全 文 ：板蓝根切制工艺的优选及切制前后
指纹图谱的变化研究
李友，马莉，龚慕辛，关怀
（首都医科大学 中医药学院，北京 １０００６９）
［摘要］ 目的：优选板蓝根软化切制的工艺条件；通过比较不同产地板蓝根药材切制前后指纹图谱的差异性，客观反应
润药切制对药材总体成分的影响。方法：以药材软化时加水量、润制时间和饮片切制厚度为考察因素，以水溶性浸出物为指
标，采用正交设计，优选板蓝根软化切制的条件；采用反相高效液相色谱法，ＺｏｒｂａｘＳＢＣ１８（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）柱，流动
相乙腈水，梯度洗脱，检测波长２３８ｎｍ，进样量１０μＬ。对板蓝根粗粉和水润切制后的饮片进行ＨＰＬＣ测定，并采用中药色谱
指纹图谱相似度评价软件进行比较。结果：板蓝根软化切制的最佳工艺为：０６倍量的水，浸润２４ｈ，饮片厚度为２ｍｍ；结论：
建立了板蓝根药材醋酸乙酯萃取物ＨＰＬＣ指纹图谱。板蓝根在切制前后，指纹图谱对照谱图差异明显，切制后中等极性部分
损失较多。
［关键词］ 板蓝根；切制工艺；正交设计；指纹图谱
［收稿日期］ ２００９０３１７
［基金项目］ 国家自然科学基金项目（３０７０１０９１）；北京市优秀人才
培养项目（２００７１Ｄ０５０１８００２４８）
［通信作者］ 马莉，Ｔｅｌ：８３９１１６３５，Ｅｍａｉｌ：ｍａｒｙｔｊｙ６６＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
［作者简介］ 李友，在读硕士，方向为中药质量控制。Ｅｍａｉｌ：ｌｉｙｏｕ＿
ｌｉｏｎ＠１６３．ｃｏｍ
板蓝根是十字花科植物菘蓝 Ｉｓａｔｉｓｉｎｄｉｇｏｔｉｃａ
Ｆｏｒｔ．的干燥根。《中国药典》２００５年版规定板蓝根
饮片炮制方法为“除去杂质，洗净，润透，切厚
片，干燥”［１］，药典附录中规定厚片的厚度为２～４
ｍｍ，但就其切制工艺而言，目前仍是各地各法［２］。
中药炮制有 “七分润工，三分切工”的描述，可
见饮片切制润药是关键。为了规范板蓝根饮片的炮
制工艺，本研究以药材软化时加水量、润制时间和
饮片切制厚度为考察因素［３］，以水溶性浸出物为
指标，采用正交设计，优选板蓝根软化切制的工艺
条件。
由于切制过程中涉及到水处理，必然会导致
水溶性成分的流失。板蓝根成分复杂，采用单一
化学成分作为其质量控制和质量评价的手段已
经不能够全面反映药材的质量，本实验采用
ＨＰＬＣ色谱法［４］，对不同产地板蓝根在切制前后
醋酸乙酯萃取部分指纹图谱进行比较［５］，拟从整
体化学成分的角度，就切制工艺对板蓝根质量的
影响进行探讨。
１ 材料
１．１ 仪器与试剂
Ａｇｉｌｅｎｔ１１００高效液相色谱仪（Ｇ１３７９Ａ在线脱
气泵、Ｇ１３１３Ａ自动进样器、Ｇ１３１５ＢＤＡＤ检测器、
Ｇ１３１６Ａ柱温箱、化学工作站）；ＳａｒｔｏｒｉｕｓＭＥ２３５Ｓ电
子天平；乙腈，甲醇（均为色谱纯 美国Ｆｉｓｈｅｒ公司）；
娃哈哈纯净水；其他溶剂均为分析纯。
１．２ 药材
板蓝根 Ｉ．ｉｎｄｉｇｏｔｉｃａ９批药材编号及产地
见表１。
表１ ９批板蓝根编号及产地
Ｎｏ． 药材产地
Ｓ１ 山东临沂
Ｓ２ 河北玉田（同仁堂ＧＡＰ基地）
Ｓ３ 安徽阜阳（三塔）
Ｓ４ 河北祈新
Ｓ５ 河南清丰
Ｓ６ 内蒙古赤峰
Ｓ７ 安徽阜阳（白云山ＧＡＰ基地）
Ｓ８ 安徽太和（元寨）
Ｓ９ 黑龙江哈尔滨
２ 方法与结果
２．１ 浸润与切制
切制的饮片按照《中国药典》２００５年版（一部）
附录ⅡＤ药材炮制通则项下有关规定，以加水倍量、
浸润时间和饮片切制厚度为因素设计正交试验，优
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选软化切制工艺，因素水平见表２。
表２ 板蓝根个子水润切制工艺因素水平
水平
Ａ
加水量／倍
Ｂ
浸润时间／ｈ
Ｃ
饮片厚度／ｍｍ
１ ０４ ２４ ２
２ ０６ １８ ３
