全 文 ：和厚朴酚对 Ｄ半乳糖衰老模型小鼠抗氧化作用的研究
郝庆红，陈冠华１，冯雅琪２，郭云霞１，雷白时１
（１．河北农业大学 生命科学学院，河北 保定 ０７１００１；
２．河北能源职业技术学院，河北 唐山 ０６３０００）
［收稿日期］　２００８０６１２
［基金项目］　河北省自然科学基金项目（２０２２８１）；河北省教育厅自
然科学基金项目（２０００２５７）
［通信作者］　陈冠华，Ｔｅｌ：（０３１２）５０２２６７５，Ｅｍａｉｌ：ｃｇｈｃｙｃｂｙ＠１６３．
ｃｏｍ
　　衰老是生命的基本特征之一，是个体发育成熟
后，随年龄的增长，体内器官、组织和细胞的形态结
构逐渐退化，生理功能相应减弱，整体适应能力和抵
抗力随之下降等的综合表现。据相关报道目前解释
衰老机制的理论或学说达２００多种［１］，自由基致衰
老是大家公认机制之一。为了预防自由基致衰老，
人们在不断地寻找抗氧自由基的药物，天然产物作
为一种抗氧化剂越来越受到人们的青睐。厚朴为木
兰科植物，是常用的理气药，有温中、下气、燥湿、中
枢镇静、消痰、抗痉挛、抗溃疡、止泻、抑菌及防龋等多
方面的作用，另外还有抗癌、抑制胆固醇、抑制蛋白酶
的作用［２４］；厚朴属于植物多酚类并且具有抗氧化性，
其提取物有很强的体外清除自由基的作用［５７］。本研
究采用腹腔注射 Ｄ半乳糖制造小鼠亚急性衰老模
型，观察和厚朴酚对衰老模型小鼠的影响。
１　材料与方法
１．１　动物　昆明系（ＫＭ）健康小鼠，１～２月龄，
１８～２２ｇ，雌雄兼用，购自河北省动物实验中心（动
物合格证ＤＫ０４０７００７１）。
１．２　药物及试剂　和厚朴酚对照品（纯度９９５％，
中国药品生物制品检定所）；超氧化物歧化酶
（ＳＯＤ）测试盒、丙二醛（ＭＤＡ）测试盒、过氧化氢酶
（ＣＡＴ）测试盒、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰｘ）测
试盒、蛋白测定试剂盒（以上测试盒均购于南京建
成生物工程研究所）；维生素 Ｅ（Ｓｉｇｍａ公司）、Ｄ半
乳糖（上海蓝季科技发展有限公司，批号０４０５０８）、
羧甲基纤维素钠（天津市科密欧化学试剂开发中
心）。
１．３　主要仪器　ＤＵ６５０紫外可见分光光度计
（Ｂｅｃｋｍａｎ），ＹＸ２８０型手提式压力蒸汽消毒器（上
海医疗器械工业集团公司 江阴医疗设备厂）、ＳＨＡ
ＮＧＰＩＮＧＦＡ１００４万用电子天平（上海天平仪器厂）、
ＴＧ１６台式离心机（长沙英泰仪器有限责任公司）、
电热恒温水浴锅（北京西诚区医疗设备厂）、ＳＫ１快
速混匀器（江苏省金坛市正基有限公司）。
１．４　方法　小鼠随机分为５组：和厚朴酚高、低剂
量组、Ｄ维生素Ｅ（ＶｉｔＥ）组，Ｄ半乳糖模型组、正常
组。灌胃给药，除正常组外，其余各组连续６周每天
腹腔注射Ｄ半乳糖（０３０ｇ·ｋｇ－１），正常组注射同
体积生理盐水。在以上处理的同时，给药组每天分
别灌胃和厚朴酚（１６，４ｍｇ·ｋｇ－１），阳性药组每天
灌胃给予维生素 Ｅ（５０ｍｇ·ｋｇ－１），正常组和 Ｄ半
乳糖模型组每天灌胃等体积０５％的羧甲基纤维素
钠溶液。样品的采集、处理与测定均按照试剂盒要
求进行。
１．５　统计分析　采用ＳＰＳＳ１１０软件进行分析，实
验数据用 珋ｘ±ｓ表示，做方差分析。Ｐ＜００５表示有
显著性差异。
２　结果
２．１　对小鼠血清中 ＭＤＡ，ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ的影
响　与正常组比较，衰老模型小鼠血清中 ＭＤＡ含
量明显增加，ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ活性明显降低，而
灌胃给药和厚朴酚可明显降低小鼠血清中 ＭＤＡ含
量和提高ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ活性（表１）。
２．２　对小鼠心肌中ＭＤＡ含量、ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨ
Ｐｘ活性的影响　与正常组比较，衰老模型小鼠心
肌中ＭＤＡ含量明显增加、ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ活
性明显降低，而灌胃给药和厚朴酚可明显降低小鼠
心肌中ＭＤＡ含量和提高ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ活性
