０６Ｘ＋
１４７３０３，ｒ＝０９９９７；ｂ：Ｙ＝５×１０６Ｘ－５８０３２，ｒ＝
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Ａ．样品溶液（色谱条件Ⅰ）；Ｂ．ａ，ｂ对照品溶液（色谱条件Ⅰ）；Ｃ．样品溶液（色谱条件Ⅱ）；Ｄ．ｃ～ｅ对照品溶液（色谱条件Ⅱ）。
图１　不同色谱条件下对照品及样品色谱图
０９９９８；ｃ：Ｙ＝４×１０６Ｘ－３０９２７，ｒ＝０９９９９；ｄ：Ｙ
＝５×１０６Ｘ－１０８４５，ｒ＝０９９９９；ｅ：Ｙ＝３×１０６Ｘ－
２１５０５，ｒ＝０９９９９。结果表明 ａ在 ０２２１０～
３３１５０μｇ，ｂ在 ００４０４～０６０６０μｇ，ｃ在
００１０２～０１０２０μｇ，ｄ在００２５４～０６３５０μｇ，ｅ
在００４００～０２０００μｇ线性关系良好。
２．５　精密度试验　分别精密吸取上述供试品溶液
Ⅰ：（安徽１生决明子）１０μＬ、供试品溶液Ⅱ：（安
徽１炒决明子）１５μＬ，按相应的色谱条件连续进样
５次，依法测定，结果 ａ，ｂＲＳＤ分别为 ０４０％，
１３％。ｃ，ｄ，ｅＲＳＤ分别为１６％，０６３％，１３％。
２．６　稳定性试验　精密吸取上述供试品溶液Ⅰ：
（安徽１生决明子）１０μＬ，供试品溶液Ⅱ：（安徽１
炒决明子）１０μＬ，分别于０，２，４，８，１２，２４ｈ进样，按
相应的色谱条件测定。结果 ａ，ｂＲＳＤ分别为
１０％，０７２％。ｃ，ｄ，ｅＲＳＤ分别为１４％，０８３％，
１６％。可见样品溶液在２４ｈ内均保持稳定。
２．７　重复性试验　平行称取５份安徽１生决明子样
品、５份安徽１炒决明子样品，按２．２项下Ⅰ和Ⅱ制备成
供试品溶液，分别按相应的色谱条件进样分析各组分
含量，并计算 ＲＳＤ。结果 ａ，ｂＲＳＤ分别为０６７％，
１４％。ｃ，ｄ，ｅＲＳＤ分别为１８％，０９４％，１５％。
２．８　加样回收率试验　精密称取已知含量的安徽
１生决明子粉末适量，６份，安徽Ⅱ炒决明子粉末适
量，各６份，置具塞三角瓶中，分别加入各对照品适
量，按“供试品溶液的制备”方法制备样品。精密吸
取上述对照品与样品品各 ５～１０μＬ，分别依法测
定，计算回收率，结果见表１。
表１　各对照品加样回收率
对照品
样品含量
／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
ａ １０８９４ １１２６０ ２１６４７ ９５５０ ９９６４ ２６
　 １０９０３ １１２６０ ２１９２７ ９７９０ 　 　
　 １０８７６ １１２６０ ２２０７９ ９９４９
　 １０９４２ １１０５０ ２２２３３ １０２２ 　 　
　 １０９３７ １１０５０ ２２１５０ １０１５ 　 　
　 １０９１１ １１０５０ ２２１０５ １０１３ 　 　
ｂ ０２７５１ ０２５６０ ０５３２０ １００４ ９９０５ ３７
　 ０２７５３ ０２５６０ ０５４３３ １０４７ 　 　
　 ０２７４６ ０２５６０ ０５３２８ １００９
　 ０２７６３ ０２０２０ ０４７３６ ９７６７ 　 　
　 ０２７６２ ０２０２０ ０４６８９ ９５４０ 　 　
　 ０２７５５ ０２０２０ ０４６８１ ９５３５ １０３５ １０
ｃ ００４４２ ００４０８ ００８６２ １０２９ 　 　
　 ００４４３ ００４０８ ００８７１ １０４９ 　 　
　 ００４４２ ００４０８ ００８６０ １０２５
　 ００４４１ ００４０８ ００８６８ １０４７ 　 　
　 ００４４２ ００４０８ ００８６２ １０２９ 　 　
　 ００４４２ ００４０８ ００８６２ １０２９ 　 　
ｄ ０２８８６ ０２５４０ ０５４０９ ９９３３ １０１１ ２２
　 ０２８９８ ０２５４０ ０５５１５ １０３０ 　 　
　 ０２８９１ ０２５４０ ０５４３９ １００３
　 ０２８８２ ０２５４０ ０５５４１ １０４７ 　 　
　 ０２８９３ ０２５４０ ０５４３８ １００２ 　 　
　 ０２８８６ ０２５４０ ０５４０９ ９９３３
ｅ ００７７８ ００４００ ０１１８８ １０２５ １０２１ ０７７
　 ００７８１ ００４００ ０１１９２ １０２８ 　 　
　 ００７７９ ００４００ ０１１８４ １０１３
　 ００７７７ ００４００ ０１１８８ １０２８ 　 　
　 ００７８０ ００４００ ０１１８４ １０１０ 　 　
　 ００７７８ ００４００ ０１１８８ １０２５ 　 　
２．９　饮片含量测定　分别称取各样品粉末１ｇ，精
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第３４卷第１１期
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密称定，按２．２项下方法制备溶液后分别进样分析，
按外标一点法计算样品中各对照成分的含量。结果
