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Chemical and biological studies on essential oil from Ficus tsiangii

岩木瓜挥发性成分及生物活性研究


目的:分析岩木瓜的挥发性成分并研究其抗血栓和抗氧化活性。方法:采用水蒸气蒸馏法提取,GC-MS鉴定化学成分;测定氧化产物水平研究抗氧化作用;用Born比浊法测定对血小板聚集的影响。结果:从挥发油中检出198个色谱峰,鉴定57个化合物,占挥发油总量的72.06%,其中含量最高的为脂肪酸类成分;岩木瓜的挥发性成分没有抗氧化作用,对ADP诱导的血小板聚集有弱的抑制作用。结论:岩木瓜的挥发性成分及其生物活性均为首次报道。

Objective: To analyze the chemical components of the essential oil extracted from the bark of Ficus tsiangii. Method: The essential oil was extracted by water-steam distillation and separated by GC capillary column chromatography. The components were quantitatively determined with normalization method and identified by GC-MS; Oxidation levels were used to study the antioxidation of the essential oil. Born turbidimetric method was applied to study the action of the the essential oil on rabbit platelet aggregation in vitro. Result: The oil rate of Ficus tsiangii was 0.097%. 198 chromatographic peaks were detected and 57 compounds were identified, which were composed of 72.06% of the total essential oil. The highest ingredients in essential oil were fatty acids. The essential oil had no antioxidation and a weak inhibitory effect of the ADP-inducd platelet aggregation. Conclusion: The chemical and biological data of the essential oil were reported for the first time.


全 文 :岩木瓜挥发性成分及生物活性研究
段松冷1,刘秀梅2,梁鸿1,赵玉英1
(1.北京大学 药学院 天然药物学系,北京 100191;
2.北京大学 药学院 药理系,北京 100191)
[摘要] 目的:分析岩木瓜的挥发性成分并研究其抗血栓和抗氧化活性。方法:采用水蒸气蒸馏法提取,GCMS鉴定化
学成分;测定氧化产物水平研究抗氧化作用;用Born比浊法测定对血小板聚集的影响。结果:从挥发油中检出198个色谱峰,
鉴定57个化合物,占挥发油总量的72.06%,其中含量最高的为脂肪酸类成分;岩木瓜的挥发性成分没有抗氧化作用,对ADP
诱导的血小板聚集有弱的抑制作用。结论:岩木瓜的挥发性成分及其生物活性均为首次报道。
[关键词] 岩木瓜;挥发油;抗氧化活性;血小板聚集;GCMS
[收稿日期] 20090103
[通信作者] 梁鸿,Tel:(010)82801592,Email:nmechem@bjmu.
edu.cn
  岩木瓜为桑科榕属植物岩木瓜 Ficustsiangi
Mer.exCorner的树皮,主要分布在贵州、云南、四
川、广西、湖北、湖南等地[1],在四川部分地区作为
民间药用,治疗心血管系统疾病,主要用于抗血栓。
但目前尚未有对岩木瓜化学成分或活性的报道。为
此,本实验采用GCMS联用技术分析其挥发性成分
的组成,并研究其抗氧化和抑制血小板凝集活性,为
岩木瓜开发利用提供科学依据。
1 材料
Trace气相质谱联用仪(Finnigan公司,美国),
BIORAD550型酶标仪(BioradInc,美国),Chrono
log490型双通道血小板聚集仪(Chronolog公司,美
国),AnkeTDL40B离心机(上海安亭科学仪器厂)。
岩木瓜于2008年4月采自重庆市,经重庆市药
物种植研究所易思荣副研究员鉴定为岩木瓜F.tsi
angi的树皮。
大耳白兔,雄性,北京大学医学部实验动物科学
部提供,许可证编号(SCXK11000008)。二磷酸腺
苷(adenosindiphosphate,ADP),美国 Sigma公司产
品;血小板活化因子(plateletactivatingfactor,PAF),
美国Sigma公司产品。试剂均为分析纯。
2 方法
2.1 挥发油提取 岩木瓜粗粉500g,按《中国药
典》2005年版附录 XD方法[2],加热回流8h,得浅
黄色油状物。挥发油经无水乙醚稀释,用少许无水
硫酸钠干燥。
2.2 GCMS条件 DB5MS色谱柱(025mm×30
m,025μm),柱温初始温度50℃,保持3min;以5
℃·min-1的速率升温至250℃,保持10min。载气
为高纯氦气,汽化温度 270℃,流速 10mL·
min-1。分流进样,分流比1∶20,进样05μL。离子
源为EI源,温度200℃,轰击电压为70eV,扫描质
量范围m/z35~450。采用 NIST谱库检索,面积归
一化法测定各组分的相对百分含量。
2.3 抗氧化活性 将药物与Fe2+混合,加入H2O2,
启动氧化反应,反应5min后,加入硫氰酸钾,用酶
标仪测A490(氧化产物的水平通过 A490表示,反应体