（表２）。
２．３　对小鼠脑中 ＭＤＡ含量、ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ活
性的影响　与正常组比较，衰老模型小鼠脑中 ＭＤＡ
含量明显增加、ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ活性明显降低，
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第３４卷第６期
２００９年３月
　　　　　　 　 　 　 　 　　　　　　 　 　 　 　
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表１　和厚朴酚对衰老小鼠血清中ＭＤＡ含量和ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ活性的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
组别 剂量／ｍｇ·ｋｇ－１ ＭＤＡ／ｎｍｏｌ·ｍＬ－１ ＳＯＤ／Ｕ·ｍＬ－１ ＣＡＴ／Ｕ·ｍＬ－１ ＧＳＨＰｘ／Ｕ·ｍＬ－１
正常 － ８３１±０８９２） ４９８６±４４６２） ８３３±０５７２） ４５２７０±３５０９
模型 － １４０２±０２７ ２３９８±４５０ ７２５±１５０ ３７２７３±３９０１
维生素Ｅ ５０ １１４４±０２６２） ３１１８±２１９１） １１０７±０８１２） ５４０７７±１５３１２）
和厚朴酚 ４ １１１６±１５１２） ４４７４±３８３２） １０４４±０９６２） ４６３５４±２０４７２）
　 １６ ９４８±０３７２） ４８３９±４４１２） １２４９±０８８２） ５４５８５±２９４５２）
　　注：与模型组比较１）Ｐ＜００５，２）Ｐ＜００１（表２～４同）。
表２　和厚朴酚对衰老小鼠心肌中ＭＤＡ含量和ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ活性的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
组别 剂量／ｍｇ·ｋｇ－１ ＭＤＡ／ｎｍｏｌ·ｍｇ－１ ＳＯＤ／Ｕ·ｍｇ－１ ＣＡＴ／Ｕ·ｍｇ－１ ＧＳＨＰｘ／Ｕ·ｍｇ－１
正常 － ２７９±０２９２） ８２３±０７４ ７５７±０６８２） ７０２±０９５
模型 － ５６６±０４６ ６３９±１０１ ３３４±１１２ ６０８±０４７
维生素Ｅ ５０ ２２２±０１６２） １０８９±１９４２） ４４３±１３４ ８３８±０４８２）
和厚朴酚 ４ １２４±０１８２） １０４６±０９９２） ４７８±０９８ ７３３±０３７２）
　 １６ １１３±０３２２） １１７４±２４０２） ８４３±２２１２） ８２４±０８１２）
而灌胃给药和厚朴酚可明显降低小鼠脑中 ＭＤＡ含 量和提高ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ活性（表３）。
表３　和厚朴酚对衰老小鼠脑中ＭＤＡ含量和ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ活性的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
组别 剂量／ｍｇ·ｋｇ－１ ＭＤＡ／ｎｍｏｌ·ｍｇ－１ ＳＯＤ／Ｕ·ｍｇ－１ ＣＡＴ／Ｕ·ｍｇ－１ ＧＳＨＰｘ／Ｕ·ｍｇ－１
正常 － ３１１±０２３２） １７６１±２１９２） １０１３±１７５２） ８３２±０９３
模型 － ５２４±０７２ ４８３±０３２ ３８４±０５８ ６８４±０６７
维生素Ｅ ５０ ２２７±０３１２） １２９５±１００２） １０４２±３５１２） １１４１±０９２２）
和厚朴酚 ４ ２４７±０３４２） １４１１±１３６２） ８３３±１０６２） ７８８±０５２
　 １６ ２２４±０４２２） １７１４±２２９２） １４６７±３４８２） ８５９±０９８２）
２．４　对小鼠肝中 ＭＤＡ含量、ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ活
性的影响　与正常组比较，衰老模型小鼠肝中 ＭＤＡ
含量明显增加、ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ活性明显降低，
