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A new method for quick analysis of tanshinoneⅡAand salvianolic acid in Fufang Danshen tablets by AOTF-Near infrared spectroscopy

声光可调-近红外光谱技术快速分析复方丹参片中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的新方法



全 文 :目前认为,药物经鼻黏膜吸收入脑主要有3条
通路:嗅神经通路、嗅黏膜上皮通路和血液循环通
路。鼻腔给药后药物分子滞留于嗅黏膜而易经前两
条通路进入嗅球和脑脊液,可绕过血脑屏障直接进
入中枢神经系统,并可避免胃肠道中酶的破坏和肝
脏的首过效应,有利于提高生物利用度,发挥治疗作
用。川芎嗪的相对分子质量为13620,冰片的相对
分子质量为15425,两者的分量均小于1000,适于
鼻黏膜吸收,芎冰喷雾剂经鼻腔给药后能够迅速吸
收入脑可能与此有关。
[参考文献]
[1] 徐慧聪.芎冰喷雾剂对椎基底动脉供血不足的即时疗效[J].
中西医结合心脑血管病杂志,2006,4(5):388.
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[4] 许卫华,王 晖,许卫铭.川芎嗪的鼻腔吸收及冰片的促进作
用[J].中国临床药理学与治疗学,2002,7(5):434.
InfluenceofborneolonnasalabsorptionofLigustrazinee
LIUYude1,SUNHanjin2,LIRong,WUWei1,CHENHonggui1
(1.GuangzhouUniversityofTraditionalChineseMedicine,Guangzhou510405,China;
2.GuangzhouRedCrosHospital,Guangzhou510220,China)
[Abstract] Objective:Toevaluatetheinfluenceofborneolonnasalabsorptionenhancementofligustrazine.Method:Therats
wererandomlydividedinto3groups:Xiongbingnasalspraygroup(groupA),Chuanxiongnasalspraygroup(groupB)andXiongbing
groupbydecoctionintragastricadministration(groupC).Altheratsweredecapitatedatseveraltimepointsafteradministration.The
wholebrainsofratsweretakentohomogenateanddetectedtheconcentrationsofligustrazine.Result:ComparedwithgroupBandC,
groupAhasitscharacteristics:quickabsorption,quickdistributionandquickexcretionofligustrazine.Conclusion:Nasaladministra
tionisaquickactingwayforischemiccerebralvesselinsuficientia.Borneolpromotednasalabsorptionofligustrazineintobrain.
[Keywords] borneol;ligustrazine;nasaladministration
[责任编辑 鲍 雷]
[收稿日期] 20070521
[基金项目] 山东省自然科学基金(Y2007C144);山东省教育厅科研项目(J07YD12)
[通讯作者] 王宁,Tel:(0531)86305103,Email:sdwxwn@163.com
声光可调近红外光谱技术快速分析复方丹参片中
丹参酮ⅡA和丹酚酸 B的新方法
王 宁1,蔡绍松2,魏 红1,董海平2
(1.山东医学高等专科学校,山东 济南 250002;
2.济南金宏利实业有限公司,山东 济南 250100)
[摘要] 目的:建立一种用声光可调(AOTF)近红外(NIR)光谱技术快速测定复方丹参片中丹参酮ⅡA和丹
酚酸B的新方法。方法:依据2005年版《中国药典》复方丹参片含量测定方法,以 HPLC测定其丹参酮ⅡA和丹酚