３ ０８ １２ ４
２．２ 切制样品制备
取原药材，除去杂质及残茎，取粗细均匀的板蓝
根药材５０ｇ，平行９份，抢水洗净，按表１的工艺组
合进行炮制。操作中，将药材置陶瓷罐内，整齐堆
放，均匀喷淋清水（每隔１ｈ喷淋清水１次），润透，
取出稍晾，切片，６０℃烘干，取出晾凉，筛去碎屑，塑
料袋密封，备用。
２．３ 水溶性浸出物的含量测定
取切制后各样品，粉碎，过２号筛，精密称定供
试品约４ｇ，置２５０ｍＬ锥形瓶中，精密加水１００ｍＬ，
按《中国药典》２００５年版一部附录Ⅹ Ａ水溶性浸出
物测定法（热浸法）测定，以干燥品计算样品中水溶
性浸出物的质量（重复实验２次），结果见表３。
表３ 板蓝根饮片切制Ｌ９（３
４）正交试验
Ｎｏ． 水提物的量／ｇ
１ １０４８７
２ ０９５１２
３ ０９４０８
４ １０１６６
５ ０９７４８
６ ０９４３７
７ １０５２２
８ ０９８７２
９ ０９３１４
２．４ 板蓝根浸润与切制工艺条件的优选结果
按照上述试验方法，以水溶性浸出物的质量为
指标，采用正交试验，试验数据见表３，结果分析见
表４。
表４ 方差分析
方差来源 离均差平方和 方差 Ｆ 显著性
Ａ ００００７４ ００００３７ １２３
Ｂ ００４７３９ ００２３７０ ７９０ Ｐ＜００１
Ｃ ０００３６４ ０００１８２ ６０７ Ｐ＜００５
Ｄ ０００００６ ０００００３
注：ｆ＝２；Ｆ００５（２，２）＝１９００，Ｆ００１（２，２）＝９９００。
观察分析结果，影响因素的大小顺序为
Ｂ＞Ｃ＞Ａ。
由方差分析表可以看出，本试验设计中，因素浸
润时间（Ｂ）和饮片厚度（Ｃ）对板蓝根的软化切制均
有显著影响，结合炮制及生产实际情况和方差分析，
确定最佳搭配为Ａ２Ｂ１Ｃ１，即板蓝根软化切制的最佳
工艺为 ０６倍量的水，浸润２４ｈ，饮片厚度为２ｍｍ。
２．５ 验证试验
平行称取３份板蓝根药材，按照最佳工艺进行炮
制并测定其水溶性浸出物的含量。结果３份药材炮
制后浸出物的质量分别为１０５７３，１０５１４，１０６１２
ｇ，平均值为１０５６６ｇ，ＲＳＤ０４４％。验证试验结果表
明实验条件下筛选的板蓝根炮制工艺稳定可行。
２．６ 醋酸乙酯部位指纹图谱的测定
２．６．１ 色谱条件 ＺｏｒｂａｘＳＢＣ１８色谱柱（４６
ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；流动相乙腈水梯度洗脱，见
表５；流速１ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长２３８ｎｍ；柱温３０
℃；进样量１０μＬ。
表５ 梯度洗脱条件
时间／ｍｉｎ 乙腈／％ 水／％
０ ０ １００
１５ １０ ９０
３０ ３０ ７０
５０ ５０ ５０
６０ １００ ０
６５ １００ ０
２．６．２ 供试品溶液的制备 取切制前后各批次板
蓝根粗粉２５ｇ，于１０倍量水中回流提取２次，每次１
ｈ，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度 １０５（６０
℃），用醋酸乙酯萃取３次，少量水洗醋酸乙酯层，
减压回收醋酸乙酯，转移至２５ｍＬ量瓶中，用甲醇定
容至刻度，取续滤液适量，以０４５μｍ微孔滤膜滤
过，即得。
２．６．３ 图谱测定时间的确定 取 Ｓ２样品溶液１０
μＬ，注入液相色谱仪，记录１００ｍｉｎ内色谱图。结果
表明，６５ｍｉｎ后无有意义峰出现，故确定图谱记录
时间为６５ｍｉｎ。
２．６．４ 检测波长的选择 试验过程中选择了２２５，
２３８，２５４，２９０ｎｍ等波长进行分析，见图１，发现检测
波长为２３８ｎｍ时，色谱峰的强度普遍比较强，峰形
对称性好，基线稳定，得到的信息量充分，所以选择
２３８ｎｍ作为本次试验检测波长。
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图１ 不同波长下的图谱