系中若有抗氧化物质存在,生成的 Fe(SCN)3会减
少,相应的A490值会减小)
[3]。
2.4 抑制血小板聚集活性 从家兔耳中动脉取血,
1/10体积的38%柠檬酸钠抗凝,1100r·min-1离心
15min,取出上层富血小板血浆(PRP),下层继续在
3000r·min-1离心10min,制备贫血小板血浆(PPP)。
用PRP调血小板聚集仪零点,PPP调仪器100%,将样
品或溶媒(DMSO或NS)和PRP温育1min后分别加入
诱导剂ADP(8×10-5mol·L-1)及诱导剂 PAF(4×
10-7mol·L-1)引起不同原因的血小板聚集,纪录最大
聚集率A,按如下公式计算样品对血小板聚集的抑制率
(I%)=(A对照 -A样品)/A对照 ×100%
[4]。
3 结果与讨论
3.1 挥发性成分分析 采用水蒸气蒸馏法提取岩
木瓜中的挥发油,得油率为0097%。采用 GCMS
联用技术,分析了岩木瓜挥发油的化学成分,从分离
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 June,2009
出的198个峰中确定了57个化合物,占峰面积的 7206%。结果见表1。
表1 岩木瓜挥发油成分组成
化合物名称 分子式
相对分
子质量
相对
含量/%
醋酸乙酯 ethylacetate C4H8O2 88 239
1戊醇1pentanol C5H12O 88 004
己醛 hexanal C6H12O 100 015
呋喃醛 furfural C5H4O2 96 008
1己醇1hexanol C6H14O 102 016
庚醛 heptanal C7H14O 114 005
苯甲醛 benzaldehyde C7H6O 106 004
2戊基呋喃2pentylfuran C9H14O 138 050
苯乙醛 benzeneacetaldehyde C8H8 120 017
苯乙酮 acetophenone C8H8O 120 003
1,1,5三甲基5乙烯基2四氢呋喃甲醇1,1,5trimenthyl5ethenyl2tetrahydrofuranmethanol C10H18O2 170 016
3(4甲基3戊烯基)呋喃3(4methyl3pentenyl)furan C10H14O 150 005
3,7二甲基1,6辛二烯3醇3,7dimethyl1,6octadien3ol C10H18O 154 005
6甲基3,5庚二烯2酮6methyl3,5heptadiene2one C8H12O 124 012
壬醛 nonanal C9H18O 142 036
(Z)3壬烯1醇 (Z)3nonene1ol C9H18O 142 012
(E)3壬烯1酮 (E)3nonene1one C9H16O 140 019
正癸醛 decanal C10H20O 156 054
壬酸 nonanoicacid C9H18O2 158 009
1癸醇1decanol C10H22O 158 010
2十一烷酮2undecanone C11H22O 170 005
2甲基萘2methylnaphthalene C11H10 142 017
(E,E)2,4癸二烯醛 (E,E)2,4decadienal C10H16O 152 026
癸酸 decanoicacid C10H20O2 172 025
 (E)1(2,6,6三甲基1,3环己二烯)2丁烯1酮 C13H18O 190 035
(E)1(2,6,6trimethyl1,3cyclohexadiene1yl)2buten1one      
2甲基5(1,5二甲基4己烯基)1,3环己二烯2methyl5(1,5dimethyl4hexenyl)1,3cyclohexadiene C15H24 204 016
1乙基萘1ethylnaphthalene C12H12 156 014
2,6二甲基萘2,6dimethylnaphthalene C12H12 156 057
1,4二甲基萘1,4dimethylnaphthalene C12H12 156 039
 4,11,11三甲基8亚甲基二环[7.2.0]十一碳4烯 C15H24 204 042
4,11,11trimethyl8methylenebicyclo[7.2.0]undec4ene      
 2,6二甲基6(4甲基3戊烯基)二环[3.1.1]庚2烯 C15H24 204 034
2,6dimethy6(4methyl3pentenyl)bicyclo[3.1.1]hept2ene      
(Z)6,10二甲基5,9十一二烯2酮 (Z)6,10dimethyl5,9undecadien2one C13H22O 194 051
(E)4(2,6,6三甲基1环己烯基)3丁烯2酮 (E)4(2,6,6trimethyl1cyclohexen1yl)3buten2one C13H20O 192 006
3甲基1,1′联二苯 3methyl1,1′bipheny C13H12 168 011
 1,2,3,4,4a,5,6,8a八氢代4a,8二甲基2异丙烯基萘 C15H24 204 01
1,2,3,4,4a,5,6,8aoctahydro4a,8dimethyl2(1methylethenyl)naphthalene      
二苯呋喃 dibenzofuran C12H8O 168 004
2,3,6三甲基萘2,3,6trimethylnaphthalene C13H14 170 012
1,6,7三甲基萘1,6,7trimethylnaphthalene C13H14 170 010
1,4,6三甲基萘1,4,6trimethylnaphthalene C13H14 170 010
石竹烯氧化物 caryophyleneoxide C15H24O 220 077
正十四醛 tetradecannal C14H28O 212 018
十四烷酸 tetradecanoicacid C14H28O2 228 208
9亚甲基9H芴9methylene9Hfluorene C14H10 178 033
十五酸乙酯 pentadecanoicacid,methylester C17H34O 254 006
