目的:分析岩木瓜的挥发性成分并研究其抗血栓和抗氧化活性。方法:采用水蒸气蒸馏法提取,GC-MS鉴定化学成分;测定氧化产物水平研究抗氧化作用;用Born比浊法测定对血小板聚集的影响。结果:从挥发油中检出198个色谱峰,鉴定57个化合物,占挥发油总量的72.06%,其中含量最高的为脂肪酸类成分;岩木瓜的挥发性成分没有抗氧化作用,对ADP诱导的血小板聚集有弱的抑制作用。结论:岩木瓜的挥发性成分及其生物活性均为首次报道。
Objective: To analyze the chemical components of the essential oil extracted from the bark of Ficus tsiangii. Method: The essential oil was extracted by water-steam distillation and separated by GC capillary column chromatography. The components were quantitatively determined with normalization method and identified by GC-MS; Oxidation levels were used to study the antioxidation of the essential oil. Born turbidimetric method was applied to study the action of the the essential oil on rabbit platelet aggregation in vitro. Result: The oil rate of Ficus tsiangii was 0.097%. 198 chromatographic peaks were detected and 57 compounds were identified, which were composed of 72.06% of the total essential oil. The highest ingredients in essential oil were fatty acids. The essential oil had no antioxidation and a weak inhibitory effect of the ADP-inducd platelet aggregation. Conclusion: The chemical and biological data of the essential oil were reported for the first time.
全 文 :岩木瓜挥发性成分及生物活性研究
段松冷1,刘秀梅2,梁鸿1,赵玉英1
(1.北京大学 药学院 天然药物学系,北京 100191;
2.北京大学 药学院 药理系,北京 100191)
[摘要] 目的:分析岩木瓜的挥发性成分并研究其抗血栓和抗氧化活性。方法:采用水蒸气蒸馏法提取,GCMS鉴定化
学成分;测定氧化产物水平研究抗氧化作用;用Born比浊法测定对血小板聚集的影响。结果:从挥发油中检出198个色谱峰,
鉴定57个化合物,占挥发油总量的72.06%,其中含量最高的为脂肪酸类成分;岩木瓜的挥发性成分没有抗氧化作用,对ADP
诱导的血小板聚集有弱的抑制作用。结论:岩木瓜的挥发性成分及其生物活性均为首次报道。
[关键词] 岩木瓜;挥发油;抗氧化活性;血小板聚集;GCMS
[收稿日期] 20090103
[通信作者] 梁鸿,Tel:(010)82801592,Email:nmechem@bjmu.
edu.cn
岩木瓜为桑科榕属植物岩木瓜 Ficustsiangi
Mer.exCorner的树皮,主要分布在贵州、云南、四
川、广西、湖北、湖南等地[1],在四川部分地区作为
民间药用,治疗心血管系统疾病,主要用于抗血栓。
但目前尚未有对岩木瓜化学成分或活性的报道。为
此,本实验采用GCMS联用技术分析其挥发性成分
的组成,并研究其抗氧化和抑制血小板凝集活性,为
岩木瓜开发利用提供科学依据。
1 材料
Trace气相质谱联用仪(Finnigan公司,美国),
BIORAD550型酶标仪(BioradInc,美国),Chrono
log490型双通道血小板聚集仪(Chronolog公司,美
国),AnkeTDL40B离心机(上海安亭科学仪器厂)。
岩木瓜于2008年4月采自重庆市,经重庆市药
物种植研究所易思荣副研究员鉴定为岩木瓜F.tsi
angi的树皮。
大耳白兔,雄性,北京大学医学部实验动物科学
部提供,许可证编号(SCXK11000008)。二磷酸腺
苷(adenosindiphosphate,ADP),美国 Sigma公司产
品;血小板活化因子(plateletactivatingfactor,PAF),
美国Sigma公司产品。试剂均为分析纯。
2 方法
2.1 挥发油提取 岩木瓜粗粉500g,按《中国药
典》2005年版附录 XD方法[2],加热回流8h,得浅
黄色油状物。挥发油经无水乙醚稀释,用少许无水
硫酸钠干燥。
2.2 GCMS条件 DB5MS色谱柱(025mm×30
m,025μm),柱温初始温度50℃,保持3min;以5
℃·min-1的速率升温至250℃,保持10min。载气
为高纯氦气,汽化温度 270℃,流速 10mL·
min-1。分流进样,分流比1∶20,进样05μL。离子
源为EI源,温度200℃,轰击电压为70eV,扫描质
量范围m/z35~450。采用 NIST谱库检索,面积归
一化法测定各组分的相对百分含量。
2.3 抗氧化活性 将药物与Fe2+混合,加入H2O2,
启动氧化反应,反应5min后,加入硫氰酸钾,用酶
标仪测A490(氧化产物的水平通过 A490表示,反应体
系中若有抗氧化物质存在,生成的 Fe(SCN)3会减
少,相应的A490值会减小)
[3]。
2.4 抑制血小板聚集活性 从家兔耳中动脉取血,
1/10体积的38%柠檬酸钠抗凝,1100r·min-1离心
15min,取出上层富血小板血浆(PRP),下层继续在
3000r·min-1离心10min,制备贫血小板血浆(PPP)。