酸B的含量,运用偏最小二乘(PLS1)法建立NIR光谱与2个成分 HPLC分析值之间的多元校正模型,对未知样品
进行含量预测。结果:建立的定量模型准确性好,丹参酮ⅡA、丹酚酸 B的内部交叉验证均方差(RMSECV)分别是
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00103,01868,决定系数分别是09873,09832,并对外部验正集样品进行外部验证,丹参酮ⅡA、丹酚酸B预测
值与真值的相关系数分别是 09743,09886。该方法的精密度,稳定性好,RSD分别是 1756%,1980%和
1193%,1869%,预测回收率分别为1030%,990%。结论:AOTF近红外光谱法对复方丹参片中丹参酮ⅡA和
丹酚酸B含量预测结果较好,为中药生产过程的在线、无损定量分析提供了依据。
[关键词] 声光可调滤光器;近红外光谱技术;复方丹参片;丹参酮ⅡA;丹酚酸B;偏最小二乘法(PLS)
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2008)03026104
  复方丹参片是活血化瘀,理气止痛的常用中成
药,由丹参、三七、冰片三味药组成,大量的药理实验
证明丹参酮ⅡA和丹酚酸 B具有改善心肌缺血,清
除自由基等作用,是丹参药效的主要物质基础[1]。
2005年版《中国药典》以 HPLC测定复方丹参片中
丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量
[2],操作繁琐,分析周
期长。目前在临床应用中发现由于不同厂家、不同
批号复方丹参片中药效成分含量变化幅度较大,致
使药品质量和疗效存在很大的差异[3],因此,当前
迫切需要发展一种快速、高效、并适合现场检测的新
型分析测试技术,研究建立复方丹参片快速评价方
法和适应于生产过程的在线质量监控方法。
近红外(NIR)光谱法是近年来发展迅速的一种
绿色分析技术,并以其独特的优点开始应用于中药
分析 [47],以往多采用傅立叶变换近红外光谱仪。
20世纪90年代末出现了第5代声光可调(AOTF)
近红外光谱仪,被称为“90年代近红外光谱仪最突
出的进展”。这种新型的近红外光谱仪具有结构简
单、体积小、重现性好和仪器环境适应性强的特点,
将过去必须在室内,且对温度、湿度、灰尘、防震均有
严格要求的各项检测转移到了生产在线和现场(室
外)。最近几年,AOTF近红外光谱分析仪引进国
内,已开始应用于烟草及化工行业[8],本研究采用
声光可调滤光器近红外(AOTFNIR)光谱分析技
术,建立快速、同时测定复方丹参片中药效成分丹参
酮ⅡA和丹酚酸 B含量的新方法。该方法操作简
便、分析迅速,体现了 AOTFNIR光谱分析技术可
用于现场快速分析的特点,为复方丹参片的快速定
量分析和生产过程中的在线检测,控制产品的质量
提供了有效的分析方法。
1 仪器与试药
AOTF便携式 Luminar5030-731近红外光谱
分析仪(美国 BRIMROSE公司),用于静止检测的
30mm有机玻璃样品槽(槽深8mm)和有机玻璃支
架,配套使用的 SNAP光谱采集软件和 CAMO化学
计量学软件。Waters1525色谱仪(美国 Waters公
司),Waters2996二极管阵列检测器,Empower色谱
工作站。
丹酚酸B对照品(中国药品生物制品检定所,
批号 111562200504,供含量测定用);丹参酮ⅡA
(中国药品生物制品检定所,批号 110766200417,
供含量测定用);复方丹参片(济南宏济堂制药有限
公司提供);甲醇为色谱纯试剂;水为超纯水。
2 方法
2.1 收集样品 为消除建摸样品的含量范围和分
布对所建校正模型性能的影响,本研究中,除济南宏
济堂制药有限责任公司提供的不同批号复方丹参片
样品以外,还摸拟车间生产条件在实验室制备部分
样品以拉大含量分布范围.共收集样品57批,将57
批样品分为校正集和验证集,其中验证集5批均来
自济南宏济堂制药有限公司。
2.2 HPLC分析 将上述57个样品按2005年版
《中国药典》复方丹参片项下含量测定方法,采用
HPLC测定样品中丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量,每份
样品重复测定3次,相对偏差小于15%,以3次含
量测定结果的平均值为样品中丹参酮ⅡA和丹酚酸
B的含量。
2.3 近红外光谱采集 每次取不同批次的样品10
片,研磨成粉状(过80目筛),分别倒入30mm的有
机玻璃样品槽中,用专用的有机玻璃槽盖将样品表
面抹平,在1100~2300nm扫描,扫描间隔为20
nm,扫描平均次数为100次。每个样品测1次,得