２．６．５ 数据处理方法 采用中药色谱指纹图谱相
似度评价系统２００４年版进行数据处理，从各样本图
谱中综合比较生成对照模式色谱图，并计算每个色
谱图与对照模式色谱图的相似度。本试验采用相关
系数（中位数）进行评价。
２．６．６ 精密度试验 取同一批样品，制备供试品溶
液，连续进样５次，检测指纹图谱，以“中药色谱指
纹图谱相似度评价系统”评价，结果相似度都在
０９６以上，表明仪器的精密度良好。
２．６．７ 稳定性试验 取同一批样品，制备供试品溶
液，分别在０，２，４，８，１６，２４ｈ进样，检测指纹图谱，
以“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”评价，结果
相似度都在 ０９６以上，表明供试品溶液的稳定
性良好。
２．６．８ 重复性试验 取同一批供试品５份，分别精
密称定，制备供试品溶液，分别进样，检测指纹图谱，
以“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”评价，结果
相似度都在０９６以上，表明样品的重现性良好。
２．６．９ 样品指纹图谱测定 按照上述色谱条件，对
切制前后９批不同来源板蓝根饮片的醋酸乙酯萃取
物进行测定，记录６５ｍｉｎ色谱图，通过比较各色谱
图，采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似
度评价系统版”，对切制前后醋酸乙酯萃取物进行
自动校正，生成对照谱图见图２，３，各匹配图谱见图
４，５。
板蓝根切制前后对照谱图差异十分明显，在
２０～４０ｍｉｎ内，切制后的色谱峰稀少且强度较弱，提
示板蓝根在切制后整体化学成分有一定的变化。
板蓝根在切制前后各批样品与对照谱图进行相
似度分析的结果以及ＲＳＤ见表６。
３ 小结与讨论
板蓝根药材质地坚硬，需较长时间的浸润才能
润透，但水量不宜过多，以免伤水。《中国药典》
图２ 板蓝根切制前对照谱图
图３ 板蓝根切制后对照谱图
图４ 未切制板蓝根醋酸乙酯萃取物指纹图谱
图５ 切制后板蓝根醋酸乙酯萃取物指纹图谱
表６ 板蓝根切制前后相似度
Ｎｏ 切制前 切制后
Ｓ１ ０９３７ ０９６９
Ｓ２ ０９６６ ０９５８
Ｓ３ ０９５４ ０９６７
Ｓ４ ０９５８ ０９６４
Ｓ５ ０９１９ ０９７３
Ｓ６ ０９８６ ０９６９
Ｓ７ ０９４９ ０８８７
Ｓ８ ０９６３ ０９７０
Ｓ９ ０９９４ ０９４８
ＲＳＤ／％ ２４０ ２９８
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２００５年版（一部）规定，板蓝根应切为厚片，因此笔
者考察的切片厚度定为２～４ｍｍ。板蓝根切制时的
操作程序为最佳工艺流程：０６倍量的水，浸润 ２４
ｈ，饮片厚度为２ｍｍ。相对较长的浸润时间，能够保
证药材充分润透，便于药材的切制成规定厚度的饮
片，并且可以减少由于药材过硬切制产生的碎屑，减
少药材损失。
试验时考察了甲醇水、乙腈水２种流动相，并
尝试了这２种流动相的多种线性梯度洗脱，结果表
明乙腈水系统最佳，并进行了梯度洗脱条件的优
化。采用该系统各个色谱峰的峰形和分离度都较
好，基线稳定。因此选用该系统为板蓝根醋酸乙酯
萃取物指纹图谱的流动相。
板蓝根切制前后相似度对照图谱差异明显，在
相同洗脱条件下，未经切制的板蓝根图谱色谱峰较
多，各色谱峰的相对保留时间在各极性段都有体现，
通过对保留时间以及流动相洗脱条件的分析，作者
认为在切制后板蓝根中等极性成分损失较多。推测
该极性段为有机酸类化合物，有机酸成分种类和损
失情况有必要再以后的实验中深入研究。
从相似度分析结果来看，切制前各样品相似度
都在０９以上，经过水润切制后，除 Ｓ７号样品为
０８８７外，其他图谱和相似度都与对照很接近。这
说明药材由于产地和采收情况的不同，药材之间会
有一定差异，然而经过水处理后，药材的成分发生
了变化，药材之间差异减小，说明水处理对不同产