而灌胃给药和厚朴酚可明显降低小鼠肝中 ＭＤＡ含
量和提高ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ活性（表４）。
３　讨论
表４　和厚朴酚对小鼠肝中ＭＤＡ含量和ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ活性的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
组别 剂量／ｍｇ·ｋｇ－１ ＭＤＡ／ｎｍｏｌ·ｍＬ－１ ＳＯＤ／Ｕ·ｍｇ－１ ＣＡＴ／Ｕ·ｍＬ－１ ＧＳＨＰｘ／Ｕ·ｍｇ－１
正常 － ４１６±０３５１） １２３１±１６６２） ８４４±１１８ ３２７９±３００２）
模型 － ５８２±０８６ ７６４±０８４ ７１８±１３４ ２４８３±１８１
维生素Ｅ ５０ １３５±０３１２） １０６６±１２１２） ８２４±０８２ ３２５３±３２６２）
和厚朴酚 ４ １３５±０３１２） ９８３±１１５１） ９８３±０７６２） ３２８８±１６４２）
　 １６ １１１±０１２２） １４０１±２０１２） １０６９±１３６２） ３５１４±３６９２）
　　Ｄ半乳糖衰老模型是目前造模时间短，简单快
捷，较理想的研究筛选抗氧化、抗衰老药物的动物模
型。Ｄ半乳糖在体内醛糖还原酶的作用下，生成醛
糖醇和Ｈ２Ｏ２以及在反应过程产生超氧阴离子，超氧
阴离子和Ｈ２Ｏ２在动物体内可与细胞中脂质、蛋白和
核酸作用损伤生物大分子，同时反应晚期糖基化产
物诱导氧化应激（ｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓ）自由基损伤，导致
一系列病理生理改变，由此引起全身各器官受损、系
统功能衰退、产生一系列相应的症状，如：早衰、脑老
化、氧化应激、白内障和蛋白ＮＥＧ等［８９］。
ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ等抗氧化酶是生物体自身
的一道重要抗氧化防线。随着年龄增长，机体内的
抗氧化酶类活性下降，抗氧化酶活性的增龄性失活，
这是由于编码抗氧化酶的基因及抗氧化酶本身受自
由基损伤所致。人们通过研究衰老Ｗｉｓｔａｒ大鼠主要
器官中ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ的活性及脂质过氧化产
物ＭＤＡ的含量，发现在心肝等组织中抗氧化体系
随衰老而减弱；不同抗氧化酶在不同器官中以不同
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的方式随衰老而改变；它们的活性变化与器官的过
氧化程度之间没有明显的相关性。因此不能将
ＭＤＡ含量的测定作为一个特征指标，它必须与其他
指标结合起来考虑，如ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ等活性的
测定，本试验就是将这些指标与其结合起来进行测
定。
本试验给小鼠连续６周注射 Ｄ半乳糖模拟自
然衰老小鼠，发现小鼠行动迟缓、毛色发暗，食欲下
降，形体瘦弱，呈现明显的衰老体征；各组织和血清
中ＭＤＡ生成量增加，脂质过氧化程度都有不同程
度增强，ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ酶活性也有不同程度下
降，与文献报道一致［１０１１］，证明衰老模型成功建立。
通过对衰老模型组、空白组、维生素 Ｅ组、和厚朴酚
高、低剂量给药组小鼠血清和组织中 ＳＯＤ，ＣＡＴ，
ＧＳＨＰｘ抗氧化酶活性和 ＭＤＡ水平的比较，发现给
药后小鼠的血清和组织中 ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨＰｘ抗氧
化酶活性增强、ＭＤＡ含量降低，这可能是因为和厚
朴酚通过提高机体抗氧化能力，清除衰老机体产生
过多的自由基，阻断氧自由基链反应的进一步进行，
抑制机体、组织、细胞的过氧化过程而起到延缓衰老
的作用。本试验结果显示，和厚朴酚可提高机体抗
氧化酶活力，降低体内脂质过氧化产物的积累，具有
良好的抗氧化能力，能在一定程度上延缓由于注射
Ｄ半乳糖引起的小鼠体内的拟衰老变化，这为进一
步研究和厚朴酚抗衰老作用奠定基础。
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