到57个样品的总光谱图,见图1。
3 结果与讨论
3.1 光谱预处理 在建立模型前,首先对扫描得到
的原始吸收光谱进行光谱预处理,以消除噪音和基
线漂移的影响。作者采用的预处理方法为一阶导数
9点平滑法(savitzkygolay)。一阶导数光谱图见图
2。经一阶导数处理可以很好的消除样品由于颜色
差别引起的光谱基线偏移和漂移。
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图1 复方丹参片近红外光谱图
图2 复方丹参片的一阶导数光谱图
3.2 建立 PLS1数学模型 将经过预处理后的光
谱数据与PHLC分析数据进行关联,采用偏最小二
乘法(PLS1),交叉验证法(crossvalidation),用 The
Unscrambler定量分析软件建立模型。NIR和 HPLC
测定的异常值分别采用光谱影响值Leverage和化学
值误差Residual这2个统计量来检验剔除。经过异
常值的剔除进行优化,得到了较为理想的校正模型。
通过PLS1方法建立的(NIR)光谱校正模型,得
到的样品丹参酮ⅡA和丹酚酸B的 NIR光谱预测值
与HPLC分析值之间相关性良好,测定数据偏差较
小。丹参酮ⅡA 模型的主成分维数为 7,R
2 =
09873,RMSECV=00103,丹酚酸 B模型的主成
分维数为3,R2=09832,RMSECV=01868。校
正模型确立后,NIR光谱完成1次测量只需2min。
而HPLC测定以上2种成分需分别提取和测试,整
个测试过程约需4h。
3.3 检测模型效果 以PLS1建立的校正模型对5
份外部验正集样品进行分析。丹参酮ⅡA的测试结
果见表 1。NIR光谱预测值与 HPLC测定真值的
R2=09743。丹酚酸B的测试结果见表2。NIR光
谱预测值与HPLC测定真值的R2=09886。
由上述数据可见,NIR光谱预侧值与 HPLC分
析值之间相关性良好,测定结果趋于一致。
3.4 精密度试验 取1个预测样品,重复扫描20
  表1 丹参酮ⅡA、丹酚酸B校正模型对外部验正
集样品的分析结果(n=5) % 
成分 编号 预测值 化学值 相对误差 绝对误差
丹参酮ⅡA 001 0246 0231 6494 0015
  002 0263 0267 -1498 -0004
  003 0196 0199 -1508 -0003
  004 0201 0189 6349 0012
  005 0179 0168 6548 0011
丹酚酸B 001 4085 4051 0839 0034
  002 4647 4740 -1962 -0093
  003 3362 3547 -5216 -0185
  004 3394 3365 0862 0029
  005 3048 2985 2111 0063
表2 丹参酮ⅡA、丹酚酸B预测回收率(n=5) %
成分 编号 预测值 化学值 回收率 平均值
丹参酮ⅡA 1001 0246 0231 1065 1030
  1002 0263 0267 995  
  1003 0196 0199 985  
  1004 0201 0189 1063  
  1005 0179 0168 1075  
丹酚酸B 1001 4085 4051 1018 990
  1002 4647 4740 980  
  1003 3362 3547 958  
  1004 3394 3365 1019  
  1005 3048 2985 1021  
次,将所得光谱带入建立的校正模型计算含量,以考
察方法的精密度,结果丹参酮ⅡA和丹酚酸 B的 RSD
分别为1756%,1980%,说明仪器精密度良好。
3.5 稳定性试验 取1个预测样品,每1h扫描一
次,于5h内重复扫描5次,考察样品的稳定性。结
果丹参酮ⅡA的 RSD1193%,丹酚酸 B的 RSD
1869%,说明样品在5h内相对稳定。
3.6 预测回收率试验 取5个预测样品,分别扫
描,将所得光谱带入建立的校正模型,计算丹参酮
ⅡA和丹酚酸B预测值与 HPLC测定的真值之间的
比值(预测回收率),丹参酮ⅡA和丹酚酸 B的预测
回收率分别为1030%,990%。结果见表2。
4 结论
AOTF近红外光谱测定复方丹参片中丹参酮
ⅡA和丹酚酸 B的新方法,集快速、直接、多成分同
时测定和能够实现现场分析为一体,解决了复方丹
参片定量分析过程中操作复杂、分析周期长,不能用
于在线检测的问题,分析结果令人满意,各项分析参
数能够满足药品生产过程中含量测定的要求,若进
一步加大样本的数量,增加样本的代表性,可以建立
更加稳定的模型,为复方丹参片在线质量控制提供