生品中 ａ，ｂ，ｃ，ｄ，ｅ的平均质量分数分别为
０４２２３％，０１０１ ４％，０００４ ３％，０００４ ６％，
０００２６％，炒品则分别为 ０２００２％，００５２９％，
０００６４％，００３０２％，０００９９％，见表２。
表２　各饮片中５种成分的质量分数 ％　
样品名 ａ ｂ ａ＋ｂ ｃ ｄ ｅ ｃ＋ｄ＋ｅ
生品 安徽１ ０４３７３ ０１１０７ ０５４８０ ０００５６ ０００６２ ０００２４ ００１４２
　 安徽２ ０４３０６ ００８９４ ０５２００ ０００６３ ０００６７ ０００２６ ００１５７
　 安徽３ ０４００３ ００８４８ ０４８５１ ０００６２ ０００６７ ０００２８ ００１５６
　 安徽２１ ０４７９８ ０１２６４ ０６０６２ ０００３２ － － ０００３２
　 安徽２２ ０４４８４ ０１０２２ ０５５０６ ０００３２ － － ０００３２
　 河南１ ０５３６０ ０１２３９ ０６５９９ ０００３９ ０００２５ － ０００６４
　 河南２ ０４８０３ ００９０１ ０５７０４ ０００４１ ０００２６ － ０００６７
　 河南３ ０４５８３ ００８３９ ０５４２２ ０００３９ ０００２７ － ０００６６
　 广西１ ０２９０８ － ０２９０８ ０００３８ － － ０００３８
　 广西２ ０２６０９ － ０２６０９ ０００３０ － － ０００３０
炒品 安徽１ ０１８８２ ００５５６ ０２４３８ ０００８５ ００５７２ ００１３９ ００７９６
　 安徽２ ０１７２４ ００３８０ ０２１０４ ０００８６ ００５２６ ００１５１ ００７６３
　 安徽３ ０１７１３ ００３６２ ０２０７５ ０００８５ ００５１８ ００１４９ ００７５３
　 安徽２１ ０２７５２ ００７５９ ０３５１１ ０００５７ ００１８８ ０００６０ ００３０４
　 安徽２２ ０１７１１ ００４２５ ０２１３６ ０００６１ ００１７５ ０００７２ ００３０８
　 河南１ ０３０３２ ００７３７ ０３７６９ ０００７２ ００３２０ ０００９６ ００４８８
　 河南２ ０２６２０ ００４９５ ０３１１５ ０００６３ ００３０２ ００１１２ ００４７７
　 河南３ ０２６６２ ００５２０ ０３１８２ ０００６２ ００３０３ ００１１０ ００４７５
　 广西１ ００９５９ － ００９５９ ０００４２ ０００４９ ０００２９ ０００９４
　 广西２ ００９６２ － ００９６２ ０００３１ ０００７０ ０００６６ ００１６７
３　讨论
Ｒｕｂｒｏｆｕｓａｒｉｎ６Ｏβｇｅｎｔｉｏｂｉｏｓｉｄｅ（ａ）、ｒｕｂｒｏｆｕｓａ
ｒｉｎ６ＯβＤａｐｉｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ（１→６）ＯβＤｇｌｕｃｏｐｙｒａｎ
ｓｉｄｅ（ｂ）为萘并吡喃酮苷类化合物，经紫外可见全
波长扫描，最大吸收为２７８ｎｍ，故选用２７８ｎｍ为ａ，
ｂ含量测定的检测波长。游离蒽醌大黄素（ｃ），大黄
酚（ｄ），大黄素甲醚（ｅ）按药典方法选择２５４ｎｍ作
为检测波长。同时对提取溶剂提取方法进行了考
察，分别确定了２５倍量甲醇、乙醇，回流提取３，２ｈ
的提取方法。
对于萘并吡喃酮苷类化合物（ａ，ｂ）含量测定的
流动相亦进行了考察，单用乙腈０１％磷酸溶液，对
照品ａ与其他峰很难较好地分离，适当加入四氢呋
喃可得到改善，ａ，ｂ都分离较好，所以本研究采用乙
腈四氢呋喃０１％磷酸溶液系统测定。
样品测定结果表明，生品中２个萘并吡喃酮苷
类成分的含量均大于炒品的含量，说明苷类成分可
能在炒制过程中一定程度上受热的破坏；而炒品中
游离蒽醌大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量均大于
生品的含量，说明可能在炒制过程中，其相应的苷类
成分受热破坏，转化为游离蒽醌类。其转化的机制
有待进一步研究。
文献报道的决明子含量测定方法多为通过酸水
解测定决明子中游离蒽醌的含量，本研究首次测定
决明子饮片中原态游离蒽醌以及２个萘并吡喃酮苷
类化合物的含量，进行比较分析，为决明子饮片的炮
制及质控提供较为全面的参考。
［参考文献］
［１］　沈奇桂，朱寿民．决明子对实验性高胆固醇血症和动脉粥样硬
化的抑制作用及其机理探讨［Ｊ］．浙江医科大学学报，１９９３，２２
（６）：２４６．
［２］　中山敏光．决明子的成分研究［Ｊ］．国外医学·中医中药分册，
１９９６，１８（６）：４９．
［３］　ＷａｎｇＳＭ．Ｎｅｗａｎｌｉｈｅｐａｔｏｔｏｘｉｃｎａｐｈｔｈａｐｙｒｏｎｅｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓｆｒｏｍ
ｔｈｅｓｅｅｄｓｏｆＣａｓｉａｔｏｒａ［Ｊ］．ＰｌａｎｔａＭｅｄ，１９８９，５５（３）：２７６．