用PRP调血小板聚集仪零点,PPP调仪器100%,将样
品或溶媒(DMSO或NS)和PRP温育1min后分别加入
诱导剂ADP(8×10-5mol·L-1)及诱导剂 PAF(4×
10-7mol·L-1)引起不同原因的血小板聚集,纪录最大
聚集率A,按如下公式计算样品对血小板聚集的抑制率
(I%)=(A对照 -A样品)/A对照 ×100%
[4]。
3 结果与讨论
3.1 挥发性成分分析 采用水蒸气蒸馏法提取岩
木瓜中的挥发油,得油率为0097%。采用 GCMS
联用技术,分析了岩木瓜挥发油的化学成分,从分离
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出的198个峰中确定了57个化合物,占峰面积的 7206%。结果见表1。
表1 岩木瓜挥发油成分组成
化合物名称 分子式
相对分
子质量
相对
含量/%
醋酸乙酯 ethylacetate C4H8O2 88 239
1戊醇1pentanol C5H12O 88 004
己醛 hexanal C6H12O 100 015
呋喃醛 furfural C5H4O2 96 008
1己醇1hexanol C6H14O 102 016
庚醛 heptanal C7H14O 114 005
苯甲醛 benzaldehyde C7H6O 106 004
2戊基呋喃2pentylfuran C9H14O 138 050
苯乙醛 benzeneacetaldehyde C8H8 120 017
苯乙酮 acetophenone C8H8O 120 003
1,1,5三甲基5乙烯基2四氢呋喃甲醇1,1,5trimenthyl5ethenyl2tetrahydrofuranmethanol C10H18O2 170 016
3(4甲基3戊烯基)呋喃3(4methyl3pentenyl)furan C10H14O 150 005
3,7二甲基1,6辛二烯3醇3,7dimethyl1,6octadien3ol C10H18O 154 005
6甲基3,5庚二烯2酮6methyl3,5heptadiene2one C8H12O 124 012
壬醛 nonanal C9H18O 142 036
(Z)3壬烯1醇 (Z)3nonene1ol C9H18O 142 012
(E)3壬烯1酮 (E)3nonene1one C9H16O 140 019
正癸醛 decanal C10H20O 156 054
壬酸 nonanoicacid C9H18O2 158 009
1癸醇1decanol C10H22O 158 010
2十一烷酮2undecanone C11H22O 170 005
2甲基萘2methylnaphthalene C11H10 142 017
(E,E)2,4癸二烯醛 (E,E)2,4decadienal C10H16O 152 026
癸酸 decanoicacid C10H20O2 172 025
(E)1(2,6,6三甲基1,3环己二烯)2丁烯1酮 C13H18O 190 035
(E)1(2,6,6trimethyl1,3cyclohexadiene1yl)2buten1one
2甲基5(1,5二甲基4己烯基)1,3环己二烯2methyl5(1,5dimethyl4hexenyl)1,3cyclohexadiene C15H24 204 016
1乙基萘1ethylnaphthalene C12H12 156 014
2,6二甲基萘2,6dimethylnaphthalene C12H12 156 057
1,4二甲基萘1,4dimethylnaphthalene C12H12 156 039
4,11,11三甲基8亚甲基二环[7.2.0]十一碳4烯 C15H24 204 042
4,11,11trimethyl8methylenebicyclo[7.2.0]undec4ene
2,6二甲基6(4甲基3戊烯基)二环[3.1.1]庚2烯 C15H24 204 034
2,6dimethy6(4methyl3pentenyl)bicyclo[3.1.1]hept2ene
(Z)6,10二甲基5,9十一二烯2酮 (Z)6,10dimethyl5,9undecadien2one C13H22O 194 051
(E)4(2,6,6三甲基1环己烯基)3丁烯2酮 (E)4(2,6,6trimethyl1cyclohexen1yl)3buten2one C13H20O 192 006
3甲基1,1′联二苯 3methyl1,1′bipheny C13H12 168 011
1,2,3,4,4a,5,6,8a八氢代4a,8二甲基2异丙烯基萘 C15H24 204 01
1,2,3,4,4a,5,6,8aoctahydro4a,8dimethyl2(1methylethenyl)naphthalene
二苯呋喃 dibenzofuran C12H8O 168 004
2,3,6三甲基萘2,3,6trimethylnaphthalene C13H14 170 012
1,6,7三甲基萘1,6,7trimethylnaphthalene C13H14 170 010
1,4,6三甲基萘1,4,6trimethylnaphthalene C13H14 170 010
石竹烯氧化物 caryophyleneoxide C15H24O 220 077
正十四醛 tetradecannal C14H28O 212 018
十四烷酸 tetradecanoicacid C14H28O2 228 208
9亚甲基9H芴9methylene9Hfluorene C14H10 178 033
十五酸乙酯 pentadecanoicacid,methylester C17H34O 254 006
6,10,14三甲基2十五碳酮 6,10,14trimethyl2pentadecannone C18H36O 268 096
2羟基环十五碳酮2hydroxycyclopentadecannone C16H30O2 254 400
十五酸 pentadecanoicacid C15H30O2 242 355