有效的分析方法。另外,将美国、欧洲等发达国家纳
入药典的先进分析技术应用于中成药的生产和质量
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分析,使中成药分析方法与国际医药市场标准接轨,
适应了中药现代化的需要。
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AnewmethodforquickanalysisoftanshinoneⅡAandsalvianolicacid
inFufangDanshentabletsbyAOTFNearinfraredspectroscopy
WANGNing,CAIShaosong2,WEIHong1,DONGHaiping2
(1ShandongMedicalColege,Ji'nan250002,China;2Ji'nanGoldenproIndustrialCo.Ltd.,Ji'nan250100,China)
[Abstract] Objective:ToestablishanewmethodusingAOTFNearinfraredspectroscopy(NIRS)forquickdeterminationof
tanshinoneⅡAandsalvianolicacidBinFufangDanshentablets.Method:HPLCwasusedasareferencemethodtodeterminethecon
tentsoftanshinoneⅡAandsalvianolicacidBinFuFangDanShentablets.MultivariatecalibrationmodelsbasedonPLS1algorithm
weredevelopedtocorelatethespectraandthecorespondingvaluesdeterminedbythereferencemethods.Result:RMSECV(root
meansquareerorofcrossvalidation)ofthemodelsfortanshinoneⅡAandsalvianolicacidBwere0.0103and0.1868respectively.
Thecorelationcoeficientsofthecalibrationmodelswere0.9873and0.9832respectively.Externalvalidationwithexternalvalidation
samplesprovedthattherelativecoeficientofthepredictedvalueandthetruthvaluewereR2=0.9743andR2=0.9886respectively,
withmeasuredrecycleratesof103.0% and99.0%.Conclusion:NIRScanbeusedinthedeterminationoftanshinoneⅡAandsalvi
anolicacidB,whichsetsupthefoundationofproductlinecontrolofFuangDanhentablets.
[Keywords] acoustoptictunablefilter;nearinfraredspectroscopy;FufangDanshentablets;tanshinoneⅡA;salvianolicacid
B;PLS1algorithm [责任编辑 鲍 雷]
[收高日期] 20070312
[基金项目] 上海市经委课题(2003B010)
[通讯作者] 徐德生,Tel:(Fax):(021)51322491,Email:xudes1953@126.com
聚酰胺大孔树脂联用富集益母草总黄酮
余丹妮1,徐德生2,冯 怡2,卫洪昌2
(1.中国药科大学,江苏 南京 210009;2.上海中医药大学 中药学院,上海 201203)
[摘要] 目的:寻找一种有效富集益母草总黄酮的方法并对工艺条件进行初步摸索。方法:样品液以聚酰胺
吸附,水洗除杂。将除杂后的聚酰胺加于大孔吸附树脂柱顶部,以乙醇洗脱富集总黄酮 。结果:聚酰胺与D101树
脂联合应用能很好的富集益母草总黄酮。最佳工艺条件为:药材与聚酰胺比为5∶1,药材与树脂比为1∶3,树脂径
高比为1∶7时,以50%乙醇洗脱,收集洗脱液7BV。富集物总黄酮纯度可达23%,黄酮转移率为69%。结论:该方
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