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第３４卷第１１期
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Ｃａｓｓｉａｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａｂｅｆｏｒｅａｎｄａｆｔｅｒｒｏａｓｔｅｄ
ＬＩＧｕｉｌｉｕ，ＸＩＡＯＹｏｎｇｑｉｎｇ，ＺＨＡＮＧＣｕｎ，ＬＩＬｉ，ＰＡＮＧＺｈｅｎ
（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭａｄｉｃａ，ＣｈｉｎａＡｃａｄｅｍｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００７００，Ｃｈｉｎａ）
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∶３∶８０），２７８ｎｍ；Ⅱ，ＭｅＯＨ０１％Ｈ３ＰＯ４（７９∶２１），２５４ｎｍ．Ａｎａｌｙｚｅｄａｎｄｃｏｍｐａｒｅｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｈｅｔｗｏｔｙｐｅｓｏｆｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｂｅ
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ｓｉｏｎａｎｄｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙｗｅｒｅｐｅｒｆｅｃｔ（ＲＳＤ＜１６％，１８％）．Ｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｓｔａｂｉｌｅｄｕｒｉｎｇ２４ｈ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｓｔｕｄｙｐｒｏｖｉｄｅａ
ｂｅｔｅｒｕｎｉｖｅｒｓａｌｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｅｖａｌｕａｔｉｎｇａｎｄｃｏｎｔｒｏｌｉｎｇｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆＣ．ｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａｐｉｅｃｅｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ｃａｓｉａｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａ；ＨＰＬＣ；ｃｏｎｔｅｎｔｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ
［责任编辑　周　驰］
关于召开２００９年药物溶出度国际学术研讨会的通知
拟定于２００９年９月在北京和上海两地召开药物溶出度国际学术研讨会，将邀请固体制剂溶出度研究领
域的中外专家，就会议主题进行专题讲座。现将会议的有关事宜通知如下：
一、会议专题讲座：
药物溶出度及生物利用度；中国药典２０１０年版简介；药物缓释、控释制剂研究发展等。
二、会议征文与要求：
１．征文内容：药物溶出度法在药品检验中的应用；药物溶出度法对缓释、控释制剂质量的评价；药物溶出
度法在中药制剂及生化药物制剂中的应用；药用辅料、药用胶囊对药物溶出度的影响；药物溶出度与生物利
用度之间的关系；药物溶出度仪器的研究进展。
２．征文要求：①未公开发表的论文均可作为本次征文稿件，研究论文一般不超过３０００字，综述不超过
５０００字；②论文格式请按本刊稿约要求；③每篇稿件需附单位介绍信及５０元审稿费；④征文截止日期２００９
年７月３０日；⑤投稿方式：请登录本刊在线投稿系统：进行在线投稿，“期刊栏目”请选择“２００９溶出度会议
征文”；⑥论文经专家审阅后，将在本刊发表，并酌收版面费。
３．联系方式：地址：北京市崇文区天坛西里２号，中国药品生物制品检定所药物分析杂志编辑部；邮政编
码：１０００５０；电话：０１０６７０５８４２７；传真：０１０６７０１２８１９；Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｗｆｘ＠ｎｉｃｐｂｐ．ｏｒｇ．ｃｎ；ｗｗｗ．ｙｗｆｘｚｚ．ｃｎ；联系人：
刘小帅。
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第３４卷第１１期
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