6,10,14三甲基2十五碳酮 6,10,14trimethyl2pentadecannone C18H36O 268 096
2羟基环十五碳酮2hydroxycyclopentadecannone C16H30O2 254 400
十五酸 pentadecanoicacid C15H30O2 242 355
(E,E)6,10,14三甲基5,9,13十五碳三烯2酮 (E,E)6,10,14trimethyl5,9,13pentadecatrien2one C18H30O 262 024
棕榈酸甲酯 hexadecanoicacid,methylester C17H34O2 270 045
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续表1
化合物名称 分子式
相对分
子质量
相对
含量/%
棕榈酸 hexadecanoicacid C16H32O2 256 3656
(Z,Z)9,12亚油酸甲酯 (Z,Z)9,12octadecadienoicacid,methylester C19H34O2 294 027
(Z,Z,Z)9,12,15亚油酸甲酯 (Z,Z,Z)9,12,15octadecadienoicacid,methylester C19H32O2 292 012
叶绿醇 phytol C20H40O 296 062
(Z,Z)9,12亚油酸 (Z,Z)9,12octadecadienoicacid C18H32O2 280 1146
氨基十六碳酸 hexadecanamide C16H33NO 255 024
(Z)9氨基十八碳烯酸 (Z)9octadecenamide C18H35NO 281 054
氨基十四碳酸 tetradecanamide C14H29NO 227 016
  分析结果表明,岩木瓜的挥发性成分中含量最
高的 为 脂 肪 酸 类 化 合 物,其 中 棕 榈 酸 最 高
(3656%),亚油酸次之 (1146%),十五烷酸
(355%),十四烷酸(208%)。其他类含量较高的
为醋酸乙酯(239%)。
3.2 抗氧化活性 研究结果表明05g·L-1挥发
油样品溶液 A490值为1302±0026,而阴性对照组
A490值为0763±0013,说明岩木瓜的挥发油成分
没有抗氧化作用。
3.3 抑制血小板聚集活性 采用Born方法测定挥
发油样品溶液对 ADP及 PAF诱导的家兔血小板聚
集功能的影响,研究结果表明05g·L-1挥发油样
品溶液的血小板聚集抑制率分别为268%和  
90%,说明岩木瓜的挥发油成分对 ADP诱导的血
小板聚集有弱的抑制作用。
[致谢] 重庆市药物种植研究所易思荣副研究员采集
药材,北京大学医学部医药卫生分析中心陶海燕老师代测
GCMS。
[参考文献]
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[4] 武源,郭宏宝,王铁军,等.几种中药组分对家兔体外血小板聚
集作用的比较[J].中国临床药理学与治疗学,2007,12(9):
1047.
ChemicalandbiologicalstudiesonessentialoilfromFicustsiangi
DUANSongleng1,LIUXiumei2,LIANGHong1,ZHAOYuying1
(1.DepartmentofNaturalMedicines,SchoolofPharmaceuticalSciences,PekingUniversity
HealthScienceCenter,Beijing100191,China;
2.DepartmentofMolecularandCelularPharmacology,SchoolofPharmaceuticalSciences,Peking
UniversityHealthScienceCenter,Beijing100191,China)
[Abstract] Objective:ToanalyzethechemicalcomponentsoftheessentialoilextractedfromthebarkofFicustsiangi.Meth
od:TheessentialoilwasextractedbywatersteamdistilationandseparatedbyGCcapilarycolumnchromatography.Thecomponents
werequantitativelydeterminedwithnormalizationmethodandidentifiedbyGCMS;Oxidationlevelswereusedtostudytheantioxida
tionoftheessentialoil.Bornturbidimetricmethodwasappliedtostudytheactionofthetheessentialoilonrabbitplateletaggregation
invitro.Result:TheoilrateofFicustsiangiwas0.097%.198chromatographicpeaksweredetectedand57compoundswereidenti
fied,whichwerecomposedof72.06% ofthetotalessentialoil.Thehighestingredientsinessentialoilwerefatyacids.Theessential
oilhadnoantioxidationandaweakinhibitoryefectoftheADPinducdplateletaggregation.Conclusion:Thechemicalandbiological
dataoftheessentialoilwerereportedforthefirsttime.
[Keywords] Ficustsiangi;essentialoil;antioxidant;plateletaggregation;GCMS
[责任编辑 王亚君]
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