地药材的作用是不同的。
通过对板蓝根软化切制工艺和切制前后指纹图
谱的研究，发现炮制过程中水处理对药材质量有很
大影响，化学成分的变化，必然导致药效的改变，规
范板蓝根的炮制工艺，对保证药材的质量和疗效起
着至关重要作用。
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ＯｐｔｉｍｉｚｉｎｇｃｕｔｉｎｇｐｒｏｃｅｓｓｏｆＲａｄｉｘＩｓａｔｉｄｉｓａｎｄ
ｃｏｍｐａｒｉｎｇｄｉｆｅｒｅｎｃｅｏｆｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓｂｅｆｏｒｅａｎｄａｆｔｅｒｃｕｔｉｎｇ
ＬＩＹｏｕ，ＭＡＬｉ，ＧＯＮＧＭｕｘｉｎ，ＧＵＡＮＨｕａｉ
（ＣｏｌｅｇｅｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＣａｐｉｔａｌＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００６９，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＦｏｒｏｐｔｉｍｉｚｉｎｇｔｈｅｃｕｔｉｎｇｐｒｏｃｅｓｓｏｆＲａｄｉｘＩｓａｔｉｄｉｓ，ｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｃｕｔｉｎｇｐｒｏｃｅｓｓｏｎｔｈｅｗｈｏｌｅｃｈｅｍ
ｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｗａｓｓｔｕｄｉｅｄｂｙｃｏｍｐａｒｉｎｇｔｈｅｄｉｆｅｒｅｎｃｅｏｆＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓｏｆＲａｄｉｘＩｓａｔｉｄｉｓｆｒｏｍｖａｒｉｏｕｓｓｏｕｒｃｅｓｂｅｆｏｒｅａｎｄａｆｔｅｒ
ｃｕｔｉｎｇ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｌ９（３
４）ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｔａｂｌｅｗｅｒｅｄｅｓｉｇｎｅｄｗｉｔｈｔｈｒｅｅｆａｃｔｏｒｓ：Ｔｈｅａｍｏｕｎｔｏｆｓｏｌｖｅｎｔ，ｓｏａｋｉｎｇｔｉｍｅａｎｄｔｈｉｃｋｎｅｓｓｏｆ
ｐｉｅｃｅｓ．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅａｍｏｕｎｔｏｆｗａｔｅｒｓｏｌｕｂｌｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｄｅｓｉｇｎｗａｓａｐｐｌｉｅｄｔｏｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ；Ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓｏｆａｃｅｔｏａｃｅｔａｔｅ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｆｒｏｍ９ｂａｔｃｈｅｓｏｆＲａｄｉｘＩｓａｔｉｄｉｓｆｒｏｍｖａｒｉｏｕｓｓｏｕｒｃｅｓｂｅｆｏｒｅａｎｄａｆｔｅｒｃｕｔｉｎｇｗｅｒｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｗｉｔｈａＨｉｇｈＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＬｉｑｕｉｄ
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［责任编辑 周驰］
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