(E,E)6,10,14三甲基5,9,13十五碳三烯2酮 (E,E)6,10,14trimethyl5,9,13pentadecatrien2one C18H30O 262 024
棕榈酸甲酯 hexadecanoicacid,methylester C17H34O2 270 045
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续表1
化合物名称 分子式
相对分
子质量
相对
含量/%
棕榈酸 hexadecanoicacid C16H32O2 256 3656
(Z,Z)9,12亚油酸甲酯 (Z,Z)9,12octadecadienoicacid,methylester C19H34O2 294 027
(Z,Z,Z)9,12,15亚油酸甲酯 (Z,Z,Z)9,12,15octadecadienoicacid,methylester C19H32O2 292 012
叶绿醇 phytol C20H40O 296 062
(Z,Z)9,12亚油酸 (Z,Z)9,12octadecadienoicacid C18H32O2 280 1146
氨基十六碳酸 hexadecanamide C16H33NO 255 024
(Z)9氨基十八碳烯酸 (Z)9octadecenamide C18H35NO 281 054
氨基十四碳酸 tetradecanamide C14H29NO 227 016
分析结果表明,岩木瓜的挥发性成分中含量最
高的 为 脂 肪 酸 类 化 合 物,其 中 棕 榈 酸 最 高
(3656%),亚油酸次之 (1146%),十五烷酸
(355%),十四烷酸(208%)。其他类含量较高的
为醋酸乙酯(239%)。
3.2 抗氧化活性 研究结果表明05g·L-1挥发
油样品溶液 A490值为1302±0026,而阴性对照组
A490值为0763±0013,说明岩木瓜的挥发油成分
没有抗氧化作用。
3.3 抑制血小板聚集活性 采用Born方法测定挥
发油样品溶液对 ADP及 PAF诱导的家兔血小板聚
集功能的影响,研究结果表明05g·L-1挥发油样
品溶液的血小板聚集抑制率分别为268%和
90%,说明岩木瓜的挥发油成分对 ADP诱导的血
小板聚集有弱的抑制作用。
[致谢] 重庆市药物种植研究所易思荣副研究员采集
药材,北京大学医学部医药卫生分析中心陶海燕老师代测
GCMS。
[参考文献]
[1] 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志.第 23卷
[M].北京:科学出版社,1990:175.
[2] 中国药典.一部[S].2005:198.
[3] JianYang,TangZhiyuY,WangYinyeY,etal.PolyaspartoylL
arginineprotectsendothelialcelsagainstinjury[J].EurJPhar
macol,2008,599(1/3):96.
[4] 武源,郭宏宝,王铁军,等.几种中药组分对家兔体外血小板聚
集作用的比较[J].中国临床药理学与治疗学,2007,12(9):
1047.
ChemicalandbiologicalstudiesonessentialoilfromFicustsiangi
DUANSongleng1,LIUXiumei2,LIANGHong1,ZHAOYuying1
(1.DepartmentofNaturalMedicines,SchoolofPharmaceuticalSciences,PekingUniversity
HealthScienceCenter,Beijing100191,China;
2.DepartmentofMolecularandCelularPharmacology,SchoolofPharmaceuticalSciences,Peking
UniversityHealthScienceCenter,Beijing100191,China)
[Abstract] Objective:ToanalyzethechemicalcomponentsoftheessentialoilextractedfromthebarkofFicustsiangi.Meth
od:TheessentialoilwasextractedbywatersteamdistilationandseparatedbyGCcapilarycolumnchromatography.Thecomponents
werequantitativelydeterminedwithnormalizationmethodandidentifiedbyGCMS;Oxidationlevelswereusedtostudytheantioxida
tionoftheessentialoil.Bornturbidimetricmethodwasappliedtostudytheactionofthetheessentialoilonrabbitplateletaggregation
invitro.Result:TheoilrateofFicustsiangiwas0.097%.198chromatographicpeaksweredetectedand57compoundswereidenti
fied,whichwerecomposedof72.06% ofthetotalessentialoil.Thehighestingredientsinessentialoilwerefatyacids.Theessential
oilhadnoantioxidationandaweakinhibitoryefectoftheADPinducdplateletaggregation.Conclusion:Thechemicalandbiological
dataoftheessentialoilwerereportedforthefirsttime.
[Keywords] Ficustsiangi;essentialoil;antioxidant;plateletaggregation;GCMS
[责任编辑 王亚君]
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